检索结果-内蒙古大学图书馆

高技术通讯 2006年第4期16卷 435-440页

作者：李朝霞李健何玉英刘萍王清印中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071

利用7对AFLP引物组合检测了中国对虾连续五代选育群体基因组DNA的遗传结构，根据AFLP分析结果计算了选育世代群体间的遗传相似系数和遗传距离。结果表明，AFLP标记表现出较高的多态检测效率,7对引物共产生500余条带,平均每对引物组合检... 详细信息

利用7对AFLP引物组合检测了中国对虾连续五代选育群体基因组DNA的遗传结构，根据AFLP分析结果计算了选育世代群体间的遗传相似系数和遗传距离。结果表明，AFLP标记表现出较高的多态检测效率,7对引物共产生500余条带,平均每对引物组合检测到33.7个多态性标记,平均杂合度为0.0854～0.1025,非常适合于遗传多样性分析。结果显示，随着选育世代的增加，选育群体的遗传多样性呈现下降趋势，但随着选育时间的延长，群体之间的分化逐渐降低，群体的遗传结构开始趋于稳定，成为一个品系。

关键词：中国对虾 AFLP分析遗传结构

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表达绿色荧光蛋白基因的花鲈胚胎干细胞株的建立及其体外分化

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高技术通讯 2006年第1期16卷 61-66页

作者：叶寒青陈松林刘洋沙珍霞中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所、农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071

以带有绿色荧光标记的基因（pCMV-EGFP）为报告基因，用Genejammer、Genejuice和Metafeetene三种脂质体介导花鲈胚胎干细胞（IJES1）的基因转移。实验发现，Genejammer介导的细胞转化效率最高，高达27．3％，其余分别为12．1％和5．3％... 详细信息

以带有绿色荧光标记的基因（pCMV-EGFP）为报告基因，用Genejammer、Genejuice和Metafeetene三种脂质体介导花鲈胚胎干细胞（IJES1）的基因转移。实验发现，Genejammer介导的细胞转化效率最高，高达27．3％，其余分别为12．1％和5．3％。转移绿色荧光蛋白（GFP）基因的IJES1细胞经过药物筛选和单克隆化培养，获得了表达GFP基因的阳性克隆细胞株，经PCR对GFP阳性细胞株的基因组DNA及提取的RNA扩增，获得了目的祭带，证实了GFP基因已经整合到LIES1细胞的基因组中，并获得了正常的表达。通过体外诱导，GFP阳性细胞能够分化为神经细胞、肌肉细胞、成纤维细胞等，用悬滴法培养获得了GFP阳性细胞的拟胚体，证实了经过长期的药物筛选后，LJES1细胞仍然保持着发育的多能性。这一研究，为进一步利用海水鱼类胚胎干细胞进行遗传操作及基因工程的研究提供了方法上的探索。

关键词：脂质体绿色荧光蛋白胚胎干细胞转化体外分化

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真鲷肌肉生长抑素（MSTN）基因的克隆及表达分析

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高技术通讯 2006年第7期16卷 718-724页

作者：叶寒青陈松林中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所、农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071

采用同源克隆的策略,设计了3对引物,首次分离、克隆了2820bp的真鲷肌肉生长抑素（MSTN）基因组序列,该序列在GenBank上注册（注册登录号为AY965686）.经过剪接、比较,分析了真鲷MSTN基因的序列和结构特征.真鲷的MSTN基因具有3个外显子、... 详细信息

采用同源克隆的策略,设计了3对引物,首次分离、克隆了2820bp的真鲷肌肉生长抑素（MSTN）基因组序列,该序列在GenBank上注册（注册登录号为AY965686）.经过剪接、比较,分析了真鲷MSTN基因的序列和结构特征.真鲷的MSTN基因具有3个外显子、2个内含子,整个开放阅读框编码着384个氨基酸,第1个外显子上有一个连续11个Q氨基酸的残基,C-末端具有9个保守的半胱氨基酸及一个RVRR的蛋白酶解加工位点.在第1、第2内含子和3＇非翻译区上分别具有一个微卫星重复序列.RT-PCR分析表明,MSTN基因在真鲷不同组织中都有表达,但表达量具有明显的差异;MSTN在肌肉中表达量最高,其次是脑、小肠、头肾、鳃和性腺,心脏、眼睛、肝脏中只有极少量表达,脾脏中没有检测到MSTN的表达.

