检索结果-内蒙古大学图书馆

海洋与湖沼 2024年第2期55卷 431-440页

作者：薛彬李磊蒋丽勤张佳奇戴乾王君浙江省海洋水产研究所、农业农村部重点渔场渔业资源科学观测实验站、浙江省海洋渔业资源可持续利用技术研究重点实验室浙江舟山316021 中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 浙江海洋大学浙江舟山316022

为了阐明枸杞岛近岸海域食物网结构,为岛礁近岸海藻场鱼类群落结构变化提供研究依据,应用碳、氮稳定同位素技术方法,分析评估了舟山枸杞岛近岸海藻场主要鱼类群落的营养结构特征及其季节变化。结果表明,海藻场茂盛期(春、夏季)主要鱼类... 详细信息

为了阐明枸杞岛近岸海域食物网结构,为岛礁近岸海藻场鱼类群落结构变化提供研究依据,应用碳、氮稳定同位素技术方法,分析评估了舟山枸杞岛近岸海藻场主要鱼类群落的营养结构特征及其季节变化。结果表明,海藻场茂盛期(春、夏季)主要鱼类的δ^(13)C值范围为-20.4‰~-12.8‰,均值为-16.1‰,其δ^(15)N值范围为4.1‰~10.4‰,均值为8.4‰;海藻场衰退期(秋、冬季)主要鱼类的δ^(13)C值范围为-17.9‰~-14.4.‰,均值为-16.1‰,δ^(15)N值范围为7.6‰-12.9‰,均值为9.7‰。钩虾和麦秆虫对褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)、大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)和斑头鱼(Agrammus agrammus)等海藻场定居种类的食源贡献率最大,浮游动物对黄姑鱼(Nibea albiflora)和皮氏叫姑鱼(Johnius belengerii)的等非藻场定居种类食源贡献最大;应用SIBER模型计算显示枸杞岛海藻场茂盛期的主要鱼类群落生态位空间、核心生态位空间、基础食物来源、营养多样性的值均大于衰退期。不同时期的鱼类营养结构存在差异,茂盛期位于多边形顶点的种类分别为赤鼻棱鳀、青鳞小沙丁、丝背细鳞鲀和黄姑鱼;而衰退期的种类为赤鼻棱鳀、棘头梅童鱼、黑鲷、斑鳍天竺鲷、红鳍天竺鲷、红鳍东方鲀和大泷六线鱼。研究表明海藻场对主要鱼类的碳源具有显著影响,海藻场茂盛期支撑了更高的生物多样性、食源多样性和群落营养结构。

关键词：枸杞岛海藻场主要鱼类营养结构稳定同位素

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人工养殖中华鲟后备亲鱼摄食和生长的周年变化

人工养殖中华鲟后备亲鱼摄食和生长的周年变化

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2018长江生物资源保护论坛水生野生动物保护分论坛

作者：郑跃平刘健徐嘉楠倪春华范厚勇崔百惠吴建辉陈锦辉庄平上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市长江口中华鲟自然资源保护区管理处上海200092 中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海20 上海市长江口中华鲟自然资源保护区管理处上海200092 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090

实现全人工繁殖,是中华鲟物种保护的重要途径.建立中华鲟人工养殖亲鱼群体,是人工繁殖的基础条件.本研究对自然变温条件下人工培育中华鲟后备亲鱼(15龄,体长183～235cm,体重71.5～180.5kg)的摄食行为和生长的周年变化进行了跟踪观测.结... 详细信息

实现全人工繁殖,是中华鲟物种保护的重要途径.建立中华鲟人工养殖亲鱼群体,是人工繁殖的基础条件.本研究对自然变温条件下人工培育中华鲟后备亲鱼(15龄,体长183～235cm,体重71.5～180.5kg)的摄食行为和生长的周年变化进行了跟踪观测.结果显示,中华鲟后备亲本喜好摄食鲜活饵料,其摄食比例、摄食频次、日饵率具有明显的月际变化特征,3-5月和10月至翌年1月是摄食高峰期,摄食比例和摄食频次的月际变化与水温的月际变化存在显著相关关系;在实验期内,中华鲟后备亲本的体重和体周长等生长指标呈现先降后升的变化趋势,至实验结束,其体长和体重增长率分别为1.16％和-3.23％,总体表现为生长停滞.

