检索结果-内蒙古大学图书馆

中国水产科学 2007年第6期14卷 889-895页

作者：刘丽燕杨爱国王清印周丽青刘志鸿农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

从提取时间和TritonX-100浓度两个方面对长牡蛎(Crassosstrea gigas)精子膜蛋白提取条件进行优化,确定最佳提取条件:将精液150 g离心去除精原细胞,经PBS缓冲液和Tris-HCl缓冲液清洗后,3 000 g离心10 min(4 ℃)得精子悬液;然后加入3倍体... 详细信息

从提取时间和TritonX-100浓度两个方面对长牡蛎(Crassosstrea gigas)精子膜蛋白提取条件进行优化,确定最佳提取条件:将精液150 g离心去除精原细胞,经PBS缓冲液和Tris-HCl缓冲液清洗后,3 000 g离心10 min(4 ℃)得精子悬液;然后加入3倍体积含1% TritonX-100的膜蛋白提取液,冰浴振摇1 h;50 000 g离心15 min(4 ℃),收集上清液即为精子膜蛋白溶液.SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝R-250染色检测到21种膜蛋白,分子量在26～156 kD之间,PAS染色检测到糖蛋白有14种,苏丹黑B染色检测到脂蛋白有17种,其中有13种膜蛋白既是糖蛋白又是脂蛋白.实验结果还发现1种分子量为38 kD的r16膜蛋白既为糖蛋白又为脂蛋白,且高碘酸-Shiff试剂和苏丹黑B染色最深,条带最清晰,蛋白丰度最高,与此相对的分子量为55 kD的r12膜蛋白,考马斯亮蓝R-250染色也较深,条带清晰,但其糖蛋白和脂蛋白染色相对r16膜蛋白较浅,说明r16和r12两种膜蛋白其蛋白丰度相差不大,其糖基化程度及脂化程度可能相差较大,此两种膜蛋白有待于进一步分离纯化.此研究结果可为长牡蛎精子膜蛋白在精子发生和受精过程中作用的研究提供基础资料.

关键词：长牡蛎精子膜蛋白糖蛋白脂蛋白

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孔雀石绿的代谢机理及生物毒性研究进展

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2007年第1期37卷 27-32页

作者：翟毓秀郭莹莹耿霞张翠宁劲松农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

孔雀石绿(Malachite green,MG)是1种三苯甲烷类工业染料,曾广泛用于治疗水产动物的水霉病、烂鳃病、寄生虫病等,但由于具有高毒、高残留、“三致”等毒性性质,许多国家禁止其在经济鱼类(观赏鱼除外)的养殖过程中使用,成为药物残留监控... 详细信息

孔雀石绿(Malachite green,MG)是1种三苯甲烷类工业染料,曾广泛用于治疗水产动物的水霉病、烂鳃病、寄生虫病等,但由于具有高毒、高残留、“三致”等毒性性质,许多国家禁止其在经济鱼类(观赏鱼除外)的养殖过程中使用,成为药物残留监控的主要内容之一。本文对孔雀石绿的化学性质、代谢规律及机理、生物毒性等研究现状进行了综述,旨在为药残的监控工作提供理论依据。

关键词：孔雀石绿无色孔雀石绿代谢生物毒性

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牙鲆肌肉生长抑制素(MSTN)基因克隆

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水产学报 2008年第4期32卷 497-506页

作者：徐建勇陈松林中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

采用同源克隆及基因组步移的方法,分离克隆了牙鲆肌肉生长抑制素(MSTN)基因。经过序列分析及cDNA验证,牙鲆MSTN基因具有3个外显子和2个内含子,编码377个氨基酸。5′侧翼区含有8个TATA框,一个CAAT框,6个E框;3′侧翼区含有加尾信号。通过... 详细信息

