检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2013年第10期40卷 37-41页

作者：宋庆庆朱杰丁平云段志强屠颉刘晓文刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

新城疫病毒Ⅰ系苗Mukteswar株为中等毒力,野外分离株JS/7/05/Ch的基因组核苷酸与其具有高于99%的相似性,但其毒力却明显强于前者。为了给基因Ⅲ型NDV的遗传进化机制研究提供基础,本研究成功构建了JS/7/05/Ch株的反向遗传平台。首先根据G... 详细信息

新城疫病毒Ⅰ系苗Mukteswar株为中等毒力,野外分离株JS/7/05/Ch的基因组核苷酸与其具有高于99%的相似性,但其毒力却明显强于前者。为了给基因Ⅲ型NDV的遗传进化机制研究提供基础,本研究成功构建了JS/7/05/Ch株的反向遗传平台。首先根据GenBank上公布的基因Ⅲ型新城疫病毒JS/7/05/Ch株基因组全序列设计并合成8对引物,RT-PCR扩增目的片段后,分别依次亚克隆至pCR2.1载体中构建含有JS/7/05/Ch全长基因组cDNA的克隆质粒pJS/7/05/Ch,然后再通过特异性酶切位点将JS/7/05株全长基因组cDNA转移到TVT7R(0.0)转录载体中,成功构建出含JS/7/05/Ch株基因组全长cDNA的转录质粒pTVT/JS705。然后将该质粒与3个辅助质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,转染60h后将该细胞及其上清接种鸡胚;血凝(HA)试验和RT-PCR结果表明JS/7/05/Ch株新城疫病毒被成功拯救。

关键词：新城疫病毒基因Ⅲ型反向遗传技术拯救

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H5N1亚型禽流感病毒HA糖基化位点缺失突变株的构建及生物学特性

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病毒学报 2013年第5期29卷 495-499页

作者：张晓剑李彦芳熊丽平陈素娟彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室禽类预防医学教育部重点实验室扬州225009

不同H5亚型禽流感(AIV)HA上糖基化位点的分布是不同的,然而不同糖基化位点对病毒的作用仍不十分清楚。本研究利用定点突变和反向遗传操作构建了3个不同糖基化位点单缺失突变病毒,并对其增殖特性和毒力进行了测定。结果表明,通过HA基因... 详细信息

不同H5亚型禽流感(AIV)HA上糖基化位点的分布是不同的,然而不同糖基化位点对病毒的作用仍不十分清楚。本研究利用定点突变和反向遗传操作构建了3个不同糖基化位点单缺失突变病毒,并对其增殖特性和毒力进行了测定。结果表明,通过HA基因序列测定和免疫印迹分析证实已成功去除了特定糖基化位点。158位糖基化位点缺失突变株rS△158在鸡胚中的EID50和MDCK细胞上TCID50比野生型rS略低,空斑直径显著减小;而单独去除169位和290位糖基化位点的rS△169和rS△290的EID50和TCID50略高于野生型rS,空斑直径相近,但空斑数要比后者高出10倍以上。所有突变株及野生型病毒在CEF上增殖速率相同,对SPF鸡均是高致病性的。因此,糖基化位点可影响病毒的体外增殖,但结果因细胞而异。

关键词： H5N1亚型禽流感 HA 糖基化位点突变

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鹅源坦布苏病毒SHYG株的分离与鉴定

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中国农业科学 2013年第5期46卷 1044-1053页

作者：潘金金邹晓艳李鑫宿春虎柴茂姜逸胡艳芬赵国王彦红石火英陈素娟彭大新扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学兽医学院

【目的】分离鹅源坦布苏病毒,并研究其对雏鹅的致病性。【方法】用RT-PCR方法对江苏省3个鹅场送检的产蛋期病鹅样品进行检测;对坦布苏病毒核酸阳性的样品进行病毒分离,测定分离病毒的生物学特性和E蛋白基因序列。【结果】这些样品中坦... 详细信息

【目的】分离鹅源坦布苏病毒,并研究其对雏鹅的致病性。【方法】用RT-PCR方法对江苏省3个鹅场送检的产蛋期病鹅样品进行检测;对坦布苏病毒核酸阳性的样品进行病毒分离,测定分离病毒的生物学特性和E蛋白基因序列。【结果】这些样品中坦布苏病毒呈阳性;从病料中分离鉴定一株病毒,命名为SHYG。E蛋白基因序列同源性比对显示其与中国鸭源坦布苏病毒同源性达到99.3%;生物学特性研究表明该病毒可致Vero细胞病变,对小鼠无致病性,接种2周龄雏鹅出现精神沉郁、腹泻、神经症状甚至死亡;组织学变化可见肝脏淤血、胆小管扩张、脂肪变性;肺淤血、炎性渗出及含铁血黄素沉着,脾脏网状内皮细胞空泡化,肾出血,脑充血、胶质细胞增生。【结论】坦布苏病毒SHYG株对雏鹅有较强的致病性。