关键词：中华鲟后备亲鱼摄食行为生长

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整合子相关元件多重PCR检测技术建立及其在弧菌中应用

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上海海洋大学学报 2016年第6期25卷 814-821页

作者：刘旭马立才赵姝李健王元房文红中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

为了建立一种能同时检测1类整合子、4类超级整合子和1型插入序列共同区的多重PCR检测方法,根据Gen Bank中1类整合子整合酶基因int1、4类超级整合子整合酶基因intSXT和1型插入序列共同区转座酶基因ISCR1的序列,应用Primer Plex 2.61设计... 详细信息

为了建立一种能同时检测1类整合子、4类超级整合子和1型插入序列共同区的多重PCR检测方法,根据Gen Bank中1类整合子整合酶基因int1、4类超级整合子整合酶基因intSXT和1型插入序列共同区转座酶基因ISCR1的序列,应用Primer Plex 2.61设计3对特异性引物,通过改变引物浓度和退火温度对多重PCR体系进行了优化。此后,评价了所建立多重PCR体系的特异性和灵敏度,并应用于222株海水养殖源弧菌中3种整合子相关元件的检测。结果显示,设计的3对引物能分别单独且特异性地扩增出569 bp、430 bp和651 bp的目的条带;当int1、intSXT和ISCR13对引物(10 pmol/μL)的体积依次为0.3μL、0.6μL和0.6μL,退火温度为50℃时,多重PCR体系能特异性地扩增出3个条带清晰、区分度良好的目的条带,方法的灵敏度达到0.02 ng/μL弧菌基因组模板DNA;利用所建立的方法对222株临床分离弧菌进行3种整合子元件检测得到的结果与文献报道的单引物检测结果一致。从上述研究结果可以看出,该多重PCR方法能快速准确地检测Int1、SXT和ISCR1,适用于整合子相关元件流行监测及整合子相关的耐药性研究。

关键词：多重PCR 整合子 SXT ISCR1 弧菌

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亚硝基氮胁迫下WSSV对凡纳滨对虾致病性研究

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东北农业大学学报 2016年第9期47卷 39-45页

作者：方金龙王元李新苍周俊芳陈甜甜房文红中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

为评价养殖水环境中亚硝基氮(NO_2^--N)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)危害性,开展NO_2^--N胁迫对凡纳滨对虾感染白斑综合征病毒(WSSV)后的死亡率、WSSV在患病对虾体内增殖速率和对虾主要免疫相关酶活性影响研究。试验设置NO_2^--... 详细信息

为评价养殖水环境中亚硝基氮(NO_2^--N)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)危害性,开展NO_2^--N胁迫对凡纳滨对虾感染白斑综合征病毒(WSSV)后的死亡率、WSSV在患病对虾体内增殖速率和对虾主要免疫相关酶活性影响研究。试验设置NO_2^--N胁迫浓度为6.68 mg·L^(-1),分别注射10^(-4)和10^(-5)稀释度的WSSV提取液,结果显示,胁迫下感染10-4WSSV的凡纳滨对虾144 h死亡率达90.00%,显著高于无胁迫组(60.00%),相同试验条件下高浓度病毒感染组死亡率高于低浓度组。对虾鳃组织WSSV荧光定量PCR检测结果显示,NO_2^--N胁迫下凡纳滨对虾鳃组织内WSSV增殖加快,感染48 h后10-4攻毒浓度胁迫组病毒量是无胁迫组1.33倍,72 h时病毒量达到无胁迫组2.00倍。此外,免疫相关酶活性结果显示,NO_2^--N浓度突变导致对虾血清中酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性先升后降。由此可见,NO_2^--N胁迫会加快WSSV在患病凡纳滨对虾体内增殖,导致高死亡率,这可能是胁迫造成对虾免疫相关酶活性降低和抗病原感染能力下降所致。

关键词：凡纳滨对虾 WSSV 胁迫亚硝基氮致病性

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海水养殖源酰胺醇耐药弧菌耐药分子机制初步研究

海水养殖源酰胺醇耐药弧菌耐药分子机制初步研究

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2016年中国水产学会学术年会

作者：李健马立才刘旭王元赵姝房文红中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海海洋大学水产与生命学院

