检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2015年第2期46卷 323-331页

作者：王萍巨向红雍艳红贾汝敏马铭龙赵云涛廖明广东海洋大学动物科学系湛江524088 广东海洋大学动物医学系湛江524088 农业部动物疫病防控重点开放实验室广州510642 华南农业大学兽医学院广州510642 广东海洋大学现代生化中心湛江524088

旨在研究和系统阐述热应激诱发猪免疫抑制及炎性因子紊乱的发生机理。本研究克隆了土杂(陆川猪×长白猪)猪SOCS4基因,发现其开放阅读框(ORF)长1 326bp,编码441个氨基酸,N端包含285个氨基酸,与长白猪、牛、山羊、猫、马、犬、人和小... 详细信息

旨在研究和系统阐述热应激诱发猪免疫抑制及炎性因子紊乱的发生机理。本研究克隆了土杂(陆川猪×长白猪)猪SOCS4基因,发现其开放阅读框(ORF)长1 326bp,编码441个氨基酸,N端包含285个氨基酸,与长白猪、牛、山羊、猫、马、犬、人和小鼠的氨基酸序列同源性分别为100.0%、96.1%、96.1%、95.2%、94.6%、94.3%、93.0%和88.1%;蛋白分子量为50.5ku,等电点(PI)为6.60。荧光定量PCR结果显示,高温条件下,第3和第9天胸腺组织上SOCS4 mRNA显著上调表达(P≤0.05),而在第1和第6天的肠系膜淋巴结中极显著上调表达(P≤0.01)。与上述组织不同,SOCS4mRNA在小肠和脾组织中却显著下调表达(P≤0.05)。本研究成功克隆了土杂猪SOCS4基因,发现其在高温条件下的表达量发生明显改变,并呈组织和时间依赖性。

关键词：猪 SOCS4 克隆荧光定量热应激

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猪SOCS1基因的克隆、生物信息分析及热应激条件下的表达

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中国兽医学报 2015年第4期35卷 661-668页

作者：马铭龙巨向红雍艳红贾汝敏赵云涛王萍廖明广东海洋大学动物科学系广东湛江524088 广东海洋大学动物医学系广东湛江524088 广东海洋大学现代生化中心广东湛江524088 农业部动物疫病防控重点开放实验室广东广州510642 华南农业大学兽医学院广东广州510642

本试验克隆了土杂猪SOCS1基因cDNA序列,发现SOCS1基因cDNA编码220个氨基酸的前体蛋白。该蛋白相对分子质量24 370,等电点(PI)10.98,与GenBank中登录的普通猪、人、牛、羊和小鼠SOCS1序列同源性分别为99.9%、97.1%、96.1%、94.3%和93.7%... 详细信息

本试验克隆了土杂猪SOCS1基因cDNA序列,发现SOCS1基因cDNA编码220个氨基酸的前体蛋白。该蛋白相对分子质量24 370,等电点(PI)10.98,与GenBank中登录的普通猪、人、牛、羊和小鼠SOCS1序列同源性分别为99.9%、97.1%、96.1%、94.3%和93.7%。具有1个中央SH2域(Scr-homology 2)、1个长度可变的N端结构域和1个位于C端包含40个氨基酸残基的保守序列(SOCS盒)。荧光定量PCR结果显示,脾脏、小肠和胸腺中SOCS1mRNA的表达在热应激条件下显著上调(P≤0.05),且呈时间依赖性。但在肠系膜淋巴结中,热应激第3、6、9天显著下调(P≤0.05)。结果表明,SOCS1表达量在热应激条件下的土杂猪发生明显改变,并呈组织和时间依赖性。

关键词：猪 SOCS1 生物信息学分析荧光定量热应激

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HPS OmpP2膜外结构环诱导PAMs IL-8 mRNA转录的研究

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中国兽医杂志 2015年第10期51卷 3-6页

作者：罗银珠贺现辉周素明冯赛祥姚文凤徐成刚廖明辛朝安华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点开放实验室广东广州510642 宁波大学海洋科学院海洋生物应用重点实验室浙江宁波315211 广东省河源市动物疫病预防控制中心广东河源517000

