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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2012年学术交流会

作者：管政兵水燕周鑫徐增洪赵朝阳江南大学生物工程学院无锡214122 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081

目前对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)眼柄切除诱导卵巢成熟的分子机制还很不清楚。本研究借鉴国外最新研究结果，首先探讨了克氏原螯虾单侧眼柄切除后15天内卵巢的一系列变化情况，随后利用实时定量RT-PCR技术比较分析了眼柄切除前... 详细信息

目前对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)眼柄切除诱导卵巢成熟的分子机制还很不清楚。本研究借鉴国外最新研究结果，首先探讨了克氏原螯虾单侧眼柄切除后15天内卵巢的一系列变化情况，随后利用实时定量RT-PCR技术比较分析了眼柄切除前、后卵巢组织中钙调蛋白基因(CaM)与质膜Ca2+-ATPase基因(PMCA)的表达情况。结果表明在克氏原螯虾眼柄切除诱导卵巢成熟的早期分子过程中，钙信号通路可能发挥了重要作用。实验结果为进一步深入研究克氏原螯虾眼柄切除促进卵巢成熟的分子机制积累了研究资料。

关键词：克氏原螯虾眼柄切除卵巢成熟实时定量PCR 钙信号通路

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克氏原螯虾卵巢发育Ⅲ期与Ⅳ期的比较蛋白质组学研究

克氏原螯虾卵巢发育Ⅲ期与Ⅳ期的比较蛋白质组学研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2012年学术交流会

作者：水燕管政兵赵朝阳徐增洪周鑫中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 江南大学生物工程学院无锡214122 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081

克氏原螯虾作为经济虾蟹类的重要代表,是淡水虾类重要水产养殖资源。目前在规模化养殖过程中优质苗种的供应短缺现状,是制约克氏原螯虾产业发展的瓶颈之一。人工养殖条件下,雌虾卵巢易出现发育迟缓甚至停滞现象而导致雌、雄性腺发育不... 详细信息

克氏原螯虾作为经济虾蟹类的重要代表,是淡水虾类重要水产养殖资源。目前在规模化养殖过程中优质苗种的供应短缺现状,是制约克氏原螯虾产业发展的瓶颈之一。人工养殖条件下,雌虾卵巢易出现发育迟缓甚至停滞现象而导致雌、雄性腺发育不同步是优质菌种短缺的首要根本原因。克氏原螯虾卵巢从卵黄发生前期(Ⅲ期)到卵黄发生期(Ⅳ期)的发育过渡是卵母细胞能否顺利发育成熟的关键点。本研究对克氏原螯虾发育Ⅲ期和Ⅳ期卵巢组织总蛋白质组双向电泳的等电聚焦条件、上样量等关键环节进行了优化;运用PDQuestTM软件对获得的凝胶图谱进行了图像分析;并对表达差异蛋白质点(丰度差异=2倍)进行了串联质谱鉴定。结果显示,在等电总伏特数不低于8500 Vh、样品上样量为200μg时,可以获得较清晰的凝胶图谱。利用串联质谱分析挖取的52个差异蛋白质点,其中共成功鉴定29个(包括22种蛋白质)。分析表明,相对于发育Ⅲ期卵巢蛋白质组,在Ⅳ期卵巢蛋白质组中有13种蛋白质表达量有下调,9种蛋白质表达量有上调。研究结果将对于揭示克氏原螯虾的卵巢发育分子调控机制奠定一定基础,同时对于了解其它虾蟹类动物的性腺发育机理也将积累重要分子资料。

关键词：克氏原螯虾双向电泳卵巢发育串联质谱

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罗非鱼生产技术效率与市场竞争力的关系分析

罗非鱼生产技术效率与市场竞争力的关系分析

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2012中国渔业经济专家论坛

作者：代云云袁永明袁媛贺艳辉徐翔中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室南京农业大学经济管理学院

我国罗非鱼产量不断增长,但出口利润却一直在下降,市场竞争力不断下降,提升其市场竞争力的关键在于罗非鱼技术效率的提高。本文探讨了技术效率对市场竞争力的影响机理,同时通过国家罗非鱼产业技术体系示范县跟踪点养殖户的调研数据,利... 详细信息