关键词：鹅坦布苏病毒致病性

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禽流感-新城疫重组活载体疫苗研究进展

引用

中国家禽 2013年第4期35卷 38-40,44页

作者：丁平云刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

禽流感和新城疫是严重危害养禽业发展的两种主要病毒性传染病。由于禽流感病毒和新城疫病毒(NDV)流行毒株复杂、感染宿主范围广及传播途径多样,给防制带来很大困难。目前,对这两种疾病的防制主要依赖疫苗。近年来,随着反向遗传技术的发... 详细信息

禽流感和新城疫是严重危害养禽业发展的两种主要病毒性传染病。由于禽流感病毒和新城疫病毒(NDV)流行毒株复杂、感染宿主范围广及传播途径多样,给防制带来很大困难。目前,对这两种疾病的防制主要依赖疫苗。近年来,随着反向遗传技术的发展成熟,NDV常被作为病毒载体,用以携带外源基因,研制重组活载体疫苗,其中,用以表达禽流感病毒保护性抗原的研究成为热点之一。本文从多方面分析了NDV作为疫苗载体的优点,并就禽流感和新城疫重组活载体疫苗的研究进展作一综述。

关键词：新城疫病毒载体禽流感重组疫苗

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H9亚型禽流感与新城疫重组二联疫苗株的构建与拯救

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中国家禽 2013年第16期35卷 16-20页

作者：丁平云陈雨昕古小兵胡顺林陈坚刘晓文王晓泉陈鸿志刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

为研制H9亚型禽流感和新城疫的重组二联活疫苗,从农业部畜禽传染病重点开放实验室2012年分离的H9亚型禽流感病毒中选取一株具有代表性的流行株A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012(H9N2)作为HA基因的供体。在新城疫弱毒LX株反向遗传操作平台的... 详细信息

为研制H9亚型禽流感和新城疫的重组二联活疫苗,从农业部畜禽传染病重点开放实验室2012年分离的H9亚型禽流感病毒中选取一株具有代表性的流行株A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012(H9N2)作为HA基因的供体。在新城疫弱毒LX株反向遗传操作平台的基础上,构建了表达该株H9亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pLX-H9HA。拯救出的重组嵌合体病毒rLX/H9HA经间接免疫荧光鉴定,并对其生物学特性、安全性和免疫原性进行测定。结果表明:获救的重组病毒呈典型弱毒特征,同时保持了亲本毒株的高滴度生长特性和遗传稳定性,可作为H9亚型禽流感和新城疫二联活疫苗的候选株。

关键词：新城疫病毒禽流感病毒反向遗传二联疫苗

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H5N1亚型禽流感病毒进化的研究进展

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中国家禽 2013年第8期35卷 40-43页

作者：李彦芳彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院/农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

H5N1亚型禽流感病毒是重要的人兽共患病病原,其基因组为分节段的负股单链RNA,这种特殊的基因组结构使得流感病毒的进化机制跟其他病毒有所不同。本文对流感病毒的进化机制、H5N1亚型禽流感病毒的进化规律和生物信息学在流感病毒进化中... 详细信息

H5N1亚型禽流感病毒是重要的人兽共患病病原,其基因组为分节段的负股单链RNA,这种特殊的基因组结构使得流感病毒的进化机制跟其他病毒有所不同。本文对流感病毒的进化机制、H5N1亚型禽流感病毒的进化规律和生物信息学在流感病毒进化中应用等方面的研究进展予以综述。

关键词：禽流感病毒 H5N1亚型进化生物信息学

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一株鸽源绿铜绿假单胞菌的分离与鉴定

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上海畜牧兽医通讯 2014年第4期 54-55,57页

作者：赵振振许梦怡许静王彦红扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 江苏盱眙县兽医站江苏盱眙211700

2013年9月,镇江世业洲某鸽场鸽群暴发不明疫情,死亡率达到10%。对送检病死鸽进行剖检,有气囊炎、肝脏呈古铜色、肾肿大而苍黄等症状。无菌采取肝脏,脾脏进行病毒分离,未分离到病毒。无菌采取肝脏,成功分离到1株细菌,经分离培养、染色镜... 详细信息

