检索结果-内蒙古大学图书馆

小反刍兽疫研究进展

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中国预防兽医学报 2003年第2期25卷 152-155页

作者：信爱国杨仁标向文彬农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南昆明650224

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的一种严重的烈性、接触性的重大跨国动物疫病。本文从病原学 ,流行病学 ,诊断学和预防控制等方面 ,综述了该病研究现状和研究进展。目前该病在印度等南亚邻近国家存在 ,对我国构成潜在的威胁。

关键词：小反刍兽疫病原学流行病学诊断预防控制

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禽I型副粘病毒f基因克隆及序列分析

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中国病毒学 2003年第2期18卷 141-145页

作者：宋建领赵文华杨斌张永仙王金萍信爱国朱建波丛佩清农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南昆明650224

用RT-PCR一步法对云南省不同禽类(鸡、鸽子)3株禽I型副粘病毒F基因进行扩增和克隆,并对其f基因片段核苷酸序列进行分析,结果表明,云南省禽I型副粘病毒各毒株同源性为88.1%～94.9%,与疫苗株LaSota和强毒株F48E9的同源性为85.6%。所分离... 详细信息

用RT-PCR一步法对云南省不同禽类(鸡、鸽子)3株禽I型副粘病毒F基因进行扩增和克隆,并对其f基因片段核苷酸序列进行分析,结果表明,云南省禽I型副粘病毒各毒株同源性为88.1%～94.9%,与疫苗株LaSota和强毒株F48E9的同源性为85.6%。所分离两株新城疫病毒在F蛋白裂解位点区(112～117aa)的氨基酸序列与强毒株在这一区域的序列完全相同,表明为强毒株。鸽I型副粘病毒F蛋白裂解位点区的氨基酸序列与PPMV ZQ98-1株在这一区域的序列完全相同,揭示为中强毒株。以1 662bp核苷酸绘制系统发育树,表明云南地方新城疫病毒属于基因Ⅶ型,鸽I型副粘病毒属于基因Ⅵ型。

关键词：禽Ⅰ型副粘病毒 f基因基因克隆序列分析 RT-PCR一步法同源性系统发育

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口蹄疫病毒群特异性RT-LAMP检测技术的建立及试用撤回

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中国动物传染病学报 2020年

作者：谢佳芮寇美玲苗海生云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室农业农村部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室

为实现对口蹄疫病毒（FMDV）感染的现场快速检测，本研究于GenBank下载全球具有代表性的107条血清O型、A型和Asia-1型FMDV基因组序列，截取并比对FMDV高度保守的3D（RNA聚合酶）基因序列，设计17套环介导等温扩增引物，并对反应体系和... 详细信息

为实现对口蹄疫病毒（FMDV）感染的现场快速检测，本研究于GenBank下载全球具有代表性的107条血清O型、A型和Asia-1型FMDV基因组序列，截取并比对FMDV高度保守的3D（RNA聚合酶）基因序列，设计17套环介导等温扩增引物，并对反应体系和反应条件进行优化，建立FMDV群特异性RT-LAMP技术。该技术在反应前用石蜡密封PicoGreen染料，实现了免开盖可视化判定检测结果；该技术对PRV、PRRSV、AKAV、BTV-1、BTV-16、EHDV、CHUV等偶蹄动物病毒未见非特异性扩增；最低可检测3.4×10-6 ng/μL的病毒RNA，灵敏度是RT-qPCR技术的10倍，是一步法RT-PCR的100倍；尝试应用RT-LAMP对94份RNA临床样品进行检测比对，该检测方法与RT-PCR方法和RT-qPCR 方法对临床样品检测的符合率均为82.8%。本研究建立的FMDV群特异性RT-LAMP快速核酸检测技术，具有准确性高、快速简便的优点，可用作家畜FMDV早期感染的现场诊断技术。

关键词：口蹄疫病毒环介导等温核酸扩增群特异性引物

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口蹄疫病毒群特异性RT-LAMP检测技术的建立及试用

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中国动物传染病学报 2020年

作者：谢佳芮寇美玲苗海生云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室农业农村部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室