采用同源克隆及基因组步移的方法,分离克隆了牙鲆肌肉生长抑制素(MSTN)基因。经过序列分析及cDNA验证,牙鲆MSTN基因具有3个外显子和2个内含子,编码377个氨基酸。5′侧翼区含有8个TATA框,一个CAAT框,6个E框;3′侧翼区含有加尾信号。通过同源分析,牙鲆MSTNC末端含有9个保守半胱氨酸残基和一个RVRR蛋白酶酶切位点;通过进化树分析,牙鲆MSTN与鱼类MSTN基因聚为一支。RT-PCR分析表明,牙鲆MSTN在胚胎发育中不表达或表达量较低,说明MSTN在牙鲆胚胎发育中并不起重要作用;其在各组织中的表达,随个体和环境的不同而有差异,暗示MSTN的表达受外界因素调控。

关键词：牙鲆肌肉生长抑制素克隆

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7种海洋鱼类的生物能量学模式

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水产学报 2003年第5期27卷 443-449页

作者：唐启升孙耀张波中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室山东青岛　266071

根据室内流水实验法,定量研究了黄、渤海生态系统7种鱼类能量收支组分,并建立了相应的生物能量学模式。7种海洋鱼类的生物能量学模式显著不同,并可分为3类:(1)较低代谢和较高生长,如黑、矛尾虎鱼;(2)较高代谢和较低生长,如欧氏六线... 详细信息

根据室内流水实验法,定量研究了黄、渤海生态系统7种鱼类能量收支组分,并建立了相应的生物能量学模式。7种海洋鱼类的生物能量学模式显著不同,并可分为3类:(1)较低代谢和较高生长,如黑、矛尾虎鱼;(2)较高代谢和较低生长,如欧氏六线鱼和黑鲷;(3)代谢和生长均处于中等水平,如真鲷、红鳍东方和鲐。其差异原因可能与这7种海洋鱼类的生态习性不同相关。与淡水肉食性鱼类比较,7种海洋鱼类的代谢能明显偏高,表明海洋鱼类属于高代谢消耗、低生长效率型鱼类。

关键词：能量收支生物能量学模式海洋鱼类

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AFLP分子标记构建中国对虾遗传连锁图谱的初步研究

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高技术通讯 2004年第5期14卷 88-93页

作者：岳志芹王伟继孔杰戴继勋王清印中国水产科学院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室，青岛266071 中国海洋大学海洋生命学院，青岛266003

利用AFLP分子标记结合“拟测交”策略，以中国对虾的单对杂交亲本及其F1代为作图群体，应用MAPMAKER EXP／3．0软件，分别构建了中国对虾雌、雄的遗传连锁图谱。在中国对虾的雄性连锁图谱中，74个标记组成了5个连锁群(遗传标记数量大于3... 详细信息

利用AFLP分子标记结合“拟测交”策略，以中国对虾的单对杂交亲本及其F1代为作图群体，应用MAPMAKER EXP／3．0软件，分别构建了中国对虾雌、雄的遗传连锁图谱。在中国对虾的雄性连锁图谱中，74个标记组成了5个连锁群(遗传标记数量大于3)、7个三联体、13个连锁对，总图距为951．5eM，最大连锁群的长度为206．2eM，最短的为7．4eM，标记间的平均距离为12．8eM；雌性连锁图谱中，由66个标记组成的5个连锁群，4个三联体，13个连锁对，总图距为712．7eM，连锁群的长度介于7．7eM～128．2eM之间，标记间的平均距离为10．7eM。估算的中国对虾基因组总长度为2000eM，所构建的连锁图谱分别覆盖了基因组长度的47．5％和35．6％。中国对虾遗传连锁图谱的构建为分子标记辅助育种、比较基因组作图以及基因定位与克隆创造了条件，并对今后其他海洋生物遗传图谱的构建具有理论价值和实践意义。