关键词：真鲷 Chrysophrys major 肌肉生长抑素基因 cDNA 表达分析

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花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建

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高技术通讯 2006年第2期16卷 186-190页

作者：沙珍霞刘洋陈松林叶寒清田永胜孟亮唐启升中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071

旨在通过花鲈胚胎干细胞（LJESl）移植构建嵌合体，证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性。采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内，细胞绿色荧光蛋白（GFP）的表达率为5％～10％，以此为供体，通过显... 详细信息

旨在通过花鲈胚胎干细胞（LJESl）移植构建嵌合体，证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性。采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内，细胞绿色荧光蛋白（GFP）的表达率为5％～10％，以此为供体，通过显微注射方法把20—50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中，共移植囊胚478枚，获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎，其中的15枚胚胎发育成鱼苗。荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合，嵌合部位可分布于胚体的三个胚层；同时也证明GFP是一种优良的遗传标记。本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据。

关键词：花鲈胚胎干细胞(LJES1) 绿色荧光蛋白(GFP) 细胞移植显微注射嵌合体

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丝足鱼(Trichogaster trichopterus)耐盐性及盐度驯化

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中国水产科学 2006年第5期13卷 775-780页

作者：窦海鸽黄倢王秀华范文辉刘莉农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

以斑马鱼(Danio rerio)和剑尾鱼(Xiphophorus helleri)作比较,对丝足鱼(Trichogaster trichopterus)耐盐性进行研究,测定丝足鱼的96 h半致死盐度(LS50-96 h)、平均存活时间(MST)、50%存活时间(MT50)、开始死亡时间和死亡率等耐盐指标,... 详细信息

以斑马鱼(Danio rerio)和剑尾鱼(Xiphophorus helleri)作比较,对丝足鱼(Trichogaster trichopterus)耐盐性进行研究,测定丝足鱼的96 h半致死盐度(LS50-96 h)、平均存活时间(MST)、50%存活时间(MT50)、开始死亡时间和死亡率等耐盐指标,并逐级提高养殖水体盐度对丝足鱼进行耐盐驯化实验,测定丝足鱼在盐度为14水体中不同驯化时间的血清渗透压。结果表明,①丝足鱼的耐盐性高于斑马鱼,而低于剑尾鱼的耐盐性;②丝足鱼稚、幼鱼间耐盐性存在着极显著差异,其耐盐性与日龄有关,日龄越大,耐盐性越强;③丝足鱼在盐度14半咸水中驯化48 h左右渗透压基本调节平衡。实验证明经过从低盐度到高盐度的梯度驯化,丝足鱼可适应盐度为14的半咸水,为丝足鱼作为海水致病菌毒力分析模型奠定理论基础。

关键词：丝足鱼耐盐性咸水驯化

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栉孔扇贝和虾夷扇贝杂交子代的GISH鉴定及其免疫学特性

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中国水产科学 2006年第4期13卷 597-602页

作者：吕振明杨爱国王清印刘志鸿周丽青农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

以栉孔扇贝[Chlamys farreri(Jones et Preston)](♀)和虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)(♂)杂交子代担轮幼虫为材料,分别用栉孔扇贝和虾夷扇贝基因组作探针,采用基因组荧光原位杂交(GISH)的方法,对杂交后代杂交子的确切身份进行初... 详细信息

