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2018年中国水产学会学术年会

作者：单凡刘波孙存鑫周群兰张慧敏杨震飞熊哲刘博南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

试验用8%脂肪+200 mg/kg VE(CFVE1,对照组)、12%脂肪+200 mg/kg VE(HFVE1)、8%脂肪+600 mg/kg VE(CFVE2)及12%脂肪+600 mg/kg VE(HFVE2)4种饲料投喂罗氏沼虾8周,考察生长、肉质及抗氧化等指标的影响。结果显示:(1)与对照组相比,高脂HFVE1组极显著降低了增重率(WG)、特定生长率(SGR)(P<0.01);与HFVE1组相比,HFVE2组显著提高了WG和SGR(P<0.05)。(2)与对照组相比,高脂HFVE1组极显著提高了肌肉滴水损失和蒸煮损失(P<0.01);与HFVE1组相比,HFVE2组显著降低了滴水损失(P<0.05),极显著降低了蒸煮损失和肌肉硬度(P<0.01)。(3)与对照组相比,高脂HFVE1组显著降低了谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05);与HFVE1组相比,HFVE2组显著提高了GSH-Px活性(P<0.05)。因此,饲料中添加600mg/kg维生素E能够缓解高脂诱导的罗氏沼虾生长受阻、肉质下降及抗氧化应激。

关键词：罗氏沼虾维生素E 高脂氧化损伤

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青虾Ran基因的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能

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中国水产科学 2017年第3期24卷 459-469页

作者：卜宗元傅洪拓孙盛明乔慧金舒博张文宜龚永生蒋速飞熊贻伟吴滟南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

本研究应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponensis)Ran(Ras related nuclear protein,Ras相关核蛋白)基因全长cDNA序列,该基因cDNA全长1191 bp,包括218 bp的5'UTR,648 bp的开放阅读框(ORF),405 bp的3'UTR,编码215个氨基酸。青虾Ran基因属于P-loop-NTPase超级家族,拥有PTZ00132跨结构域,多肽分子量约为24.57 kDa,理论等电点7.13。系统进化树分析表明,在动物界进化中非常保守的青虾Ran多肽与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)聚为一支,具有最近的亲缘关系。使用荧光定量PCR技术检测Ran基因在成体青虾不同组织和卵巢不同发育期的表达差异,结果显示,Ran基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量在卵巢中最高,是精巢表达量的7~8倍;随着卵巢的发育,Ran基因的表达水平呈现上升趋势,在卵巢消退期又恢复到较低水平。RNA干扰后,实验组Ran基因表达量显著低于对照组(P<0.05),同时卵巢发育关键基因Vg(vitellogenin)在卵巢中的表达量也显著低于对照组(P<0.05),推测Ran基因参与雌性卵巢发育过程并对Vg基因的表达起到调控作用。

关键词：青虾 Ran基因克隆卵巢发育 RNA干扰

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三种脂肪源中添加维生素E对罗氏沼虾生长、肌肉质构及血液生化的影响

三种脂肪源中添加维生素E对罗氏沼虾生长、肌肉质构及血液生化的...

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2018年中国水产学会学术年会

作者：熊哲刘波周群兰孙存鑫张慧敏杨震飞单凡刘博南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

本试验旨在探讨同脂肪源饲料中补充维生素E(VE)对罗氏沼虾生长性能、肌肉质构和血液生化指标的影响,试验配制豆油、菜籽油和鱼油三种脂肪源,且添加200mg/kg正常水平VE和600mg/kg高水平VE的6组等氮等能饲料,分别为豆油+200mg/kg VE组、豆... 详细信息

本试验旨在探讨同脂肪源饲料中补充维生素E(VE)对罗氏沼虾生长性能、肌肉质构和血液生化指标的影响,试验配制豆油、菜籽油和鱼油三种脂肪源,且添加200mg/kg正常水平VE和600mg/kg高水平VE的6组等氮等能饲料,分别为豆油+200mg/kg VE组、豆油+600mg/kgVE组、菜籽油+200mg/kgVE组、菜籽油+600mg/kgVE组、鱼油+200mg/kgVE组、鱼油+600mg/kgVE组,并分别记为S1、S2、R1、R2、F1、F2,饲养幼虾8周。结果表明:(1)生长方面,饵料系数S1组显著低于R1(P<0.05);S1组增重率、特定生长率显著高于F1(P<0.05)。(2)肉质方面,弹性F2组显著高于R2组(P<0.05);胶黏性F1组显著高于S1和R1组(P<0.05);耐咀性R1组显著高于S1(P<0.05)。(3)血液生化方面,谷草转氨酶活性R2组显著低于R1组(P<0.05),F2组显著低于F1组(P<0.05);总胆固醇含量F1组显著低于R1组(P<0.05)。因此,本实验表明罗氏沼虾最适脂肪源为豆油,在鱼油和菜籽油饲料中添加600mg/kg VE能改善罗氏沼虾肉质并影响生长。