关键词： AFLP 分子标记中国对虾遗传连锁图谱拟测交策略水产养殖

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养殖刺参腐皮综合征两种致病菌Dot-ELISA快速检测

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海洋科学 2007年第8期31卷 59-64页

作者：谢建军王印庚张正荣小军农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

以养殖刺参(Apostichopus japonicus)腐皮综合征两种主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为抗原,分别制备兔抗血清,建立了两种病原菌的点酶ELISA(Dot-ELISA)检测方法。根据方正试验,确定检测用一抗、二抗最佳工作稀释度:灿烂弧菌抗血清稀释度320,酶标二抗稀释度3 000;假交替单胞菌抗血清稀释度160,酶标二抗稀释度2 000。阻断试验结果表明两种抗血清特异性均较高。灿烂弧菌抗血清在稀释度为40时与溶藻胶弧菌、河流弧菌、创伤弧菌等弧菌发生微弱交叉反应,提高稀释度到160时,不发生交叉反应。假交替单胞菌抗血清基本不与常见海水致病弧菌发生交叉反应。人工感染试验检测结果表明该方法能从患病海参溃烂组织、未发病海参组织和感染水体检测到相应致病菌,检测灵敏度为9.4×103个/mL。人工感染试验检测结果经直接凝集反应验证。该方法操作简便、灵敏度高,不需复杂仪器设备,适合在基层推广。

关键词：刺参(Apostichopus japonicus) 腐皮综合征灿烂弧菌(Vibrio splendidus) 假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrzfaciens) Dot- ELISA 快速检测

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异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育后代的微卫星分析

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水产学报 2009年第4期33卷 542-548页

作者：吴彪杨爱国王清印刘志鸿周丽青中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

采用紫外线遗传灭活的长牡蛎精子激活栉孔扇贝卵子,6-DMAP诱导染色体加倍的方法,获得第二极体抑制型雌核发育二倍体早期胚胎。通过优化PCR反应条件,在11对栉孔扇贝和10对长牡蛎微卫星引物中共筛选出3对引物,可以同时在长牡蛎和栉孔扇贝... 详细信息

采用紫外线遗传灭活的长牡蛎精子激活栉孔扇贝卵子,6-DMAP诱导染色体加倍的方法,获得第二极体抑制型雌核发育二倍体早期胚胎。通过优化PCR反应条件,在11对栉孔扇贝和10对长牡蛎微卫星引物中共筛选出3对引物,可以同时在长牡蛎和栉孔扇贝基因组中获得稳定性,多态性较好的特异性扩增条带,其中2对引物为栉孔扇贝引物。利用筛选出的3对通用微卫星引物对雌核发育后代进行检验及遗传分析。结果表明,雌核发育个体基因完全来自于母本,后代中没有父本基因的表达;部分雌核发育后代在3个座位上发生了纯合,部分个体发生了不同程度的基因重组,3个座位上的重组率分别为40%、55%和35%。研究结果从分子水平上证实,利用遗传失活的长牡蛎精子诱导栉孔扇贝雌核发育是可行的,只进行一次第二极体抑制型雌核发育二倍体的诱导只能获得部分后代个体的基因纯合,但后代与母本具有较高的遗传同质性。

关键词：栉孔扇贝异源精子雌核发育微卫星

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栉孔扇贝和虾夷扇贝杂交子代的细胞遗传学研究

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高技术通讯 2006年第8期16卷 853-858页

作者：吕振明杨爱国王清印刘志鸿周丽青中国海洋大学生命科学与技术学部青岛266003 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071

采用基因组荧光原位杂交（GISH）技术，结合改进的染色体滴片和压片法，对栉孔扇贝和虾夷扇贝远缘杂交正、反交子代4—8细胞胚胎及担轮幼虫的染色体构成及其变异进行了研究。结果表明，在染色体数目上，绝大部分正、反交子代早期胚胎的... 详细信息

