检索结果-内蒙古大学图书馆

中国水产科学 2014年第2期21卷 235-243页

作者：孙盛明戈贤平傅洪拓朱健张世勇乔慧中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)的Hc基因全长cDNA序列,并对该基因序列特征进行了分析。青虾Hc基因cDNA全长2 235 bp,包括10 bp的5′末端非翻译区(UTR),2 074 bp的开放阅读框(ORF),151 bp的3′UTR,开放阅读框编码688... 详细信息

应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)的Hc基因全长cDNA序列,并对该基因序列特征进行了分析。青虾Hc基因cDNA全长2 235 bp,包括10 bp的5′末端非翻译区(UTR),2 074 bp的开放阅读框(ORF),151 bp的3′UTR,开放阅读框编码688个氨基酸。蛋白相似度比对显示,青虾血蓝蛋白含有典型的6个保守的铜离子结合位点。系统进化树分析表明,青虾Hc与脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)Hc聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,Hc基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量在肝胰腺中最高;使用荧光定量PCR检测青虾Hc基因在低氧胁迫和复氧条件下在肝胰腺中的mRNA时空表达情况,结果显示,经低氧和复氧刺激后,与对照组相比,Hc在肝胰腺中的表达量分别在低氧胁迫12 h、24 h和复氧6 h出现了3次明显上调,由此推测Hc基因参与低氧应激分子过程。此外,本研究通过血蓝蛋白的分离纯化技术制备了多克隆抗体,本研究结果可为更进一步的了解青虾血蓝蛋白的生理功能提供理论支撑。

关键词：青虾血蓝蛋白基因克隆低氧胁迫复氧刺激多克隆抗体

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养殖刀鲚与生长环境菌群PCR-DGGE指纹图谱及多样性分析

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水产学报 2014年第7期38卷 1009-1017页

作者：聂志娟徐钢春程起群张勇杜富宽顾若波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室

为了分析养殖刀鲚体内与生长环境菌群结构,利用PCR-DGGE技术,对养殖刀鲚鳃、胃、肠壁及肠内容物和养殖水体菌群结构进行了初步分析。PCR-DGGE指纹图谱分离显示,42条清晰条带,其中养殖水体(27)、鳃(9)、胃(13)、肠道壁(19)、肠道内容物(... 详细信息

为了分析养殖刀鲚体内与生长环境菌群结构,利用PCR-DGGE技术,对养殖刀鲚鳃、胃、肠壁及肠内容物和养殖水体菌群结构进行了初步分析。PCR-DGGE指纹图谱分离显示,42条清晰条带,其中养殖水体(27)、鳃(9)、胃(13)、肠道壁(19)、肠道内容物(18)的香农指数分别为3.037、1.883、2.193、2.825、2.683;养殖水体与刀鲚鳃、胃、肠道壁及肠道内容物分别具有6、9、11、8共有带。UPGMA聚类分析显示,样品3个重复相似度都在95%以上,差异不明显;不同样品之间,养殖刀鲚鳃和胃聚为一支,具有较高的相似度(76%),同时与养殖水体相似度达29%;养殖刀鲚肠道壁和肠道内容物聚为一支,相似度为38%。回收测定所有显示条带,主要包含变形菌、放线菌、拟杆菌、柔膜菌、蓝藻细菌、厚壁菌、梭杆菌及少量未定义菌种。研究表明,PCR-DGGE技术能区分养殖刀鲚主要部位及水体微生物的结构差异和多样性,澄清养殖刀鲚及生长水体微生物区系,可为定植益生菌的开发提供参考。

关键词：刀鲚细菌菌落香农指数 PCR-DGGE

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饥饿胁迫对刀鲚形体、体成分及血液生化指标的影响

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动物学杂志 2014年第6期49卷 897-903页

作者：金鑫徐钢春杜富宽徐跑顾若波南京农业大学无锡渔业学院无锡214128 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214128

为了探讨短期饥饿胁迫对刀鲚(Coilia nasus)相关生理学指标的影响,以室内养殖刀鲚为实验对象,研究20 d的短期饥饿对其形体、体成分和血液生化指标的影响,实验组分别在第0、2、5、10、15和20天取样。结果表明,脏体比和肝体比在饥饿的第2... 详细信息