关键词：罗氏沼虾脂肪源维生素E 生长性能肉质血液生化

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使用转录组学和蛋白质组学方法联合分析大黄素对嗜水气单胞菌的抑制作用

使用转录组学和蛋白质组学方法联合分析大黄素对嗜水气单胞菌的抑...

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2018年中国水产学会学术年会

作者：张慧敏刘波戈贤平周群兰孙存鑫滕涛单凡杨震飞南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

为探讨大黄素对嗜水气单胞菌抑菌作用机制,使用RNA-Seq和i TRAQ技术联合检测并比较分析了正常组和200μg/ml大黄素组对嗜水气单胞菌的差异基因及蛋白质表达谱变化。结果显示:获得158个基因（88个上调,70个下调）和237个蛋白（52个上调,... 详细信息

为探讨大黄素对嗜水气单胞菌抑菌作用机制,使用RNA-Seq和i TRAQ技术联合检测并比较分析了正常组和200μg/ml大黄素组对嗜水气单胞菌的差异基因及蛋白质表达谱变化。结果显示:获得158个基因（88个上调,70个下调）和237个蛋白（52个上调,185个下调）具有差异表达,关联分析表明81个基因和蛋白表达一致（64个上调,17个下调）。GO功能注释表明,显著差异基因主要参与翻译、ATP合成耦合质子输运、硫化氢生物合成过程、甘油分解等过程。KEGG富集分析表明,显著差异基因主要参与核糖体和氧化磷酸化等通路。其中有差异的前10个基因或蛋白分别是:AHA481、hgpB、AHA893、hscB、AHA848、yfiA-2、napA、AHA844、AHA996和AHA359等蛋白在转录和蛋白水平共表达,主要参与了毒力、细胞膜、细胞质合成、能量代谢等过程。因此,大黄素可能通过改变嗜水气单胞菌相关的毒力基因、细胞膜调控蛋白和能量代谢蛋白等抑制嗜水气单胞菌的生长。

关键词：嗜水气单胞菌大黄素转录组蛋白质组细胞膜

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辣木叶提取物对罗氏沼虾生长及抗氧化的研究

辣木叶提取物对罗氏沼虾生长及抗氧化的研究

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2018年中国水产学会学术年会

作者：刘博 Ivan venkonwine kaleo 刘波孙存鑫张慧敏杨震飞单凡熊哲南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

本研究旨在探究辣木叶提取物对罗氏沼虾生长、抗氧化性能和抗应激能力的影响。试验分为5组,分别投喂含0、0.25%、0.5%、和1%辣木叶提取物以及0.025%恩诺沙星的饲料。其中,恩诺沙星为阳性对照。每组3个重复,养殖期为60天。结果表明,试验... 详细信息

本研究旨在探究辣木叶提取物对罗氏沼虾生长、抗氧化性能和抗应激能力的影响。试验分为5组,分别投喂含0、0.25%、0.5%、和1%辣木叶提取物以及0.025%恩诺沙星的饲料。其中,恩诺沙星为阳性对照。每组3个重复,养殖期为60天。结果表明,试验组的生长性能和饲料利用率优于对照组,其中添加0.5%辣木叶提取物末重、特定生长率和蛋白利用率最高且显著高于对照组(P<0.05)。从抗氧化指标来看,CAT活性随着添加量的提高呈先升高后降低的趋势,0.5%辣木叶提取物添加组活性最高并且与1%添加组相比差异显著(P<0.05)。GSH-Px活性变化趋势与CAT相同。与对照组相比,添加0.25-0.5%辣木叶提取物SOD活性相对较高且比1%添加组显著增加(P>0.05)。此外,与对照组相比,NO含量除1%辣木叶提取物添加组外显著降低(P<0.05),各组间iNOS活性差异不显著(P>0.05),但是0.5%辣木叶提取物添加组iNOS活性最高。因此,从生长指标和饲料系数做二元回归分析得出辣木叶提取物的最适添加量分别0.46%、0.49%,综合抗氧化与生长指标来看,适宜需要量为0.46-0.49%。

