检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2011年第4期27卷 316-319,324页

作者：曾艳波朱顺海韩红玉董辉姜连连赵其平马卫娇程军黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

目的为了筛选能有效用于治疗动物弓形虫病的药物,本研究选择了9种药物进行抗急性弓形虫疗效初步评价实验。在此基础上,更深入评价了已选的最佳药物磺胺氯吡嗪抗弓形虫的疗效,比较了不同剂量磺胺氯吡嗪和各剂量组分别与乙胺嘧啶复配后的... 详细信息

目的为了筛选能有效用于治疗动物弓形虫病的药物,本研究选择了9种药物进行抗急性弓形虫疗效初步评价实验。在此基础上,更深入评价了已选的最佳药物磺胺氯吡嗪抗弓形虫的疗效,比较了不同剂量磺胺氯吡嗪和各剂量组分别与乙胺嘧啶复配后的抗弓形虫疗效。方法用弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子,按5 000个/只腹腔接种小鼠,接种24h后,通过灌服方式给药,连续治疗5d,接种后观察到40d后结束实验,评价平均存活时间、半数死亡时间和存活率等各项指标得出疗效。结果多种药物比较实验中,三字球虫粉(SPZ 250mg/kg)组的平均存活时间、半数死亡时间、存活率明显高于感染不用药组和其他药物治疗组(P<0.05),表现出良好抗虫效果。另外,不同剂量及复配结果显示:磺胺氯吡嗪(250mg/kg)组和磺胺氯吡嗪(350mg/kg)+乙胺嘧啶(15mg/kg)组,分别保护了58.33%和54.55%的小鼠免于发病死亡,并大大推迟了半数死亡时间,与其他各剂量组、复配组及感染不用药对照组呈现显著性差异(P<0.05),表明灌服磺胺氯吡嗪有显著的抗弓形虫作用,尤其250mg/kg治疗剂量效果最佳。结论本研究筛选出了对小白鼠感染弓形虫有明显治疗效果的抗动物弓形虫药物磺胺氯吡嗪以及最佳治疗剂量,为后续研究此药进一步治疗动物弓形虫病及推广应用奠定了基础。

关键词：弓形虫病弓形虫磺胺氯吡嗪

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布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究

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动物医学进展 2009年第12期30卷 25-29页

作者：宫晓炜周继章中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩... 详细信息

设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Westernblot和间接ELISA试验证明,纯化之后的OMP10重组蛋白可以被布鲁菌阳性血清识别。

关键词：布鲁菌 0MPIO重组蛋白抗原性

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镰形扇头蜱组胺结合蛋白全长基因的克隆与分析

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中国兽医学报 2008年第3期28卷 257-260页

作者：向飞宇周勇志龚海燕周金林中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

从本实验室构建的镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)抑制消减杂交cDNA文库中选择了1条可能编码组胺结合蛋白(HBP)的EST序列(RhHBP),以5′末端快速扩增的方法(5′RACE)扩增获得5′末端序列,拼接获得全长基因。DNAMAN(v4.0)、DN... 详细信息

从本实验室构建的镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)抑制消减杂交cDNA文库中选择了1条可能编码组胺结合蛋白(HBP)的EST序列(RhHBP),以5′末端快速扩增的方法(5′RACE)扩增获得5′末端序列,拼接获得全长基因。DNAMAN(v4.0)、DNAstar(v4.0)和Genetyx(v4.0)软件分析阅读框、编码产物、序列同源性和系统进化,同时也分析了该基因在吸血前后雌雄蜱体内的表达情况。5′RACE法获得1条约400 bp的DNA片段,克隆测序,拼接获得1条长803 bp的全长基因,编码219个氨基酸残基。该基因在吸血雌蜱唾液腺内特异表达,初步分析该基因是组胺结合蛋白基因。

关键词：镰形扇头蜱组胺结合蛋白 5′末端快速扩增

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国内部分地区贝类隐孢子虫感染情况调查

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中国人兽共患病学报 2009年第11期25卷 1124-1125页

作者：黄燕徐梅倩朱顺海曹杰何国声中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

近年来,隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)作为一种新的严重危害人畜健康的重大寄生虫病得到广泛关注,它的流行和传播有可能会给人类带来大规模的灾难,WHO于1986年将之列为艾滋病的怀疑指标之一~([1]).

