检索结果-内蒙古大学图书馆

南京农业大学学报 2003年第4期26卷 30-35页

作者：董宏平彭建令余晓江赵静王颖董汉松南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室

建立了从不同植物中克隆抗病性信号传导调控基因及检测其表达的方法 ,并优化了相关条件。用RT PCR和PCR方法从拟南芥、烟草、番茄、中华鳖中克隆了 7个信号传导通路中 18个调控基因的cDNA和DNA序列 ,它们分别是 :抗病基因Pto介导的蛋白... 详细信息

建立了从不同植物中克隆抗病性信号传导调控基因及检测其表达的方法 ,并优化了相关条件。用RT PCR和PCR方法从拟南芥、烟草、番茄、中华鳖中克隆了 7个信号传导通路中 18个调控基因的cDNA和DNA序列 ,它们分别是 :抗病基因Pto介导的蛋白激酶级联中的Pti4、Pti5和Pti6 ,细胞编程死亡通路中的Hin1和hsr2 0 3,水杨酸介导的系统性获得抗病性通路中的NPR1,乙烯信号通路中的ETR1、ERS1、CTR1、EIN2和ERF1,茉莉酸信号通路中的COI1,核黄素信号通路中的RFBP和LR ,脱落酸信号通路中的ABF3、ABF4和ABH1,以及调控不同信号通路的通调基因NDR1。进一步研究了这些基因表达的定量测定方法 :用细菌激发子harpinEa处理植物 ,提取RNA作为cDNA第1链合成的模板 ,以在真核生物中广泛同源和高度保守的细胞伸长翻译因子基因EF1α为内参 ,用半定量RT PCR法测定基因mRNA的积累 ,可以比较准确地检测不同基因的相对表达水平。

关键词：植物抗病性信号传导调控基因基因克隆基因表达检测方法半定量RT-PCR

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光照、湿度和培养基对苎麻疫霉卵孢子产生量的影响

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应用生态学报 1998年第3期9卷 286-290页

作者：高智谋郑小波陆家云南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室

采用３因素随机区组设计研究了光照、湿度和培养基对苎麻疫霉（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｂｏｅｈｍｅｒｉａｅ）卵孢子产生量的影响．结果表明，各因子对卵孢子产生量的影响效应大小次序为培养基＞光照＞湿度，其中培养基和光照两因子... 详细信息

采用３因素随机区组设计研究了光照、湿度和培养基对苎麻疫霉（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｂｏｅｈｍｅｒｉａｅ）卵孢子产生量的影响．结果表明，各因子对卵孢子产生量的影响效应大小次序为培养基＞光照＞湿度，其中培养基和光照两因子影响均在０．０１水平上显著．在供试的４种常用培养基上，卵孢子产生量的大小次序为：ＳＬＡ培养基（ＳＬＡ）＞利马豆培养基（ＬＢＡ）＞Ｖ６汁培养基（Ｖ６Ａ）＞澄清的Ｖ６汁培养基（Ｖ６Ｂ）．在设置的３种光照条件中，卵孢子产生量以连续黑暗处理最高，连续光照最低，光照与黑暗交替处理居中．３个试验因子间的所有互作对卵孢子产生量均有极显著的影响．在不同光照、湿度、培养基组合中，卵孢子产生量以低湿＋连续黑暗＋ＳＬＡ组合最高，低湿＋连续光照＋Ｖ６Ｂ组合最低．

关键词：苎麻疫霉卵孢子形成光照湿度培养基

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梨火疫菌(Erwinia amylovora)环腺苷酸受体蛋白基因(crp)的功能分析

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农业生物技术学报 2010年第5期18卷 827-835页

作者：刘倩倩于洋洋宋俊贤胡白石范加勤刘凤权南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室

梨火疫菌(Erwinia amylovora)可引起梨、苹果等蔷薇科(Rosaceae)植物的火疫病。在菊欧文氏菌(Erwinia chrysanthemi)中,由crp基因编码的环腺苷酸受体蛋白(cyclic adenosine monphosphate(cAMP)receptor protein,CRP)对果胶酶基因的表达调控和菌株致病性起着重要的作用。本研究首次鉴定并克隆出梨火疫菌中的crp同源基因,命名为Eacrp,并通过同源重组的方法,构建了梨火疫菌的crp基因突变体EaΔcrp以及互补子,进行了致病性、过敏性反应、胞外多糖、鞭毛运动等一系列相关表型的鉴定。结果表明,crp基因影响着梨火疫菌的致病性、胞外多糖、游动性、生长情况等多种生物学特性,然而,EaΔcrp仍能引起烟草过敏性反应,并且在过氧化氢敏感度以及沉降性、生物膜和AI-2信号分子的生成方面与野生型菌株相比差异明显。本研究结果说明,梨火疫菌crp基因对病菌的胞外多糖分泌、生长、游动性以及致病性方面具有关键作用。

