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海洋渔业 2014年第1期36卷 8-15页

作者：鞠晨曦李云刘红蔡生力上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

在实验室水温26±1℃、盐度28±1的条件下,对眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)胚胎发育过程中的形态学变化和时间进行了观察研究。结果表明,眼斑双锯鱼受精卵属一端带有附着丝的沉性卵,呈长椭圆形,长径2.0±0.1 mm,短径0.9... 详细信息

在实验室水温26±1℃、盐度28±1的条件下,对眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)胚胎发育过程中的形态学变化和时间进行了观察研究。结果表明,眼斑双锯鱼受精卵属一端带有附着丝的沉性卵,呈长椭圆形,长径2.0±0.1 mm,短径0.95±0.1 mm;其卵裂方式为端黄卵盘状卵裂;胚胎发育可分为10个主要阶段:卵裂前期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、体节期、翻转期、血管形成期、器官形成期和孵化期。发育过程中胚胎的颜色逐渐加深,呈现由橙黄色到棕黄色的变化;在26℃水温条件下,整个胚胎发育过程需200 h左右。

关键词：眼斑双锯鱼胚胎发育形态学

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温度和pH对公子小丑鱼幼鱼消化酶活性的影响

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广东农业科学 2014年第3期41卷 131-135页

作者：张弢蔡生力鞠晨曦上海海洋大学水产与生命学院/农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

研究了温度和pH对人工养殖下的公子小丑鱼(Amphiprion ocellaris)幼鱼的胃、肝脏、肠道中蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性的影响,并对各部位消化酶活性进行比较。结果表明,在胃、肝脏、肠道中均可以检测出蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性,其... 详细信息

研究了温度和pH对人工养殖下的公子小丑鱼(Amphiprion ocellaris)幼鱼的胃、肝脏、肠道中蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性的影响,并对各部位消化酶活性进行比较。结果表明,在胃、肝脏、肠道中均可以检测出蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性,其中蛋白酶活性顺序为胃>肠道>肝脏,淀粉酶活性顺序为肠道>肝脏>胃,脂肪酶活性顺序为肠道>肝脏>胃。胃、肝脏、前肠、中肠、后肠蛋白酶的最适pH值分别为2.2、7.5、7.0、7.0和8.0;淀粉酶肝脏的最适pH值为6.0,其余部位均为7.0;脂肪酶肝脏的最适pH值为7.0,其余部位均为7.5。胃、肝脏、肠道的蛋白酶最适温度均为40℃;胃淀粉酶最适温度为40℃,肝淀粉酶最适温度为35℃,肠道淀粉酶最适温度为30℃;胃、肝脏、肠道的脂肪酶的最适温度均为40℃。

关键词：公子小丑鱼温度消化酶

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三角帆蚌外套膜细胞体外培养优化及体内植入培养对细胞生长的影响

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中国水产科学 2014年第2期21卷 225-234页

作者：李倩施志仪李文娟黄凯祁晓翔上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E-研究院上海海洋大学上海201306

以DMEM为基础培养基,通过优化改良培养基及缓冲液的配方,对三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)外套膜进行细胞培养,并且以显微观测、RNA/DNA的比值作为该细胞增殖的评价指标,分别对体外培养细胞的迁出时间、速度、数量以及增殖活力进行... 详细信息