关键词：辣木罗氏沼虾生长抗氧化

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刀鲚水通道蛋白1的分子克隆及高盐作用下的表达分析

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中国水产科学 2017年第3期24卷 449-458页

作者：王美垚杨健徐跑徐钢春徐东坡尤洋刘凯段金荣周彦锋方弟安张敏莹俞振飞南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)克隆获得了刀鲚(Coilia nasus)水通道蛋白1(AQP1)全长cDNA序列。其碱基序列全长为1299 bp,5′端、3′端非翻译区(untranslated regions,UTR)长度分别为107 bp和458 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为777 bp,共编码258个氨基酸。理论等电点是6.13,蛋白分子量为27.1 kD。结构分析表明,刀鲚AQP1具有水通道蛋白家族典型结构特征,包括6个跨膜结构域,2个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(NPA)特征序列,同时还具有AQP1抑制剂含汞化合物的半胱氨酸结合位点。序列同源性及系统进化分析表明,其与同属鲱形目的大西洋鲱的同源性最高(93%),并且与其聚为一支。实时荧光定量分析结果表明,刀鲚AQP1基因在多种组织中有表达,包括脑、鳃、肝、前肠、后肠、中肾、肌肉。高盐度作用后,AQP1在渗透调节作用关键组织鳃、中肾、肠中的表达水平有显著差异(P<0.05),体现了AQP1在刀鲚渗透调节中的重要作用。本研究结果可为今后进一步探讨刀鲚渗透调节相关基因的调控机制提供理论参考。

关键词：刀鲚水通道蛋白1 基因克隆盐度组织表达

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中华绒螯蟹羧酸酯酶的基因克隆及农药处理后的组织表达分析

中华绒螯蟹羧酸酯酶的基因克隆及农药处理后的组织表达分析

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2018年中国水产学会学术年会

作者：张晓臧亚南宋坤沈怀舜南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

羧酸酯酶(CXEs)是一种多功能家族酶系,具有代谢多种药物、环境毒物及致癌物的作用。在昆虫体内,羧酸酯酶作为一种重要的解毒酶参与有机磷等杀虫剂代谢解毒。为了了解羧酸酯酶在中华绒螯蟹体内的组织分布及对杀虫剂的解毒代谢机制,在本... 详细信息

羧酸酯酶(CXEs)是一种多功能家族酶系,具有代谢多种药物、环境毒物及致癌物的作用。在昆虫体内,羧酸酯酶作为一种重要的解毒酶参与有机磷等杀虫剂代谢解毒。为了了解羧酸酯酶在中华绒螯蟹体内的组织分布及对杀虫剂的解毒代谢机制,在本研究中,获得了编码中华绒螯蟹羧酸酯酶的全长c DNA序列。序列分析表明,CXE全长c DNA序列为2385bp。且此序列具有羧酸酯酶家族的序列N端信号肽序列及催化三联体结构,同时与其他甲壳类动物高度相似。实时荧光定量PCR结果显示,CXE在肝胰腺中高度表达。此外,在低浓度阿维菌素,敌百虫和高效氯氰菊酯处理下,中华绒螯蟹肝胰腺中CXE基因的表达水平相对于对照组显着改变。因此,杀虫剂处理诱导了CXE的表达。综上所述,CXEs可能对中华绒螯蟹杀虫剂的解毒起着至关重要的作用。

关键词：中华绒螯蟹羧酸酯酶基因克隆解毒杀虫剂组织表达

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日本沼虾视蛋白opsin基因的克隆及其时空表达分析

日本沼虾视蛋白opsin基因的克隆及其时空表达分析

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2018年中国水产学会学术年会

作者：李菲金毅乔慧傅洪拓孙盛明张文宜金舒博蒋速飞龚永生熊贻伟吴滟胡宇宁南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

本研究通过分析序列和c DNA末端快速扩增,研究日本沼虾眼组织中视蛋白基因。该基因c DNA全长1382个碱基,编码375个氨基酸。通过系统发育分析,将其划分为长波视蛋白组,命名为Mn-LW,Mn-LW表达在雄虾和雌虾的组织中表现出明显的季节变化,... 详细信息