OmpP2是副猪嗜血杆菌的致病因子,也是其重要的免疫原性蛋白。为探明OmpP2蛋白8个膜外结构环(Loop)在HPS感染过程中的促炎作用,本试验以猪肺泡巨噬细胞(Porcine Alveolar Macrophages,PAMs)为细胞模型,以HPS血清5型标准菌株OmpP2蛋白、HP... 详细信息

OmpP2是副猪嗜血杆菌的致病因子,也是其重要的免疫原性蛋白。为探明OmpP2蛋白8个膜外结构环(Loop)在HPS感染过程中的促炎作用,本试验以猪肺泡巨噬细胞(Porcine Alveolar Macrophages,PAMs)为细胞模型,以HPS血清5型标准菌株OmpP2蛋白、HPS血清5型标准菌株全菌体及牛血清白蛋白(BSA)作为参照,通过Real-Time PCR的方法研究OmpP2 8个膜外结构环诱导PAMs产生炎性应答的作用。结果显示,与空白对照组相比,HPS血清5型标准菌株OmpP2蛋白膜外结构环均能诱导PAMs细胞使其促炎细胞因子IL-8的转录水平出现不同程度的上调,表明它们在HPS感染过程中参与了宿主肺泡巨噬细胞的促炎性免疫应答;在8个膜外结构环中,Loop7(2^(-△△Ct)≈8,P<0.05)表现出非常显著的刺激活性,远远高于其他膜外结构环组,并与HPS血清5型标准菌株OmpP2蛋白组的诱导上调幅度(2^(-△△Ct)≈12(P<0.05))最接近,表明Loop7在OmpP2蛋白诱导PAMsIL-8促炎性免疫应答过程中扮演着重要角色,结果暗示Loop7很可能是OmpP2致宿主肺巨噬细胞促炎性功能活跃区。本试验为进一步了解OmpP2蛋白功能及了解HPS诱导宿主细胞炎症反应分子机制提供实验基础。

关键词：副猪嗜血杆菌 OmpP2 膜外结构环猪肺巨噬细胞细胞因子 IL-8

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土杂猪SOCS2基因的克隆、生物信息分析及热应激条件下的表达

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广东海洋大学学报 2015年第3期35卷 114-121页

作者：马铭龙巨向红雍艳红贾汝敏赵云涛王萍廖明广东海洋大学农学院广东湛江524088 农业部动物疫病防控重点开放实验室广东广州510642 华南农业大学兽医学院广东广州510642 广东海洋大学实验教学部广东湛江524088

热应激诱发的免疫抑制是诸多传染性疫病暴发的重要诱因,细胞因子信号传导抑制因子2(SOCS-2)参与炎性反应及癌变等多种病理过程,可能与热应激猪的炎性因子紊乱和免疫抑制有关。克隆土杂猪(长白猪×本地土猪)SOCS2基因c DNA序列,分析... 详细信息

热应激诱发的免疫抑制是诸多传染性疫病暴发的重要诱因,细胞因子信号传导抑制因子2(SOCS-2)参与炎性反应及癌变等多种病理过程,可能与热应激猪的炎性因子紊乱和免疫抑制有关。克隆土杂猪(长白猪×本地土猪)SOCS2基因c DNA序列,分析其结构特征,研究其在热应激不同时段肠系膜淋巴结、脾脏、胸腺和小肠黏膜等免疫器官中的表达变化。结果表明,SOCS2基因开放阅读框(ORF)长597 bp,编码一由198个氨基酸组成的前体蛋白。该蛋白分子质量22.25 ku,等电点(p I)8.53,与Gen Bank中登录的普通猪、牛、人和小鼠SOCS2序列同源性分别为99.9%、97.5%、96.0%和94.4%,具有1个中央SH2域(Scr-homology 2)、1个长度可变的N端结构域和1个位于C端包含40个氨基酸残基的保守序列(SOCS盒)。荧光定量PCR结果表明,热应激条件下SOCS2表达量发生明显改变,且呈组织和时间依赖性,在猪脾脏和肠系膜淋巴结中的表达量下调,与对照组差异有统计学意义(P<0.01),而小肠中SOCS2 m RNA的表达量上调,热应激6 d时达到峰值,6、9 d时与对照组差异有统计学意义(P<0.01)。SOCS2有明显的热应激响应,参与猪的热应激致病过程,是潜在的热应激防控干预靶点。

