检索结果-内蒙古大学图书馆

植物病理学报 2006年第2期36卷 109-115页

作者：龙海刘昊徐建华南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

象耳豆根结线虫是一种在中国具有潜在经济重要性的农作物病原物。为提供有助于控制象耳豆根结线虫传播扩散的方法,研制了该线虫的快速PCR鉴定和检测法。该方法PCR引物的扩增目标为rDNA-IGS2区域,其设计依据象耳豆根结线虫与南方、爪哇... 详细信息

象耳豆根结线虫是一种在中国具有潜在经济重要性的农作物病原物。为提供有助于控制象耳豆根结线虫传播扩散的方法,研制了该线虫的快速PCR鉴定和检测法。该方法PCR引物的扩增目标为rDNA-IGS2区域,其设计依据象耳豆根结线虫与南方、爪哇、花生和北方根结线虫在该区域核酸序列的差异。通过对6种近似根结线虫的不同地理群体及自然土壤线虫群体的测试,验证了设计的PCR引物针对象耳豆根结线虫的特异性和可靠性。本方法具有快速灵敏的特点,可用于象耳豆根结线虫单条线虫的直接鉴定以及混合土壤线虫群体中象耳豆根结线虫的检测。

关键词：象耳豆根结线虫 IGS2序列 PCR鉴定和检测法

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昆虫信息素结合蛋白及其分子运输机制和生理功能研究进展

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昆虫学报 2005年第5期48卷 778-784页

作者：修伟明董双林王荫长南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

昆虫信息素结合蛋白是气味结合蛋白多基因家族的一个分支,在昆虫识别性信息素过程中起重要作用。该文从信息素结合蛋白的分子特征、与信息素分子的结合及释放机制、生理功能和进化基因组学等方面进行了综述,针对鳞翅目昆虫进行了重点阐述。

关键词：昆虫信息素结合蛋白性信息素分子运输生理功能进化基因组学

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棉疫病菌诱导非寄主过敏反应激发子基因的克隆

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科学通报 2006年第22期51卷 2638-2643页

作者：李俊张海峰张正光王源超郑小波南京农业大学植保学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室

采用功能筛选策略从以PVX病毒载体建立的棉疫病菌(Phytophthora boehmeriae)cDNA文库中克隆了能诱导烟草产生过敏反应的激发子基因(片段).以农杆菌Mog101为宿主、利用PVX病毒表达载体构建了含有6800个单克隆的棉疫病菌cDNA文库,采用牙... 详细信息

采用功能筛选策略从以PVX病毒载体建立的棉疫病菌(Phytophthora boehmeriae)cDNA文库中克隆了能诱导烟草产生过敏反应的激发子基因(片段).以农杆菌Mog101为宿主、利用PVX病毒表达载体构建了含有6800个单克隆的棉疫病菌cDNA文库,采用牙签接种本氏烟(Nicotiana benthamiana),从4100个克隆中筛选到12个能引起烟草过敏反应的阳性克隆.对上述阳性克隆进行序列测定和分析,结果显示,其中7个与已知的基因具有较高的同源性,其中PBC43编码一个特异的elicitin蛋白;PBC163编码一个Rab蛋白,与大豆疫霉的RAB同源性较高;PBC241编码抗增殖蛋白(prohibitin);PBN62编码一个热激蛋白60(HSP60).还有5个克隆在公共数据库中没有同源基因,提示可能是该病原菌特异的激发子基因.上述结果表明,利用病毒表达载体构建cDNA文库,用功能筛选策略可从棉疫病菌全基因组范围内筛选诱导烟草产生过敏反应的激发子基因,该方法可望为其他植物病原菌激发子基因的克隆提供技术平台.

关键词：棉疫病菌非寄主抗性过敏性反应 PVX病毒表达载体激发子

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枯草芽孢杆菌脂肽类抗生素发酵和提取条件

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中国生物防治 2007年第4期23卷 342-347页

作者：王帅高圣风高学文王娜王光强南京农业大学/农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

以枯草芽孢杆菌G1为出发菌株,研究了发酵过程中不同培养条件和培养基对该菌株产生脂肽类抗生素的影响。结果表明:最有利于脂肽类抗生素产生的发酵条件是初始pH7.0,接种量3%,发酵培养温度30℃,发酵时间38h时,而最佳培养基为Landy培养基... 详细信息

