检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医杂志 2025年第2期61卷 57-61页

作者：董俊斌包海泉内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010010 内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018

为了明确内蒙古自治区呼和浩特市和通辽市蒙古马马胃蝇蛆病病原种类和种系发育关系,本试验于2023年3月在呼和浩特市和通辽市屠宰场采集马胃蝇三龄幼虫120只,利用光学显微镜和扫描电子显微镜对其进行形态学鉴定;通过PCR方法扩增其线粒体... 详细信息

为了明确内蒙古自治区呼和浩特市和通辽市蒙古马马胃蝇蛆病病原种类和种系发育关系,本试验于2023年3月在呼和浩特市和通辽市屠宰场采集马胃蝇三龄幼虫120只,利用光学显微镜和扫描电子显微镜对其进行形态学鉴定;通过PCR方法扩增其线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COXⅠ)基因,并利用MEGA 6.0和DnaSP 5.0软件将COXⅠ基因序列与GenBank中胃蝇科、皮蝇科和狂蝇科昆虫COXⅠ基因序列进行比对分析,并构建系统发育树;同时对呼和浩特市和通辽市的马胃蝇三龄幼虫进行线粒体COXⅠ基因单倍型和遗传分化分析。结果显示,本试验采集的马胃蝇三龄幼虫体色呈粉红色、口脊末端平滑,形态特征与黑腹胃蝇三龄幼虫一致。系统发育分析结果显示,通辽市黑腹胃蝇TONGLIAO1、TONGLIAO2、TONGLIAO3和TONGLIAO4与呼和浩特市黑腹胃蝇HUHEHAOTE2处于同一分支,呼和浩特市黑腹胃蝇HUHEHAOTE1与GenBank数据库中胃蝇科黑腹胃蝇处于同一分支,2个地区的黑腹胃蝇均与胃蝇科鼻胃蝇、红尾胃蝇和肠胃蝇处于不同分支,与皮蝇科、狂蝇科和外群双翅目麻蝇科距离较远。马胃蝇三龄幼虫COXⅠ基因相似性比对结果与系统发育分析结果一致。呼和浩特市和通辽市黑腹胃蝇线粒体COXⅠ基因序列共含有5个单倍型,二者没有共享单倍型,遗传分化系数(Fst)值大于0.05,基因流(Nm)为4。结果表明,呼和浩特市和通辽市蒙古马马胃蝇蛆病病原为黑腹胃蝇,且亲缘关系较近,未出现遗传分化。

关键词：蒙古马黑腹胃蝇形态学鉴定发育树分析

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厚垣普可尼亚菌原生质体的制备、再生与遗传体系构建

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浙江农业学报 2025年第4期37卷 800-807页

作者：马园郝陆瑶张艳妮李倩楠王瑞内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010011

为建立厚垣普可尼亚菌高效原生质体制备体系和聚乙二醇(PEG)介导的遗传转化体系,选取厚垣普可尼亚菌菌丝作为实验对象,系统考察菌丝培养时间、裂解酶种类、酶解时间与温度、渗透压稳定剂类型和pH值等关键参数对原生质体形成的影响;采用... 详细信息

为建立厚垣普可尼亚菌高效原生质体制备体系和聚乙二醇(PEG)介导的遗传转化体系,选取厚垣普可尼亚菌菌丝作为实验对象,系统考察菌丝培养时间、裂解酶种类、酶解时间与温度、渗透压稳定剂类型和pH值等关键参数对原生质体形成的影响;采用单因素试验优化原生质体制备工艺;通过PEG介导法进行质粒DNA转化,评价转化子的遗传稳定性。结果表明:厚垣普可尼亚菌原生质体的最佳制备条件为厚垣普可尼亚菌在马铃薯葡萄糖水(PDB)培养基中26℃培养24 h,使用0.7 mol·L^(-1)NaCl(pH值7.5)作为渗透压稳定剂,经20 mg·mL^(-1)崩溃酶在30℃酶解5 h,0.5 g菌丝的原生质体产量达3.05×10^(6)mL^(-1);获得的原生质体在再生培养基中的再生率为6.2%。PEG介导转化能够获得稳定遗传的转化子,转化率为45%,转化菌株的菌落形态、生长速率和分生孢子产量与野生菌株无显著差异。本研究成功建立了厚垣普可尼亚菌原生质体高效制备与遗传转化体系,为其生防功能解析和基因工程学改造提供了关键技术支撑。

