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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：蔡德敏贾逸敏宋浩刚隋世燕卢镜宇赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室

目的阐明母体妊娠期日粮中添加甜菜碱对新生仔猪肝脏中糖异生的影响及其相关的表遗传机制。材料和方法16头母猪随机分为对照组(标准日粮)和甜菜碱组(标准日粮+3%甜菜碱),每天在05:00、10:00以及17:00分3次饲喂。妊娠母猪分娩结束后,立... 详细信息

目的阐明母体妊娠期日粮中添加甜菜碱对新生仔猪肝脏中糖异生的影响及其相关的表遗传机制。材料和方法16头母猪随机分为对照组(标准日粮)和甜菜碱组(标准日粮+3%甜菜碱),每天在05:00、10:00以及17:00分3次饲喂。妊娠母猪分娩结束后,立即从每窝新生仔猪中选取体重居中的雄性和雌性仔猪各1头,处死后采集样品。结果母猪妊娠期日粮添加甜菜碱显著增加新生仔猪肝糖原含量(P<0.05),同时,显著增加血清中生糖氨基酸(P<0.05)以及乳酸浓度(P<0.05)。实时荧光定量PCR和Western blot分析表明,母猪日粮中添加甜菜碱显著上调了新生仔猪肝脏甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(P<0.05)、甲硫氨酸腺苷基转移酶(P<0.05)和S-腺苷高半胱氨酸水解酶样因子1(P<0.05)mRNA及蛋白含量。同时显著上调了线粒体型磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(P<0.05)和果糖-1,6-2′磷酸果糖酶(FBP1,P<0.05)的基因和蛋白水平,并伴随着丙酮酸羧化酶(PC,P<0.05)和胞质型磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK1,P<0.05)的蛋白含量显著升高,但是显著降低了PCK1(P<0.05)的mRNA含量。此外,基因启动子甲基化程度PCK1(P<0.05),PCK2(P<0.05)显著升高,但FBP1显著降低(P<0.05)。同时,母猪日粮中添加甜菜碱降低了新生仔猪肝脏靶向于PC的2个miRNA(P<0.05)和靶向于PCK1的6个miRNA(P<0.05)的表达。结论母体妊娠期日粮添加甜菜碱通过DNA甲基化及miRNAs调控新生仔猪肝脏的糖异生功能,而新生仔猪肝脏中甲硫氨酸的代谢可能是与DNA甲基化调控有关联。

关键词：糖异生甜菜碱表观遗传母体营养新生仔猪

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母猪低蛋白日粮对新生猪卵巢卵泡发生和类固醇生成基因及microRNAs表达的影响

母猪低蛋白日粮对新生猪卵巢卵泡发生和类固醇生成基因及microRNA...

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：隋世燕赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室

目的妊娠期母体营养不良能导致成年后代卵巢功能紊乱,新生动物卵巢发育对成年后卵巢的功能具有重要的作用。然而,母体营养对新生动物卵巢的影响尚未见报道。因此,本试验通过母体蛋白日粮饲喂研究新生动物卵巢卵泡发生和类固醇生成基因及... 详细信息

目的妊娠期母体营养不良能导致成年后代卵巢功能紊乱,新生动物卵巢发育对成年后卵巢的功能具有重要的作用。然而,母体营养对新生动物卵巢的影响尚未见报道。因此,本试验通过母体蛋白日粮饲喂研究新生动物卵巢卵泡发生和类固醇生成基因及microRNAs表达的影响。材料和方法二胎长大二元杂交母猪16头,随机分为两组(n=8),分别饲喂含15%(SP)和7.5%(LP)粗蛋白的等能日粮。母猪自然分娩后,现将仔猪与母猪隔离,待分娩结束后,每窝选择1头接近平均体重的雌性仔猪进行采样,收集仔猪血清和卵巢。结果母猪饲喂低蛋白日粮对新生猪体重无显著影响,但显著降低了卵巢重与体重比值(P<0.05)。同时,研究发现LP组仔猪血清中雌二醇(P<0.05)浓度显著升高,而卵巢中类固醇激素生成基因CYP19A1(P<0.05)和CYP17A1(P<0.05)mRNA含量显著下降。另外,我们检测了细胞增殖和凋亡相关基因的表达,结果表明母猪饲喂低蛋白日粮显著升高雌性新生仔猪卵巢BAX/Bcl-2基因表达的比值(P<0.01),同时显著上调了雌性新生仔猪BMP4和PCNA基因表达(P<0.05),并且我们分别检测了靶向与BAX、Bcl-2、CYP19A1和PCNA的miRNAs的表达。结果表明,一起靶向于CYP19A1和PCNA的miR423-5p(P<0.05)显著下调,同时靶向于CYP19A1的miR378(P<0.05)及靶向于BMP4的miR-210(P<0.05)表达也显著下调。结论母猪饲喂低蛋白日粮影响新生猪卵巢卵泡发生和类固醇生成基因的表达,母体低蛋白使新生仔猪卵巢发育加快,提示母体低蛋白使新生仔猪卵巢发育紊乱,microRNAs可能参与了此过程的调控。