以枯草芽孢杆菌G1为出发菌株,研究了发酵过程中不同培养条件和培养基对该菌株产生脂肽类抗生素的影响。结果表明:最有利于脂肽类抗生素产生的发酵条件是初始pH7.0,接种量3%,发酵培养温度30℃,发酵时间38h时,而最佳培养基为Landy培养基。在提取脂肽类抗生素粗提物的过程中发现,加酸至pH4.0时脂肽类抗生素能够完全沉淀。在Landy培养基和上述发酵条件下,最多能产生脂肽类抗生素粗提物6.5g/L。利用HPLC技术对产生的脂肽类抗生素进行定量分析,结果表明产生纯的脂肽类抗生素最高达2.4g/L。

关键词：枯草芽孢杆菌脂肽类抗生素发酵提取

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杀虫剂对赤眼蜂的影响

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中国生物防治 2004年第2期20卷 81-86页

作者：李元喜南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

综述杀虫剂对赤眼蜂影响的测定方法、结果及影响因子,以及赤眼蜂的抗药性筛选方法和结果,并对今后有关研究提出了建议。

关键词：杀虫剂赤眼蜂抗药性

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麻疫霉对甲霜灵抗性的遗传研究

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南京农业大学学报 1997年第3期20卷 54-59页

作者：高智谋郑小波陆家云南京农业大学植保系病虫监测与治理农业部重点开放实验室

在实验室条件下研究了苎麻疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｂｏｅｈｍｅｒｉａｅＳａｗａｄａ）对甲霜灵抗性的特点和遗传规律。结果表明：苎麻疫霉易对甲霜灵产生抗性，抗性水平可达野生型亲本的１８００倍以上，但抗性遗传不稳定；抗... 详细信息

在实验室条件下研究了苎麻疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｂｏｅｈｍｅｒｉａｅＳａｗａｄａ）对甲霜灵抗性的特点和遗传规律。结果表明：苎麻疫霉易对甲霜灵产生抗性，抗性水平可达野生型亲本的１８００倍以上，但抗性遗传不稳定；抗甲霜灵（Ｍｒｔ）突变株ＥＣ３１的Ｍｒｔ性状在游动孢子后代中发生连续分离，其余突变株的Ｍｒｔ性状经一代单游动孢子分离后完全丧失；Ｍｒｔ单游动孢子株在不含甲霜灵的利马豆培养基（ＬＢＡ）平板上培养１０～１４ｄ后对甲霜灵的抗性下降或丧失，其游动孢子后代中Ｍｒｔ个体比例相应减少；而在含甲霜灵的ＬＢＡ上，Ｍｒｔ单孢株的Ｍｒｔ性状可以保持一个月以上，且随着与甲霜灵接触时间的增加，其游动孢子后代中Ｍｒｔ个体比例有上升趋势。

关键词：苎麻疫霉甲霜灵抗药性遗传

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拟寄生蜂的寄主标记研究进展

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昆虫学报 2006年第3期49卷 504-512页

作者：李国清南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

拟寄生蜂常借助寄主标记信息素(hostmarkingpheromone,HMP)来辨别已寄生寄主和健康寄主,避免过寄生和多寄生,减少后代的种内和种间竞争。寄主标记有外部标记、内部标记和“容器”及区域标记3种方式。HMP来源于拟寄生蜂的杜氏腺、毒腺、... 详细信息

拟寄生蜂常借助寄主标记信息素(hostmarkingpheromone,HMP)来辨别已寄生寄主和健康寄主,避免过寄生和多寄生,减少后代的种内和种间竞争。寄主标记有外部标记、内部标记和“容器”及区域标记3种方式。HMP来源于拟寄生蜂的杜氏腺、毒腺、输卵管、卵巢、卵或咽侧体,由触角或产卵器感受。目前已鉴定出几种拟寄生蜂的HMP,多数为饱和与不饱和烃类的混合物,但卡氏盾痣细蜂Dendroceruscarpenteri的HMP是保幼激素。拟寄生蜂对寄主标记的反应受HMP持效期,拟寄生蜂内部状况如载卵量、年龄、经验和学习,及外部条件如拟寄生蜂和健康寄主种群密度以及寄主种类的影响。本文还讨论了HMP研究的理论和实际意义。

关键词：拟寄生蜂寄主标记寄主标记信息素来源感受化学成分

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禾谷镰孢菌γ- 微管蛋白基因克隆及其与多菌灵抗药性关系分析

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植物病理学报 2005年第2期35卷 161-167页

作者：陈长军王建新周明国南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

根据禾谷镰孢菌参考菌株NRR[31084(PH-1)的γ-微管蛋白基因核苷酸序列设计5对引物，采用：PCR方法从禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵(MBC)的敏感菌株、室内诱导及田间多菌灵抗药性菌株中分段扩增测序，获得了γ-微管蛋白基因... 详细信息