关键词：隐孢子虫病感染情况调查贝类国内寄生虫病人畜健康艾滋病 WHO

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干扰日本血吸虫凋亡抑制因子最佳siRNA分子的筛选

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中国人兽共患病学报 2013年第9期29卷 846-849页

作者：罗荣赵江平胡超程国锋中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

目的筛选干扰日本血吸虫凋亡抑制因子(Inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)较好的siRNA分子。方法应用生物信息学设计了针对SjIAP的3对siRNA分子。利用脂质体将每对siRNA分子和表达IAP的重组质粒传染到HEK2... 详细信息

目的筛选干扰日本血吸虫凋亡抑制因子(Inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)较好的siRNA分子。方法应用生物信息学设计了针对SjIAP的3对siRNA分子。利用脂质体将每对siRNA分子和表达IAP的重组质粒传染到HEK293T细胞中,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹检测IAP的表达。将siRNA分子与日本血吸虫童虫(12d)进行体外共培养,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹检测虫体内的IAP表达。结果细胞转染实验的实时定量RTPCR和免疫印迹分析表明本研究获得了2个干扰SjIAP较好的siRNA分子,且其中1对siRNA分子可显著抑制日本血吸虫虫体内IAP蛋白的表达,同时虫体Caspase活性有所上升。结论本研究获得了2个干扰日本血吸虫IAP较好的siRNA分子,为进一步利用RNA干扰研究血吸虫IAP的功能奠定了前期基础。

关键词：日本血吸虫凋亡抑制因子 RNA干扰基因功能

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检测牛奶中结合珠蛋白的电流型免疫传感器的研制

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南京农业大学学报 2011年第5期34卷 112-116页

作者：丁守强刘彬谭勋潘韬浙江大学动物科学学院/农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室浙江杭州310029 全国畜牧总站北京100125

为构建可定量检测牛奶中结合珠蛋白(Hp)含量的电流型免疫传感器,以三电极系统中的金电极为工作电极,采用层层自组装技术将L-半胱氨酸、纳米金颗粒和抗牛Hp抗体依次组装在工作电极上,制成免疫传感器。制成的免疫传感器对Hp的线性检测范围... 详细信息

为构建可定量检测牛奶中结合珠蛋白(Hp)含量的电流型免疫传感器,以三电极系统中的金电极为工作电极,采用层层自组装技术将L-半胱氨酸、纳米金颗粒和抗牛Hp抗体依次组装在工作电极上,制成免疫传感器。制成的免疫传感器对Hp的线性检测范围为15～100 mg.L-1,最低检测限为0.63 mg.L-1,并具有较好的重现性和稳定性。分别采用该传感器和ELISA检测试剂盒对隐性乳房炎患牛乳样中的Hp含量进行检测的结果表明,两种检测结果间无显著差异(P>0.05)。结论:制备的免疫传感器可定量检测牛奶中的结合珠蛋白(Hp)。

关键词：牛奶结合珠蛋白免疫传感器

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柔嫩艾美耳球虫子孢子高表达新基因的克隆、表达及分析

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中国预防兽医学报 2010年第5期32卷 370-374页

作者：李洋韩红玉董辉赵其平姜连连朱顺海郭涛平宪卿马卫娇曾艳波程军黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

为克隆和研究柔嫩艾美耳球虫(***)新基因,本研究在所获得的ESTs序列的基础上,应用RACE技术克隆获得了1个在子孢子阶段高表达新基因的全长cDNA序列(GU553107),命名为ZB7-C11,该基因全长1439bp,ORF为525bp,编码174个氨基酸,预测表达蛋白... 详细信息

为克隆和研究柔嫩艾美耳球虫(***)新基因,本研究在所获得的ESTs序列的基础上,应用RACE技术克隆获得了1个在子孢子阶段高表达新基因的全长cDNA序列(GU553107),命名为ZB7-C11,该基因全长1439bp,ORF为525bp,编码174个氨基酸,预测表达蛋白的分子量约为18.7ku。Real-timePCR对***不同发育阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和裂殖子)表达量进行分析显示,该基因在子孢子阶段的表达高于其它阶段。另外,将ZB7-C11克隆于pGEX-4T中构建重组质粒pGEX-4T-C11,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达6h后其表达量最高,并且重组蛋白分子量约44.7ku大部分以可溶性存在。Westernblot分析显示该重组蛋白可被抗***的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性。该结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫子孢子克隆表达

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猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段的表达、纯化及抗原性分析

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中国兽医学报 2012年第2期32卷 231-237页

作者：郝宝成梁剑平兰喜刑小勇项海涛温峰琴胡永浩柳纪省中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药重点开放实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学学院甘肃兰州730070

