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禽细胞因子作为免疫佐剂的作用机理研究进展

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中国禽业导刊 2005年第15期22卷 36-37页

作者：薛峰邵卫星姚春峰刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

细胞因子是免疫系统的重要调节因子,病原感染或免疫接种诱导产生的细胞因子决定免疫反应的类型和程度。细胞因子作为一类新型分子免疫佐剂正成为研究热点,本文对几种禽细胞因子的生物学活性与功能作了综述。

关键词：细胞因子免疫佐剂机理研究小分子肽疫苗接种生物学活性免疫球蛋白免疫细胞免疫系统免疫反应

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无抗性表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌构建

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动物医学进展 2005年第7期26卷 45-48,68页

作者：杨健美张小荣高崧韦栋平刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550。经过质粒酶切分析和表达产物的SDSPAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目的蛋白仍与... 详细信息

利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550。经过质粒酶切分析和表达产物的SDSPAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目的蛋白仍与谷胱甘肽转移酶相融合,得到有效表达,重组融合蛋白的分子质量约为80ku。经体外连续传代试验,重组菌X4550(pFSFaeG)均能在无抗生素压力下大量扩增并稳定传代,质粒稳定性和蛋白表达稳定性良好。无抗性重组菌的成功构建解决了基因工程疫苗抗性基因潜在危险问题,并有望通过沙门氏菌载体的递送作用,为研制口服疫苗奠定了基础。

关键词：平衡致死系统基因敲除蛋白表达

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表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究

表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：杨健美高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

已构建的能表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx2eB-FaeG融合蛋白的重组菌BL21(pFSFaeG)和重组菌X4550(pFSFaeG),经IPTG诱导的重组菌制成抗原,经口服、及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,抗体检测结果表明,重组菌经灭活后免疫能够诱... 详细信息

已构建的能表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx2eB-FaeG融合蛋白的重组菌BL21(pFSFaeG)和重组菌X4550(pFSFaeG),经IPTG诱导的重组菌制成抗原,经口服、及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,抗体检测结果表明,重组菌经灭活后免疫能够诱导小鼠产生针对上述三种保护性抗原的特异性抗体IgG。免疫效力试验结果显示,两种重组菌的最佳免疫途径均为灭活后经腹腔免疫。

关键词：大肠杆菌 PWD ED 重组菌抗体检测免疫效力

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水禽流感病毒A/Duck/Yangzhou/44/02(H11N2)分离株表面膜蛋白基因的序列分析

水禽流感病毒A/Duck/Yangzhou/44/02(H11N2)分离株表面膜蛋白基因...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：张评浒薛峰唐应华钱忠明郝贵杰刘慧谋刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒所引起的各种家禽及野生禽类感染和/或疾病综合征[1]。根据其表面糖蛋白血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)和神经氨基酸酶(Neuraminidase,NA)的抗原关系不同,目前可分为16种HA亚型和9种NA亚型[2,3... 详细信息

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒所引起的各种家禽及野生禽类感染和/或疾病综合征[1]。根据其表面糖蛋白血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)和神经氨基酸酶(Neuraminidase,NA)的抗原关系不同,目前可分为16种HA亚型和9种NA亚型[2,3]。近几年来,南亚国家屡有禽流感病毒突破种间屏障作用,直接感染人类或其它哺乳动物,甚至致人死亡事件[4-6]的情况发生,因而赋予了禽流感全新的公共卫生学意

关键词：禽流感病毒序列分析 A/Duck/Yangzhou/44/02 H11N2 分离株

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禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的研制和初步应用

禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的研制和初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：唐应华张评浒薛峰刘晓文刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

目的:获得特异针对禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体。方法:以H9N2亚型病毒制成疫苗免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,取细胞上清用HI筛选。结果:共获得9株稳定分泌针对血凝素蛋白抗体的杂交瘤细胞;经广谱性和特异性鉴定,所有单抗... 详细信息

目的:获得特异针对禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体。方法:以H9N2亚型病毒制成疫苗免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,取细胞上清用HI筛选。结果:共获得9株稳定分泌针对血凝素蛋白抗体的杂交瘤细胞;经广谱性和特异性鉴定,所有单抗株均能与所有检测的82株不同年代不同地方不同禽源H9亚型流感病毒大部分分离株反应,且所有单抗株均不与非AIV-H9病毒反应,而其中一株(8E6)能与所有检测的H9亚型病毒株反应。进行Western blot分析显示,其中8株单抗能与AIV的Mr为75000kD处反应,表明是针对AIVH9HA的单抗。。结论:本试验获得9株广谱性特异性很好的单抗,特别是8E6株;这些单抗株为以后作病毒抗原性位点分析、临床检测和流行病学调查提供良好试剂。

关键词： H9亚型禽流感血凝素单克隆抗体 Western blot

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表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究

