检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2013年第5期35卷 628-636页

作者：夏正龙俞菊华李红霞李建林唐永凯任洪涛朱双宁南京农业大学无锡渔业学院无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 河南科技大学动物科技学院洛阳471003

文章采用PCR方法从建鲤(Cyprinus carpio ***)基因组分离到2个肠型脂肪酸结合蛋白基因(Fatty acid binding protein 2,FABP2),ORF长度均为399 bp,相似度为92.2%,分别记为jlFABP2a、jlFABP2b,和斑马鱼(Danio rerio)FABP2 ORF的相似度分别为88.0%和90.5%。jlFABP2s基因结构与FABPs家族其他成员一致,由4个外显子和3个内含子组成,2a和2b间内含子序列和长度差异明显。系统树显示这2个基因对应斑马鱼的1个FABP2基因,和鲤鱼染色体数是斑马鱼的2倍一致。实时荧光定量PCR结果显示,jlFABP2a、2b在建鲤肠中的表达量极显著高于脑、肝脏、肌肉、肾脏、心脏、性腺等其他组织(P<0.01),且2a表达量显著(雄鱼,P<0.05)或极显著(雌鱼,P<0.01)高于2b,但在其他组织则2b表达量稍高,暗示2a为肠特异性表达,2b则为广谱表达。通过比对8尾建鲤的2a和2b基因序列,在2a和2b上分别找到12个和4个SNP,均位于内含子上。使用PCR-RFLP法检测jlFABP2a上4个SNP位点I1-A15G、I1-A99G、I2-C487T和I3-A27T在建鲤选育群体中的基因型分布,并进行了基因型与个体增重的关联分析,结果表明,4个位点与雌、雄成鱼阶段增重分别有极显著或显著相关。同时考虑4个位点的基因型与增重的关系,结果基因型AGGGCCXX和AGGGXXAT的个体平均增重比其他个体快15%,这两种基因型个体在选育群中占了9%,具有较大的选育空间,可用于建鲤分子育种计划中。

关键词：建鲤肠型脂肪酸结合蛋白组织表达单核苷酸多态性 SNP-增重相关分析

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建鲤催乳素受体基因全长cDNA的克隆、序列分析与组织表达

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中国水产科学 2013年第4期20卷 722-732页

作者：李冰王杰张成锋朱健中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

为了解催乳素受体(Prolactin Receptor,PRLR)的基因序列及其在建鲤(Cyprinus carpio ***)渗透调节组织中的表达情况,采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)的方法分离克隆了建鲤PRLR基因全长cDNA,得到2 440... 详细信息

为了解催乳素受体(Prolactin Receptor,PRLR)的基因序列及其在建鲤(Cyprinus carpio ***)渗透调节组织中的表达情况,采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)的方法分离克隆了建鲤PRLR基因全长cDNA,得到2 440 bp的全长cDNA,包括1 821 bp的开放阅读框(ORF),213 bp的5′末端非编码区(UTR)以及406 bp的3′末端非编码区(UTR)。对该基因序列和推测的氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其他硬骨鱼类该基因的氨基酸序列相似度在37.46%～87.25%,与鲤(Cyprinus carpio)的氨基酸相似度最高(87.25%),鲫(Carassius auratus)次之(86.86%),和金头鲷(Sparus aurata)的相似度较低(41.87%),和人(Homo sapiens)最低(37.46%),表明不同物种间的PRLR的氨基酸序列具有较高的保守性。用实时定量PCR(RT-PCR)检测该基因在建鲤脑、肠、鳃、性腺、肝、脾、肾、皮肤中催乳素受体的相对表达量,其中鳃、肾、肠3个主要渗透调节组织的表达量较高,这表明建鲤的渗透调节组织是PRLR的主要表达场所,从定量角度提示了催乳素(prolactin,PRL)通过PRLR的表达,作用于渗透调节组织从而行使其渗透压调节功能。本研究旨在为进一步探索建鲤的渗透调控机制提供基础依据。

关键词：建鲤催乳素受体克隆序列分析组织表达

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克氏原螯虾的脂肪需求量及饲料中脂肪与糖类适宜比例的研究

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动物营养学报 2013年第5期25卷 1017-1024页

作者：何亚丁华雪铭赵朝阳冯文和税春张厚群邢思华朱站英焦建刚农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 安徽省巢湖水产局巢湖238000 三珍水产开发公司巢湖238000

为研究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)饲料中脂肪的适宜水平以及脂肪与糖类的适宜比例,以菜籽粕、鱼粉、豆粕、面粉和糊精等为主要原料配制5种等氮(蛋白质水平约为35%)等能(消化能约为13 MJ/kg)的半纯合饲料,分别饲喂5组平均体重为(8.... 详细信息