以栉孔扇贝[Chlamys farreri(Jones et Preston)](♀)和虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)(♂)杂交子代担轮幼虫为材料,分别用栉孔扇贝和虾夷扇贝基因组作探针,采用基因组荧光原位杂交(GISH)的方法,对杂交后代杂交子的确切身份进行初步鉴定。结果表明,子代分别继承了双亲各一套染色体(n=19),为真正的杂交种。为了解杂交扇贝的免疫学特性,在自然海域栉孔扇贝大规模死亡的情况下,分别对杂交扇贝及其亲本3个扇贝群体血细胞的胞内活性氧含量(ROIs)、血清凝集素效价(HA)、溶菌酶活力(LSZ)、抑菌活力、酚氧化酶活性(PO)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)等9种非特异性免疫学指标进行测定。结果表明,栉孔扇贝除ROIs、SOD、ACP等3个指标显著低于虾夷扇贝外(P<0.01),其他6种指标均高于虾夷扇贝,且除血清凝集素效价外均达显著水平(P<0.05)。在杂交子代中,上述免疫指标除SOD活性低于低值亲本外(P>0.6),其余8种免疫指标均介于双亲之间。杂交子代在9种免疫指标中有8种与母本无显著性差异,而子代与父本之间9种免疫指标中有7种达显著差异(P<0.05)。这些结果说明,杂交扇贝在非特异性免疫上存在明显的偏母性特征,这点与子代在外形特征上的偏母性相吻合。因此杂交扇贝相对于其母本在生产实践中表现出的一定程度的抗逆优势可能与非特异性免疫无明显关系。[中国水产科学,2006,13(4):597-602]

关键词：杂交扇贝免疫 GISH 杂种优势

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渤海小黄鱼生长特征的变化

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中国水产科学 2006年第2期13卷 243-249页

作者：郭旭鹏金显仕戴芳群农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

根据1960年、1982年、1993年和2003年各年春季对渤海进行的底拖网调查获得的小黄鱼(Pseudosciaena polyactisBleeker)生物学数据,对4个不同年代间渤海小黄鱼的群体组成、生长状况等生物学特征的年代间变化进行分析,结果表明,渤海小黄鱼... 详细信息

根据1960年、1982年、1993年和2003年各年春季对渤海进行的底拖网调查获得的小黄鱼(Pseudosciaena polyactisBleeker)生物学数据,对4个不同年代间渤海小黄鱼的群体组成、生长状况等生物学特征的年代间变化进行分析,结果表明,渤海小黄鱼的生物学特征在这4个年代间发生了明显变化。自1982年以来,渤海小黄鱼群体结构呈现个体小型化、低龄化、生长加快、渐近体长和渐近体质量减小、体质量生长拐点提前等现象。小黄鱼生物学特征因子的年代间变化,可能与渔业资源不断衰退以及小黄鱼自身对外界环境因素变化的适应有关。

关键词：生长特征小黄鱼渤海

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栉孔扇贝和虾夷扇贝杂交子代的细胞遗传学研究

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高技术通讯 2006年第8期16卷 853-858页

作者：吕振明杨爱国王清印刘志鸿周丽青中国海洋大学生命科学与技术学部青岛266003 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071

采用基因组荧光原位杂交（GISH）技术，结合改进的染色体滴片和压片法，对栉孔扇贝和虾夷扇贝远缘杂交正、反交子代4—8细胞胚胎及担轮幼虫的染色体构成及其变异进行了研究。结果表明，在染色体数目上，绝大部分正、反交子代早期胚胎的... 详细信息

采用基因组荧光原位杂交（GISH）技术，结合改进的染色体滴片和压片法，对栉孔扇贝和虾夷扇贝远缘杂交正、反交子代4—8细胞胚胎及担轮幼虫的染色体构成及其变异进行了研究。结果表明，在染色体数目上，绝大部分正、反交子代早期胚胎的染色体数目为38条，与其双亲一致；在染色体构成上，绝大部分正、反交子代分别继承了栉孔扇贝和虾夷扇贝各一套染色体，为真正的杂交种，核型也为双亲染色体核型的综合：2n=6m＋29（sm,st）＋3t；正、反交子代之间在染色体构成上无明显差别，结果说明两种扇贝的属间杂交正反方向均能产生正常的杂交种胚胎，合子中两套染色体具有较强的亲合性。此外，杂交子代在胚胎发育早期还存在较小比例的染色体数目异常、不对称染色体继承等遗传学现象。在群体杂交所产生的正反交子代中还存在极小比例的疑为雌核发育的母本类型个体，但在单对杂交产生的正反交子代中均未见雌核发育的个体。本文就这些异常现象产生的可能原因进行了探讨。

