检索结果-内蒙古大学图书馆

华南师范大学学报（自然科学版） 2018年第4期50卷 68-73页

作者：吴倩倩胡敏伦钟云闫化学姜波吴波钟广炎高峰广东省植物发育生物工程重点实验室∥华南师范大学生命科学学院广州510631 广东省农业科学院果树研究所广州510640 农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室∥广东省热带亚热带果树研究重点实验室广州510640

文中采用PCR技术从番茄中克隆获得了Mi基因,采用反转录PCR(RT-PCR)技术从来源于红橘(Citus reticulate)的根结线虫中克隆获得了16D10基因,采用DNA重组技术构建了Mi基因的过表达载体和16D10基因的RNAi载体,分别命名为pB-Mi和pB-16DR.通... 详细信息

文中采用PCR技术从番茄中克隆获得了Mi基因,采用反转录PCR(RT-PCR)技术从来源于红橘(Citus reticulate)的根结线虫中克隆获得了16D10基因,采用DNA重组技术构建了Mi基因的过表达载体和16D10基因的RNAi载体,分别命名为pB-Mi和pB-16DR.通过根瘤农杆菌介导的遗传转化,获得了经PCR检测为阳性的沙田柚转基因植株.这一结果将为研究Mi基因过表达和16D10基因的RNA干扰对柑橘根结线虫病的抗性影响提供试材和技术支持.

关键词： Mi基因 16D10基因过表达载体 RNAi载体根结线虫

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硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长的影响

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分子植物育种 2018年第1期16卷 240-247页

作者：王玉林胡位荣刘顺枝潘玉珠易干军孙清明广州大学生命科学学院广州510006 广东省农业科学院果树研究所农业部南亚热带果树生物技术与遗传资源利用重点实验室广州510640

为明确硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发特性的影响,本研究以新鲜花粉为材料,采用液体培养基离体培养法,结合单因子与正交设计试验,以期优化液体培养基组分。结果表明,蔗糖、硼酸和pH值三因素均对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长... 详细信息

为明确硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发特性的影响,本研究以新鲜花粉为材料,采用液体培养基离体培养法,结合单因子与正交设计试验,以期优化液体培养基组分。结果表明,蔗糖、硼酸和pH值三因素均对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长产生极显著影响,因素间存在交互作用。其中,对花粉离体萌发率的作用大小表现为硼酸×蔗糖>蔗糖>蔗糖×pH>硼酸>硼酸×蔗糖×pH>pH>硼酸×pH,对花粉管长度影响程度为蔗糖>pH>硼酸×蔗糖>硼酸>硼酸×pH>蔗糖×pH>硼酸×蔗糖×pH。促进花粉萌发的最佳组分为500 mg/L硼酸+25%蔗糖+pH 6.5,促进花粉管伸长的最佳组分为300 mg/L硼酸+20%蔗糖+pH 7.5。本研究为建立最佳火龙果花粉离体萌发的液体培养基配方奠定基础,也为生产中提高辅助授粉效率、加快人工杂交育种进程提供参考。

关键词：火龙果花粉离体萌发特性液体培养基

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CgCDA3基因缺失对胶孢炭疽菌生长和侵染致病的影响

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江苏农业学报 2018年第5期34卷 1013-1021页

作者：孟祥春郑肖祎黄泽鹏王小菁广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室广东广州510640 华南师范大学生命科学学院广东广州510631

为了明确CgCDA3基因在胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)生长及侵染致病过程中的功能,从C. gloeosporioides基因组中克隆CgCDA3基因,首先进行生物信息学分析,然后利用基因同源重组的方法获得CgCDA3基因缺失突变体(△cda3),最... 详细信息

为了明确CgCDA3基因在胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)生长及侵染致病过程中的功能,从C. gloeosporioides基因组中克隆CgCDA3基因,首先进行生物信息学分析,然后利用基因同源重组的方法获得CgCDA3基因缺失突变体(△cda3),最后分析了△cda3的孢子萌发、附着胞形成和侵染致病性变化。结果表明,CgCDA3基因ORF全长1 470 bp,编码含489个氨基酸的蛋白质,其含有一个聚多糖去乙酰化酶保守结构域。CgCDA3蛋白与已知的西瓜炭疽菌(C. orbiculare)、禾生炭疽菌(C. graminicda)和睡莲炭疽菌(C. nymphaeae)的CDA蛋白同源性较高,同源性分别为63%、60%和80%。CgCDA3基因缺失突变体同野生型相比,生长及产孢正常,但表现为孢子萌发能力下降,附着胞形成率降低,同时侵染芒果的致病性也显著减弱。推测CgCDA3基因参与调控胶孢炭疽菌孢子萌发和附着胞形成等形态生长和建成过程,从而对其致病性产生一定的影响。