【目的】旨在了解我国海水养殖源弧菌酰胺醇类药物耐药表型和分子机理。【方法】从前期分离的300株海水养殖源弧菌中挑选出42株对氟苯尼考低敏感的菌株,再次纯化和鉴定;测定了这些菌株对酰胺醇类药物(氯霉素和氟苯尼考)的敏感性;利用PC... 详细信息

【目的】旨在了解我国海水养殖源弧菌酰胺醇类药物耐药表型和分子机理。【方法】从前期分离的300株海水养殖源弧菌中挑选出42株对氟苯尼考低敏感的菌株,再次纯化和鉴定;测定了这些菌株对酰胺醇类药物(氯霉素和氟苯尼考)的敏感性;利用PCR扩增测序的方法检测了这些菌株的常见酰胺醇耐药基因的携带情况,包括:氯霉素素乙酰转移酶基因(cat1、cat2和cat3),外排泵基因(floR、cmlA、pexA、fexA、fexB和optrA),23S rRNA甲基化酶基因(cfr)。实验研究4种药物(甲基吡咯烷酮(N-methyl-2-pyrrolidone,NMP),利血平(Reserpine),羰基氰氯苯腙(Carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone,CCCP),Phe-Arg-β-naphthylamide(PAβN))外排泵抑制剂对氯霉素,氟苯尼考抗弧菌的最小抑菌浓度的影响。【结果】这42株氟苯尼考低敏感弧菌的种类包括:副溶血弧菌(14株)、溶藻弧菌(18株)、哈维氏弧菌(8株)、创伤弧菌(2株);氯霉素耐药菌株34株,氟苯尼考耐药菌株38株。高耐药菌株检测出氟苯尼考耐药基因floR和cmlA,氯霉素耐药基因cat2和cat3。42株弧菌中,分别有33.33%(14/42),38.10%(16/42),59.22%(25/42),26.19%(11/42)的弧菌被依次被四种外派泵抑制剂降低了对氯霉素的MIC值;42株弧菌中,分别有23.81%(10/42),21.42%(9/42),47.62%(20/42),23.81%(10/42)的弧菌依次被四种外派泵抑制剂降低了对氟苯尼考的MIC值,其中,羰基氰氯苯腙的影响程度高于其他外排泵抑制剂。【结论】耐药基因的检出率与耐药表型基本呈正相关,4种外排泵抑制剂对氯霉素和氟苯尼考抗弧菌存在不同程度的影响。

关键词：弧菌酰胺醇类药物表型耐药基因外排泵

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梭子蟹肌孢虫实时定量PCR检测方法的建立与应用

梭子蟹肌孢虫实时定量PCR检测方法的建立与应用

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2016年中国水产学会学术年会

作者：陈甜甜房文红王元周俊芳中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海海洋大学水产与生命学院

梭子蟹肌孢虫(Ameson sp.)是感染三疣梭子蟹的常见病原,为了及早确定其在梭子蟹体内的感染程度,本实验通过一对自设引物建立了梭子蟹肌孢虫的SYBR Green I实时荧光定量PCR (qPCR)检测方法.结果显示,该方法在引物终浓度为0.2μmol/L、... 详细信息

梭子蟹肌孢虫(Ameson sp.)是感染三疣梭子蟹的常见病原,为了及早确定其在梭子蟹体内的感染程度,本实验通过一对自设引物建立了梭子蟹肌孢虫的SYBR Green I实时荧光定量PCR (qPCR)检测方法.结果显示,该方法在引物终浓度为0.2μmol/L、退火温度60℃时扩增效果最好,扩增熔解曲线只获得了一个单峰.该方法的扩增产物阈值循环数(Ct)与模板起始量对数的关系为Ct=-3.26X+ 35.57(X为质粒拷贝数的对数),相关系数为0.999,扩增效率为101.45％,介于最优值范围(95-105％);检测灵敏度下限可达2.0× 101 copies/μL,组内和组间重复性好.利用该荧光定量PCR方法与实验室先前建立的套式PCR方法分别对养殖三疣梭子蟹样品进行检测,结果显示,套式PCR方法的检测率为64.7％,而荧光定量PCR方法的检测率为82.3％,表明本研究建立的荧光定量PCR方法具有更高的灵敏度,该方法可为梭子蟹“牙膏病”的早期诊断与防控提供良好的技术支撑.