为了探讨短期饥饿胁迫对刀鲚(Coilia nasus)相关生理学指标的影响,以室内养殖刀鲚为实验对象,研究20 d的短期饥饿对其形体、体成分和血液生化指标的影响,实验组分别在第0、2、5、10、15和20天取样。结果表明,脏体比和肝体比在饥饿的第2天即显著下降(P<0.05),肥满度和体质量在20 d的饥饿期内呈下降趋势,但变化不显著(P>0.05)。刀鲚肌肉粗脂肪在第5天显著下降(P<0.05),下降5.99%,而粗蛋白含量在第15天时才显著降低(P<0.05),水分在整个饥饿期间总体呈上升趋势,第10天显著上升(P<0.05),粗灰分含量在饥饿期间变化不显著(P>0.05)。血清总蛋白、球蛋白、胆固醇和皮质醇随着饥饿时间的延长呈现先升高后降低的趋势,而血清甘油三酯和血糖总体呈先急速下降后维持一定水平,其中甘油三酯在饥饿至第2天显著下降(P<0.05),血糖浓度在第5天显著下降(P<0.05)。表明短期饥饿胁迫使刀鲚形体发生一定的变化,随着饥饿时间的延长,刀鲚首先动用体内储存的脂肪来满足能量供应,再动用蛋白质来维持体内的正常代谢,血液生化指标也发生与饥饿相适应的变化。

关键词：刀鲚饥饿形体体成分血液生化指标

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饲料中添加不饱和脂肪酸对刀鲚幼鱼脂肪代谢酶活性和肌肉成分的影响

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动物营养学报 2014年第1期26卷 270-278页

作者：魏广莲徐钢春顾若波徐跑南京农业大学无锡渔业学院无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081

为探讨饲料中添加不饱和脂肪酸对刀鲚(Coilia nasus)幼鱼脂肪代谢酶活性和肌肉成分的影响,以初始体质量为(2.78±0.09)g的3 000尾刀鲚幼鱼为研究对象,将其随机分为2组(每组3个重复,每个重复500尾),分别投喂不添加和添加4.76%鱼油(... 详细信息

为探讨饲料中添加不饱和脂肪酸对刀鲚(Coilia nasus)幼鱼脂肪代谢酶活性和肌肉成分的影响,以初始体质量为(2.78±0.09)g的3 000尾刀鲚幼鱼为研究对象,将其随机分为2组(每组3个重复,每个重复500尾),分别投喂不添加和添加4.76%鱼油(不饱和脂肪酸添加源)的配合饲料(实测粗脂肪水平分别为7.86%和11.32%),进行为期60 d的饲养试验。结果表明:2组刀鲚幼鱼的末均质量、末体长、体长/体高、体长/体厚、肝体指数(HSI)及脏体指数(VSI)均没有显著差异(P>0.05),但添加组刀鲚幼鱼的肥满度(CF)显著高于未添加组(P<0.05)。与未添加组相比,添加组刀鲚幼鱼肌肉中粗蛋白质含量显著降低(P<0.05),粗脂肪含量有升高趋势(P>0.05)。2组刀鲚幼鱼肝脏中脂肪酶(LPS)和总脂酶(TLP)活性及脂质过氧化物(LPO)含量均差异不显著(P>0.05)。肝脏中,添加组刀鲚幼鱼肉碱软脂酰基转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)和肉碱软脂酰基转移酶-Ⅱ(CPT-Ⅱ)活性显著低于未添加组(P<0.05),而乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性则高于未添加组(P>0.05);肌肉中,2组刀鲚幼鱼CPT-Ⅰ、CPT-Ⅱ以及ACC活性均无显著差异(P>0.05)。此外,饲料添加4.76%的鱼油后,肌肉中饱和脂肪酸(SFA)和单不饱和脂肪酸(MUFA)含量显著下降(P<0.05),多不饱和脂肪酸(PUFA)、二十碳五烯酸(EPA)+二十二碳六烯酸(DHA)以及n-3 PUFA含量显著上升(P<0.05)。由此得出,提高饲料中不饱和脂肪酸含量可有效地增加刀鲚幼鱼鱼体必需脂肪酸含量,有利于改善鱼体的营养品质,但有升高鱼体内LPO含量的趋势。