关键词：胶胞炭疽菌几丁质脱乙酰酶孢子萌发附着孢突变体致病性

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荔枝果实成熟特性的研究

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中国农学通报 2018年第25期34卷 57-63页

作者：戴宏芬邱燕萍向旭袁沛元凡超蒋侬辉刘伟广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室/广东省热带亚热带果树研究重点实验室广州510640

为研究荔枝果实的成熟特性,以‘糯米糍’和‘桂味’2个花期和成熟期较一致的荔枝品种为试验材料,当‘桂味’果皮首先开始转黄时,定期测量2种果实的纵横径和果实各部分质量,测定果实固形物(TSS)、糖、酸和Vc等含量,从果实外观成熟度变化... 详细信息

为研究荔枝果实的成熟特性,以‘糯米糍’和‘桂味’2个花期和成熟期较一致的荔枝品种为试验材料,当‘桂味’果皮首先开始转黄时,定期测量2种果实的纵横径和果实各部分质量,测定果实固形物(TSS)、糖、酸和Vc等含量,从果实外观成熟度变化、果实的生长情况和果实品质等方面探讨荔枝的成熟特性。结果表明,‘糯米糍’果实的初始缓慢生长期较‘桂味’长,果皮推迟转黄约13天,但后期大部分时间内生长速度更快,两者果径和单果重的差异在缩小,成熟度趋于一致;后期果径的生长以横径为主;当果实的鲜食品质趋于最佳时,果径有暂时收缩的趋势;‘糯米糍’和‘桂味’的果肉分别以积累蔗糖和还原糖为主,过熟时还原糖含量增加;可滴定酸持续下降,当可滴定酸含量位于0.23%~0.69%、糖酸比位于20.93~61.75时,果实鲜食品质较佳;‘糯米糍’可食率较高,维持在约80%,过熟时‘桂味’可食率下降,单果重的增加以果皮和果核增重为主;2种果实过熟时继续生长,‘糯米糍’生长速度较快,但果实TSS下降,Vc含量较低,果实品质劣变更加严重。2个荔枝品种的果实具有独特的成熟特性。可滴定酸和糖酸比可作为判断果实成熟度的参考指标。‘糯米糍’成熟果实衰退快速,维持适宜含酸量和糖酸比的时间较短,宜鲜食的品质保持期和适宜采收期较短,‘桂味’果实衰退速度较慢,适宜保质采收期较‘糯米糍’长,这也是‘桂味’品种的成熟特征。

关键词：荔枝成熟特性生长速度可滴定酸糖酸比过熟

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菠萝混合授粉杂交品系表型研究及其父本来源分析

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农学学报 2018年第4期8卷 39-45页

作者：刘传和刘岩广东省农业科学院果树研究所广州510640 农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室广州510640 广东省热带亚热带果树研究重点实验室广州510640

旨在研究菠萝混合授粉杂交品系‘H’的父本来源。比较‘H’与其母本以及混合花粉供体的表型性状;并基于表型性状遗传距离分析及SLAF测序,研究‘H’与混合花粉供体间的遗传相似性及SNP基因型来源。杂交品系‘H’的物候期、植株大小,果实... 详细信息

旨在研究菠萝混合授粉杂交品系‘H’的父本来源。比较‘H’与其母本以及混合花粉供体的表型性状;并基于表型性状遗传距离分析及SLAF测序,研究‘H’与混合花粉供体间的遗传相似性及SNP基因型来源。杂交品系‘H’的物候期、植株大小,果实理化品质、色泽等表型性状与花粉供体之一的‘神湾’相当,而部分理化品质指标优于‘神湾’;果实香气物质组分及含量与其母本‘无刺卡因’较接近。果实小于其母本‘无刺卡因’及‘巴厘’,而大于‘神湾’。杂交品系‘H’与‘神湾’间的遗传相似性大于‘H’与‘巴厘’间的遗传相似性。通过SLAF简化基因组测序分析表明,‘H’的父本来源于‘神湾’的可能性大于‘巴厘’。