我国罗非鱼产量不断增长,但出口利润却一直在下降,市场竞争力不断下降,提升其市场竞争力的关键在于罗非鱼技术效率的提高。本文探讨了技术效率对市场竞争力的影响机理,同时通过国家罗非鱼产业技术体系示范县跟踪点养殖户的调研数据,利用随机前沿生产模型(SFA)对罗非鱼生产技术效率进行测算,统计分析了罗非鱼生产技术效率与其市场竞争力的关系,证实了技术效率是市场竞争力的重要影响因素,并提出了相应的政策建议。

关键词：生产环节技术效率市场竞争力

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罗非鱼生产技术效率与市场竞争力的关系分析

罗非鱼生产技术效率与市场竞争力的关系分析

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2012年中国渔业经济专家论坛

作者：代云云袁永明袁媛贺艳辉徐翔中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室南京农业大学经济管理学院

中国罗非鱼产量不断增长，但出口利润却一直在下降，市场竞争力不断下降，提升其市场竞争力的关键在于罗非鱼技术效率的提高。本文探讨了技术效率对市场竞争力的影响机理，同时通过国家罗非鱼产业技术体系示范县跟踪点养殖户的调研数据... 详细信息

中国罗非鱼产量不断增长，但出口利润却一直在下降，市场竞争力不断下降，提升其市场竞争力的关键在于罗非鱼技术效率的提高。本文探讨了技术效率对市场竞争力的影响机理，同时通过国家罗非鱼产业技术体系示范县跟踪点养殖户的调研数据，利用随机前沿生产模型(S FA)对罗非鱼生产技术效率进行测算，统计分析了罗非鱼生产技术效率与其市场竞争力的关系，证实了技术效率是市场竞争力的重要影响因素，并提出了相应的政策建议。

关键词：罗非鱼产业生产环节技术效率市场竞争力

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超高效液相色谱-串联质谱联用测定罗非鱼肌肉中甲基睾丸酮残留

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食品科学 2011年第22期32卷 243-247页

作者：祝璟琳杨弘肖炜邹芝英李大宇单航宇中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

建立罗非鱼肌肉中甲基睾丸酮残留量的超高效液相色谱-串联质谱联用(ultro high performance liquid chroma-tography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定方法。以氘代试剂为内标,样品经乙腈萃取后,乙酸乙酯液液分配,强阴离子交... 详细信息

建立罗非鱼肌肉中甲基睾丸酮残留量的超高效液相色谱-串联质谱联用(ultro high performance liquid chroma-tography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定方法。以氘代试剂为内标,样品经乙腈萃取后,乙酸乙酯液液分配,强阴离子交换柱净化,正己烷液液分离,硅酸镁固相萃取柱净化,采用UPLC-MS/MS选择离子监测(selected ion monitoring,SIR)正离子模式测定,可对罗非鱼肌肉中甲基睾丸酮残留进行定性和定量检测,检出限为0.4μg/kg,定量限为1μg/kg。线性范围为1～60μg/kg(r>0.999),方法的平均回收率范围为71.06%～83.06%,相对标准偏差为7.4%～15.3%。完全满足食品安全及进出口罗非鱼肌肉中甲基睾丸酮残留的监控和检测需要。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 甲基睾丸酮罗非鱼肌肉

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温度与盐度对吉富品系尼罗罗非鱼仔鱼生长与存活的联合影响

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中国水产科学 2011年第6期18卷 1299-1307页

作者：强俊徐跑何杰李瑞伟南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 广东茂名茂南三高罗非鱼良种基地广东茂名525024

采用中心复合实验设计（CCD）和响应曲面方法（response surface methodology, RSM）, 探讨了温度（18-37℃）和盐度（0-16）对吉富品系尼罗罗非鱼（Oreochromis miloticus）仔鱼生长和存活的联合影响。结果表明, 本实验条件下, 温度与... 详细信息

