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中国海洋湖沼学会、中国动物学会鱼类学分会2012年学术研讨会

作者：孙庆亮危起伟薛超施德亮靳建波中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室湖北武汉430223 华中农业大学水产学院湖北武汉430070 中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室湖北武汉430223

研究了养殖密度对人工繁殖获得的秦岭细鳞鲑稚鱼生长的影响.试验共设置4个密度组(3000、5000、7000、10000尾/m3)，每组设置3个平行，实验对象为18～20日龄的人工繁殖秦岭细鳞鲑稚鱼，每10天测量一次生长数据，实验期间依次投喂丰年虫... 详细信息

研究了养殖密度对人工繁殖获得的秦岭细鳞鲑稚鱼生长的影响.试验共设置4个密度组(3000、5000、7000、10000尾/m3)，每组设置3个平行，实验对象为18～20日龄的人工繁殖秦岭细鳞鲑稚鱼，每10天测量一次生长数据，实验期间依次投喂丰年虫→丰年虫+水蚯蚓→水蚯蚓→水蚯蚓+颗粒饲料→颗粒饲料.结果显示：(1)养殖密度对死亡率的影响显著;(2)养殖密度对肥满度(CF)影响不显著;(3)不同养殖密度、不同阶段均会对特定生长率(SGR)产生显著性影响;(4)养殖密度无论是对体长还是体重的变异系数(CV)的影响均不显著。综上，秦岭细鳞蛙稚鱼适宜的养殖密度为5000～7000尾/m3.

关键词：细鳞鲑稚鱼养殖密度人工繁殖生长发育

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养殖密度对秦岭细鳞鲑稚鱼生长的影响

养殖密度对秦岭细鳞鲑稚鱼生长的影响

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中国海洋湖沼学会鱼类学分会、中国动物学会鱼类学分会2012年学术研讨会

作者：孙庆亮危起伟薛超施德亮靳建波中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室华中农业大学水产学院

研究了养殖密度对人工繁殖获得的秦岭细鳞鲑稚鱼生长的影响。试验共设置4个密度组（3000、5000、7000、10000尾/m）,每组设置3个平行,实验对缘为18～20日龄的人工繁殖秦岭细鳞鲑稚鱼,用循环的山泉水混合有曝气井水养殖

关键词：秦岭细鳞鲑养殖密度肥满度特定生长率变异系数

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长江口明珠湖底栖动物群落时空格局及其水质评价

长江口明珠湖底栖动物群落时空格局及其水质评价

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2012年中国水产学会学术年会

作者：胡忠军张颖陈细华彭自然陈立婧刘其根上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室中国水产科学研究院长江水产研究所

2006年7月—2008年4月对上海崇明明珠湖底栖动物进行了季节调查。共采集到隶属4门的33种底栖动物,其中以节肢动物物种数最多,占45.5%。聚类分析结果表明,底栖动物物种组成无空间差异,但以季节聚成2类群落:冬季的红裸须摇蚊群落和春夏秋... 详细信息

2006年7月—2008年4月对上海崇明明珠湖底栖动物进行了季节调查。共采集到隶属4门的33种底栖动物,其中以节肢动物物种数最多,占45.5%。聚类分析结果表明,底栖动物物种组成无空间差异,但以季节聚成2类群落:冬季的红裸须摇蚊群落和春夏秋季的霍甫水丝蚓群落。底栖动物年均密度和生物量分别为1650.3±216.6ind·m-2和3.32±0.58g·m-2。双因素方差分析表明,底栖动物密度、生物量及各种多样性指数在空间上无显著差异,但在季节间差异显著或接近显著水平。在5种摄食功能群中,直接收集者在物种数(51.52%)、密度(85.7%)和生物量(75.0%)上均占绝对优势。RDA分析表明,水温和溶氧是影响底栖动物时空分布格局的主要环境因子,红裸须摇蚊水温低的季节出现,霍甫水丝蚓主要生活在水温较高、溶解氧和透明度较低环境中,微小摇蚊主要出现在pH值和溶解氧较高的生境中。采用Shannon多样性指数、Goodnight-Whitley指数、Wright指数、Carlander生物量指数、BPI指数及BI指数对明珠湖水质进行的评价结果表明,该湖水质等级属于中污染水平,已达轻度富营养化。