关键词：扇贝杂交染色体基因组荧光原位杂交

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牙鲆选择性养殖群体遗传结构的微卫星分析

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高技术通讯 2006年第1期16卷 94-99页

作者：刘云国陈松林李八方汪东风中国海洋大学生命科学与技术学部青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071

应用10对徽卫星引物对三个牙鲆群体各30个个体进行了群体遗传多样性分析。普通群体的平均等位基因数为7．6，显著高于感病群体的5．80，略高于抗病群体的7．2。普通群体的10个位点的平均基因型数为11．4，而感病群体和抗病群体分别只有8... 详细信息

应用10对徽卫星引物对三个牙鲆群体各30个个体进行了群体遗传多样性分析。普通群体的平均等位基因数为7．6，显著高于感病群体的5．80，略高于抗病群体的7．2。普通群体的10个位点的平均基因型数为11．4，而感病群体和抗病群体分别只有8．3和9．0。普通群体的平均有效等位基因数为3．97，略高于感病群体和抗病群体的3．78和3．72。普通群体10个位点最高频率等位基因的平均频率值为0．388，而感病群体和抗病群体分别为0．407和0．425。普通群体低频等位基因（0-0．05）总共有27个，而感病群体和抗病群体分别只有15个和19个。普通群体共得到14个私有等位基因，感病群体和抗病群体仅各得到3个等位基因。研究结果表明了感病群体和抗病群体两个选择性养殖群体遗传多样性的降低。

关键词：牙鲆选择性养殖群体遗传结构微卫星标记

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牙鲆MHC class ⅡB基因多态性及其与鱼体抗病力关系的分析

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水产学报 2006年第5期30卷 633-639页

作者：张玉喜陈松林中国水产科学院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室山东青岛266071 中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003

用fmhcN1和fmhcC1引物分别从42尾感病个体和42尾抗病个体的基因组DNA中扩增MHC基因片段,扩增产物长度为268/280 bp。在268/280 bp的核苷酸序列中,有32个(11.4%)核苷酸位点是多态的。在其编码的61个氨基酸位点中,有13个位点是多态的,其中... 详细信息

用fmhcN1和fmhcC1引物分别从42尾感病个体和42尾抗病个体的基因组DNA中扩增MHC基因片段,扩增产物长度为268/280 bp。在268/280 bp的核苷酸序列中,有32个(11.4%)核苷酸位点是多态的。在其编码的61个氨基酸位点中,有13个位点是多态的,其中有6个位点发生在多肽结合位点上。对核苷酸替代的类型及位点进行分析,发现非多肽结合位点的非同义碱基替代率与同义碱基替代率的比值(dN/dS)(0.523)远远小于多肽结合位点的非同义碱基替代率与同义碱基替代率的比值(dN/dS)(23.091),表明氨基酸替换集中出现在exon2多肽结合位点上。分析84个个体的411个阳性克隆的测序结果,发现有13个不同的MHC classⅡB等位基因,并且分别编码13个不同的氨基酸序列。其中大部分等位基因如a,b,c,d,e,f,j,k,i,m是两个群体共有的,等位基因d在感病群体中出现的频率(23.80%)显著高于在抗病群体中出现的频率(7.14%)。而等位基因g和h只出现在13个抗病个体中,其频率分别为21.4%和9.52%;等位基因l只出现在感病群体中,其频率为19.05%。

关键词：主要组织相容性复合体 MHCⅡ多态性抗病力牙鲆

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