关键词：三疣梭子蟹梭子蟹肌孢虫 SYBR Green Ⅰ 实时定量PCR

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网箱养殖条件下大黄鱼的听觉特性研究

网箱养殖条件下大黄鱼的听觉特性研究

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2016年中国水产学会学术年会

作者：殷雷明黄洪亮陈雪忠上海海洋大学海洋科学学院农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室东海水产研究所中国水产科学研究院

利用听觉脑干反应(Auditory brainstem response,ABR)技术,使用美国TDT脑神经信号采集分析系统,通过插入皮下的电极记录了10尾网箱养殖大黄鱼在不同短纯音刺激条件下产生的听觉脑干诱导电位,分析养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)的听... 详细信息

利用听觉脑干反应(Auditory brainstem response,ABR)技术,使用美国TDT脑神经信号采集分析系统,通过插入皮下的电极记录了10尾网箱养殖大黄鱼在不同短纯音刺激条件下产生的听觉脑干诱导电位,分析养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)的听觉特性。同时,对大黄鱼网箱周围水下噪声进行平均声压级(SPL,dB re 1 Pa)计算和频谱分析。结果显示:(1)大黄鱼在100～1000Hz范围内的听觉阈值约为93～99 dB。随着刺激声强的减小,大黄鱼的听觉脑干反应波形相似,振幅减小,潜伏期延长;(2)网箱周围水下噪声SPL约为105dB,船舶、海上风成和波浪噪声是环境噪声的主要来源,船舶噪声SPL约为102 dB,略高于大黄鱼的听觉阈值,但不影响其正常声通讯交流和摄食行为。研究大黄鱼的听觉特性,有助我们了解大黄鱼在不同声场条件下的行为反应和健康状况,且为海上环境噪声评估提供参考依据。

关键词：大黄鱼听性脑干反应听觉阈值网箱养殖水下噪声

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一株致病性溶藻弧菌的多重耐药与毒力基因分子分析

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海洋渔业 2015年第6期37卷 557-564页

作者：胡梦华马立才赵姝刘旭周俊芳房文红中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

从发病的凡纳滨对虾中分离并经鉴定得到一株溶藻弧菌(命名为:V_A-76),通过对虾回感实验和药物敏感性实验分别对V_A-76菌株的耐药表型和致病能力进行了研究,并运用PCR方法检测了该菌的毒力相关基因、整合子和耐药基因的携带情况。对虾感... 详细信息

从发病的凡纳滨对虾中分离并经鉴定得到一株溶藻弧菌(命名为:V_A-76),通过对虾回感实验和药物敏感性实验分别对V_A-76菌株的耐药表型和致病能力进行了研究,并运用PCR方法检测了该菌的毒力相关基因、整合子和耐药基因的携带情况。对虾感染实验结果表明,溶藻弧菌V_A-76能够导致凡纳滨对虾发病死亡。经PCR检测发现,该菌携带8种毒力相关基因:tdh、tlh、tox S、collagenase、fla A、omp W、asp A和fur。药敏结果显示,V_A-76对环丙沙星、氯霉素、链霉素、红霉素、磺胺甲噁唑、复方新诺明和利福平7种药物表现出较高的耐药水平,且该菌包含1类整合子、4类超级整合子SXT和1型插入序列共同区(ISCR1)。此外,该菌携带arr-2、dfr A27、str A、str B、floR、cat和qnrv C耐药相关基因。从上述研究结果可知,菌株V_A-76既具有一定的感染能力,同时对多种抗菌药物表现出较高的耐药水平,提示应对养殖源致病性弧菌的耐药性现状予以更多的关注。

关键词：溶藻弧菌多重耐药整合子 ISCR 毒力基因

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湖鲚体内与生长环境菌群PCR-DGGE指纹图谱及多样性分析

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淡水渔业 2015年第1期45卷 8-14页

作者：聂志娟徐钢春程起群杜富宽张勇顾若波朱文龙中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室南京农业大学渔业学院江阴市周庄镇农服中心