关键词：刀鲚幼鱼不饱和脂肪酸肌肉成分脂肪代谢酶

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日本沼虾过氧化物还原酶基因的克隆及其表达分析

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中国水产科学 2014年第3期21卷 474-483页

作者：孙盛明戈贤平傅洪拓朱健张世勇中国水产科学研究院淡水渔业研究中心、农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

利用 cDNA 末端快速克隆方法获得了青虾（Macrobrachium nipponense）的过氧化物还原酶基因（Prx）全长cDNA序列。该基因cDNA全长878 bp,包括72 bp的5′末端非翻译区,594 bp的开放阅读框（ORF）,212 bp的3′末端非翻译区,开放阅读框编码... 详细信息

利用 cDNA 末端快速克隆方法获得了青虾（Macrobrachium nipponense）的过氧化物还原酶基因（Prx）全长cDNA序列。该基因cDNA全长878 bp,包括72 bp的5′末端非翻译区,594 bp的开放阅读框（ORF）,212 bp的3′末端非翻译区,开放阅读框编码198个氨基酸。氨基酸相似度比对显示,所分离的青虾过氧化物还原酶基因包括两个半胱氨酸残基的区域“FYPLDFTFVCPTEI”和“GEVCPA”。系统进化树分析表明,青虾过氧化物还原酶基因与南美白对虾（Litopenaeus vannamei）过氧化物还原酶聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量 PCR 检测显示,过氧化物还原酶基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由低到高依次为肠道、心脏、卵巢、肌肉、鳃、肝胰腺。使用荧光定量PCR检测青虾在低氧胁迫和复氧条件下肝胰腺中的过氧化物还原酶基因mRNA的时空表达情况,结果显示,与对照组相比,实验组青虾过氧化物还原酶在肝胰腺和鳃组织中的表达量分别在低氧胁迫12~24 h 和复氧6 h出现了3次明显上调,由此推测过氧化物还原酶基因参与低氧应激分子过程。本研究结果可为进一步了解青虾低氧应激分子机制提供参考。

关键词：日本沼虾过氧化物还原酶基因克隆低氧胁迫定量PCR

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3种品系尼罗罗非鱼生长及高密度胁迫后生理响应变化的比较

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中国水产科学 2014年第1期21卷 142-152页

作者：强俊杨弘何杰王辉徐跑朱志祥中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 广东海洋大学水产学院广东湛江524025

以‘吉富’、‘新吉富’、‘埃及尼罗’3种不同品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为研究对象,通过不同品系之间生长与高密度胁迫反应的比较,探讨3种尼罗罗非鱼的生长特点与应激后生理响应的变化规律。将初始规格基本一致的3种品系... 详细信息

以‘吉富’、‘新吉富’、‘埃及尼罗’3种不同品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为研究对象,通过不同品系之间生长与高密度胁迫反应的比较,探讨3种尼罗罗非鱼的生长特点与应激后生理响应的变化规律。将初始规格基本一致的3种品系尼罗罗非鱼饲养100 d后,吉富罗非鱼特定生长率最高,新吉富其次,两者间无显著差异(P>0.05),埃及尼罗罗非鱼特定生长率显著低于吉富罗非鱼(P<0.05)。吉富与新吉富罗非鱼的内脏比显著高于埃及尼罗(P<0.05);3种尼罗罗非鱼的肥满度之间无显著差异(P>0.05)。养殖实验结束后,进行48 h的急性高密度(100 g/L)应激实验。应激48 h内,吉富与新吉富罗非鱼血清总蛋白、葡萄糖、谷草转氨酶、胆固醇与溶菌酶活力/水平以及肝HSP70mRNA水平呈先上升后下降的变化。应激48 h后,埃及尼罗罗非鱼血清皮质醇水平与应激前相比无显著差异(P>0.05),吉富与新吉富罗非鱼的皮质醇水平显著高于应激前(P<0.05);埃及尼罗罗非鱼血清溶菌酶活力与肝HSP70 mRNA水平在应激后48 h内始终高于应激前(P<0.05)。研究结果表明,短期高密度胁迫可提高3种尼罗罗非鱼血清葡萄糖与甘油三酯的利用,并诱发肝损伤。埃及尼罗罗非鱼的抗高密度应激能力高于吉富和新吉富罗非鱼。