关键词：厚垣普可尼亚菌原生质体酶解条件遗传转化

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产气荚膜梭菌Alpha毒素突变体的表达及单克隆抗体制备

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中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 442-450页

作者：韩凤烨刘莹潘晨帆张乾义陈小云朱真印春生温永俊王凤雪杜吉革内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000 中国兽医药品监察所北京100081

[目的]获得产气荚膜梭菌Alpha毒素(Clostridium perfringens alpha-toxin, CPA)的重组突变体,评价其毒力和抗原性,进而制备针对CPA的单克隆抗体,并评价单克隆抗体特性。[方法]通过人工合成含6个氨基酸突变(第56和130位的天冬氨酸突变为... 详细信息

[目的]获得产气荚膜梭菌Alpha毒素(Clostridium perfringens alpha-toxin, CPA)的重组突变体,评价其毒力和抗原性,进而制备针对CPA的单克隆抗体,并评价单克隆抗体特性。[方法]通过人工合成含6个氨基酸突变(第56和130位的天冬氨酸突变为甘氨酸、第275、307和331位的酪氨酸突变为苯丙氨酸、第336位的天冬氨酸突变为天冬酰胺)的CPA基因片段,并将其克隆至pET-30a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化,获得重组蛋白rCPA_(m6),并检测其毒力与免疫原性。将rCPA_(m6)作为包被抗原建立CPA抗体的间接ELISA检测方法,并用灭活的天然CPA作为免疫原按照常规方法免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,对其功能进行鉴定。[结果]重组蛋白rCPA_(m6)在大肠杆菌BL21(DE3)感受态中能够以可溶性和包涵体两种形式表达。毒力测定结果显示,100μg/只rCPA_(m6)攻毒后,小鼠全部存活。免疫原性分析结果显示,1×最小致死量(MLD)的天然CPA攻毒后,对照组小鼠全部死亡,10和20μg/只rCPA_(m6)免疫组小鼠存活率为100%。利用rCPA_(m6)成功建立了CPA抗体的间接ELISA检测方法,并筛选获得4株分泌抗CPA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6E3、6B8、10A11、13D10,且4种细胞上清抗体效价均≥1∶3 200,其中单克隆抗体6B8细胞上清能中和天然CPA,且能与rCPA_(m6)发生反应。[结论]试验成功获得具有良好的安全性和免疫原性的重组蛋白rCPA_(m6),制备的CPA单克隆抗体6B8具有一定的中和活性及较高的特异性和敏感性。研究结果为CPA亚单位疫苗的研制提供了候选抗原,同时为CPA中毒症的治疗以及抗原/抗体检测方法的建立提供了物质基础。

关键词：产气荚膜梭菌Alpha毒素(CPA) 突变体原核表达单克隆抗体

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蜱实验室人工饲养技术研究进展

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中国人兽共患病学报 2025年第1期41卷 67-74页

作者：董晓楠孙连阳崔浩康佳美丁玉林刘永宏赵丽内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010000 内蒙古自治区呼伦贝尔市扎兰屯市动物疫病预防控制中心呼伦贝尔021000 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000

蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱... 详细信息

蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱传病原体的研究及为研制抗蜱药物及防蜱疫苗提供充足实验材料。目前实验室饲养蜱的方法大致可分为两类,一类为使用宿主动物的饲养方法,另一类为使用人工膜的饲养方法,饲养方法的选择需根据蜱的种类、吸血习性、生活环境等多方面综合考虑,现就两种方法的发展过程及各自存在的优弊进行阐述与讨论,以期为实验室开展蜱的人工饲养提供一定的帮助。

关键词：蜱人工饲养生活史

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校企合作赋能兽医影像学实验课教学改革的探索与实践——以内蒙古农业大学瑞派动物医院为例