关键词：上海崇明岛大型底栖无脊椎动物群落结构现存量生物多样性时空变化水质生物学评价

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网箱养殖圆口铜鱼血液生化及急性应激反应特征

网箱养殖圆口铜鱼血液生化及急性应激反应特征

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2012年全国博生研究生学术论坛——可持续的水产养殖：理论与实践

作者：赵建华朱永久杨德国陈建武何勇风冯宪斌李茜中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室武汉430223 华中农业大学水产学院武汉430070 中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室武汉430223 华中农业大学水产学院武汉430070

圆口铜鱼因其肉嫩、味美、营养价值较高，曾是长江上游重要的经济鱼类。近年来，由于受过度捕捞，特别是水电工程设施建设等人类活动影响，其资源量急剧下降，甚至将面临灭绝境地。然而，由于圆口铜鱼对其固有的生活环境依赖程度较高，... 详细信息

圆口铜鱼因其肉嫩、味美、营养价值较高，曾是长江上游重要的经济鱼类。近年来，由于受过度捕捞，特别是水电工程设施建设等人类活动影响，其资源量急剧下降，甚至将面临灭绝境地。然而，由于圆口铜鱼对其固有的生活环境依赖程度较高，移养驯化过程中应激反应剧烈、极易感染小瓜虫病且死亡率较高。目前，圆口铜鱼的养殖仅限于长江沿岸的船体网箱养殖一种模式，且处于摸索阶段;除零星的试验性养殖外，尚未见室内驯养成功的报道。实验测定了网箱养殖状态下圆口铜鱼的血液皮质醇、葡萄糖糖、甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶等十项生化参数，并监测了不同程度急性操作胁迫前、后(0、1、4、12、24、72、120、168小时)圆口铜鱼血液的生理应激反应特征。结果显示，网箱养殖状态下，圆口铜鱼血浆皮质醇基础水平较高;与前人测定的野生群体相比，其血糖、甘油三酯含量亦明显偏高。在应激后的前24小时，圆口铜鱼血液皮质醇、血糖、乳酸和谷丙转氨酶水平先升高，而后恢复至应激前水平，表现出典型的急性应激反应特征。在应激后的24至168小时，高、低度空气暴露组圆口铜鱼均不同程度地感染了小瓜虫病，并表现出长期的、慢性应激反应特征。研究结果将为圆口铜鱼及其他鱼类，特别是长江上游珍稀特有鱼类的血液生理、健康评估、应激反应监测与缓解、人工繁育及物种保护等相关研究提供基础支持。

关键词：圆口铜鱼血液生化生理急性应激操作

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同域分布二倍体和四倍体泥鳅群体的遗传结构

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华中农业大学学报 2011年第5期30卷 624-630页

作者：周玲玲张桂蓉魏开建邹桂伟王卫民梁宏伟冉玮华中农业大学水产学院/农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室武汉430070 中国水产科学研究院长江水产研究所/农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室武汉430060

采用SRAP标记和线粒体DNA控制区测序方法对武汉和洞庭湖2个二倍体和四倍体泥鳅同域分布区4个泥鳅群体的遗传结构进行研究。SRAP分析结果表明,18对多态性引物组合在4个泥鳅群体中共检测到534个位点,每对引物组合检测的位点数为23～40个;... 详细信息