关键词：猪基因 SOCS2 生物信息学分析荧光定量PCR 热应激

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猪SOCS3基因的克隆、生物信息分析及热应激条件下的表达

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畜牧兽医学报 2014年第7期45卷 1044-1052页

作者：王萍巨向红雍艳红贾汝敏赵云涛马铭龙廖明广东海洋大学动物科学系湛江524088 广东海洋大学动物医学系湛江524088 农业部动物疫病防控重点开放实验室广州510642 广东海洋大学现代生化中心湛江524088 华南农业大学兽医学院广州510642

鉴于细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)与多种疫病的发生密切相关,推测其可能在热应激致病中发挥重要作用。本研究克隆了猪SOCS3基因cDNA序列,发现SOCS3基因开放阅读框(ORF)长690bp,编码229个氨基酸的前体蛋白。其与八眉猪、马、牛、人... 详细信息

鉴于细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)与多种疫病的发生密切相关,推测其可能在热应激致病中发挥重要作用。本研究克隆了猪SOCS3基因cDNA序列,发现SOCS3基因开放阅读框(ORF)长690bp,编码229个氨基酸的前体蛋白。其与八眉猪、马、牛、人和小鼠的氨基酸序列一致性分别为98.2%、97.4%、96.5%、97.8%和96.4%。该蛋白分子量25.1ku,等电点(PI)8.84,具有SOCS家族特异的中央SH2区、C末端40个氨基酸的SOCS box区及12个氨基酸的KIR结构区。荧光定量PCR结果显示,肠系膜淋巴结中SOCS3mRNA在热应激的第3、6和9天显著下调(P≤0.05)。但在胸腺和小肠黏膜中,尽管在第3天呈下降趋势,但在第6和第9天显著上调(P≤0.05)。本研究成功克隆了猪SOCS3基因,发现其在热应激条件下表达量发生明显改变,并呈组织和时间依赖性。

关键词：猪 SOCS3 克隆荧光定量热应激

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弯曲杆菌中具有高抑菌活性乳酸菌的筛选

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中国畜牧兽医 2013年第6期40卷 129-134页

作者：饶雷黄武黄永兴高瑞娟罗开健华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室广东广州510642

使用微生态制剂来替代抗生素用于动物疫病防制是未来的发展趋势,而乳酸菌是目前微生态制剂最主要的成分。试验旨在筛选弯曲杆菌中具有高抑菌活性并耐受动物胃肠道环境的乳酸菌。从广东不同地区采集家禽粪便样品,对分离的乳酸菌进行生化... 详细信息

使用微生态制剂来替代抗生素用于动物疫病防制是未来的发展趋势,而乳酸菌是目前微生态制剂最主要的成分。试验旨在筛选弯曲杆菌中具有高抑菌活性并耐受动物胃肠道环境的乳酸菌。从广东不同地区采集家禽粪便样品,对分离的乳酸菌进行生化鉴定、PCR鉴定及16SrDNA测序。同时,对分离菌株进行鸡源空肠弯曲杆菌、鸭源空肠弯曲杆菌和鹅源结肠弯曲杆菌的抑菌试验,以及模拟胃肠道环境的耐酸、耐胆盐和耐胰蛋白酶试验。结果表明,唾液乳杆菌R3对不同禽源的弯曲杆菌都具有高抑菌活性和耐受能力。因此,唾液乳杆菌R3为开发防控家禽弯曲杆菌疾病的微生态制剂提供了候选株。

关键词：弯曲杆菌乳酸菌抑菌活性耐受力

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NDV对NF-κB和IRF7信号通路影响的研究

NDV对NF-κB和IRF7信号通路影响的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：康银峰汪招雄孙敏华何静韩斐张盼盼谢鹏李艳玲任涛华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广东广州 510642

IFN 调节因子(interferon regulation factor,IRF)家族在IFN 的诱导表达中起着重要的调节作用,近来研究表明IRF-7是诱导IFN表达的最主要的调节因子。病毒dsRNA可被宿主特定的Toll 样受体识别,由IRF3和IRF7介导产生干扰素,在宿主抗病毒...

