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2018年（第十三届）浙江渔业科技论坛

作者：练青平张任驰宓国强姚子亮刘士力黄富有陆君吴燕琴农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江省淡水水产研究所浙江省丽水市水产技术推广站

2016-2018年,对水泥池养殖的1足龄马口鱼亲鱼进行催产,通过干法人工授精获得受精卵。连续观察了马口鱼从受精卵到初孵仔鱼25个发育时期的发育时序及形态特征,观察结果显示:马口鱼胚胎发育可以分为卵裂前期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、... 详细信息

2016-2018年,对水泥池养殖的1足龄马口鱼亲鱼进行催产,通过干法人工授精获得受精卵。连续观察了马口鱼从受精卵到初孵仔鱼25个发育时期的发育时序及形态特征,观察结果显示:马口鱼胚胎发育可以分为卵裂前期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期、出膜期等7个阶段;马口鱼的受精卵为金黄色或桔黄色,无粘性,沉性卵,卵径为(2.06±0.05)mm;在孵化水温(23±1)℃条件下,受精后35 min,胚盘形成;1h11 min,进入卵裂期;3 h55 min,进入囊胚期;9h09min,进入原肠期;16h05min,进入神经胚期;受精后17h,进入器官形成期;52h10min,进入孵化出膜期,仔鱼开始出膜。马口鱼受精卵完成胚胎发育所需的积温为1199.91℃·h;初孵仔鱼全长6.0～6.8mm,体透明。本研究可为马口鱼的人工繁殖提供理论指导。

关键词：马口鱼人工繁殖胚胎发育

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刀鲚POMC基因的cDNA克隆及其应激应答

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中国水产科学 2017年第2期24卷 231-238页

作者：杜富宽徐钢春黎燕练青平徐跑农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江省淡水水产研究所浙江湖州313001 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

为了研究刀鲚(Coilia nasus)阿黑皮素原(proopiomelanocortin,POMC)基因的应激应答及调控,克隆了刀鲚POMC基因的c DNA全长。刀鲚POMC基因的c DNA全长2030 bp,编码区699 bp,编码232个氨基酸。二级结构预测显示,刀鲚POMC包括信号肽(signal... 详细信息

为了研究刀鲚(Coilia nasus)阿黑皮素原(proopiomelanocortin,POMC)基因的应激应答及调控,克隆了刀鲚POMC基因的c DNA全长。刀鲚POMC基因的c DNA全长2030 bp,编码区699 bp,编码232个氨基酸。二级结构预测显示,刀鲚POMC包括信号肽(signal peptide)、N末端区(N-terminal region,NPP)、促肾上腺皮质激素结构域(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、β-脂解素(β-LPH)、α-促黑素(α-MSH)、促肾上腺皮质激素样垂体中叶多肽(CLIP)、γ-脂解素(γ-LPH)、β-促黑素(β-MSH)和β-内咖肽(β-EP)结构域。运用荧光定量的方法检测了该基因在刀鲚不同组织中的表达分布。结果显示,POMC在健康刀鲚的脑高表达,鳃、肾、精巢相对高表达,肝、脾、肠、头肾、肌肉和卵巢中微量表达。运输胁迫后,POMC基因的表达量显著下降(P<0.05);10‰ NaCl组4 h和6 h POMC基因的表达量显著上调(P<0.05),6 h的表达量恢复至应激前。POMC基因在脂肪代谢及应激调控中发挥重要的功能,本研究结果可为该基因在刀鲚后续育种及应激调控工作提供重要基础。

关键词：刀鲚 POMC基因应激应答运输胁迫

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运用水声学的水库鱼类资源增殖放流效果评估

运用水声学的水库鱼类资源增殖放流效果评估

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2018年（第十三届）浙江渔业科技论坛

作者：郭爱环刘金殿原居林郝雅宾辛建美顾志敏浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心

合理开展水库鱼类增殖放流,可提高水库鱼产力、修复水库生态环境和防治水库富营养化等,对水库健康运行具有重要意义。而科学评估水库鱼类资源动态及增殖放流净化效果将为合理开展增殖放流提供基础和指导。本研究于2015年运用BioSonics D... 详细信息