关键词：尼罗罗非鱼生长性能高密度应缴生理响应血清生化 HSP70 mRNA

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背部肌肉注射含IGF2b基因慢病毒载体对鲤鱼生长的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2014年第7期42卷 8-14,28页

作者：雷莹苏胜彦丁敬波刘浩亮袁新华南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

【目的】研究IGF2b基因对建鲤生长及体型的影响。【方法】用含有IGF2b基因的慢病毒载体注射建鲤背部肌肉组织,注射量分别为10,20和40μL/尾,阴性对照组不进行任何处理,阳性对照组注射20μL/尾去离子水。在相同饲养条件下饲养满9个月后,... 详细信息

【目的】研究IGF2b基因对建鲤生长及体型的影响。【方法】用含有IGF2b基因的慢病毒载体注射建鲤背部肌肉组织,注射量分别为10,20和40μL/尾,阴性对照组不进行任何处理,阳性对照组注射20μL/尾去离子水。在相同饲养条件下饲养满9个月后,分别测量建鲤的各项生长指标。【结果】注射IGF2b基因的建鲤体质量、体长、体高、体厚、尾长均显著大于阴性对照组和阳性对照组,说明IGF2b基因在建鲤背部肌肉组织中过表达对鲤第2阶段生长同样具有促进作用,IGF2b基因在鲤背部肌肉组织中过表达对鲤的体型也有一定的作用。鲤的体长、体高、体厚的3D图也说明,随着IGF2b基因注射,鲤鱼倾向于具有更大的体长、体高、体厚的值。用多元逐步回归法做体质量的回归方程可知,鲤鱼的体质量与体长、体厚、尾长具有线性关系,利用体长、体厚、尾长这3个自变量进行聚类分析,即可准确得到鲤鱼5个注射组间的聚类关系:阴性对照组与阳性对照组共属一类,3个注射组同为一类,其中注射组中10μL注射组和20μL注射组为一类,40μL注射组为一类,IGF2b基因对鲤鱼体型的影响在注射量大于20μL/尾之后产生了转折,出现了负增长。【结论】IGF2b基因对鲤第2阶段生长同样具有促进作用,且对鲤鱼的体型有一定影响。

关键词：建鲤 IGF2b基因慢病毒载体不同生长阶段背部肌肉注射聚类分析

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建鲤和黑龙江野鲤自交和正反交F_1形态差异分析

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中国水产科学 2014年第1期21卷 59-66页

作者：李冰柴学森张成锋朱健中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

通过测定建鲤（***）和黑龙江野鲤（Cyprinuscarpiohaermatopterus）自交和正反交组合的形态参数，运用方差分析和多元分析，比较了4个自交和正反交组合的形态差异。结果表明，不同组合间在侧线鳞、侧线上鳞、侧线下鳞、胸鳍鳍棘以及腹... 详细信息

通过测定建鲤（***）和黑龙江野鲤（Cyprinuscarpiohaermatopterus）自交和正反交组合的形态参数，运用方差分析和多元分析，比较了4个自交和正反交组合的形态差异。结果表明，不同组合间在侧线鳞、侧线上鳞、侧线下鳞、胸鳍鳍棘以及腹鳍鳍棘数量上没有显著差异（尸〉0．05）。而在背鳍鳍棘、背鳍鳍条、腹鳍鳍条、臀鳍鳍棘、臀鳍鳍条以及胸鳍鳍条数量上有差异（P〈0．05）。聚类分析结果表明，自交组合之间的形态最为接近，两个杂交组合与两个自交组合的趋异程度逐渐增大。用判别分析方法构建了4个判别方程，判别准确率P1为76．7％~96．7％，判别准确率P2为85．2％～90．6％，综合判别率为87．5％。利用主成分分析提取了9个主成分，对总变异的累积贡献率为68．943％。研究结果为建鲤和黑龙江野鲤及其杂交后代的种群和亲缘关系鉴定以及育种提供了科学依据。

关键词：建鲤黑龙江野鲤形态参数多元分析方差分析

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精氨酸对团头鲂幼鱼生长、血清游离精氨酸和赖氨酸、血液生化及免疫指标的影响