采用中心复合实验设计（CCD）和响应曲面方法（response surface methodology, RSM）, 探讨了温度（18-37℃）和盐度（0-16）对吉富品系尼罗罗非鱼（Oreochromis miloticus）仔鱼生长和存活的联合影响。结果表明, 本实验条件下, 温度与盐度的一次与二次效应对特定生长率和存活率均有显著影响（P〈0.05）, 随着温度或盐度的上升, 生长与存活均呈先上升后下降的变化。温度与盐度间存在互作效应（P〈0.05）, 温度为18-20℃时, 仔鱼的特定生长率与存活率在盐度为8-9时较高; 随着温度上升, 27-32℃时, 盐度为5-7时较高; 高温环境时（35-37℃）, 盐度在4左右, 生长与存活率较高。所考察因子与生长和存活率间的二次多项回归方程的决定系数分别达到0.9796和0.9821 （P〈0.01）, 可用于预测罗非鱼的生长与存活率; 温度效应对生长的影响较盐度明显, 而对存活率的影响则相反。通过对所建立的两个回归方程同时优化, 得到2个因子的最佳组合为：温度29.1℃和盐度5.4, 在此最佳因子组合下罗非鱼仔鱼的特定生长率与存活率达到最优, 分别为10.08%d-1和91.34%, 其可靠性达0.973。建议罗非鱼仔鱼在本研究中得到的最优因子组合下进行培育, 以提高生产效率。

关键词：尼罗罗非鱼仔鱼生长存活中心复合设计响应曲面

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氨氮与拥挤胁迫对吉富品系尼罗罗非鱼幼鱼生长和肝脏抗氧化指标的联合影响

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水产学报 2011年第12期35卷 1837-1848页

作者：强俊徐跑何杰王辉李瑞伟南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室广东海洋大学水产学院广东茂名茂南三高罗非鱼良种基地

采用中心复合试验设计(CCD)和响应曲面方法(response surface methodology,RSM),探讨了氨氮(0.02～2.00 mg/L)和养殖密度(1～5尾/10 L)对吉富罗非鱼幼鱼生长和肝脏抗氧化指标的联合影响。结果表明,本试验条件下,氨氮和养殖密度的一次与... 详细信息

采用中心复合试验设计(CCD)和响应曲面方法(response surface methodology,RSM),探讨了氨氮(0.02～2.00 mg/L)和养殖密度(1～5尾/10 L)对吉富罗非鱼幼鱼生长和肝脏抗氧化指标的联合影响。结果表明,本试验条件下,氨氮和养殖密度的一次与二次效应对特定生长率有显著影响(P<0.05),随着氨氮或养殖密度的上升,特定生长率呈先上升后下降的变化。氨氮与养殖密度之间存在互作效应(P<0.05),氨氮浓度为0.02～0.20 mg/L,养殖密度在1～2尾/10 L时,幼鱼特定生长率较高;而氨氮浓度高于0.20 mg/L,养殖密度在3尾/10 L左右时,生长速度较快。肝脏丙二醛(MDA)含量随氨氮浓度和养殖密度的上升而上升,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力呈先上升后下降的变化。氨氮与养殖密度的一次效应对MDA含量和两种酶活力均有显著影响(P<0.05),二次效应对两种酶活力的表达有极显著影响(P<0.01);氨氮与养殖密度对CAT活力有互作效应,高浓度氨氮与高养殖密度环境会抑制SOD和CAT活力的表达。因子与响应值间二次多项回归方程的决定系数分别达到0.972 4、0.913 2、0.938 9和0.969 2(P<0.01),可用于预测;氨氮效应对生长和抗氧化酶活力的影响较养殖密度明显。建议在罗非鱼的养殖过程中合理安排好养殖密度,保持溶氧充足,降低氨氮胁迫,提高罗非鱼的生长与抗病力。

关键词：尼罗罗非鱼氨氮拥挤生长抗氧化酶响应曲面

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美洲鲥的人工繁殖及胚胎发育的研究

美洲鲥的人工繁殖及胚胎发育的研究

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2011年中国水产学会学术年会

作者：徐钢春顾若波聂志娟张呈祥中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

2007年至2009年间,利用深井水及设有钢架保温大棚的土池成功进行了美洲鲥(Alosasapidissima)的亲鱼培育与人工繁殖的研究,同时观察了美洲鲥的胚胎发育过程。结果表明:2龄美洲鲥在池塘中经专池培育并采用激素+不饱和脂肪酸+维生素E投喂... 详细信息