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养殖与饲料 2025年第4期24卷 143-146页

作者：王宇刘行健呼格吉乐图内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

[目的]提升学生专业素养,探索兽医影像学教学模式改革与创新的路径。[方法]以内蒙古农业大学兽医学院为例,以提升学生素质、贴近实际需求为目标,通过校企合作的方式从考核标准、开展方式、教育方式等方面对兽医影像学实验课教学进行深... 详细信息

[目的]提升学生专业素养,探索兽医影像学教学模式改革与创新的路径。[方法]以内蒙古农业大学兽医学院为例,以提升学生素质、贴近实际需求为目标,通过校企合作的方式从考核标准、开展方式、教育方式等方面对兽医影像学实验课教学进行深化改革。[结果]探索出了一种目前较为适合于内蒙古农业大学兽医影像学的教学模式,使用该模式教学后,兽医影像学的课程质量有了质的提升,学生对课程的满意度和掌握度有了明显的提高。[结论]该模式的施行为兽医行业的影像学人才培养提供了很好的教育环境,为未来技能型学科的教学提供了可借鉴的路径。

关键词：兽医影像学校企合作实践能力教学方法课程改革

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鄂尔多斯细毛羊前后盘吸虫病病原分子鉴定及驱虫药物筛选

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1807-1814页

作者：乌日力格李娜格日勒格拉巴哈斯图雅张靖靖侯斌哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室国家级动物医学实验教学中心呼和浩特010018 乌审旗动物疫病预防控制中心鄂尔多斯017300 鄂尔多斯生态环境职业学院鄂尔多斯017010

【目的】探明鄂尔多斯细毛羊体内寄生的前后盘吸虫种类并筛选出理想的驱虫药物。【方法】在粪便虫卵检查初步诊断前后盘吸虫病的基础上,通过剖检采集鄂尔多斯细毛羊瘤胃内的前后盘吸虫虫体,并进行形态学和分子生物学鉴定。随机选取3条... 详细信息

【目的】探明鄂尔多斯细毛羊体内寄生的前后盘吸虫种类并筛选出理想的驱虫药物。【方法】在粪便虫卵检查初步诊断前后盘吸虫病的基础上,通过剖检采集鄂尔多斯细毛羊瘤胃内的前后盘吸虫虫体,并进行形态学和分子生物学鉴定。随机选取3条虫体提取DNA,继而对核糖体内转录间隔区2(ITS-2)进行PCR扩增,将扩增产物测序后于NCBI数据库进行BLAST比对分析,并构建系统进化树。分别用氯硝柳胺、硝氯酚、碘醚柳胺和3%敌百虫联合硝氯酚,针对感染前后盘吸虫病的绵羊开展驱虫效果比较试验。【结果】ITS-2基因PCR扩增获得大小为441 bp的条带,与目的基因条带相符。3条虫体与源于中国的鹿前后盘吸虫ITS-2(KJ459936.1)序列相似性依次为99.3%、99.3%和99.8%。进化分析结果表明,该前后盘吸虫与来自中国(KP341671)、爱尔兰(AB973398)、阿根廷(HM209066)、德国(MZ532797)的前后盘吸虫同属一个大分支,且与鹿前后盘吸虫(Paramphistomum cervi)共处一个小分支内,鉴定为鹿前后盘吸虫。驱虫试验中氯硝柳胺、硝氯酚、碘醚柳胺、3%敌百虫配伍硝氯酚组的虫卵减少率分别为44.00%、26.73%、23.00%和90.80%。【结论】在内蒙古乌审旗地区鄂尔多斯细毛羊体内寄生的前后盘吸虫属鹿前后盘吸虫,采用3%敌百虫联合硝氯酚治疗可达到较好的驱虫效果。

关键词：鄂尔多斯细毛羊前后盘吸虫分子生物学鉴定驱虫效果

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前列腺素D2对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞中细胞因子分泌及吞噬杀伤功能的影响

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中国兽医学报 2025年第1期45卷 107-114页

作者：龚鹏飞杨效林郭莉莉王钰吴敬泽张双翼刘博毛伟曹金山内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

为了研究前列腺素D2（prostaglandin D2,PGD2）对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响，以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象，分析内源性和外源性PGD2对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的分... 详细信息