根据已克隆的戊型肝炎病毒株swCH189株结构蛋白基因(ORF2)的抗原性及水溶性分析,在其序列上设计套式引物,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2主要抗原基因片段,长度为728bp,将其克隆于PMD18-T载体,测序结果表明插... 详细信息

根据已克隆的戊型肝炎病毒株swCH189株结构蛋白基因(ORF2)的抗原性及水溶性分析,在其序列上设计套式引物,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2主要抗原基因片段,长度为728bp,将其克隆于PMD18-T载体,测序结果表明插入的片段属于猪戊型肝炎病毒结构蛋白基因ORF2部分;将该片段插入pet32a表达载体,经酶切、测序鉴定证实获得了带有目的基因的重组表达质粒。将重组质粒转化Rosetta菌,经0.3mmol/L IPTG诱导得到融合表达,得到相对分子质量为45 000的重组蛋白,以包涵体形式存在。Western blot分析表明,该蛋白可以与猪戊型肝炎阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的反应原性。并用SDS电泳切胶纯化和透析浓缩方法进行纯化,用纯化的蛋白免疫兔子,经每2周免疫1次,连续3次免疫后,对免疫组和对照组,分别在45,60,90d采血,每只兔子采集1份。用夹心ELISA法测定免疫血清抗体,结果表明免疫组在45d后均产生具有HEV抗原结合活性的抗体。本试验对猪swCH189株CP239基因的克隆和表达研究,为进一步研究结构蛋白基因ORF2的生物学功能奠定了基础。

关键词：猪戊型肝炎病毒 swCH189株克隆原核表达纯化抗原性分析

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牛支原体生长曲线的测定和培养基筛选

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湖北农业科学 2012年第3期51卷 549-551页

作者：邵倩储岳峰何生虎逯忠新宁夏大学农学院银川750021 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物(疫病重点开放实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

为筛选最适于牛支原体(Mycoplasma bovis)生长的培养基,利用活菌计数方法测定了牛支原体OF2株在改良Thiaucourt’s培养基、牛心汤培养基和改良KM2培养基中的生长曲线。结果发现,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长30 h即可达到平... 详细信息

为筛选最适于牛支原体(Mycoplasma bovis)生长的培养基,利用活菌计数方法测定了牛支原体OF2株在改良Thiaucourt’s培养基、牛心汤培养基和改良KM2培养基中的生长曲线。结果发现,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长30 h即可达到平台期,平均最高生长滴度7.0×109ccu/mL;在牛心汤培养基中生长40 h即可达到平台期,平均最高生长滴度4.0×109ccu/mL;在改良KM2培养基中生长50 h达到平台期,其平均最高生长滴度为7.0×108ccu/mL。结果表明,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长快、滴度高,为下一步牛支原体灭活疫苗的研究提供了参考依据。

关键词：牛支原体(Mycoplasma bovis) 培养基筛选生长曲线

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马立克氏病病毒编码的microRNA:从基因组学到功能研究

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中国科学：生命科学 2010年第6期40卷 476-483页

作者：罗俊滕蔓樊剑鸣王方雨周玲邓瑞广张改平河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室郑州450002 郑州大学公共卫生学院毒理学教研室郑州450001

microRNA在多种生物学过程中发挥重要的基因转录后调控功能.近期发现,疱疹病毒也编码大量的miRNA.对包括马立克氏病病毒在内的疱疹病毒编码miRNA的初步研究表明,它们可能在病毒复制、潜伏感染、细胞转化及肿瘤发生发展中发挥重要调控作... 详细信息

microRNA在多种生物学过程中发挥重要的基因转录后调控功能.近期发现,疱疹病毒也编码大量的miRNA.对包括马立克氏病病毒在内的疱疹病毒编码miRNA的初步研究表明,它们可能在病毒复制、潜伏感染、细胞转化及肿瘤发生发展中发挥重要调控作用.MDV是疱疹病毒甲亚科的重要成员,其感染自然宿主鸡后可诱发典型的马立克氏病,该病可用抗病毒疫苗有效预防,这是目前已知肿瘤病中第一个可用疫苗预防的病毒性肿瘤病.因此,MDV感染对于研究miRNA调控肿瘤发生和发展的生物学、遗传学及免疫学等都提供了极好的动物模型.本文综述了MDV编码miRNA的发现与鉴定、基因组结构、表达谱及功能研究的进展,并探讨了今后深入研究其生物学功能的技术及前景.

关键词： miRNA MDV 疱疹病毒肿瘤肿瘤发生机制

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