检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：周宇欧阳伟王永山范红结江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

我们运用五株源于不同IBDV的单克隆抗体和噬菌体展示随机肽库技术,构建了由5个不同IBDV抗原表位组成的模拟IBDV多表位序列,该模拟肽对IBDV具有免疫保护效果,具有可作为IBD多表位疫苗的潜力。近期,我们对安徽省在2007年12月发生的两起免... 详细信息

我们运用五株源于不同IBDV的单克隆抗体和噬菌体展示随机肽库技术,构建了由5个不同IBDV抗原表位组成的模拟IBDV多表位序列,该模拟肽对IBDV具有免疫保护效果,具有可作为IBD多表位疫苗的潜力。近期,我们对安徽省在2007年12月发生的两起免疫失败的IBDV野外毒株的VP2基因的分子特征进行了分析,发现其VP2基因与当时

关键词：传染性法氏囊病病毒免疫失败 VP2 模拟抗原表位产物分析

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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将*** O157:H7（EHEC-O157:H7）用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2... 详细信息

将*** O157:H7（EHEC-O157:H7）用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMλ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×10～3,腹水效价均为1×10;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10～1～2×10～2,腹水效价均为1×10～3。相加ELISA结果显示,F1、G9和G11三株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位.用间接ELISA分析特异性,七株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应.Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,而其它四株mAbs则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体的制备及鉴定

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中国比较医学杂志 2009年第11期19卷 23-26页

作者：熊富强王芳范志宇恽时锋蔡少平林焱姜平南京军区南京总医院比较医学科南京210002 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095

目的建立能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌(Bb)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后进一步建立该菌的免疫检测技术奠定基础。方法以Bb分离株BLJ05的灭活菌液为免疫原,腹腔免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备Bb单克隆抗体(McAb),用间接... 详细信息

目的建立能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌(Bb)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后进一步建立该菌的免疫检测技术奠定基础。方法以Bb分离株BLJ05的灭活菌液为免疫原,腹腔免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备Bb单克隆抗体(McAb),用间接ELISA、Western-blot等方法对McAb特性进行鉴定。结果获得两株能稳定分泌抗Bb单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A7D5和D6B2,其小鼠腹水抗体效价分别为1∶409600和1∶102400;且不与兔大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、产气荚膜梭菌等兔的常见病原菌反应,特异性强。两株单抗亲和力实验表明A7D5亲和力略高于D6B2。ELISA相加试验表明它们针对相同的抗原表位。结论成功建立了两株能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,效价高、特异性强,为今后建立该菌的免疫检测技术建立奠定了基础。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体

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大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：刘洁夏兴霞王永山张雪寒费荣梅何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸... 详细信息

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果:该试纸条仅与O157:H7阳性鼠血清发生特异性反应;用该试纸条与常规间接ELISA平行比较检测O157:H7免疫鼠血清,抗体效价分别为10～6和10～5,两者的敏感度相当。该试纸条操作简便,10min可出结果,适用于调查与追溯鼠O157:H7感染状况时的现场检测。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 胶体金免疫层析试纸条鼠

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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究 Ⅰ.分泌抗大肠杆菌0157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究 Ⅰ.分泌抗大肠杆菌...

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中国畜牧兽医学会2009学术年会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

引言/目的:食源性病原微生物已成为当今不断增多的食品安全和突发性公共卫生事件的主要诱因。全世界每年至少有200万人死于以感染性腹泻为主的食源性疾病。在食源性病原微生物中,肠出血性大肠杆菌（EHEC）占有重要地位。O157:H7的感染... 详细信息

引言/目的:食源性病原微生物已成为当今不断增多的食品安全和突发性公共卫生事件的主要诱因。全世界每年至少有200万人死于以感染性腹泻为主的食源性疾病。在食源性病原微生物中,肠出血性大肠杆菌（EHEC）占有重要地位。O157:H7的感染因具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性以及抗生素治疗可能会加剧病情等特点,已成为全球性的公共卫生问题,获得简便、快速、敏感、实用的O157:H7快速检测方法仍是当前食源性病原微生物防控研究亟需解决的问题。本研究旨在制备抗O157:H7的系列单克隆抗体,为该病原菌的快速检测、抗原结构分析及其致病机理研究提供技术支撑。材料与方法:将*** O157:H7（EHEC-O157:H7）用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP/20骨髓瘤细胞融合,建立分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株。结果与讨论:获得七株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMκ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×10～3,腹水效价均为1×10;C3、2E7、B8、D3和H7细胞培养上清液的效价为1×10～1～2×10～2,腹水效价均为4×10～2～2.5×10～6。相加ELISA结果显示,D3和H7 mAbs对应相同的抗原表位,而其它五株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,2E7、H7和D3为抗EHEC-O157:H7特异性单克隆抗体,其它四株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,2E7、D3和H7三株mAbs在蛋白分子量35kD处有特异性条带,而mAbs B8则未显示蛋白带。本研究制备抗O157:H7的系列单克隆抗体,为该病原菌的快速检测、抗原结构分析及其致病机理研究提供技术支撑。同时,实验结果表明大肠杆菌的抗原成分十分复杂,不同血清型甚至同种血清型不同菌株之间存在着大量的共同抗原表位。