2013年9月,镇江世业洲某鸽场鸽群暴发不明疫情,死亡率达到10%。对送检病死鸽进行剖检,有气囊炎、肝脏呈古铜色、肾肿大而苍黄等症状。无菌采取肝脏,脾脏进行病毒分离,未分离到病毒。无菌采取肝脏,成功分离到1株细菌,经分离培养、染色镜检、生化试验以及PCR分析,确诊为铜绿假单胞菌感染。对分离菌进行药敏试验,结果显示所分离的铜绿假单胞菌对强力霉素、多粘菌素等耐药,对氟哌酸敏感。

关键词：鸽铜绿假单胞菌 PCR检测耐药性

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转变防疫观念为现代畜牧业发展护航

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中国禽业导刊 2013年第14期30卷 8-9页

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

一H7N9流感在我国流行的特点．历史上，曾有多次人的大流行流感，造成了极大的灾难，其中最著名的1918年的西班牙流感为H1N1亚型，造成死亡人数5000万以上；1957年的亚洲流感为H2N2亚型，造成死亡人数200万以上；1968年的香港流感为H3N... 详细信息

一H7N9流感在我国流行的特点．历史上，曾有多次人的大流行流感，造成了极大的灾难，其中最著名的1918年的西班牙流感为H1N1亚型，造成死亡人数5000万以上；1957年的亚洲流感为H2N2亚型，造成死亡人数200万以上；1968年的香港流感为H3N2亚型，造成死亡人数近100万人。2009年大流行流感：数万人死亡。季节性流感有两种：H1N1亚型和H3N2亚型，均为当前全球发生的流感。禽流感主要分为：低致病性禽流感（H9N2亚型或其他亚型）和高致病性禽流感（H7亚型和H5亚型）。

关键词：高致病性禽流感牧业发展防疫观念 H1N1亚型 H3N2亚型低致病性禽流感死亡人数护航

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核磷蛋白B23与新城疫病毒M蛋白相互作用促进病毒的复制

核磷蛋白B23与新城疫病毒M蛋白相互作用促进病毒的复制

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：段志强陈坚许海旭何亮刘慧谋胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州 225009

M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核仁中,不仅持续抑制宿主细胞基因的... 详细信息

M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核仁中,不仅持续抑制宿主细胞基因的转录和翻译,还可调控病毒基因组的复制和转录;在病毒感染后期进入细胞质,协助子代病毒粒子的出芽和释放.但是目前对M蛋白的核仁定位机制、与核仁蛋白的相互作用及其对病毒的复制影响还不清楚.核仁素、核仁纤维蛋白和核磷蛋白B23是核仁中含量丰富且研究深入的三个蛋白,可介导蛋白的核仁定位并与具有核仁定位特性的病毒蛋白发生相互作用促进病毒的复制.本研究首先通过酵母双杂交方法在酵母体内证实核磷蛋白B23与M蛋白发生相互作用,并进一步通过GST pull-down、免疫共沉淀和荧光共定位证实两者的互作.对两个蛋白截短表达鉴定彼此相互作用结构域,发现B23蛋白通过其核酸结合结构域的aa188-245与M蛋白相互作用;M蛋白通过aa30-60与B23蛋白相互作用,同时该结构域介导M蛋白的核仁定位.此外,通过RNA干扰方法抑制DF1细胞内B23蛋白的表达或在DF1细胞内过表达B23蛋白均能显著抑制NDV的复制效率.以上结果证实,M蛋白通过其核仁定位信号基序结合B23蛋白进入核仁,并在核仁内持续破坏B23蛋白的结构与功能促进NDV的复制.

关键词：核磷蛋白B23 新城疫病毒 M蛋白相互作用

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规模化奶牛场结核病风险评估模型的建立和验证

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畜牧与兽医 2013年第8期45卷 95-99页

作者：王曲直沈素芳赵洪进唐文红刘佩红扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了降低规模奶牛场结核病的传播风险,在研究和确定影响奶牛场结核病传播和流行因素的基础上,采用"德尔菲法",从场址位置、场内布局、设施设备、饲养管理及卫生防疫、人员管理、监测和疫情发生史、经济因素等7个方面选出48项... 详细信息

为了降低规模奶牛场结核病的传播风险,在研究和确定影响奶牛场结核病传播和流行因素的基础上,采用"德尔菲法",从场址位置、场内布局、设施设备、饲养管理及卫生防疫、人员管理、监测和疫情发生史、经济因素等7个方面选出48项为风险因子,并确定每项因子的权重,用"定性风险分析"方法将风险级别划分为"高风险"、"中等风险"和"低风险"3个级别,从而建立"规模化奶牛场结核病风险评估模型"。通过验证和初步应用,表明该模型可以用来评价规模化奶牛场对结核病的防控水平,有利于对规模化奶牛场开展结核病风险管理工作。

关键词：奶牛场结核病风险评估模型

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