为了研究前列腺素D2（prostaglandin D2,PGD2）对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响，以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象，分析内源性和外源性PGD2对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的分泌和吞噬杀伤功能的影响。结果显示，由大肠杆菌诱导的巨噬细胞中PGD2的合成依赖于天然模式识别受体TLR2、TLR4和NLRP3。抑制内源性PGD2能够下调大肠杆菌诱导的巨噬细胞中促炎性细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的分泌（P<0.001）,并可以在一定程度上增强巨噬细胞的杀伤功能（P<0.01）。此外，外源性PGD2能够上调大肠杆菌刺激后巨噬细胞中促炎性细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的分泌（P<0.01）,一定浓度范围内的外源性PGD2能够减弱巨噬细胞的杀伤功能（P<0.01）。结果表明，PGD2对大肠杆菌诱导的巨噬细胞细胞因子的分泌和吞噬杀伤功能均具有一定的影响。

关键词：大肠杆菌前列腺素D2 奶牛骨髓源巨噬细胞模式识别受体吞噬杀伤

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莫诺拉韦在体外/体内抗H1N1流行性感冒病毒感染特点的研究

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中国感染控制杂志 2025年第4期24卷 478-485页

作者：冯茜莉王进千杨宣叶胡欣妍丁玉林马晓霞西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730010 内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

目的分析莫诺拉韦在体内和体外对流行性感冒(流感)病毒的抗病毒效果。方法检测莫诺拉韦对流感病毒H1N1 PR8毒株在体外和体内的抗病毒能力。以人源非小细胞肺癌细胞系(A549细胞)作为PR8感染的体外模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-... 详细信息

目的分析莫诺拉韦在体内和体外对流行性感冒(流感)病毒的抗病毒效果。方法检测莫诺拉韦对流感病毒H1N1 PR8毒株在体外和体内的抗病毒能力。以人源非小细胞肺癌细胞系(A549细胞)作为PR8感染的体外模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹试验(WB)、噬斑的方法,分析莫诺拉韦体外对病毒复制、蛋白合成及病毒颗粒形成方面的抗病毒效果。以PR8滴鼻感染C57BL/6雌性小鼠为体内感染模型,分别从病毒载量、病理变化及免疫组化方面,对对照组、给药组、接毒组和接毒-给药组进行检测,以评估莫诺拉韦的抗病毒能力。结果体外试验结果显示,莫诺拉韦对流感病毒的复制、蛋白合成及病毒颗粒形成没有明显抑制作用(均P>0.05)。小鼠体内试验结果显示,与单纯感染H1N1小鼠相比,接受莫诺拉韦治疗的小鼠肺组织病毒载量明显下降,病理变化程度较轻,免疫组化检测显示核蛋白(NP)抗原信号明显减弱,干扰素(IFN)-α、白细胞介素(IL)-4和IL-6在肺中的表达水平较低(均P<0.01)。结论作为具有抗病毒活性的前体物,莫诺拉韦无法在体外培养的肺源细胞中发挥抗病毒活力,但可以在宿主体内转化为活性形式,显著降低H1N1流感病毒在肺增殖的能力,进而减轻病毒对肺组织的损伤。

关键词：莫诺拉韦流行性感冒抗病毒感染模型病理变化 H1N1

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基于比较基因组学分析的方法定位及注释双峰驼MHC基因

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中国农业科学 2018年第18期51卷 3591-3599页

作者：支立康额尔敦木图安希文王超王瑞包花尔王秀珍内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

【目的】定位并注释双峰驼主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）基因序列,为进一步研究双峰驼MHC基因提供科学依据。【方法】运用比较基因组学方法,提取人类MHC（HLA）基因编码序列和牛MHC（BoLA）基因编码序... 详细信息

