FT(Flowering Locus T)蛋白在植物叶脉维管组织中表达,经韧皮部转运至顶端分生组织,激活下游基因表达,促使开花。拟南芥FT基因在多种植物(杨树、苹果、水稻、马铃薯、烟草等)中超表达,均能不同程度地加快发育进程、促使营养器官膨大、...
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FT(Flowering Locus T)蛋白在植物叶脉维管组织中表达,经韧皮部转运至顶端分生组织,激活下游基因表达,促使开花。拟南芥FT基因在多种植物(杨树、苹果、水稻、马铃薯、烟草等)中超表达,均能不同程度地加快发育进程、促使营养器官膨大、提前开花。草莓(Fragaria×ananassa)的休眠特性迫使其生育周期延长,其果形和果实大小也是选择商品草莓的标准。草莓FT基因有可能在草莓低温休眠和果实膨大过程中发挥重要作用。本研究中从‘黑龙江-3’野生森林草莓(Fragaria vesca)中克隆FT-like基因,分析其在草莓中的表达模式,探索其在草莓低温休眠与果实发育过程中可能发挥的作用,为栽培草莓花期调控与果实品质改进提供候选基因。根据同源序列比对,在已测序的夏威夷野生草莓基因组中查找FT-like基因,设计特异引物,以‘黑龙江-3’野生森林草莓的cDNA为模板,扩增基因后,构建亚细胞定位载体和植物表达载体。将亚细胞定位载体瞬转洋葱内表皮细胞,通过共聚焦显微镜观察定位该基因在细胞中的表达部位,并分析其潜在的功能;将植物表达载体蘸花转入拟南芥,再通过农杆菌介导叶盘法转入‘黑龙江-3’野生森林草莓再生体系中,获得转基因植株,分析并验证该基因的功能。从‘黑龙江-3’野生森林草莓中克隆出一个FT-like基因,暂命名为FvFT-1,其完整开放阅读框为519 bp,编码172个氨基酸;生物信息学预测结果表明,该基因的第25个氨基酸至第163个氨基酸为PEBP结构域,包含9个底物结合位点;经半定量PCR分析发现,该基因在果实中表达量最高,其次是花托,在叶片、茎和根中基本不表达;构建了带GFP标签的亚细胞定位载体和带YFP标签的植物表达载体,用农杆菌蘸花转化拟南芥,转基因植株目前正在筛选中。
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