关键词：梨火疫菌 crp基因致病性胞外多糖

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毒性基因缺失突变体Du728防治水稻白叶枯病作用机制初探

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南京农业大学学报 1998年第4期21卷 36-41页

作者：刘凤权王金生南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室

研究了稻白叶枯病菌毒性基因缺失突变体Ｄｕ７２８防治水稻白叶枯病的作用机制。结果表明，Ｄｕ７２８及其无细胞培养液对白叶枯病菌没有直接抑制作用。Ｄｕ７２８菌液拌种后不能从长出的幼苗各部位回收到目的细菌；浸根处理后Ｄｕ７２... 详细信息

研究了稻白叶枯病菌毒性基因缺失突变体Ｄｕ７２８防治水稻白叶枯病的作用机制。结果表明，Ｄｕ７２８及其无细胞培养液对白叶枯病菌没有直接抑制作用。Ｄｕ７２８菌液拌种后不能从长出的幼苗各部位回收到目的细菌；浸根处理后Ｄｕ７２８可通过维管束传导到上部叶片；叶面喷雾（下部３张叶片）后，１５ｄ内可从处理的叶片上回收到目的细菌，未处理叶片（第４叶）一直未回收到Ｄｕ７２８。先用Ｄｕ７２８喷雾处理水稻幼苗再接种白叶枯病菌（Ａｈｃ１１），白叶枯病的防治效果为４９．１％～５０．２％；当Ｄｕ７２８使用菌量达到１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ时，再增加浓度，防病效果增加甚微。这种防治效果主要表现为病叶率下降，而对病叶上的病斑长度影响不大。将Ｄｕ７２８和Ａｈｃ１１混合后接种，随着Ｄｕ７２８在混合液中比例的增加，防病效果逐渐增加。先接种Ａｈｃ１１再用Ｄｕ７２８处理，对白叶枯病基本无防治效果。这些结果表明：Ｄｕ７２８的作用机制主要是位点竞争，Ｄｕ７２８占据叶片上的侵染位点后，能部分阻止白叶枯病菌在叶片上的定殖侵入；但病原菌侵入后，Ｄｕ７２８不能阻止病原细菌在叶片细胞间的扩展。除位点竞争外，Ｄｕ７２８还能诱导稻苗产生对白叶枯病的抗性，诱抗效果为１９．３?

关键词：毒性基因缺失突变体水稻白叶枯病防治

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中国大豆疫霉菌群体遗传结构的RFLP分析

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中国农业科学 2011年第20期44卷 4190-4198页

作者：肖江涛苗苗高坤向桂林杨帅董莎萌王源超王克荣南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室

【目的】分析中国大豆疫霉菌的群体遗传结构,探索不同地区大豆疫霉菌群体间的亲缘关系。【方法】采用RFLP(restriction fragment length polymorphism)技术,对大豆疫霉菌进行群体遗传结构的分析;利用Popgene V1.32软件计算大豆疫霉菌群... 详细信息

【目的】分析中国大豆疫霉菌的群体遗传结构,探索不同地区大豆疫霉菌群体间的亲缘关系。【方法】采用RFLP(restriction fragment length polymorphism)技术,对大豆疫霉菌进行群体遗传结构的分析;利用Popgene V1.32软件计算大豆疫霉菌群体间的遗传相似度;利用NTSYSpc V2.10软件估算菌株间的遗传距离,并依据遗传距离构建UPGMA(unweighted pair-group method with arithmetic averages)系统树状图谱。【结果】采用探针PS127558对来自黑龙江、新疆和内蒙古等5个大豆疫霉菌地理群体的133个菌株的遗传多样性进行了分析,共得到25条杂交带,其中多态性条带为24个,占96%。黑龙江分别和新疆、内蒙古群体间遗传相似度较高。相对于黑龙江群体遗传结构的高度复杂性,新疆和内蒙古菌株的群体遗传结构则比较简单,分别有88.2%和100%的菌株分属于同一聚类组,且均有超过58%的菌株和部分黑龙江菌株指纹图谱完全相同。Shannon’s多样性指数也表明黑龙江群体的遗传多样性最为丰富。福建和其它群体之间的遗传相似度较低,且分别有45.5%和54.5%的福建群体都属于聚类组E和F,遗传背景较为单一。福建群体的Shannon’s多样性指数低于黑龙江和美国。美国和黑龙江群体之间的遗传相似度较高,且部分美国菌株和黑龙江菌株指纹图谱相同。【结论】新疆、内蒙古的大豆疫霉菌起源于黑龙江,福建的大豆疫霉菌可能为一个独立的进化分支或起源于其它地区。此外,中国和美国的大豆疫霉菌群体间存在菌源交流。