为实现对口蹄疫病毒（FMDV）感染的现场快速检测，本研究于GenBank下载全球具有代表性的107条血清O型、A型和Asia-1型FMDV基因组序列，截取并比对FMDV高度保守的3D（RNA聚合酶）基因序列，设计17套环介导等温扩增引物，并对反应体系和反应条件进行优化，建立FMDV群特异性RT-LAMP技术。该技术在反应前用石蜡密封PicoGreen染料，实现了免开盖可视化判定检测结果；该技术对PRV、PRRSV、AKAV、BTV-1、BTV-16、EHDV、CHUV等偶蹄动物病毒未见非特异性扩增；最低可检测3.4×10-6ng/μL的病毒RNA，灵敏度是RT-qPCR技术的10倍，是一步法RT-PCR的100倍；尝试应用RT-LAMP对94份RNA临床样品进行检测比对，该检测方法与RT-PCR方法和RT-qPCR 方法对临床样品检测的符合率均为82.8%。本研究建立的FMDV群特异性RT-LAMP快速核酸检测技术，具有准确性高、快速简便的优点，可用作家畜FMDV早期感染的现场诊断技术。

关键词：口蹄疫病毒环介导等温核酸扩增群特异性引物

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环介导等温扩增技术的最新研究进展

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畜牧与兽医 2021年第2期53卷 119-125页

作者：谢佳芮寇美玲苗海生云南省畜牧兽医科学院/云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室/农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南昆明650224

环介导等温核酸扩增技术是一种新型的核酸扩增技术,其核心原理是对靶基因片段的6个区域设计3对引物,实现对靶基因片段地快速、高效扩增。该技术目前已广泛的运用于一些领域。通过简述该技术的原理方法,在一些领域的运用,总结该技术国内... 详细信息

环介导等温核酸扩增技术是一种新型的核酸扩增技术,其核心原理是对靶基因片段的6个区域设计3对引物,实现对靶基因片段地快速、高效扩增。该技术目前已广泛的运用于一些领域。通过简述该技术的原理方法,在一些领域的运用,总结该技术国内外目前的研究进展以及改进措施,分析该技术未来的发展趋势,对环介导等温核酸扩增技术有一个全面的了解,以期为今后该技术的发展运用提供一定的参考依据。

关键词：环介导等温扩增技术应用及改进研究进展未来趋势

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口蹄疫病毒群特异性RT-LAMP检测技术的建立及试用

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中国动物传染病学报 2022年第3期30卷 119-126页

作者：谢佳芮寇美玲苗海生云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室农业农村部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室昆明650224

为实现对口蹄疫病毒(FMDV)感染的现场快速检测,本研究于GenBank下载全球具有代表性的107条血清O型、A型和Asia-1型FMDV基因组序列,截取并比对FMDV高度保守的3D(RNA聚合酶)基因序列,设计17套环介导等温扩增引物,并对反应体系和反应条件... 详细信息

为实现对口蹄疫病毒(FMDV)感染的现场快速检测,本研究于GenBank下载全球具有代表性的107条血清O型、A型和Asia-1型FMDV基因组序列,截取并比对FMDV高度保守的3D(RNA聚合酶)基因序列,设计17套环介导等温扩增引物,并对反应体系和反应条件进行优化,建立FMDV群特异性RT-LAMP技术。该技术在反应前用石蜡密封PicoGreen染料,实现了免开盖可视化判定检测结果;该技术对PRV、PRRSV、AKAV、BTV-1、BTV-16、EHDV、CHUV等偶蹄动物病毒未见非特异性扩增;最低可检测3.4×10;ng/μL的病毒RNA,灵敏度是RT-qPCR技术的10倍,是一步法RT-PCR的100倍;尝试应用RT-LAMP对94份RNA临床样品进行检测比对,该检测方法与RT-PCR方法和RT-qPCR方法对临床样品检测的符合率均为82.8%。本研究建立的FMDV群特异性RT-LAMP快速核酸检测技术,具有准确性高、快速简便的优点,可用作家畜FMDV早期感染的现场诊断技术。

关键词：口蹄疫病毒环介导等温核酸扩增群特异性引物

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蓝舌病毒野毒株及疫苗株S10基因多态性分析研究

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微生物学报 2003年第6期43卷 698-705页

作者：张以芳张念祖刘建平朱建波殷震云南农业大学动物科技学院昆明650201 农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室昆明650224 解放军军需大学军事兽医研究所长春130062

对中国蓝舌病毒 1株疫苗株、31株野毒株及 1株南非毒株进行测序。结果揭示 33株毒株S1 0基因核苷酸长度均为 82 2bp ,S1 0基因为基因内基因 ,其核苷酸链的第 2 0～ 2 2和 5 9～61位有两个起始密码子 ,共有终止子在 70 7～ 70 9位 ,预测... 详细信息