利用PCR-DGGE技术,选择细菌原核通用引物F357-GC和R518对太湖湖鲚(Coilia ectenes taihuensis)鳃、肠壁及肠内容物及其生长环境菌群结构进行了初步分析。结果显示:PCR-DGGE指纹图谱分离显示49条清晰条带,样品菌群丰富度(DGGE条带数):湖... 详细信息

利用PCR-DGGE技术,选择细菌原核通用引物F357-GC和R518对太湖湖鲚(Coilia ectenes taihuensis)鳃、肠壁及肠内容物及其生长环境菌群结构进行了初步分析。结果显示:PCR-DGGE指纹图谱分离显示49条清晰条带,样品菌群丰富度(DGGE条带数):湖水(33)>肠道壁(23)>湖泥(18)>肠道内容物(16)=鳃(16);相应的香农多样性指数分别为:3.11、2.76、2.21、2.37、2.30。湖鲚肠道壁、肠道内容物和鳃与湖水分别具有14、14、10条共有带,切胶回收测定其中21条优势条带,主要包含:变形菌(Proteobacteria)、放线菌(Actinobacteria)、拟杆菌(Bacteroidetes)、柔膜菌(Tenericutes)、蓝藻细菌(Cyanobacteria)、厚壁菌(Firmicutes)。结果表明PCR-DGGE指纹图谱能够清晰显示湖鲚不同部位及其生长环境细菌群落结构和区分其菌群结构差异,并阐明生长水域环境是影响湖鲚体内细菌菌群结构组成的主要因素之一。

关键词：湖鲚(Coilia ectenes taihuensis) PCR-DGGE 细菌群落香农多样性指数

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红螯螯虾酚氧化酶原及其特性研究(英文)

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水生生物学报 2015年第1期39卷 117-125页

作者：顾伟陈静黄艳青靳明建孟庆国王文南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室江苏省水生甲壳动物病害重点实验室南京210023 中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 江苏省如东县渔业技术推广站南通226400

采用同源克隆策略和RACE技术,从红螯螯虾Cherax quadricarinatus血细胞中克隆得到酚氧化酶原基因的全长c DNA序列,共2951 bp,开放读码框为1995 bp,编码665个氨基酸。预测的分子量和等电点分别为75.7 k D和6.23。酚氧化酶原含有两个推测... 详细信息

采用同源克隆策略和RACE技术,从红螯螯虾Cherax quadricarinatus血细胞中克隆得到酚氧化酶原基因的全长c DNA序列,共2951 bp,开放读码框为1995 bp,编码665个氨基酸。预测的分子量和等电点分别为75.7 k D和6.23。酚氧化酶原含有两个推测的tyrosinase copper-binding motifs(带有六个组氨酸残基)和一个thiol-ester-like motif,这些特征和其他甲壳动物的酚氧化酶原特征相同。红螯螯虾酚氧化酶原氨基酸序列与通讯螯虾Pacifastacus leniusculus、欧洲龙虾Homarus gammarus、美洲龙虾Homarus americanus和克氏原螯虾Procambarus clarkii酚氧化酶原的相似率分别为68%、63%、63%和59%。酚氧化酶原基因双酶切后连接入p ET-28a原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21后重组表达酚氧化酶原蛋白。在重组蛋白纯化后,免疫新西兰大耳兔制备得到的酚氧化酶原多克隆抗体,其效价大于1︰12800。红螯螯虾血淋巴、肝和鳃组织中的酚氧化酶原m RNA表达和酚氧化酶活性较高,而神经、心、肠和肌肉中较低。中华绒螯蟹螺原体和嗜水气单胞菌免疫红螯螯虾后,血淋巴细胞、肝和鳃组织中的酚氧化酶原和酚氧化酶活性在免疫后的不同时间均出现了显著性的增加,此结果表明酚氧化酶原和酚氧化酶在红螯螯虾对抗细菌感染的过程中起到重要的免疫作用。此结果为进一步深入研究酚氧化酶原基因和酚氧化酶的功能及其调控机理奠定基础。

关键词：酚氧化酶原中华绒螯蟹螺原体嗜水气单胞菌红螯螯虾

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