为研究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)饲料中脂肪的适宜水平以及脂肪与糖类的适宜比例,以菜籽粕、鱼粉、豆粕、面粉和糊精等为主要原料配制5种等氮(蛋白质水平约为35%)等能(消化能约为13 MJ/kg)的半纯合饲料,分别饲喂5组平均体重为(8.15±0.03)g的克氏原螯虾幼虾,每组4个重复,每个重复20尾。5种饲料的脂肪水平(%)/糖类水平(%)分别为3/36.94(A1组)、5/34.15(A2组)、7/26.98(A3组)、9/24.56(A4组)和11/21.85(A5组)。试验期为40 d。结果表明:随着饲料中脂肪与糖类比例的增加,各组的存活率先上升后下降,A1组显著低于其他各组(P<0.05),A2组显著高于A1和A5组(P<0.05)。饲料系数和摄食率各组之间无显著差异(P>0.05)。增重率与特定生长率A2、A3和A4组之间差异不显著(P>0.05),但A2、A3和A4组的增重率显著高于A1组(P<0.05),特定生长率显著高于A1和A5组(P<0.05)。A5组的蛋白质效率最低,显著低于A2组(P<0.05)。肌肉中水分、粗灰分和粗蛋白质含量均以A5组为最高,显著高于A2组(P<0.05),与A3和A4组差异不显著(P>0.05)。肌肉中粗脂肪、钙和磷含量各组之间无显著差异(P>0.05)。随着饲料中脂肪水平的提高,血清脂蛋白脂酶活力呈现先上升后下降的趋势,肠道中淀粉酶活力则呈现先下降后上升的趋势,极值均出现在A3组。综合以上试验结果认为,在本试验条件下,初始体重为(8.15±0.03)g的克氏原螯虾对脂肪的需求量在7%左右,饲料中脂肪与糖类的适宜比例为1.00∶3.85。

关键词：克氏原螯虾脂肪糖类需求量适宜比例

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鲢病原嗜水气单胞菌分离鉴定及检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2013年第5期35卷 374-378页

作者：梁利国谢骏叶诗尧中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

为鉴定江苏高邮市某养殖场混养鲢死亡原因,本研究对濒死鱼进行细菌分离纯化、常规理化特性、分子生物学和致病性试验鉴定以及药敏性检测。鉴定结果表明,分离菌对健康鲢具有较强的致病性,其LD50为5×106.75cfu/mL,根据其表型特征、... 详细信息

为鉴定江苏高邮市某养殖场混养鲢死亡原因,本研究对濒死鱼进行细菌分离纯化、常规理化特性、分子生物学和致病性试验鉴定以及药敏性检测。鉴定结果表明,分离菌对健康鲢具有较强的致病性,其LD50为5×106.75cfu/mL,根据其表型特征、理化特性及分子生物学鉴定,分离菌为气单胞菌属(Aeromonas)的嗜水气单胞菌(***),其16S rRNA和gyrB基因序列分别为1 460 bp和1 171 bp;药敏试验结果显示,分离菌对37种抗生素中氨曲南、氟苯尼考、庆大霉素等12种抗生素敏感。另外,根据***的气溶素aerA基因设计引物,建立了PCR检测方法,该方法可以扩增出280 bp的aerA基因片段,其最低检出量为3×104cfu/mL。本研究对***导致鲢出血死亡病原菌的分离鉴定以及建立的该菌检测方法,对鲢健康养殖和病害防治具有重要的意义。

关键词：鲢嗜水气单胞菌 16S rRNA gyrB aerA 检测方法

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三角鲂和长春鳊肌肉营养成分分析与品质评价

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动物学杂志 2013年第1期48卷 87-94页

作者：缪凌鸿戈贤平刘波谢骏朱健冯晓宇中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081 杭州市农业科学研究院杭州310024

用常规方法测定、分析了三角鲂(Megalobrama tarminalis)和长春鳊(Parabramis pekinensis)肌肉中营养成分组成与含量。结果显示,三角鲂肌肉蛋白质、脂肪含量分别为18.19%和3.06%,长春鳊肌肉蛋白质、脂肪含量分别为19.38%和2.89%。三角... 详细信息