关键词：母体日粮新生猪卵巢基因表达 microRNAs

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肌肉注射LPS对猪唾液成分及下颌腺的影响

肌肉注射LPS对猪唾液成分及下颌腺的影响

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：黄燕平刘为凤殷超慈乐赵茹茜杨晓静南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室

近几年来,利用唾液诊断作为疾病监测与健康防控的报道越来越多。本文选取12头洋三元猪(长白猪×大白猪×杜洛克)来探讨研究猪唾液中一些成分在LPS注射下是否会发生变化以及这些变化是否与下颌腺有直接的关联。12头洋三元猪随机... 详细信息

近几年来,利用唾液诊断作为疾病监测与健康防控的报道越来越多。本文选取12头洋三元猪(长白猪×大白猪×杜洛克)来探讨研究猪唾液中一些成分在LPS注射下是否会发生变化以及这些变化是否与下颌腺有直接的关联。12头洋三元猪随机分为对照组和实验组,对照组肌肉注射2 ml生理盐水,实验组肌肉注射2ml 15μg/kg BW LPS。注射后6h采集完唾液后进行屠宰采样,采集血浆,下颌腺。淀粉酶,皮质醇,免疫球蛋白A(IgA),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)的含量分别利用比色法,放射免疫分析法,酶联免疫吸附实验法进行分析测定。嗜铬性颗粒蛋白A(CgA),乳铁蛋白水平利用蛋白质印迹法进行分析测定。下颌腺中三磷酸腺苷(ATP)含量利用高效液相色谱法进行测定;反转录聚合酶链式反应分析相关基因在下颌腺中的表达水平。结果表明:LPS注射后,唾液中淀粉酶活力,皮质醇水平都极显著升高,而IL-1β,CgA,乳铁蛋白的含量却极显著下降。下颌腺中TLR2,IL-1β及TNF-α基因表达水平极显著升高。下颌腺中ATP含量的下降也许可以解释LPS注射后IL-1β,乳铁蛋白,CgA含量在唾液及下颌腺中表达不一致。本篇文章阐述了唾液中这些变化的参数可以指示动物出现炎症反应,而且这些成分也许可以作为评估动物机体发生炎症反应重要的,无应激的生理指标。

关键词：唾液下颌腺 LPS 生物标记猪

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基于2-DE结合质谱研究高碳水化合物引起肝脏蛋白表达的变化

基于2-DE结合质谱研究高碳水化合物引起肝脏蛋白表达的变化

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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议

作者：姜雪元叶平生谢正露艾阳张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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高碳水化合物日粮对肝脏氨基酸分配与重分配及乳蛋白合成的影响

高碳水化合物日粮对肝脏氨基酸分配与重分配及乳蛋白合成的影响

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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议

作者：叶平生谢正露艾阳张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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β-酪啡肽-7对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化及氧化应激影响的细胞学研究

β-酪啡肽-7对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化及氧化应激影响的...