对中国蓝舌病毒 1株疫苗株、31株野毒株及 1株南非毒株进行测序。结果揭示 33株毒株S1 0基因核苷酸长度均为 82 2bp ,S1 0基因为基因内基因 ,其核苷酸链的第 2 0～ 2 2和 5 9～61位有两个起始密码子 ,共有终止子在 70 7～ 70 9位 ,预测编码NS3和NS3A两种蛋白 ;32株中国毒株间核苷酸差异 0～ 1 0 7个 ,同源性 86%～ 1 0 0 % ;NS3蛋白氨基酸差异 0～ 1 0个 ,同源性 95 6%～ 1 0 0 %。测序毒株与GenBank中 9株其它毒株比较 ,建立的S1 0基因系统发生树 ,将蓝舌病毒分为Chinagroup和USgroup两大基因群 ,两大群的同源性为 85 % ;USgroup包括美国 8株及南非 1株毒株 ;Chinagroup包括中国 32株及澳大利亚 1株毒株 ;说明蓝舌病毒S1 0基因分群与毒株的地理区域来源有关。在国内首次进行了全国较大范围内蓝舌病毒分子流行病学调查 ,揭示了我国蓝舌病毒毒株的遗传多样性。

关键词：蓝舌病毒系统进化基因多态性 S10基因

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用乙基环丙沙星重建受猪鼻支原体污染的BHK-21细胞的研究

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中国畜牧兽医 2011年第12期38卷 45-49页

作者：高林廖德芳姚俊肖雷李华春张念祖李志华云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南昆明650224

为重建受猪鼻支原体人为污染的BHK-21细胞,本研究采用含10mg/L乙基环丙沙星的培养液,对受污染的BHK-21细胞进行物理、化学相结合的循环处理,并用DNA荧光染色法和PCR法对处理进行全程监测。结果发现,4次循环处理并再传3代后,猪鼻支原体... 详细信息

为重建受猪鼻支原体人为污染的BHK-21细胞,本研究采用含10mg/L乙基环丙沙星的培养液,对受污染的BHK-21细胞进行物理、化学相结合的循环处理,并用DNA荧光染色法和PCR法对处理进行全程监测。结果发现,4次循环处理并再传3代后,猪鼻支原体污染已被彻底清除,细胞恢复了健康。此方法为抢救受支原体污染的细胞提供了参考。

关键词：乙基环丙沙星猪鼻支原体 BHK-21细胞清除污染

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用乙基环丙沙星重建受大肠杆菌污染的BHK-21细胞

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中国畜牧兽医 2011年第11期38卷 214-217页

作者：高林廖德芳姚俊张念祖李华春李志华云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南昆明650224

为重建受大肠杆菌污染的BHK-21细胞,本研究采用药物乙基环丙沙星,先测出该药对大肠杆菌的最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),再测出该药对BHK-21细胞的MIC,从而确定10mg/L为乙基环丙沙星不影响细胞生长,又能抑制大肠... 详细信息

为重建受大肠杆菌污染的BHK-21细胞,本研究采用药物乙基环丙沙星,先测出该药对大肠杆菌的最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),再测出该药对BHK-21细胞的MIC,从而确定10mg/L为乙基环丙沙星不影响细胞生长,又能抑制大肠杆菌的安全浓度。然后用含该浓度乙基环丙沙星的MEM生长液,对受污染的BHK-21细胞进行物理、化学相结合的循环处理。经过3次循环处理,再传3代后,确认大肠杆菌污染已经被彻底清除,细胞恢复了健康。此方法为抢救受细菌污染的细胞提供了参考。

关键词：乙基环丙沙星大肠杆菌 BHK-21细胞清除污染

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链特异性RT-PCR方法检测口蹄疫病毒负链RNA

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生物技术通报 2012年第1期28卷 130-133,144页

作者：王继华信爱国朱明旺苗海生胡骑廖德芳李乐李华春云南省保山疫苗厂保山678000 云南省畜牧兽医科学院农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南省热带亚热带动物病毒重点实验室昆明650224

旨在建立一种快速、灵敏、特异的检测口蹄疫病毒在复制过程中产生的负链RNA的方法。根据口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒5'-非编码区(5'-UTR)基因序列,设计了5条引物链特异性RT-PCR引物,建立检测口蹄疫病毒... 详细信息

旨在建立一种快速、灵敏、特异的检测口蹄疫病毒在复制过程中产生的负链RNA的方法。根据口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒5'-非编码区(5'-UTR)基因序列,设计了5条引物链特异性RT-PCR引物,建立检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法。提取FMD病毒RNA,应用设计的正向引物T1-H1做反转录引物,经反转录和RNA酶A消化后,再经两轮链特异性PCR扩增,可特异性地检测FMDV在复制过程中产生的负链RNA。所建立的检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法是一种可靠的方法,在确定细胞培养物和动物感染FMDV的病毒复制和了解病毒的致病性研究中具有应用前景。

关键词：口蹄疫病毒链特异性RT-PCR 复制中间体负链RNA 感染

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