采用SRAP标记和线粒体DNA控制区测序方法对武汉和洞庭湖2个二倍体和四倍体泥鳅同域分布区4个泥鳅群体的遗传结构进行研究。SRAP分析结果表明,18对多态性引物组合在4个泥鳅群体中共检测到534个位点,每对引物组合检测的位点数为23～40个;各群体的Nei's基因多样性(h)和Shannon's信息指数(I)平均值分别为0.205～0.218和0.324～0.341,4个群体间的h以及I差异不明显;基于Nei's无偏遗传距离构建的UPGMA树显示,洞庭湖二倍体和四倍体泥鳅群体亲缘关系最近,先聚为一支,再与武汉四倍体泥鳅聚为一支,而武汉二倍体泥鳅聚为单独一支。测定了4个泥鳅群体40个个体线粒体DNA控制区序列片段(932～935bp),发现47个变异位点,共计29种单倍型。洞庭湖四倍体和二倍体泥鳅群体的核苷酸多样性(π)分别为0.898%和0.872%,明显大于武汉四倍体(π=0.465%)和二倍体(π=0.675%)。在同域分布二倍体和四倍体泥鳅群体中,洞庭湖四倍体遗传多样性略大于洞庭湖二倍体,武汉二倍体则明显大于武汉四倍体。AMOVA分析表明,泥鳅群体的遗传变异主要来自群体内(62.68%),群体间的变异达到37.32%;群体间成对固定指数FST及Kimura 2-parameter遗传距离均显示,洞庭湖四倍体与二倍体泥鳅群体无明显分化,其余群体间均存在显著分化。控制区序列单倍型Bayesian系统树与SRAP分析所揭示的4个泥鳅群体的亲缘关系相似。

关键词：泥鳅相关序列扩增多态性线粒体DNA控制区倍性遗传变异单倍型

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草鱼食用鱼不同颜色肝脏脂肪肝程度的判断

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2011年第5期37卷 557-564页

作者：田娟文华曾令兵吴凡蒋明刘伟中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室湖北武汉430223

通过测定草鱼（Ctenopharyngodon idella）食用鱼不同颜色肝脏的水分和粗脂肪含量,并运用冰冻组织切片油红O染色技术对肝细胞进行染色,观察肝细胞脂肪滴的变化,利用Image-pro plus 6.0软件测定其阳性面积率,判断不同颜色肝脏的草鱼食用... 详细信息

通过测定草鱼（Ctenopharyngodon idella）食用鱼不同颜色肝脏的水分和粗脂肪含量,并运用冰冻组织切片油红O染色技术对肝细胞进行染色,观察肝细胞脂肪滴的变化,利用Image-pro plus 6.0软件测定其阳性面积率,判断不同颜色肝脏的草鱼食用鱼脂肪肝程度.结果表明：与草鱼正常肝相比,花肝、发白肝和发黄肝的水分含量分别降低6.30%、10.01%和14.17%（P〈0.05）,粗脂肪含量分别升高198.25%、331.00%和485.59%（P〈0.05）;参照人肝细胞脂肪变性级别的判断标准,正常肝、花肝、发白肝和发黄肝的级别分别评为1.10±0.30、2.30±0.20、3.40±0.50和4.00±0.20;经Image-pro plus6.0软件分析,花肝、发白肝和发黄肝阳性面积率分别是正常肝的3.92、6.31和7.32倍;以上指标经回归分析得到的回归方程为：肝脏粗脂肪含量（Y）与水分（X）：Y=-1.089 9X＋82.035 7,R2=0.989（P〈0.01）;阳性面积率（Y）与粗脂肪含量（X）：Y=0.970 2X-0.209 0,R2=0.973（P〈0.05）;粗脂肪含量（Y）与肝细胞脂肪变性级别（X）：Y=3.662 4X-1.788 6,R2=0.985（P〈0.01）;阳性面积率（Y）与肝细胞脂肪变性级别（X）：Y=3.622 4X-2.130 6,R2=0.996（P〈0.01）.结果证实,冰冻组织切片油红O染色技术对鱼类脂肪肝的判断具有较好的参考价值,结合阳性面积率与肝脏粗脂肪含量、肝细胞脂肪变性级别具有显著的正相关,本试验建议将草鱼肝细胞阳性面积率〉2%定义为脂肪肝,其级别评定标准：2%~7%为轻度脂肪肝,7%~12%为中度脂肪肝,〉12%为重度脂肪肝.