本研究通过分析序列和c DNA末端快速扩增,研究日本沼虾眼组织中视蛋白基因。该基因c DNA全长1382个碱基,编码375个氨基酸。通过系统发育分析,将其划分为长波视蛋白组,命名为Mn-LW,Mn-LW表达在雄虾和雌虾的组织中表现出明显的季节变化,其中以眼组织表达最高,在卵巢中也有表达。Mn-LW在眼和卵巢中的表达量与卵巢发育呈正相关。原位杂交显示,Mn-LW存在于眼视网膜细胞和卵巢卵母细胞中。体内注射Mn-LW双链RNA能有效降低Mn-LW表达量。注射Mn-LW双链RNA也显著降低了卵黄生成素(VG)的表达,Mn-LW与VG在卵巢发育过程中有密切的关系。

关键词：日本沼虾甲壳动物视蛋白 RNA干扰卵巢成熟

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池塘跑道式循环水高密度应激对团头鲂生长、生理及Nrf2-keap1信号通路基因表达的影响

池塘跑道式循环水高密度应激对团头鲂生长、生理及Nrf2-keap1信号...

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2018年中国水产学会学术年会

作者：杨震飞徐刚春戈贤平刘波徐跑宋长友南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

本实验研究了池塘跑道式循环水养殖系统下高密度应激对团头鲂生长、生理反应及Nrf2信号通路的影响。以体质量为（2.33±0.13g）的团头鲂为实验对象,分别饲养在高低两种密度下（低密度组,平均534尾/m,高密度组,平均1073尾/m）,养殖... 详细信息

本实验研究了池塘跑道式循环水养殖系统下高密度应激对团头鲂生长、生理反应及Nrf2信号通路的影响。以体质量为（2.33±0.13g）的团头鲂为实验对象,分别饲养在高低两种密度下（低密度组,平均534尾/m,高密度组,平均1073尾/m）,养殖周期为90天。结果表明,与低密度组相比,养殖90天高密度组显著降低了鱼体生长,提高白细胞、红细胞及血红蛋白含量（P<0.05）。与低密度组相比,高密度组中NOX2在60天及90天,Nrf2在30天、60天及90天,Keap1在30天,Bach1在30天、60天,SOD在30天,CAT在30天显著上调（P<0.05）。类似的,高密度显著提高抗氧化酶SOD、GPx在60天、CAT在60天及90天活性（P<0.05）。此外,高密度组中MDA含量在60天及90天显著升高（P<0.05）。本研究表明高密度诱导抗氧化防御系统涉及酶活及Nrf2-Keap1信号通路转录水平的调节,进而影响鱼类生长。

关键词：密度应激 Nrf2信号通路抗氧化防御跑道式养殖系统团头鲂

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池塘工程化循环水养殖系统中溶解氧的时空变化及菌群响应特征

池塘工程化循环水养殖系统中溶解氧的时空变化及菌群响应特征

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2018年中国水产学会学术年会

作者：王朋徐钢春徐跑南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

采用基于Illumina Miseq测序平台的高通量测序技术,从不同角度（密度,区域,溶氧,季节）分析池塘工程化循环水养殖系统中溶解氧和水温对细菌群落结构和丰富度的影响。结果表明:菌群丰度在九月份最高,在十月份最低。昼夜变化中,溶解氧最... 详细信息

采用基于Illumina Miseq测序平台的高通量测序技术,从不同角度（密度,区域,溶氧,季节）分析池塘工程化循环水养殖系统中溶解氧和水温对细菌群落结构和丰富度的影响。结果表明:菌群丰度在九月份最高,在十月份最低。昼夜变化中,溶解氧最低时的细菌丰富度整体上高于溶解氧最高时。不同区域中,粪便收集区的细菌丰富度高于养殖区。在7-11月份的季节变化中,变形菌,放线菌,拟杆菌和蓝细菌的相对丰度占据前四位;在属水平上,假单胞菌,黄杆菌,聚球菌,蓝细菌为优势物种;几乎每种细菌都具有显著或极显著的月份差异。假单胞菌的相对丰度与溶解氧和水温皆具有极显著的相关性。聚球藻,蓝细菌,CL-500arineroup和Alpinimonas皆与水温具有极显著相关性。分枝杆菌,MNG7与溶解氧极显著相关。此外,不同菌落之间也具有显著或极显著的相关性。以上结果表明,放养密度,养殖区域,溶氧浓度和季节变化都会影响水体菌群丰度,且菌群丰度随溶氧降低而逐渐增加,在日均溶氧2.5 mgL时达最高。

关键词：时空变化溶解氧浓度菌落丰富度高通量测序

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