根据禾谷镰孢菌参考菌株NRR[31084(PH-1)的γ-微管蛋白基因核苷酸序列设计5对引物，采用：PCR方法从禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵(MBC)的敏感菌株、室内诱导及田间多菌灵抗药性菌株中分段扩增测序，获得了γ-微管蛋白基因全序列。该基因全长1868bp，含有5个内元，编码一含493aa的多肽；与PH-1的γ-微管蛋白基因核苷酸序列同源性99％，存在10个差异核苷酸，与所编码的氨基酸序列同源性．100％；与其它7种真菌的γ-微管蛋白基因所编码的氨基酸序列同源性为31％-72％。中国的2个敏感菌株和4个抗药菌株的γ-微管蛋白基因序列完全相同，认为多菌灵抗药性与该微管蛋白变异无关。

关键词：禾谷镰孢菌 γ-微管蛋白基因多菌灵抗药性

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南方、爪哇和花生根结线虫的快速灵敏的PCR鉴定方法(英文)

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植物病理学报 2004年第3期34卷 204-210页

作者：孟庆鹏龙海徐建华南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

为了研制南方、爪哇和花生根结线虫快速灵敏的检测和鉴定方法 ,分别分离了 4个南方根结线虫和 3个爪哇根结线虫特异性的随机扩增多态性 DNA( RAPD)片段。在这些 RAPD标记 DNA序列的基础上 ,设计了多对 SCAR PCR引物 ,并用源于国内外的... 详细信息

为了研制南方、爪哇和花生根结线虫快速灵敏的检测和鉴定方法 ,分别分离了 4个南方根结线虫和 3个爪哇根结线虫特异性的随机扩增多态性 DNA( RAPD)片段。在这些 RAPD标记 DNA序列的基础上 ,设计了多对 SCAR PCR引物 ,并用源于国内外的南方、爪哇、花生、北方和象耳豆根结线虫群体验证其扩增特异性和灵敏度。最终确定了 3对高效扩增的SCAR引物 ,它们组合使用可以可靠灵敏地鉴定南方、爪哇和花生根结线虫。 3对引物的扩增灵敏度达 1 / 3条的二龄幼虫、雄虫或雌虫 ,这表明本研究研制的 PCR鉴定法可用于生产实践中土样和根样中 3种根结线虫快速灵敏的鉴定。

关键词：根结线虫鉴定 RAPD SCAR

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黄唇蜾蠃蜂蜂毒中两个过敏原全长基因的克隆、序列分析和表达

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昆虫学报 2008年第11期51卷 1129-1137页

作者：许俊峰韩召军南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

为了进一步研究透明质酸酶的过敏活性,利用昆虫杆状病毒成功地表达了黄唇蜾蠃蜂Rhynchium brunneum蜂毒的透明质酸酶。根据已报道的胡蜂科透明质酸酶和抗原5基因的氨基酸保守序列,设计合成简并引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技... 详细信息

为了进一步研究透明质酸酶的过敏活性,利用昆虫杆状病毒成功地表达了黄唇蜾蠃蜂Rhynchium brunneum蜂毒的透明质酸酶。根据已报道的胡蜂科透明质酸酶和抗原5基因的氨基酸保守序列,设计合成简并引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术扩增了黄唇蜾蠃蜂蜂毒透明质酸酶和抗原5的基因片段,利用RACE技术进一步获得了它们的全长基因(GenBank登录号分别为EU624135和EU624136)。按照过敏原的命名法则,分别命名为Rhy b 2和Rhy b 5。序列比对分析发现,这两个基因与胡蜂科的相应序列高度相似,说明对胡蜂蜂毒过敏的人群也可能对蜾蠃蜂蜂毒有交叉过敏反应。但进一步分析发现,黄唇蜾蠃蜂蜂毒透明质酸酶的B细胞决定表位显著不同,9个保守性氨基酸在蜾蠃蜂中仅保留了3个,而且缺乏两个关键的精氨酸;黄唇蜾蠃蜂蜂毒抗原5序列N端的二级结构和具有过敏活性的常见黄胡蜂Vespula vulgaris蜂毒的抗原5显著不同,有可能因此而缺失依赖其N端二级结构的B细胞决定表位。据此认为,蜾蠃蜂蜂毒透明质酸酶和抗原5很可能是天然弱化的过敏原,在过敏原特异性免疫治疗上具有潜在的应用价值。

关键词：黄唇蜾赢蜂透明质酸酶抗原5 基因克隆表达过敏原特异性免疫治疗

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