合理开展水库鱼类增殖放流,可提高水库鱼产力、修复水库生态环境和防治水库富营养化等,对水库健康运行具有重要意义。而科学评估水库鱼类资源动态及增殖放流净化效果将为合理开展增殖放流提供基础和指导。本研究于2015年运用BioSonics DT-X科学回声探测仪(208kHz)在老虎潭水库增殖放流完成后(夏季)和渔获期(冬季)对其鱼类资源进行走航式水声学调查。结合渔获物调查,对老虎潭水库的鱼类大小组成、空间分布、密度和资源量等进行测定,评估增殖放流活动对水体的净化效果。结果显示,夏季鱼类的平均目标强度为(-51.76±3.37)dB,冬季为(-45.058±4.26)dB,夏季和冬季鱼类目标回声强度大小存在显著性差异(P<0.001)。夏冬两季鱼类密度的垂直分布存在显著性差异(P<0.001)。老虎潭水库库区夏季鱼类的总尾数为1.297×106尾,资源量约为10 246 kg。冬季鱼类的总尾数为4.8X105尾,资源量约为43 085kg。增殖放流后鱼类资源量增长明显,达32 839 kg,共转移出碳、氮、磷的净含量分别为3.379×103kg、1.031×103 kg和1.81×102 kg,实现了对水体营养物质的转移。后续研究可关注每年渔获量的科学设置,合理利用鱼类资源并有效降低库区水体营养水平。

关键词：增殖放流鱼类空间分布水声学水库治理鱼类资源量

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基于高通量测序技术的鱼类环境DNA研究中通用引物的筛选验证

基于高通量测序技术的鱼类环境DNA研究中通用引物的筛选验证

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第二届现代化海洋牧场国际学术研讨会暨中国水产学会渔业资源与环境分会2018年学术年会

作者：张爱菊郝雅宾郭爱环刘金殿练青平周志明浙江省淡水水产研究所中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心浙江省淡水水产遗传育种重点实验室农业部淡水渔业健康养殖重点实验室湖州 313001

为了筛选出一个或多个适宜研究环境DNA(environmental DNA,eDNA)的鱼类通用引物,本文选取了 5 对引物,分别对鱼类线粒体细胞色素b(Cytochrome b,Cyt b)基因、16S rDNA和细胞色素c氧化酶I(COI)基因部分片段进行扩增。在对两个水样eDNA进... 详细信息

为了筛选出一个或多个适宜研究环境DNA(environmental DNA,eDNA)的鱼类通用引物,本文选取了 5 对引物,分别对鱼类线粒体细胞色素b(Cytochrome b,Cyt b)基因、16S rDNA和细胞色素c氧化酶I(COI)基因部分片段进行扩增。在对两个水样eDNA进行扩增后发现,引物CY45M和1634M均扩增出目的条带,且扩增产物质量适用于后续的高通量测序,而引物CYFM、16ACM和COIM均没有扩增出目的条带。继续对另外 7个水样eDNA扩增后发现,引物CY45M和1634M分别在所有水样eDNA中均取得良好的扩增效果。对目的产物进行Illumina Miseq测序后发现,引物CY45M和1634M扩增产物注释上的鱼类物种均为 11 种,二者获得的鱼类种类即存在差异也存在重复。综上所述,引物CY45M和1634M都可作为鱼类群落结构eDNA研究的通用引物。

关键词：引物验证环境DNA 高通量测序钱塘江

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黄尾鲴和花?增殖放流标记技术研究

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江苏农业科学 2018年第22期46卷 160-164页

作者：郝雅宾原居林刘金殿何海生顾志敏浙江省淡水水产研究所/农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室/中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心浙江湖州313001 上海海洋大学上海201306

为探讨不同的标记方法对黄尾鲴(Xenocypris davidi)和花?(Hemibarbus maculatus)的适用性,对鱼体进行铁环标记、"T"形标记、切鳍标记、可见植入性荧光胶体标记(visible implant elastomer,简称VIE)和被动集成应答器标记(passi... 详细信息

为探讨不同的标记方法对黄尾鲴(Xenocypris davidi)和花?(Hemibarbus maculatus)的适用性,对鱼体进行铁环标记、"T"形标记、切鳍标记、可见植入性荧光胶体标记(visible implant elastomer,简称VIE)和被动集成应答器标记(passive integrated transponder,简称PIT),试验各组均以混养的模式培养,混养半年后,分析各组的生长、存活率、标记成功率、效果等情况。结果表明,除"T"形标记组外,其他各试验组黄尾鲴的平均体质量与平均体长都有所增加;除切鳍组和PIT组外,其他3个试验组花?的平均质量与平均体长都有所下降。黄尾鲴的总存活率与平均存活数都表现为荧光标记> PIT标记>切鳍标记>"T"形标记>铁环标记,花?的总存活率与平均存活数都表现为切鳍标记> PIT标记>荧光标记>"T"形标记>铁环标记,其中荧光、切鳍和PIT组的总生存率和标记成功率达90%左右。铁环和"T"形标记易造成伤口腐烂,标记效果差;切鳍组效果具有时间性;荧光标记组和PIT组效果好,荧光标记价格便宜,而PIT标记价格昂贵。综合分析认为,荧光标记可作为黄尾鲴和花?大规模标记增殖放流的一种可行的方法。