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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议

作者：张伟杨维维叶平生张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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山羊血管紧张素转移酶2(ACE2)的克隆和同源性分析

山羊血管紧张素转移酶2(ACE2)的克隆和同源性分析

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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议

作者：杨维维艾阳王珊珊张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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血管紧张素转化酶2(ACE2)对肠道氨基酸转运的影响

血管紧张素转化酶2(ACE2)对肠道氨基酸转运的影响

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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议

作者：王珊珊杨维维曹洋张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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母猪低蛋白日粮增强雄性新生仔猪肝脏线粒体DNA编码基因的调控机制

母猪低蛋白日粮增强雄性新生仔猪肝脏线粒体DNA编码基因的调控机制

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：贾逸敏李润生丛日华杨晓静孙钦伟 Nahid Parvizi 赵茹茜南京农业大学农业部生理生化重点开放实验室西北农林科技大学动物医学院

目的线粒体对维持细胞能量稳态有重要的作用,线粒体氧化磷酸化功能失调会导致代谢紊乱,影响动物健康。新生期是能量需求的关键期,母猪低蛋白日粮是否会改变新生仔猪肝脏线粒体氧化磷酸化功能以及其调控机制目前仍不清楚。材料方法本试... 详细信息

目的线粒体对维持细胞能量稳态有重要的作用,线粒体氧化磷酸化功能失调会导致代谢紊乱,影响动物健康。新生期是能量需求的关键期,母猪低蛋白日粮是否会改变新生仔猪肝脏线粒体氧化磷酸化功能以及其调控机制目前仍不清楚。材料方法本试验选取14头初产梅山母猪,随机分成两组。整个妊娠期分别饲喂正常日粮(含12%粗蛋白,SP)和低蛋白日粮(含6%粗蛋白,LP),母猪分娩后,从每窝选取平均体重雄性和雌性仔猪各1头,宰杀,收集血清和肝脏组织。结果母猪低蛋白日粮导致新生仔猪IUGR,雄性仔猪表现出低血糖。同时,降低了雄性仔猪肝脏线粒体DNA拷贝数(P<0.01),而上调了肝脏AMP含量(P<0.01)和降低了能荷值(P<0.01)。另外,线粒体DNA编码基因realtime-PCR检测显示,母猪饲喂低蛋白日粮显著升高了雄性仔猪肝脏ND6、COX1、COX2、COX3和CYTB mRNA表达(P<0.01)及COX酶活性(P<0.01)。此外,母猪低蛋白日粮显著显著降低了雄性仔猪肝脏线粒体DNA启动子区5′-甲基和5′-羟甲基化程度(P<0.01),并增加了糖皮质激素受体结合在启动子的含量(P<0.01),而显著降低了雌性仔猪肝脏线粒体DNA启动子区5′-甲基和5′-羟甲基化程度(P<0.01)。结论综上所述,母猪妊娠期低蛋白日粮能导致新生仔猪肝脏性别依赖的表遗传改变,这种变化导致了新生仔猪肝脏氧化磷酸化功能的改变,而糖皮质激素受体可能也参与了母体营养对仔猪肝脏线粒体DNA编码基因的转录调控。

关键词：新生仔猪肝脏线粒体甲基化 miRNA

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牛磺脱氧胆酸钠和CpGDNA对灭活H9N2禽流感病毒鼻腔免疫鸭的呼吸道抗体分泌细胞的影响

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畜牧兽医学报 2012年第5期43卷 761-766页

作者：康海泓申育萌王红丽杨倩南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

运用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合鸭源禽流感H9N2灭活病毒滴鼻免疫雏鸭,通过检测鸭呼吸道各组织中IgA和IgG抗体分泌细胞面积的变化对免疫效果进行评价。结果发现:应用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后3、5和7周,鼻腔... 详细信息

运用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合鸭源禽流感H9N2灭活病毒滴鼻免疫雏鸭,通过检测鸭呼吸道各组织中IgA和IgG抗体分泌细胞面积的变化对免疫效果进行评价。结果发现:应用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后3、5和7周,鼻腔、气管和气管叉组织中的IgA和IgG分泌细胞面积显著或极显著(P<0.05或P<0.01)高于单独H9N2灭活病毒免疫后的水平;应用CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后鼻腔和气管组织中IgA和IgG分泌细胞的面积有部分提高(P<0.05);而单独运用H9N2灭活病毒鼻腔免疫后IgA和IgG分泌细胞面积同对照组相比没有显著差异。结果表明:在牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA的配合下,禽流感H9N2灭活病毒鼻腔免疫能够提高雏鸭呼吸道组织中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积,有效地增强呼吸道局部的免疫应答水平。

关键词：鸭鼻腔免疫呼吸道禽流感灭活病毒抗体分泌细胞

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