用常规方法测定、分析了三角鲂(Megalobrama tarminalis)和长春鳊(Parabramis pekinensis)肌肉中营养成分组成与含量。结果显示,三角鲂肌肉蛋白质、脂肪含量分别为18.19%和3.06%,长春鳊肌肉蛋白质、脂肪含量分别为19.38%和2.89%。三角鲂和长春鳊肌肉中均检测出18种氨基酸,其中包括了8种人体必需氨基酸。三角鲂肌肉中氨基酸总量为76.27%,其中,8种人体必需氨基酸含量为32.17%,占氨基酸总量的42.18%;长春鳊肌肉中氨基酸总量为77.60%,其中,8种人体必需氨基酸含量为31.70%,占氨基酸总量的40.85%。必需氨基酸的构成比例基本符合FAO/WHO的标准。三角鲂肌肉中限制性氨基酸主要为甲硫氨酸加胱氨酸,必需氨基酸指数为63.55,4种呈味氨基酸为氨基酸总量的32.81%;长春鳊肌肉中限制性氨基酸主要为色氨酸,必需氨基酸指数为66.81,4种呈味氨基酸为氨基酸总量的33.80%。脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)含量均较高,三角鲂为7.96%,长春鳊为3.11%。矿物元素比值合理。以上分析表明,三角鲂和长春鳊均为营养价值、经济价值都较高的优质鱼类,相比而言,三角鲂肌肉脂肪、脂肪酸含量和质量更优,而长春鳊肌肉在蛋白质、氨基酸组成与含量方面更优。

关键词：三角鲂长春鳊肌肉营养成分品质分析

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饲料蛋白水平对低温应激下吉富罗非鱼血清生化指标和HSP70mRNA表达的影响

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水生生物学报 2013年第3期37卷 434-443页

作者：强俊杨弘王辉徐跑何杰中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081 广东海洋大学水产学院湛江524025

在水温27℃条件下,分别对吉富罗非鱼(27.64±2.79)g投喂3组不同蛋白水平的饲料,养殖周期56d。饲养结束后,进行14℃低温应激实验,研究低温应激后0—24h内,鱼体血清生化指标与肝脏HSP70mRNA表达量的变化。结果表明,短期投喂50%蛋白水... 详细信息

在水温27℃条件下,分别对吉富罗非鱼(27.64±2.79)g投喂3组不同蛋白水平的饲料,养殖周期56d。饲养结束后,进行14℃低温应激实验,研究低温应激后0—24h内,鱼体血清生化指标与肝脏HSP70mRNA表达量的变化。结果表明,短期投喂50%蛋白水平的饲料可以提高罗非鱼血清中葡萄糖、总蛋白、甘油三酯与胆固醇水平以及血清谷丙转氨酶与谷草转氨酶活力。在低温应激后,50%蛋白组血清葡萄糖、总蛋白、甘油三酯与胆固醇水平呈下降趋势,而血清皮质醇水平与谷草转氨酶活力表现为先上升后下降变化。25%和38%蛋白组血清葡萄糖水平与谷丙转氨酶活力在应激期间呈上升趋势,而谷草转氨酶与碱性磷酸酶活力和总蛋白与胆固醇水平呈先上升后下降变化。各实验组溶菌酶活力与肝脏HSP70 mRNA的表达量呈先上升后下降的变化。由此可知,短期投喂高蛋白饲料可以提高罗非鱼血液中蛋白、血糖与脂肪含量,增强鱼体抗应激能力,同时,高蛋白水平的饲料也会引起肝脏产生分解压力以及增加饲料成本。在生产中,需要根据实际需要合理确定饲料的蛋白含量。

关键词：吉富罗非鱼饲料蛋白低温应激血清 HSP70

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罗非鱼TRAP分子标记反应体系优化设计方案的比较

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南方水产科学 2013年第1期9卷 28-34页

作者：马庆男董在杰朱文彬苏胜彦张宁袁新华杨弘南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

靶位区域扩增多态性(target region amplification polymorphism,TRAP)是一种新型功能性分子标记,比较了L16(45)正交试验和单因素方法优化罗非鱼(Oreochromis spp.)TRAP反应体系。2种分析方法结果中dNTPs浓度、随机引物浓度、DNA浓度相... 详细信息

靶位区域扩增多态性(target region amplification polymorphism,TRAP)是一种新型功能性分子标记,比较了L16(45)正交试验和单因素方法优化罗非鱼(Oreochromis spp.)TRAP反应体系。2种分析方法结果中dNTPs浓度、随机引物浓度、DNA浓度相同而镁离子(Mg2+)浓度和TaqDNA聚合酶浓度不同,不同因素间存在一定的交互作用。正交设计方法比单因素法更简单、科学、合理。该试验获得罗非鱼15μL TRAP最优反应体系为DNA模板浓度为60 ng、Mg2+浓度为1.5 mmol.L-1、dNTPs浓度为0.3 mmol.L-1、TaqDNA聚合酶0.5 U、随机引物浓度为7 pmol.L-1和固定引物浓度为10 pmol.L-1。该反应体系在4个罗非鱼群体中验证,表现出良好的稳定性和重复性,该反应体系的建立为TRAP标记应用于罗非鱼遗传多样性评价、种质鉴定、分子标记辅助育种等研究提供了新的手段。