2007年至2009年间,利用深井水及设有钢架保温大棚的土池成功进行了美洲鲥(Alosasapidissima)的亲鱼培育与人工繁殖的研究,同时观察了美洲鲥的胚胎发育过程。结果表明:2龄美洲鲥在池塘中经专池培育并采用激素+不饱和脂肪酸+维生素E投喂、水流刺激等培育措施使雌雄鱼的性腺成熟率达60%～80%。性腺成熟的亲鱼经生态调控促使产卵或人工催产繁殖,生态调控促使产卵中水温保持在16～23℃,池水始终保持流动状态,50对美洲鲥亲鱼自4月中下旬至5月底陆续产卵,共收集鱼卵9.0万粒,平均受精率10%,孵化率70～80%;人工催产试验中,采用LHRH-A2+鱼类催产助剂、LHRH-A2+HCG+DOM+鱼类催产助剂和LHRH-A2+HCG+鱼类催产助剂三种催产剂配伍,背鳍基部两针注射法,催产率20%～100%,获卵10.57万粒,受精率0%～21.5%,孵化率0～70%。美洲鲥受精卵呈卵圆形,卵膜径为(4.03±0.25)mm,根据胚胎的外形与内部主要特征,胚胎发育分为7个生理阶段30个具体发育时期,在水温(20±1)℃下,历时约71h40min完成整个胚胎发育过程。

关键词：美洲鲥(Alosa sapidissima) 人工繁殖胚胎发育

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青虾Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆、序列特征及表达分析

青虾Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆、序列特征及表达分析

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2011年中国水产学会学术年会

作者：张响傅洪拓乔慧吴滟龚永生蒋速飞熊贻伟张文宜南京农业大学渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

本研究首次从青虾(Macrobrachium nipponense)精巢中克隆得到Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子(Kazal-type serine proteinase inhibitor,KSPI)基因的全长cDNA序列。青虾KSPI基因cDNA全长890 bp,3'端非编码区(3'UTR)为546 bp,5'UTR为80 bp,开放阅读框(ORF)为264bp,共编码87个氨基酸。预测蛋白包含1个由22个氨基酸组成的信号肽和1个保守的Kazal型结构域(CⅠX5CⅡX(6)VCⅢX(5)TYXNXCⅣX6CVXl2CⅥ),结构域中Pl活性位点为苏氨酸残基。将青虾KSPI与已报道的虾类14种KSPI氨基酸序列进行系统进化分析,结果表明,青虾KSPI与同样来源于精巢的罗氏沼虾KSPI进化关系最近聚为一支,其他虾类来源于肝胰腺和血细胞的KSPI聚为另外两支。定量PCR技术检测KSPI基因在心脏、精巢、卵巢、脑、肝脏及肠中的组织分布情况,结果显示,KSPI在肝脏、脑及肠中仅有微量表达,在精巢、心脏和卵巢中有较高表达,其中精巢表达水平极高。

关键词：青虾精巢丝氨酸蛋白酶抑制因子 cDNA 定量PcR

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黄河流域青虾遗传多样性分析

黄河流域青虾遗传多样性分析

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2011年中国水产学会学术年会

作者：吕丁傅洪拓蒋速飞乔慧吴滟龚永生熊贻伟李真南京农业大学渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

本文采用20个微卫星分子标记对黄河流域7个青虾群体进行了遗传多样性分析,采样点包括东营,济南,东明,济源,三门峡,偏关,银川。结果表明:7个青虾群体平均等位基因数(A)为4.2643,平均有效等位基因数(Ne)为2.6682;20个位点平均多态信息含量... 详细信息

本文采用20个微卫星分子标记对黄河流域7个青虾群体进行了遗传多样性分析,采样点包括东营,济南,东明,济源,三门峡,偏关,银川。结果表明:7个青虾群体平均等位基因数(A)为4.2643,平均有效等位基因数(Ne)为2.6682;20个位点平均多态信息含量PIC为0.5575;7个群体期望杂合度平均值为0.5609,研究结果表明黄河青虾遗传多样性丰富。分子方差分析(AMOVA)结果显示,黄河青虾7个群体间6%遗传变异来自群体间,94%来自群体内,两两群体间Fst值在0.0172-0.0791之间,表明群体间已明显出现分化(P<0.05),但分化程度中等。Hardy-Weinberg平衡检验表明,7群体中有多个位点偏离Hardy-Weinberg平衡。各群体间遗传距离在0.0455-0.2223之间,UPGMA聚类分析表明,7个青虾群体可以分为2大类。黄河山东段的东营,东明群体最先聚为一起,然后与济南群体聚为一起,最后与黄河河南段的三门峡,济源群体聚为一大类。黄河山西段的偏关群体与黄河宁夏段的银川群体聚为另一大类。

关键词：黄河青虾微卫星遗传多样性

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