关键词：菠萝混合授粉杂交品系父本来源表型 SLAF-seq

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德庆县农业面源污染现状与治理对策

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热带农业工程 2019年第4期43卷 75-79页

作者：胡益波张海燕陈烁宇陈小艳蒋燕玲洪玉欢黄永敬德庆县柑桔研究所广东德庆526600 德庆县新圩镇农技推广中心广东德庆526600 德庆县农技推广中心广东德庆526600 广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室广东广州510640

分析了德庆县农业面源污染的现状及其危害,总结了农业面污染治理采取的主要措施和效果,并结合新时期农业发展的趋势和当地实际情况,针对存在的问题提出了相应的对策,以期为本地区农业面源污染治理和生态保护提供参考。

关键词：德庆县农业污染现状治理对策

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平衡式疏果修剪法对龙眼生长与结果的影响

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中国农学通报 2018年第19期34卷 62-70页

作者：韩冬梅郭栋梁李建光潘学文李荣广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室广州510640

为探明幼果期疏果结合修剪对龙眼植株生长和结果的影响,选用6年生‘石硖’幼年结果树为试材,以回缩修剪、初始结果枝率、初始单穗果数为试验因素,采用L_9(3~4)正交设计,研究不同试验因素对果实成熟时的新梢比率、落果速率、结果枝率、... 详细信息

为探明幼果期疏果结合修剪对龙眼植株生长和结果的影响,选用6年生‘石硖’幼年结果树为试材,以回缩修剪、初始结果枝率、初始单穗果数为试验因素,采用L_9(3~4)正交设计,研究不同试验因素对果实成熟时的新梢比率、落果速率、结果枝率、单穗果数、产量、成熟期和果实品质的影响,并初步筛选出优势因素与水平组合。结果表明:经过疏果修剪的各处理植株在枝梢生长、果实发育和成熟品质上,都与对照有着明显差异,表现为落果率降低(P<0.01),成熟期提前,有一定的新梢比率,且合适的处理有助于提高植株单位产量;单果重增加,果肉TSS含量提高,果色偏向干净、明艳的黄绿色(P<0.01)。初始结果枝率越高的处理,成熟时果枝比率越高;回缩修剪植株的果实外观色泽比不修剪的偏向饱和黄绿色;初始单穗果数越高的处理,果实发育越慢、落果速率越高、成熟时单穗果数越多、成熟期也越晚;单穗果数处于中间水平60粒的处理,单果重和TSS含量最高(P<0.01)。正交试验方差分析结果显示,成熟时单穗果数在因素初始单穗果数、果表h°值在因素矮化修剪的不同水平上存在显著差异(P<0.05);直观分析结果显示,结果枝率50%~60%、单穗果数60粒左右,适度的回缩修剪,是龙眼植株获取生长与结果、产量与品质平衡关系的最优组合。该技术为生产应用提供了可行的操作指导。

关键词：植株生长修剪法龙眼疏果平衡式果实成熟回缩修剪果实品质

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不同有机基质配比对菜心幼苗生长及质量的影响

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农学学报 2018年第2期8卷 25-28页

作者：匡石滋赖多邵雪花广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室广州510640

为探索农业废弃物基质化利用新途径,将香蕉菠萝废弃茎叶堆肥与椰糠按不同比例配制成复合基质,以菜心种子为供试材料,调查不同配比基质的理化性质及对菜心幼苗生长指标、生理生化指标的影响。并通过平均隶属函数值法分析各处理幼苗的综... 详细信息

为探索农业废弃物基质化利用新途径,将香蕉菠萝废弃茎叶堆肥与椰糠按不同比例配制成复合基质,以菜心种子为供试材料,调查不同配比基质的理化性质及对菜心幼苗生长指标、生理生化指标的影响。并通过平均隶属函数值法分析各处理幼苗的综合素质,对不同配方复合基质的育苗效果进行研究。结果显示:以香蕉菠萝废弃茎叶堆肥与椰糠比例为5:5处理的幼苗综合素质表现最好,其平均隶属函数值为0.845,表明该配方的基质可推荐作为菜心育苗的有机基质。

关键词：菜心基质配比育苗效果

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一种适用于龙眼人工杂交的改良方法

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中国热带农业 2018年第3期 69-71页

作者：李建光郭栋梁韩冬梅李荣潘学文王静农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室/广东省农业科学院果树研究所广东广州510640