关键词：罗非鱼 TRAP 正交设计单因素试验优化

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黄金鲫温和气单胞菌鉴定及溶血素基因检测

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水生态学杂志 2013年第5期34卷 76-81页

作者：梁利国马昕羽谢骏中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

结合传统的细菌学鉴定及分子生物学鉴定方法，对从患病黄金鲫（CarassiusftuTfttlzs auratus）体内分离到的优势菌YD-1进行了鉴定，同时对供试菌进行了回感试验、表观生物学、药敏试验及毒力因子检测等系统性研究。结果表明，该菌在盐度... 详细信息

结合传统的细菌学鉴定及分子生物学鉴定方法，对从患病黄金鲫（CarassiusftuTfttlzs auratus）体内分离到的优势菌YD-1进行了鉴定，同时对供试菌进行了回感试验、表观生物学、药敏试验及毒力因子检测等系统性研究。结果表明，该菌在盐度1％～3％、pH4．0～9．0，温度10—30℃的营养肉汤培养基中均能生长；16SrRNA基因序列（GenBank收录号：KC561935，长度1446bp）和gyrB基因序列（GenBank收录号：KC561934，长度1169bp）分别与其他气单胞菌属细菌的基因同源性相似度在97％～99％，构建系统发育树确定该菌株为温和气单胞菌（Aer-onas sobria）。人工回感试验可引起健康异育银鲫死亡，对该菌毒力因子进行检测，可扩增出溶血素基因片段。药敏试验显示，该菌对多粘菌素、米诺环素、新霉素等药物敏感。

关键词：黄金鲫温和气单胞菌药敏试验毒力因子

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刀鲚和湖鲚幼鱼生长代谢及肌肉脂肪酸的差异分析

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上海海洋大学学报 2013年第6期22卷 862-867页

作者：魏广莲徐钢春顾若波徐跑南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

为研究鲚鱼幼鱼的机体代谢与营养情况,以长江刀鲚(Coilia nasus)和湖鲚(Coilia nasus taihuensis)幼鱼为研究对象,通过测定幼鱼形体指标,消化酶的活力和含量以及肌肉基本营养成分和脂肪酸成分,比较其生长性能和肌肉脂肪酸成分的差异,评... 详细信息

为研究鲚鱼幼鱼的机体代谢与营养情况,以长江刀鲚(Coilia nasus)和湖鲚(Coilia nasus taihuensis)幼鱼为研究对象,通过测定幼鱼形体指标,消化酶的活力和含量以及肌肉基本营养成分和脂肪酸成分,比较其生长性能和肌肉脂肪酸成分的差异,评价其营养价值并探讨生态习性差异对其造成的影响。结果表明:(1)刀鲚幼鱼胃蛋白酶和淀粉酶活力比湖鲚幼鱼的低,脂肪酶活力是湖鲚幼鱼脂肪酶活力的3倍,肝脏内未累积过多的脂质过氧化物有害物质。(2)刀鲚幼鱼肌肉中粗脂肪含量比例达到16.13%,是湖鲚幼鱼肌肉中粗脂肪含量比例的1.5倍,粗蛋白含量则显著低于湖鲚幼鱼(P<0.05)。(3)刀鲚幼鱼肌肉中检测出21种脂肪酸,湖鲚幼鱼肌肉中检测出17种脂肪酸,湖鲚幼鱼体内没有检测出C22∶1、C24∶1、C20∶3n-6和C20∶4n-6脂肪酸。湖鲚幼鱼肌肉中的∑n-3、∑n-6以及∑n-6/∑n-3比例都比刀鲚幼鱼的高,但是脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)的总量比例显著低于刀鲚幼鱼(P<0.05)。

关键词：刀鲚湖鲚幼鱼消化酶脂肪酸肥满度

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变性梯度凝胶电泳技术及其在人工湿地及养殖水体中应用的研究进展

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江苏农业科学 2013年第7期41卷 7-12页

作者：李晓李冰朱健南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

简要介绍了DGGE技术的基本原理及技术路线,概述了该技术在检测中存在的主要优缺点并对其存在的主要缺点进行了技术优化,重点综述了DGGE技术在人工湿地及养殖水体微生物群落多样性和动态性研究中的最新进展及应用前景。

关键词： DGGE 人工湿地养殖水体微生物群落多样性

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