IFN 调节因子(interferon regulation factor,IRF)家族在IFN 的诱导表达中起着重要的调节作用,近来研究表明IRF-7是诱导IFN表达的最主要的调节因子。病毒dsRNA可被宿主特定的Toll 样受体识别,由IRF3和IRF7介导产生干扰素,在宿主抗病毒感染的过程中发挥着关键作用,而宿主又可利用NF-κB信号通路控制的免疫系统抵抗病毒的感染。

关键词：

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差速离心对J亚群禽白血病病毒分离株SCAU11-H生物学活性影响

差速离心对J亚群禽白血病病毒分离株SCAU11-H生物学活性影响

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：代曼曼冯敏李育豪刘迪黄小容曹伟胜廖明华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广东广州 510642

禽肿瘤病毒在高温下很快灭活，病毒感染力的热不稳定性成为病毒保存中的关键因素，温度也成为实验操作中保证病毒生物学活性的重要考虑因素。在实验室通过传统接毒盲传提高病毒滴度耗费时间长，也极易造成不同亚群间的交叉污染。超速离...

禽肿瘤病毒在高温下很快灭活，病毒感染力的热不稳定性成为病毒保存中的关键因素，温度也成为实验操作中保证病毒生物学活性的重要考虑因素。在实验室通过传统接毒盲传提高病毒滴度耗费时间长，也极易造成不同亚群间的交叉污染。超速离心可以使病毒样本浓缩100 倍甚至更高，浓缩后的病毒是否具有生物学活性成为影响后续实验研究的关键因素。

关键词：

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NDV V和W基因克隆、表达及其对细胞凋亡和周期影响的研究

NDV V和W基因克隆、表达及其对细胞凋亡和周期影响的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：汪昭雄康银峰孙敏华何静张盼盼谢鹏任涛华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广东广州 510642

新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的一种能导致大多数禽类消化道、胃肠道和中枢神经系统损伤为主要特征的的高度接触性、急性败血性禽类传染病。本研究根据GenBank 公布的LaSota 和GM 株...

新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的一种能导致大多数禽类消化道、胃肠道和中枢神经系统损伤为主要特征的的高度接触性、急性败血性禽类传染病。本研究根据GenBank 公布的LaSota 和GM 株基因序列设计特异性引物扩增V 和W 基因通过融合PCR 获得NDV疫苗株LaSota 和强毒株GM V和W基因,构建真核表达载体pEGFP-La V、pEGFP-La W、pEGFP-GMV、pEGFP-GM W,构建的载体与空载体pEGFP-N1 转染DF-1 细胞,在DF-1 细胞中2 株病毒V 和W 基因均能够得到有效表达,其中转染后36 h 后各转染组细胞荧光强度最强。

关键词：

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63株IBV分离株M基因的遗传变异与系统进化分析

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中国畜牧兽医 2012年第1期39卷 122-127页

作者：郑俏伟龚军刘大伟何琴王建华郭露铰徐成刚廖明任涛华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室广东广州510642

对1993-2010年从中国不同地区分离的63株传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)野毒株,采用RT-PCR方法克隆测定所分离野毒株的M基因核苷酸序列,并与GenBank中公布的部分国内外IBV毒株的M基因序列进行比较分析,研究中国IB... 详细信息

对1993-2010年从中国不同地区分离的63株传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)野毒株,采用RT-PCR方法克隆测定所分离野毒株的M基因核苷酸序列,并与GenBank中公布的部分国内外IBV毒株的M基因序列进行比较分析,研究中国IBV的分子流行病学特点和分子遗传变异规律。结果显示,所测毒株M基因具有6种不同长度的开放阅读框,这些长度的差异是由于5′端的核苷酸插入或缺失造成的;N端含有1～2个N-糖基化位点,其中1个糖基化位点"Asn-Cys-Thr"(NCT)是高度保守的。63个IBV分离株间氨基酸序列相似性为88.9%～100%,分离株与参考株间相似性为87.2%～100%。系统进化分析结果显示,本研究的63个IBV分离株可分为9个基因型,2005-2010年IBV中国流行株大部分与Mass型疫苗株处于不同的基因型,而且氨基酸序列相似性都小于94%。

关键词： IBV M基因遗传变异系统进化分析

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