采用基因组荧光原位杂交（GISH）技术，结合改进的染色体滴片和压片法，对栉孔扇贝和虾夷扇贝远缘杂交正、反交子代4—8细胞胚胎及担轮幼虫的染色体构成及其变异进行了研究。结果表明，在染色体数目上，绝大部分正、反交子代早期胚胎的染色体数目为38条，与其双亲一致；在染色体构成上，绝大部分正、反交子代分别继承了栉孔扇贝和虾夷扇贝各一套染色体，为真正的杂交种，核型也为双亲染色体核型的综合：2n=6m＋29（sm,st）＋3t；正、反交子代之间在染色体构成上无明显差别，结果说明两种扇贝的属间杂交正反方向均能产生正常的杂交种胚胎，合子中两套染色体具有较强的亲合性。此外，杂交子代在胚胎发育早期还存在较小比例的染色体数目异常、不对称染色体继承等遗传学现象。在群体杂交所产生的正反交子代中还存在极小比例的疑为雌核发育的母本类型个体，但在单对杂交产生的正反交子代中均未见雌核发育的个体。本文就这些异常现象产生的可能原因进行了探讨。

关键词：扇贝杂交染色体基因组荧光原位杂交

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牙鲆选择性养殖群体遗传结构的微卫星分析

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高技术通讯 2006年第1期16卷 94-99页

作者：刘云国陈松林李八方汪东风中国海洋大学生命科学与技术学部青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071

应用10对徽卫星引物对三个牙鲆群体各30个个体进行了群体遗传多样性分析。普通群体的平均等位基因数为7．6，显著高于感病群体的5．80，略高于抗病群体的7．2。普通群体的10个位点的平均基因型数为11．4，而感病群体和抗病群体分别只有8... 详细信息

应用10对徽卫星引物对三个牙鲆群体各30个个体进行了群体遗传多样性分析。普通群体的平均等位基因数为7．6，显著高于感病群体的5．80，略高于抗病群体的7．2。普通群体的10个位点的平均基因型数为11．4，而感病群体和抗病群体分别只有8．3和9．0。普通群体的平均有效等位基因数为3．97，略高于感病群体和抗病群体的3．78和3．72。普通群体10个位点最高频率等位基因的平均频率值为0．388，而感病群体和抗病群体分别为0．407和0．425。普通群体低频等位基因（0-0．05）总共有27个，而感病群体和抗病群体分别只有15个和19个。普通群体共得到14个私有等位基因，感病群体和抗病群体仅各得到3个等位基因。研究结果表明了感病群体和抗病群体两个选择性养殖群体遗传多样性的降低。

关键词：牙鲆选择性养殖群体遗传结构微卫星标记

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黏红酵母表面黏附蛋白及肠黏液受体的初步研究

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水产学报 2008年第6期32卷 939-944页

作者：李正李健刘淇王群上海海洋大学水产与生命学院中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室

为获得对大菱鲆肠道具有较强黏附能力的益生菌株,了解其黏附机制,采用体外黏液黏附模型及Western-blot技术,对黏红酵母等4株益生菌的大菱鲆肠黏液黏附性能及黏红酵母表面粘附蛋白和肠黏液受体进行了初步研究。结果表明,4株益生菌均可黏... 详细信息

为获得对大菱鲆肠道具有较强黏附能力的益生菌株,了解其黏附机制,采用体外黏液黏附模型及Western-blot技术,对黏红酵母等4株益生菌的大菱鲆肠黏液黏附性能及黏红酵母表面粘附蛋白和肠黏液受体进行了初步研究。结果表明,4株益生菌均可黏附于大菱鲆肠黏液;但各菌株的黏附能力存在较大差异,其中黏红酵母黏附能力最强,鼠李糖乳杆菌次之,假丝酵母和枯草芽孢杆菌相对较低。黏红酵母表面蛋白预先与肠黏液孵育2h后,显著抑制了黏红酵母与肠黏液的结合,其黏附百分率下降了83.6%;但上述处理对其他3株益生菌的黏附没有明显影响。Western-blot显示黏红酵母表面蛋白中分子量为38.5ku和28.6ku的两个蛋白参与对肠黏液的黏附过程,大菱鲆肠黏液中分子量为27.3ku和22.3ku两个蛋白可与黏红酵母表面蛋白特异性结合。糖原染色显示上述4个蛋白均为糖蛋白。

关键词：黏红酵母黏附蛋白黏液受体大菱鲆

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