【目的】定位并注释双峰驼主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）基因序列,为进一步研究双峰驼MHC基因提供科学依据。【方法】运用比较基因组学方法,提取人类MHC（HLA）基因编码序列和牛MHC（BoLA）基因编码序列并分别与双峰驼转录本进行blastn基因序列比对,识别出相似度较高的scaffolds,通过分析HLA、BoLA基因序列比对在这些scaffolds上的位置顺序,对多条scaffolds进行拼接,得到双峰驼MHC的Pseudo chromosome;再分别提取HLA、BoLA全基因组序列与双峰驼已拼接的scaffolds进行基因组共线性分析,利用lastz建立起的Pseudo chromosome与HLA、BoLA全基因组序列的线性关系判断筛选出的scaffolds是否准确;然后通过分析MHC基因在两物种间的线性关系,在双峰驼参考基因组中提取出MHC基因序列,并对这些序列进行基因注释;最后根据得到的双峰驼MHC基因绘制系统进化树,研究其基因间的进化关系。【结果】通过对HLA、BoLA基因编码序列与双峰驼转录本用blastn进行序列比对,识别出了相似度较高的3条scaffolds,即NW011511766.1（全长4.1M）、NW011515227.1（全长1.2M）和NW011514613.1（全长15K）,对其拼接得到双峰驼MHC的Pseudo chromosome;利用lastz共线性分析,识别出HLA基因序列和BoLA基因序列并比对出其在双峰驼MHC基因的共线性区域。该区域与拼接得到的Pseudo chromosome一致,证明筛选出的scaffolds是准确的。并且发现Class-Ⅰ类和Class-Ⅲ类基因集中分布在NW011515227.1上,而Class-Ⅱ类基因集中分布在NW011511766.1和NW011514613.1上,进一步分析得知Class-Ⅱ类基因主要分布在NW011511766.1的3.5—4.1M的位置;将存在共线性区域的序列提取出来,与比对到双峰驼上的MHC基因的编码序列进行blat分析,结果在双峰驼基因组中共识别出24个与牛BoLA基因高度相似的基因,其中Ⅰ类基因1个,Ⅱ类10个,Ⅲ类基因13个。对双峰驼这24个MHC基因进行信息注释并绘制系统进化树,结果显示注释的Class-Ⅰ类和Class-Ⅱ类基因在同一分支。【结论】通过比较基因组学方法定位并注释了双峰驼的MHC基因,将双峰驼MHC基因序列定位到了3条scaffolds上,找到并注释了24个MHC基因,绘制了双峰驼MHC的Pseudo chromosome,为进一步研究双峰驼MHC基因奠定了理论基础。

关键词：双峰驼 MHC CBLA BoLA HLA 比较基因组学

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捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药相关lncRNA的转录组学测序与分析

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生物工程学报 2020年第2期36卷 250-258页

作者：赵学亮王文龙呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

分析捻转血矛线虫敏感株和耐药株中长链非编码RNA (Long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探讨lncRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制的关联性,为捻转血矛线虫耐药机理提供依据。文中对捻转血矛线虫敏感株和耐药株进行cDNA测序文库构建... 详细信息

分析捻转血矛线虫敏感株和耐药株中长链非编码RNA (Long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探讨lncRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制的关联性,为捻转血矛线虫耐药机理提供依据。文中对捻转血矛线虫敏感株和耐药株进行cDNA测序文库构建,使用Illumina HiSeq 4000平台进行双端测序,筛选出差异的lncRNA,基于顺式调控(cis)和反式调控(trans)对差异显著的lncRNA进行靶基因预测,并对靶基因进行过Gene Ontology (GO)功能注释和KEGG Pathway富集分析,利用FPKM法估计lncRNA和mRNA的表达水平。结果表明,敏感株和耐药株候选lncRNA分别为6 377和6 356个,两个文库中筛选出168个差异显著的lncRNA,其中在敏感株中表达上调有92个,表达下调76个。筛选得到的差异显著lncRNA候选靶基因416个,这些基因共注释到641条GO terms和92条信号通路;其中富集到耐药性相关的通路有药物代谢-其他酶、药物代谢-细胞色素P450、细胞色素P450对异生素的代谢等。综上表明,部分lncRNA介导的靶基因与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性相关,lncRNA在捻转血矛线虫耐药性中具有潜在的重要的调节作用。探究了对于敏感虫株和耐药虫株中lncRNA的表达谱,发现了敏感虫株和耐药虫株中差异表达的lncRNA,有助于找出捻转血矛线虫如何抵抗丙硫咪唑的发生机制,为探讨捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制提供科学的依据。

关键词：捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性转录组长链非编码RNA

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