表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：杨健美高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

已构建的能表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx 2e B-FaeG融合蛋白的重组菌BL21(pFSFaeG)和重组菌X4550(pFSFaeG),经IPTG诱导的重组菌制成抗原,经口服、及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,抗体检测结果表明,重组菌经灭活后免疫能够... 详细信息

已构建的能表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx 2e B-FaeG融合蛋白的重组菌BL21(pFSFaeG)和重组菌X4550(pFSFaeG),经IPTG诱导的重组菌制成抗原,经口服、及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,抗体检测结果表明,重组菌经灭活后免疫能够诱导小鼠产生针对上述三种保护性抗原的特异性抗体IgG。免疫效力试验结果显示,两种重组菌的最佳免疫途径均为灭活后经腹腔免疫。

关键词：大肠杆菌 PWD ED 重组菌抗体检测免疫效力

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H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立

H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：龙进学吴艳涛张小荣王曲直刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

选择一株鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成其全基因组序列测定基础上,设计合成11对引物,分11段扩增病毒的8个基因。通过与线性化的转录载体PHW2000连接,构建了A/SD/04的8个基因的拯救载... 详细信息

选择一株鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成其全基因组序列测定基础上,设计合成11对引物,分11段扩增病毒的8个基因。通过与线性化的转录载体PHW2000连接,构建了A/SD/04的8个基因的拯救载体,经测序获得准确序列的拯救质粒:241、242、243、244、245、246、247和248。用获得的A/SD/04的8质粒与PR8(H1N1)的8个拯救载体进行组合,获得8个均含A/SD/04的HA基因的H5重组流感病毒。重组病毒的鸡胚尿囊液的血凝效价在28-210,EID50在10-8.5-10-9之间,MDT在34hrs-46hrs之间,均与野生A/SD/04(wt A/SD/04)相似。8个重组病毒对6周龄的SPF鸡的静脉接种指数与Wt A/SD/04有明显的差异,原因可能是内部基因组合的不同而影响病毒对鸡的毒力。成功构建的A/SD/04的8个质粒拯救系统,为H5N1的基因功能研究和新型疫苗开发奠定基础。

关键词： H5N1亚型禽流感病毒八质粒拯救系统病毒拯救重组病毒

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鸡外周血淋巴细胞中马立克氏病疫苗病毒生产性感染的动态研究

鸡外周血淋巴细胞中马立克氏病疫苗病毒生产性感染的动态研究

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：梁萍甘军纪吴长新吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

本试验通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析了HVT、CVI988疫苗免疫鸡外周血淋巴细胞(PBLC)表面MDV相关抗原的动态分布,发现1日龄一次免疫鸡在免疫后6天左右MDV抗原阳性的淋巴细胞数达到高峰(分别为11.42%和14.92%),随后很快下降并... 详细信息

本试验通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析了HVT、CVI988疫苗免疫鸡外周血淋巴细胞(PBLC)表面MDV相关抗原的动态分布,发现1日龄一次免疫鸡在免疫后6天左右MDV抗原阳性的淋巴细胞数达到高峰(分别为11.42%和14.92%),随后很快下降并维持很低的水平;7日龄一次免疫鸡在免疫后7天左右MDV抗原阳性淋巴细胞数也达到高峰(分别为13.62%和11.6%),随后也很快下降并维持很低的水平;而1日龄和7日龄二次免疫鸡在第一次免疫后7天左右阳性细胞数达到高峰(分别为7.92%和13.29%),在第二次免疫后7天左右又达到另一个抗原表达高峰(分别为15.99%和18.43%),随后也下降并维持很低的水平。说明再次接种的MD疫苗毒也从生产性感染开始进行增殖,在经一段时间后也转为潜伏感染。二次免疫使免疫鸡群受到了再一次大量免疫原的刺激,在第一次免疫记忆存在的基础下,获得了更强的体液和细胞介导的免疫应答,大大增强了机体抗肿瘤的免疫力。

关键词：马立克氏病流式细胞术生产性感染

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异种家禽红细胞悬液对禽流感病毒血凝抑制试验的影响

异种家禽红细胞悬液对禽流感病毒血凝抑制试验的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：张评浒唐应华仇旭升薛峰曹永忠高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

为了探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列的对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,... 详细信息

为了探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列的对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,但因处理复杂,费用高,不宜推广应用;经鸡红细胞吸附处理,可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用,但处理费时;而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体,可以有效去除血清非特异性凝集的影响,且更能准确的反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而,应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。

关键词：禽流感红细胞血凝血凝抑制异种家禽血清

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不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的影响

不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：张评浒唐应华薛锋刘晓文曹永忠高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

本研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻... 详细信息

本研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2免疫组理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

关键词：禽流感鸭 H5亚型油乳灭活苗免疫攻毒

来源：评论

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