关键词：黄尾鲴花[鱼骨] 增殖放流标记

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PIT标记在水生动物研究中的应用

PIT标记在水生动物研究中的应用

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2018年（第十三届）浙江渔业科技论坛

作者：郝雅宾刘金殿郭爱环张爱菊周志明农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江省淡水水产研究所

被动集成应答器(passive integrated transponder,PIT)标记是一种基于无线射频识别的标记,以标记的方式来识别目标生物体,主要应用于水生动物的行为、生存生长、分布、监测保护和渔业增殖放流效果评估等研究中。与其它标记技术相比,PIT... 详细信息

被动集成应答器(passive integrated transponder,PIT)标记是一种基于无线射频识别的标记,以标记的方式来识别目标生物体,主要应用于水生动物的行为、生存生长、分布、监测保护和渔业增殖放流效果评估等研究中。与其它标记技术相比,PIT标记具有信息储存量大、体积小、强持久性、高识别度、唯一性和性能稳定、频率足够低时易于识别、对生物体的生存、生长和游泳能力无显著影响等优点,但也存在不足之处,如有些种类肌肉植入时保留率低;手术伤口溃烂导致生物体死亡;标记迁移影响天线的检测等。PIT标记技术对于水生动物研究具有重要意义,并具有良好的发展趋势。文章主要综述了基于PIT标记在水生动物、尤其是鱼类的研究中的应用进展,以期为渔业增殖放流效果评估研究和管理工作提供一些思考。可以预期,PIT标记技术与物理、化学和分子标记等相结合将成为水生动物研究的一个发展势头。

关键词： PIT标记鱼类水生动物

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中国花鲈富阳群体与桐庐群体遗传变异分析

中国花鲈富阳群体与桐庐群体遗传变异分析

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2018年（第十三届）浙江渔业科技论坛

作者：刘金殿农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江省淡水水产研究所

研究利用线粒体DNA(细胞色素b基因序列和D-loop区序列)序列对中国花鲈(Lateolabrax maculatus(McClelland,1844))钱塘江桐庐段水域和富阳段水域的种群遗传结构进行了分析。结果表明,在47个个体扩增出的线粒体D-loop区1002bp片段中,A+T含... 详细信息

研究利用线粒体DNA(细胞色素b基因序列和D-loop区序列)序列对中国花鲈(Lateolabrax maculatus(McClelland,1844))钱塘江桐庐段水域和富阳段水域的种群遗传结构进行了分析。结果表明,在47个个体扩增出的线粒体D-loop区1002bp片段中,A+T含量(62%)明显高于G+C含量(38%)。Cytb基因序列扩增906 bp,A+T含量(50.2%)明显高于G+C含量(49.8%)。富阳段水域群体25个个体中共检测到24个单倍型,桐庐度水域群体22个个体中共检测到22个单倍型,两个群体共享1个单倍型;AMOVA分析显示,99.58%的分子差异位于群体内,0.42%的分子差异位于群体间,两群体之间的遗传分化水平较低(Fst=0.00424,P=0.34018;Nm=11.2924)。采用邻接法构建的系统发育树和单倍型网络图分析表明,各群体内的个体不形成单系群,两者之间互有交叉。总之。钱塘江桐庐段水域和富阳段水域中中国花鲈两个群体之间基因交流充分,未出现遗传分化。

关键词：中国花鲈线粒体D-loop区线粒体细胞色素b基因遗传多样性

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钱塘江下游江段鱼类资源现状

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浙江农业学报 2017年第10期29卷 1620-1629页

作者：郝雅宾刘金殿张爱菊郭爱环浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心浙江湖州313001

2014年11月—2016年11月对钱塘江下游桐庐、富阳和闻堰江段的鱼类资源进行了逐季度采样调查,对该水域鱼类种类组成、优势种、群落多样性指数和捕捞情况进行分析。结果显示:共采集鱼类56种,隶属9目13科42属,其中鲤科鱼类种类最多,占总种... 详细信息