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中国水产科学 2014年第3期21卷 549-559页

作者：廖英杰刘波任鸣春戈贤平谢骏崔红红周群兰张武肖陈汝丽南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心、农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

选用初始体质量为(2.60±0.10)g的团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼540尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂精氨酸水平(实测值)为0.83%、1.30%、1.81%、2.35%、2.82%和3.36%(占饲料的质量分数)的6组等氮等能... 详细信息

选用初始体质量为(2.60±0.10)g的团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼540尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂精氨酸水平(实测值)为0.83%、1.30%、1.81%、2.35%、2.82%和3.36%(占饲料的质量分数)的6组等氮等能半精制饲料,饲养期为9周,探讨精氨酸对团头鲂幼鱼生长、血清游离精氨酸和赖氨酸、血液生化及免疫指标的影响。实验结果表明,随着饲料中精氨酸水平的增加,团头鲂幼鱼增重率和饲料效率显著升高(P<0.05),均在1.81%组达到最大;随着精氨酸水平的进一步增加,上述指标不再发生显著变化(P>0.05);饲料中精氨酸水平对各组存活率无显著影响(P>0.05)。与对照组(0.83%)相比,1.81%、2.82%和3.36%组团头鲂幼鱼血清中精氨酸含量显著提高(P<0.05),3.36%组血清中赖氨酸含量却显著降低(P<0.05)。与对照组相比,1.30%和1.81%组团头鲂幼鱼血清中谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05),1.81%、2.35%、2.82%和3.36%组血清中总蛋白和球蛋白的含量显著提高(P<0.05)。3.36%组团头鲂幼鱼血清中尿素含量显著高于其他各组(P<0.05),但饲料中精氨酸水平对各组血清中谷丙转氨酶活力、葡萄糖和白蛋白含量没有显著影响(P>0.05)。随着饲料中精氨酸水平的增加,团头鲂幼鱼血液中白细胞、红细胞数量和血红蛋白含量都呈先上升后趋于平缓的趋势,其中1.81%组最高;饲料中精氨酸水平对血栓细胞数量无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,1.81%和2.35%组显著提高了血清中补体3的含量(P<0.05),却对血清中补体4的含量无显著影响(P>0.05)。添加精氨酸显著(P<0.05)提高了血细胞呼吸爆发活性,同时显著(P<0.05)降低了团头鲂幼鱼感染嗜水气单胞菌后累计死亡率。综上所述,饲料中精氨酸含量为1.81%和2.35%时,团头鲂幼鱼生长、氨基酸吸收以及鱼体的免疫力和抗病原菌感染能力均达到最高。

关键词：团头鲂精氨酸赖氨酸呼吸爆发生长

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刀鲚Δ6脂肪酸去饱和酶cDNA的克隆与组织表达检测

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南京农业大学学报 2014年第3期37卷 138-144页

作者：魏广莲徐钢春顾若波杜富宽徐跑南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

利用RT-PCR和RACE技术获得刀鲚（Coilia nasus）Δ6脂肪酸去饱和酶（Δ6 fatty acyl desaturase,FAD6）的全长cDNA序列2 032 bp,开放阅读框（ORF）为1 338 bp,编码445个氨基酸。其具有3个保守的组氨酸簇（HDXGH、HXXHH和QXXHH）、2个跨... 详细信息

利用RT-PCR和RACE技术获得刀鲚（Coilia nasus）Δ6脂肪酸去饱和酶（Δ6 fatty acyl desaturase,FAD6）的全长cDNA序列2 032 bp,开放阅读框（ORF）为1 338 bp,编码445个氨基酸。其具有3个保守的组氨酸簇（HDXGH、HXXHH和QXXHH）、2个跨膜区和含亚铁血红素结合基序（HPGG）的细胞色素b5结构域等典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点。氨基酸同源性分析显示,刀鲚FAD6与海鳗（Muraenesox cinereus）和军曹鱼（Rachycentron canadum）等海水鱼类的相似性达75%～79%,而与淡水鱼类的相似性较低。系统进化分析也显示,其与海水鱼类的亲缘关系较近。荧光定量PCR检测发现该基因在刀鲚脑和肠中高表达,肌肉和肝脏相对高表达,心脏、肾脏和鳃低表达。

关键词：刀鲚 Δ6脂肪酸去饱和酶基因克隆基因表达

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