关键词：脂肪肝油红O染色法阳性面积率草鱼

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瓦氏黄颡鱼线粒体全基因组序列分析及系统进化

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遗传 2011年第6期33卷 627-635页

作者：李林梁宏伟李忠罗相忠呼光富张志伟朱媛媛邹桂伟华中农业大学水产学院武汉430070 农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室中国水产科学研究院长江水产研究所荆州434000 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心无锡214081

鲿科鱼类种类繁多,外形相似,形态学分类较为困难。为了给鲿科鱼类乃至鲇形目鱼类的系统进化研究积累基础资料,文章采用参照近缘物种线粒体基因组设计覆盖全基因组引物的方法,利用16对引物对瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)线粒体全... 详细信息

鲿科鱼类种类繁多,外形相似,形态学分类较为困难。为了给鲿科鱼类乃至鲇形目鱼类的系统进化研究积累基础资料,文章采用参照近缘物种线粒体基因组设计覆盖全基因组引物的方法,利用16对引物对瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)线粒体全基因组进行扩增,PCR产物转化到质粒后测序,最终获得线粒体基因组全序列,其全长为16 527 bp,包括2个rRNA基因、22个tRNA基因、13个编码蛋白质基因和一个非编码控制区。瓦氏黄颡鱼(***)线粒体基因组结构和基因排列顺序与现已公布的鲇形目鱼类完全一致,序列分析表明,与鲇形目其他种属间具有较高的同源性,与拟鲿属的同源性最高(91%)。利用鲇形目共4科6属9种及3个外群的线粒体全基因组序列,从线粒体基因组水平探讨了鲿科鱼类及其在鲇形目的系统进化地位,结果表明:鲿科鱼类的瓦氏黄颡鱼(***)、黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)、光泽黄颡鱼(Pelteobagrus nitidus)及越南拟鲿(Pseudobagrus tokiensis)构成一单系群;拟鲿属与黄颡鱼属的关系较近;黄颡鱼属中瓦氏黄颡鱼(***)与光泽黄颡鱼(***)的关系近于黄颡鱼(***)。

关键词：瓦氏黄颡鱼线粒体基因组基因定位序列分析

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草鱼呼肠孤病毒HZ08株VP4蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

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中国生物制品学杂志 2011年第12期24卷 1482-1485页

作者：曾伟伟王庆张乐生刘宝芹刘永奎石存斌曾令兵吴淑勤农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室中国水产科学研究院长江水产研究所武汉430223 中国水产科学研究院珠江水产研究所广州510380

目的原核表达、纯化草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)HZ08株VP4蛋白,并制备其多克隆抗体。方法采用PCR法扩增GCRV HZ08株S6基因部分节段,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a-S6,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPT... 详细信息

目的原核表达、纯化草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)HZ08株VP4蛋白,并制备其多克隆抗体。方法采用PCR法扩增GCRV HZ08株S6基因部分节段,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a-S6,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体,采用间接ELISA法测定其效价,Western blot鉴定其特异性。结果重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;表达的目的蛋白相对分子质量约为51 000,表达量占菌体总蛋白的73%,主要以包涵体形式表达,反应原性良好;制备的多克隆抗体效价约为1∶8 000,且具有较高的特异性。结论成功制备了GCRV HZ08株VP4蛋白高效价多克隆抗体,为VP4蛋白功能的深入研究、抗原表位分析、草鱼出血病诊断方法的建立及相关基因工程疫苗的研发奠定了基础。

关键词：呼肠孤病毒草鱼 VP4蛋白多克隆抗体

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尼罗罗非鱼幼鱼饲料中钴需要量的研究

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湖北农业科学 2011年第19期50卷 4021-4025页

作者：刘伟文华蒋明吴凡田娟中国水产科学研究院长江水产研究所/农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室武汉430223