以DMEM为基础培养基,通过优化改良培养基及缓冲液的配方,对三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)外套膜进行细胞培养,并且以显微观测、RNA/DNA的比值作为该细胞增殖的评价指标,分别对体外培养细胞的迁出时间、速度、数量以及增殖活力进行测定。分别取体外培养第24、108、120小时的细胞进行Hoechst DNA荧光标记,然后将3组标记细胞植入三角帆蚌外套膜中在蚌体内培养,在植入后第24、72、120、168、216小时运用RNA/DNA指标检测活体培养的细胞增殖活力。结果表明,经过优化后的缓冲液和培养基更有利于细胞从外套膜组织中迁出,迁出速度和细胞数量显著增加(P<0.05),且细胞的活力随着培养时间的延长而逐渐增大,培养至108 h时,细胞活力达到最大,RNA/DNA比值为24.53,在108 h后显著下降(P<0.05),显微观测的细胞生长状况与RNA/DNA指标测定相吻合。对体外培养的细胞植入蚌体外套膜中再进行培养时发现,对体外培养活力较好的细胞,活体内环境可增大细胞的活力,RNA/DNA比值最高达到25.45,但在活体培养168 h后活力显著下降(P<0.05);而对体外培养活力较差的细胞,活体内环境对细胞活力影响不显著(P>0.05)。本研究旨在为三角帆蚌外套膜细胞增殖的深入研究及建株提供基础性资料。

关键词：三角帆蚌外套膜细胞培养组织培养 RNA DNA活力检测淡水珍珠

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三角帆蚌内脏团不同部位插核育珠对珍珠囊形成的影响

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中国水产科学 2014年第6期21卷 1098-1107页

作者：李文娟黄凯李倩祁晓翔尚朝周子睿付元帅施志仪上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E-研究院上海海洋大学上海201306

对三角帆蚌(Hyriopsis comingii)内脏团不同部位进行插核,研究各组珍珠囊形成、结构以及珍珠质沉积的差异,从而确定出有利于珍珠形成的插核核位。实验选取内脏团5个部位(I:斧足内脏团前端;II:斧足内脏团中部;III:近生殖腺部;IV:近胃部;V... 详细信息

对三角帆蚌(Hyriopsis comingii)内脏团不同部位进行插核,研究各组珍珠囊形成、结构以及珍珠质沉积的差异,从而确定出有利于珍珠形成的插核核位。实验选取内脏团5个部位(I:斧足内脏团前端;II:斧足内脏团中部;III:近生殖腺部;IV:近胃部;V:近肾部)进行插核,并分别在插核后第20、50、90、150天(thd)采集内脏团插核部位进行组织固定,利用石蜡切片、HE染色研究不同插核部位珍珠囊结构及珍珠质沉积情况。结果表明:(1)插核施术后20 d,II组插核位点最早形成单层低柱状上皮细胞,为次生珍珠囊;(2)插核施术后50 d,I、II、III组均形成了珍珠囊上皮细胞,而IV、V组插核位点未出现类似的柱状细胞。其中II、III组珍珠囊上皮细胞前端含有大量体积较大的颗粒物;(3)插核施术后90 d,I、III组珍珠囊细胞间出现大量细胞间隙,I、II组珍珠囊表皮细胞具有多核现象的细胞数量增多,且II、III组上皮细胞中颗粒物数量增多,而IV、V组插核位点形成了复层扁平上皮细胞;(4)插核施术后150 d,I、III组珍珠囊内表皮细胞间隙变少。II组珍珠囊上皮细胞游离端存在大量的微绒毛,其与III组相似,珍珠囊上皮细胞细胞核明显增多,颗粒物减少。该时期,IV组在插核位点上形成了不连续的低柱细胞、V组插核位点仍未出现珍珠囊细胞。(5)三角帆蚌在插核术后养殖150 d后,I、II、III组珠核表面出现明显的珍珠质沉积,II、III组珍珠质沉积均匀,I组不均匀,并且II组沉积的珍珠层厚度(0.85 mm±0.06 mm)显著大于I、III组(P<0.05;0.62mm±0.07 mm,0.56 mm±0.03 mm),而IV、V组珠核表面没有珍珠质沉积。研究结果表明,三角帆蚌内脏团不同插核部位珍珠囊上皮细胞的形成存在明显差异,斧足–内脏团前端、斧足–内脏团中部以及近生殖腺部插核能形成完整的珍珠囊结构并沉积珍珠质,其中斧足–内脏团中部插核更有利于珍珠的生长。本研究旨为淡水珍珠贝的内脏团育珠研究工作提供实践基础和理论依据。