2014年11月—2016年11月对钱塘江下游桐庐、富阳和闻堰江段的鱼类资源进行了逐季度采样调查,对该水域鱼类种类组成、优势种、群落多样性指数和捕捞情况进行分析。结果显示:共采集鱼类56种,隶属9目13科42属,其中鲤科鱼类种类最多,占总种类数的60.71%。优势种为光泽黄颡鱼、鲫、鲢和鳙。2015年春季捕获的鱼类种数最多,占总种数的57.89%;冬季鱼类捕获量最高,占总渔获量的26.94%。Margalef丰富度指数、Simpson多样性指数、Shannon-Wiener多样性指数和Pielou均匀度指数的变化范围分别为1.24~2.83、0.75~0.89、1.73~2.53和0.56~0.74。与历史记录比较,桐庐、富阳和闻堰江段鱼类群落组成已经发生了显著变化,除本地种光泽黄颡鱼和鲫外,增殖放流鱼种已成为了优势或重要种群。另外,外来种和杂交种的存在可能会对该江段渔业资源的健康发展构成潜在威胁。

关键词：鱼类资源优势种钱塘江

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钱塘江富阳段鱼类资源现状

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淡水渔业 2017年第3期47卷 45-51页

作者：郝雅宾刘金殿郭爱环张爱菊倪蒙浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心浙江湖州313001

2014年11月—2015年12月对钱塘江富阳江段3个断面鱼类资源进行了逐月采样调查,对该水域鱼类种类组成、优势种、群落多样性指数和捕捞量进行分析。结果显示:共采集鱼类48种,隶属8目13科37属,其中鲤科鱼类种类最多,占总种类数的64.58%,优... 详细信息

2014年11月—2015年12月对钱塘江富阳江段3个断面鱼类资源进行了逐月采样调查,对该水域鱼类种类组成、优势种、群落多样性指数和捕捞量进行分析。结果显示:共采集鱼类48种,隶属8目13科37属,其中鲤科鱼类种类最多,占总种类数的64.58%,优势种为鲢、鲤、鲫和光泽黄颡鱼。各月中,4月份捕获的鱼类种数最多,占总种数的52.08%;9月份鱼类捕获量最高,占总渔获量的17.85%。Margalef丰富度指数4月份较高,2月份较低;Shannon-Wiener多样性指数和Pielou均匀度指数在7月份较高,9月份较低,而Simpson多样性指数与之相反。富阳段鱼类捕捞强度较大,渔获物中小个体鱼类占主要部分。与历史记录比较,富阳江段鱼类群落组成已经发生了显著变化,除本地种光泽黄颡鱼外,增殖放流鱼种已成为了优势或重要种群。

关键词：鱼类资源优势种富阳段

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翘嘴鲌生长激素(GH)基因与侧翼区的克隆及分析

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浙江农业学报 2017年第8期29卷 1281-1289页

作者：刘士力贾永义蒋文枰迟美丽程顺赵金良顾志敏傅建军浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江湖州313001 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

采用保守引物进行PCR成功扩增了编码翘嘴鲌生长激素的基因,该基因全长5 966 bp,其中转录单元长1 648 bp,由5个外显子和4个内含子组成。5'端和3'端侧翼序列长度分别为2 282 bp和2 036 bp,分别包含(AAT)8和(TTC)5T(TAA)8的微卫星... 详细信息

采用保守引物进行PCR成功扩增了编码翘嘴鲌生长激素的基因,该基因全长5 966 bp,其中转录单元长1 648 bp,由5个外显子和4个内含子组成。5'端和3'端侧翼序列长度分别为2 282 bp和2 036 bp,分别包含(AAT)8和(TTC)5T(TAA)8的微卫星序列。上游区域包含TATA框,还有一些重要的转录因子结合位点,如Pit-1、Pit-1a、CREB、AP1、GR、HNF-3、HNF-3B等转录因子。翘嘴鲌的5个外显子长度分别为64、140、117、162和255 bp。推测的阅读框为603 bp,编码由22个氨基酸的信号肽和178个氨基酸成熟肽组成的多肽。在这个多肽中发现了5个保守的半胱氨酸残基(Cys^(71)、Cys^(135)、Cys^(173)、Cys^(190)和Cys^(198))和2个可能的N-糖基化位点(145th和197th)。翘嘴鲌GH氨基酸序列与团头鲂完全相同,与草鱼只有一个氨基酸残基的差异,构建的鱼类进化树符合基本分类地位。翘嘴鲌生长激素基因4个内含子长度分别为229、103、565和103 bp。相对外显子来说,种间内含子变异较大,其中第三内含子变异最大。该结果为进一步研究翘嘴鲌GH基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础。

关键词：翘嘴鲌生长激素基因克隆序列分析

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