以CoCl2.6H2O为钴(Co)源,配制成Co含量为0.15、0.23、0.44、0.85、1.68、2.67、4.33 mg/kg的7组精制饲料,喂养尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼,研究饲料中的Co含量对其生长性能、饲料利用、全鱼体成分、血液指标及肝脏Co含量的影... 详细信息

以CoCl2.6H2O为钴(Co)源,配制成Co含量为0.15、0.23、0.44、0.85、1.68、2.67、4.33 mg/kg的7组精制饲料,喂养尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼,研究饲料中的Co含量对其生长性能、饲料利用、全鱼体成分、血液指标及肝脏Co含量的影响,以确定尼罗罗非鱼幼鱼饲料中Co的需要量。结果发现,饲料中的Co对尼罗罗非鱼幼鱼的平均末重、增重率、特定生长率、饲料效率、蛋白质效率均无显著影响(P﹥0.05);对尼罗罗非鱼幼鱼的体成分无显著影响(P﹥0.05);对血液指标和肝脏Co含量的影响显著(P﹤0.05),血红蛋白质量浓度、红细胞计数、肝脏Co含量随着饲料中Co含量的增加而增加。对红细胞计数的折线回归分析得出,饲料中Co的需要量为0.29 mg/kg;对肝脏Co含量的折线分析得出,饲料中Co的需要量为3.08 mg/kg。因此,尼罗罗非鱼幼鱼饲料中Co的需要量为0.30～3.00 mg/kg。

关键词：尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) 钴生长性能饲料利用血液指标全鱼体成分

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二倍体和四倍体泥鳅线粒体ND-5/6基因多态性的PCR-RFLP分析

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水生态学杂志 2011年第1期32卷 51-56页

作者：郑鹏飞张桂蓉魏开建邹桂伟王卫民周玲玲冉伟华中农业大学水产学院/农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室/农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室湖北武汉430070 中国水产科学研究院长江水产研究所/农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室湖北荆州434000

采用PCR-RFLP分析方法,对洞庭湖、武汉两地的二倍体和四倍体泥鳅线粒体DNAND-5/6基因多态性及4个群体遗传变异和遗传关系进行了研究。结果表明,120尾泥鳅mtDNAND-5/6扩增片段长度均为2.2kb;从13种限制性内切核酸酶中筛选出6种多态性内切... 详细信息

采用PCR-RFLP分析方法,对洞庭湖、武汉两地的二倍体和四倍体泥鳅线粒体DNAND-5/6基因多态性及4个群体遗传变异和遗传关系进行了研究。结果表明,120尾泥鳅mtDNAND-5/6扩增片段长度均为2.2kb;从13种限制性内切核酸酶中筛选出6种多态性内切酶(HaeⅢ、DraⅠ、RsaⅠ、TaqⅠ、HinfⅠ、MspⅠ),对扩增产物进行酶切,共检测到66种单倍型。泥鳅群体内单倍型多样性和核苷酸多样性分别为0.7679～0.9385和0.01041～0.03212;其中,洞庭湖二倍体核苷酸多样性最高(0.03212),武汉二倍体其次(0.02452),二倍体群体内核苷酸多样性高于四倍体。群体间的核苷酸多样性(π)大小为0.02588～0.04144,平均值为(0.031737±0.000005)。群体间的核苷酸歧化距离(δ)大小为0.00462～0.01617,平均值为(0.010659±0.000003);其中,武汉二倍体和四倍体之间的核苷酸歧化距离最大(0.01617),武汉四倍体和洞庭湖二倍体之间的核苷酸歧化距离最小(0.00462)。MonteCarlo模拟x2检验表明,4个群体间的单倍型频率存在极显著差异(P<0.0001)。UPGMA聚类分析表明,武汉四倍体、洞庭湖二倍体和四倍体聚为一支,亲缘关系较近;武汉二倍体为单独一支。

关键词：泥鳅二倍体四倍体 RFLP mtDNA ND-5/6

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