关键词：三角帆蚌内脏团插核珍珠囊珍珠质

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条斑紫菜中无机砷含量及海区环境痕量砷的分析

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上海海洋大学学报 2014年第4期23卷 518-522页

作者：张勤马家海雎敏陆勤勤沈辉上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 江苏省海洋水产研究所江苏南通226007

通过分析我国条斑紫菜主产区紫菜产品中无机砷、栽培海区海水、沉积物中总砷含量在整个生产周期中的变化情况,初步探讨栽培海区环境中砷含量与条斑紫菜中砷含量的关系。于2012-2013年紫菜栽培季节,按实际生产的采收批次,分别采收条斑紫... 详细信息

通过分析我国条斑紫菜主产区紫菜产品中无机砷、栽培海区海水、沉积物中总砷含量在整个生产周期中的变化情况,初步探讨栽培海区环境中砷含量与条斑紫菜中砷含量的关系。于2012-2013年紫菜栽培季节,按实际生产的采收批次,分别采收条斑紫菜原藻、加工品,对样品中的无机砷含量进行测定与分析,并对栽培海区的海水及表层沉积物中总砷进行定量检测与分析。结果显示,江苏省条斑紫菜原藻样品中无机砷含量为0.22~0.70mg/kg,加工品中无机砷含量为0.12~0.32 mg/kg,原藻及加工品中的无机砷含量随生产阶段的推后呈下降趋势,完全符合国家食品安全限量标准;栽培海区海水总砷含量为0.000 83~0.004 91mg/L,在整个生产周期都低于国家养殖用水水质标准对砷的限量要求,栽培海区海水中的总砷与当地紫菜产品中的无机砷之间总体呈正相关关系;表层沉积物中总砷含量范围为15.435~58.900μg/g,与条斑紫菜中无机砷含量没有明显的相关性。

关键词：条斑紫菜无机砷总砷限量标准

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早熟中华绒螯蟹雄蟹性腺指数、性腺生化成分及脂肪酸组成变化

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河南师范大学学报（自然科学版） 2014年第1期42卷 120-123页

作者：常国亮成永旭丁怀宇吴楠潘正军淮阴师范学院江苏省特色水产繁育工程实验室江苏淮安223300 上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

采用生化及气相色谱的方法研究了早熟与正常中华绒螯蟹雄蟹性腺指数、性腺生化成分及脂肪酸组成,结果表明:早熟雄蟹性腺指数为4.42±0.96,而正常雄蟹性腺指数为3.09±0.67,显著低于早熟雄蟹的性腺指数(P0.05);脂肪酸组成中,饱... 详细信息

采用生化及气相色谱的方法研究了早熟与正常中华绒螯蟹雄蟹性腺指数、性腺生化成分及脂肪酸组成,结果表明:早熟雄蟹性腺指数为4.42±0.96,而正常雄蟹性腺指数为3.09±0.67,显著低于早熟雄蟹的性腺指数(P<0.05);生化成分组成中,早熟蟹性腺的水分含量为70.26n-%,显著低于正常蟹,而总脂含量为3.96%,显著高于正常蟹(P<0.05),蛋白、碳水化合物、甘油三酯、胆固醇和磷脂含量在两种性腺中均未见显著差异(P>0.05);脂肪酸组成中,饱和脂肪酸(SFA)含量最多的均为16∶0,二者含量比较接近无显著差异(P>0.05),并且SFA均在27%稍多,二者无显著差异(P>0.05).单不饱和脂肪酸(MUFA)含量最高的均为18∶1n-9,早熟雄蟹性腺含量略高为24.04%,但与正常蟹间无显著差异(P>0.05);而早熟雄蟹性腺的18∶1n-7、20∶1n-9和MUFA含量均显著高于正常蟹(P<0.05).多不饱和脂肪酸组成中,两种蟹性腺的18∶2n-6含量非常接近,均在7.0%左右,虽然正常雄蟹性腺的20∶4n-6(ARA)、20∶5n-3(EPA)、22∶6n-3(DHA)、PUFA、n-3PUFA、n-6PUFA和HUFA含量均高于早熟蟹,但仅有后二者存在显著差异(P<0.05).