传统龙眼人工杂交存在效率低下、坐果率较低等问题。为了提高杂交效率,作者研发了一套改良型的人工杂交新方法。具体操作方法:在龙眼母本植株的花穗定型后将要开花前,采用多效唑处理母本植株,大量减少雄花数量,促使单一花穗的雌花集中开... 详细信息

传统龙眼人工杂交存在效率低下、坐果率较低等问题。为了提高杂交效率,作者研发了一套改良型的人工杂交新方法。具体操作方法:在龙眼母本植株的花穗定型后将要开花前,采用多效唑处理母本植株,大量减少雄花数量,促使单一花穗的雌花集中开放;采摘雄花盛开的父本花穗枝条,对着母本花穗轻轻摇动,使花粉飘散,完成人工杂交授粉,然后去除剩余的花蕾,套袋即可。与传统杂交方法相比,改良人工杂交新方法可以大幅度提高工作效率,将传统单个花穗完成授粉时间从4~6 d减少到2 d,同时达到提高坐果率的目的,在龙眼杂交育种上具有较好的推广前景。

关键词：龙眼去雄集中开放花粉杂交

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香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系的建立

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中国农业科学 2017年第7期50卷 1294-1301页

作者：胡春华邓贵明孙晓玄左存武李春雨邝瑞彬杨乔松易干军广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学和种质资源利用重点实验室

【目的】建立香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系,为在香蕉上利用CRISPR/CAS9技术开展香蕉基因功能研究和香蕉育种工作开辟新的路径。【方法】根据香蕉A基因组八氢番茄红素脱氢酶(phytoene dehydrogenase,PDS)基因组序列,利用在线工具ZiFi... 详细信息

【目的】建立香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系,为在香蕉上利用CRISPR/CAS9技术开展香蕉基因功能研究和香蕉育种工作开辟新的路径。【方法】根据香蕉A基因组八氢番茄红素脱氢酶(phytoene dehydrogenase,PDS)基因组序列,利用在线工具ZiFiT Targeter Version 4.2确定合适的CRISPR/Cas9靶标序列,选择其中一个位点作为靶标位点,设计包含靶标基因MaPDS序列的sgRNA。利用一套改良的CRISPR/Cas9多靶点载体系统,以pYLg RNA-Lac Z-U6a质粒为模版,Overlapping PCR法构建U6a-sgRNA表达盒,再利用Golden Gate Cloning法将U6a-sgRNA表达盒克隆到pYLCRISPR/Cas9载体中,构建以MaPDS为靶标基因的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。构建的质粒含Cas9p和sgRNA表达盒,其中Cas9p由P启动子驱动,sgRNA由水稻来源的RNA启动子U6a驱动。将构建好的载体转入农杆菌EHA105,转化香蕉主栽品种巴西蕉胚性细胞悬浮系,获得抗性再生植株。设计PCR引物扩增包含靶标序列的MaPDS序列片段,检测和分析再生植株MaPDS被编辑的情况。【结果】试验选择MaPDS作为CRISPR/Cas9靶标基因,设计一个靶标位点,利用Overlapping PCR法获得了U6a-sgRNA表达盒,利用Golden Gate Cloning法将其克隆到pYLCRISPR/Cas9的Bsa I位点,成功构建了针对MaPDS的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。经过农杆菌浸染、抗性筛选、抗性胚诱导、萌发及生根,最终获得抗性独立转化株系129个。其中,71个株系出现白化表型,产生白化表型的几率达55%。失绿突变体的出现意味着MaPDS蛋白功能丧失。随机取转化株系中的白化表型株系33个和正常表型株系14个,提取其叶片基因组DNA,扩增含有MaPDS的靶位点片段,序列分析结果表明,白化表型株系的MaPDS靶位点序列发生了基因编辑。主要是在靶位点附近增加1个碱基T或A,或是在靶位点附近或下游发生碱基颠换或转换,出现非靶标位点突变。这些突变形式均能导致MaPDS蛋白翻译错误,从而使MaPDS蛋白丧失功能,表现为白化。转化株系中表型正常植株的MaPDS靶位点序列与野生型一致,未检测到变异。【结论】成功在香蕉体内实现了对内源MaPDS的定点敲除,获得了基因定点敲除的突变体株系,为进一步利用基因编辑技术在香蕉上的应用奠定了基础。

关键词：香蕉 CRISPR/Cas9 MaPDS 基因编辑

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