关键词：杂交瘤细胞株培养上清液人兽共患细菌病大肠杆菌食源性病原微生物动物源性新制剂单克隆抗体

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传染性法氏囊病病毒siRNA抑制病毒复制实验

传染性法氏囊病病毒siRNA抑制病毒复制实验

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会

作者：欧阳伟刘小娟王永山张海彬范红结江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

本实验根据VP1基因保守区序列设计siRNA,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上分析其对IBDV复制的抑制效应,为新型抗IBDV药物与疫苗设计探索新的研究思路和靶标。1材料与方法根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP1基因保守区序列,选择设计了三个靶向VP1... 详细信息

本实验根据VP1基因保守区序列设计siRNA,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上分析其对IBDV复制的抑制效应,为新型抗IBDV药物与疫苗设计探索新的研究思路和靶标。1材料与方法根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP1基因保守区序列,选择设计了三个靶向VP1的小干扰RNA序

关键词：传染性法氏囊病病毒鸡胚成纤维细胞 siRNA 病毒复制

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火鸡疱疹病毒细菌人工染色体转移载体的构建

火鸡疱疹病毒细菌人工染色体转移载体的构建

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会

作者：周宇王永山范红结江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

HVT作为病毒载体携带外源保护性抗原基因方面,与其它病毒载体相比具有许多优势:使用安全,对鸡及其它动物均无致病性;接种鸡体后病毒在鸡体内形成长达数周的病毒血症,且终生潜伏感染,可刺激机体产生较高的抗体水平并维持终生,接种一次即... 详细信息

HVT作为病毒载体携带外源保护性抗原基因方面,与其它病毒载体相比具有许多优势:使用安全,对鸡及其它动物均无致病性;接种鸡体后病毒在鸡体内形成长达数周的病毒血症,且终生潜伏感染,可刺激机体产生较高的抗体水平并维持终生,接种一次即可获得终生免疫。目前,国外已成功地利

关键词：火鸡疱疹病毒细菌人工染色体基因工程疫苗

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大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果:该试纸条仅与O157:H7阳性鼠血清发生特异性反应;用该试纸条与常规间接EIISA平行比较检测O157:H7免疫鼠血清,抗体效价分别为106和105,两者的敏感度相当。该试纸条操作简便,10 min可出结果,适用于调查与追溯鼠O157:H7感染状况时的现场检测。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 胶体金免疫层析试纸条鼠

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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2a... 详细信息

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMκ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、2E7、B8、D3和H7细胞培养上清液的效价为1×101～2×102,腹水效价均为4×102～2.5×106。相加ELISA结果显示,D3和H7mAbs对应相同的抗原表位,而其它五株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,2E7、H7和D3为抗EHEC-O157:H7特异性单克隆抗体,其它四株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,2E7、D3和H7三株mAbs在蛋白分子量35kD处有特异性条带,而mAbsB8则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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传染性法氏囊病病毒重组病毒样颗粒VP2蛋白的制备与应用

传染性法氏囊病病毒重组病毒样颗粒VP2蛋白的制备与应用

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会

作者：欧阳伟王永山周宇张海彬范红结江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

我们对安徽省在2007年12月发生的两起免疫失败的IBDV野外毒株的VP2基因的分子特征进行了分析,其VP2基因与当时预防使用的疫苗毒株(B87株)的VP2基因序列有较大差异,再次佐证了IBDV变异株的危害。鉴于此,本实验针对IBD基因工程疫苗研究中... 详细信息

我们对安徽省在2007年12月发生的两起免疫失败的IBDV野外毒株的VP2基因的分子特征进行了分析,其VP2基因与当时预防使用的疫苗毒株(B87株)的VP2基因序列有较大差异,再次佐证了IBDV变异株的危害。鉴于此,本实验针对IBD基因工程疫苗研究中的主要问题,选用该VP2基

关键词：传染性法氏囊病病毒病毒样颗粒 VP2 制备与应用

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