关键词：早熟中华绒鳌蟹性腺指数生化成分脂肪酸

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海洋生境刀鲚菌群PCR-DGGE指纹图谱构建及分析

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海洋科学 2014年第10期38卷 63-69页

作者：聂志娟徐钢春程起群杜富宽张勇顾若波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 南京农业大学渔业学院江苏无锡214081

为了分析海洋生境刀鲚（Coilia nasus）体内及生长环境菌群结构,作者采用免培养16S rDNA 的PCR-DGGE 指纹图谱技术,对刀鲚鳃、肠道壁、肠道内容物及水体环境中的菌群结构进行了对比分析。结果表明：变性梯度为35%-55%、浓度为8%的聚丙... 详细信息

为了分析海洋生境刀鲚（Coilia nasus）体内及生长环境菌群结构,作者采用免培养16S rDNA 的PCR-DGGE 指纹图谱技术,对刀鲚鳃、肠道壁、肠道内容物及水体环境中的菌群结构进行了对比分析。结果表明：变性梯度为35%-55%、浓度为8%的聚丙烯酰胺凝胶,150V 60℃下电泳10 h, DGGE带谱的分离效果较好；刀鲚鳃、肠道壁、肠道内容物及水体样品指纹图谱上分别显示出24、19、14和29条信号强度不同的条带；相同样品重复组细菌结构相似度在80%以上,差异不显著；不同样品之间,刀鲚鳃与海水聚为一支,具有较高的相似度为52%,肠壁与肠内容物相似度为41%。样品菌群主要以未培养菌为主,主要包括变形菌、放线菌和厚壁菌。本文首次成功构建海洋生境刀鲚菌群16S rDNA 的PCR-DGGE 指纹图谱。

关键词： PCR-DGGE 菌群刀鲚(Coilia nasus) PCA

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三角帆蚌钙调蛋白(CaM)基因的cDNA序列克隆与表达分析

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安徽农业科学 2014年第22期42卷 7310-7314页

作者：李文娟李倩祁晓翔尚朝周子睿施志仪上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E-研究院上海海洋大学上海201306

[目的]研究三角帆蚌钙调蛋白(CaM)基因在育珠和非育珠蚌各组织中的表达和不同Ca2+浓度下外套膜中的表达变化。[方法]通过RACE技术,以我国重要的淡水珍珠贝——三角帆蚌为研究客体,克隆了CaM的cDNA全长,并通过Real-Time Q-PCR技术分析了... 详细信息

[目的]研究三角帆蚌钙调蛋白(CaM)基因在育珠和非育珠蚌各组织中的表达和不同Ca2+浓度下外套膜中的表达变化。[方法]通过RACE技术,以我国重要的淡水珍珠贝——三角帆蚌为研究客体,克隆了CaM的cDNA全长,并通过Real-Time Q-PCR技术分析了该基因在育珠和非育珠蚌各组织中的表达和不同Ca2+浓度下外套膜中的表达变化。[结果]三角帆蚌CaM基因cDNA全长659bp,包括70 bp的5'UTR,299 bp的3'UTR和447 bp的ORF,编码149个氨基酸,预测其分子量为16.8 kDa,等电点为4.14。cDNA序列比对信息表明三角帆蚌与池蝶蚌、合浦珠母贝间均具有57%的相似度,而其蛋白具有高度的保守性,除斑马鱼外,各生物CaM相似率达97%。定量数据表明,CaM基因广泛表达于三角帆蚌各组织,外套膜内膜与腮中表达量显著升高(P<0.05),其次是外套膜外膜和内脏团组织。插核育珠能增加该基因在各组织的表达,特别是在外套膜外膜和鳃组织中,育珠蚌该基因的表达显著高于非育珠蚌(P<0.05)。此外,水体Ca2+浓度的增大对CaM基因表达有显著的影响,外套膜内膜该基因的表达随Ca2+浓度升高而增加,而外套膜外膜1.25 mmol/L Ca2+浓度下该基因的表达水平显著高于0.50 mmol/L、3.00 mmol/L组(P<0.05)。[结论]为进一步深入研究钙调蛋白基因的在珍珠生长过程中的功能及其调控机理奠定了分子基础。

关键词：三角帆蚌 CaM 序列克隆基因表达

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稀有鮈鲫卵黄蛋白原基因全序列的克隆与分析

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上海海洋大学学报 2013年第5期22卷 678-683页

作者：黄婷妹蔡生力刘红上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

稀有绚鲫（Gobiocyprisrarus）是我国特有的一种小型鲤科鱼类，目前已作为一种新型模式生物应用于实验研究。运用普通PCR方法克隆得到一段长6299bp的序列，序列分析发现编码区与稀有绚鲫卵黄蛋白原cDNA序列相似性为100％。再参考6299bp... 详细信息

稀有绚鲫（Gobiocyprisrarus）是我国特有的一种小型鲤科鱼类，目前已作为一种新型模式生物应用于实验研究。运用普通PCR方法克隆得到一段长6299bp的序列，序列分析发现编码区与稀有绚鲫卵黄蛋白原cDNA序列相似性为100％。再参考6299bp序列5’端设计两对特异性引物，进行基因组步移，获得长度为1285bp的序列。经过序列拼接后得到7573bp的序列，分析发现其中含卵黄蛋白原基因全序列长度为6595bp卵黄蛋白原基因上游调控序列长度为978bp。进一步分析开放性阅读框得知：稀有绚鲫卵黄蛋白原基因含有26个外显子和25个内含子，编码1299个氨基酸序列，CDS长3900bp。经BLAST比对发现，稀有绚鲫卵黄蛋白原上游调控序列中220～838bp区间与朝鲜鲡（Acheilognathuayamatsutae）卵黄蛋白原基因启动子序列2857～3469bp区间有80％相似性。

关键词：卵黄蛋白原稀有鮈鲫基因组步移序列分析

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千岛湖细鳞鲴和黄尾鲴COI种群遗传结构比较的初步研究

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淡水渔业 2013年第5期43卷 3-7页

作者：张峻德赵良杰刘其根上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

利用线粒体COI基因序列,比较了千岛湖水库共栖的细鳞鲴(Xenocypris microlepis)和黄尾鲴(***)的遗传资源状况。结果显示,在532 bp的一致序列中,黄尾鲴碱基T、C、A、G平均含量分别为27.3%、18.0%、28.7%、26.0%;细鳞鲴分别为25.2%、19.6%... 详细信息

利用线粒体COI基因序列,比较了千岛湖水库共栖的细鳞鲴(Xenocypris microlepis)和黄尾鲴(***)的遗传资源状况。结果显示,在532 bp的一致序列中,黄尾鲴碱基T、C、A、G平均含量分别为27.3%、18.0%、28.7%、26.0%;细鳞鲴分别为25.2%、19.6%、29.3%、25.9%。黄尾鲴种群的变异位点为5个,细鳞鲴种群变异位点为3个。多样性分析显示,黄尾鲴的遗传多样性高于细鳞鲴。在两个物种中各发现4个单倍型,黄尾鲴4个单倍型中,有3个是共享单倍型,而细鳞鲴中仅1个共享单倍型,黄尾鲴富文和临岐群体之间存在显著的分化(Fst=0.048 09),细鳞鲴汾口群体和富文(Fst=0.238 10)、临岐群体(Fst=0.260 72)之间存在显著的遗传分化。单倍型的NJ树将四个单倍型分为两个支,推测可能是由于二次迁入或者多样性丧失导致。

关键词： COI 细鳞鲴(Xenocypris microlepis) 黄尾鲴(X davidi) 种群遗传结构

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