关键词：大豆疫霉根腐病大豆疫霉菌群体遗传起源 RFLP

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2个甜菜夜蛾信息素结合蛋白cDNA片段的克隆和序列分析

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中国农业科学 2005年第7期38卷 1501-1504页

作者：修伟明董双林苗慧穆兰芳南京农业大学/农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京农业大学/农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和S... 详细信息

通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和SexigPBP2,其分别由92个氨基酸残基和94个氨基酸残基组成。通过在GenBank中进行序列的同源性比较,表明这2个序列与已知几种昆虫的PBP氨基酸序列具较高同源性。

关键词：甜菜夜蛾信息素结合蛋白基因序列分析

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Bt棉叶对棉铃虫抗虫性的时空变化及气象因素的影响

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昆虫学报 2003年第3期46卷 299-304页

作者：孟凤霞沈晋良褚姝频南京农业大学农业部病虫监测与治理基础实验室

用叶片喂饲法 ,测定了转Bt基因棉不同叶位、不同生长时期的叶片对棉铃虫初孵幼虫抗虫性的时空变化 ,同时测定了大田和室内不同气象条件下生长的侧枝和苗期叶片对棉铃虫抗虫性的影响。结果表明 :转Bt基因棉R1 9 137株系主茎第 2～ 10叶... 详细信息

用叶片喂饲法 ,测定了转Bt基因棉不同叶位、不同生长时期的叶片对棉铃虫初孵幼虫抗虫性的时空变化 ,同时测定了大田和室内不同气象条件下生长的侧枝和苗期叶片对棉铃虫抗虫性的影响。结果表明 :转Bt基因棉R1 9 137株系主茎第 2～ 10叶的抗虫性最高 ,初孵幼虫处理 5天后的平均死亡率为 97 0 %～ 10 0 % ,为害级别在 1 0～ 1 1级 ;第 11～ 16叶的抗虫性明显下降 ,平均死亡率为 35 6 %～ 6 7 6 % ,存活幼虫以 2龄为主。 7月下旬、 8月下旬测定了不同部位侧枝叶片的抗虫性 ,平均死亡率分别为 30 9%～ 44 9%和 10 0 %～ 30 0 % ,抗虫效果进一步下降。试验结果还表明 ,在室内外不同气候条件下生长的Bt棉叶片的抗虫性有显著差异。讨论了Bt棉抗虫性时空变化的可能原因与Bt棉推广中气候条件的重要性。

关键词：转Bt基因棉棉铃虫叶片抗虫性时空变化气象因素

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Harpinxoo多克隆抗体制备、鉴定与应用

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中国农业科学 2005年第8期38卷 1570-1573页

作者：邵敏李明潘小玫王金生南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

以纯化harpinxoo蛋白为抗原免疫新西兰白兔,制备兔抗harpinxoo蛋白的多克隆抗体,经ELISA法测定抗体效价为1∶2000,经亲和层析纯化,Westernblot分析制备抗体与原核细胞体外表达的harpinxoo蛋白可以特异性结合,表明该抗体的特异性良好。... 详细信息

以纯化harpinxoo蛋白为抗原免疫新西兰白兔,制备兔抗harpinxoo蛋白的多克隆抗体,经ELISA法测定抗体效价为1∶2000,经亲和层析纯化,Westernblot分析制备抗体与原核细胞体外表达的harpinxoo蛋白可以特异性结合,表明该抗体的特异性良好。应用该抗体验证harpinxoo编码基因在转基因水稻中在翻译水平的正常表达。因此,兔抗harpinxoo抗体的成功制备,为进一步深入研究harpinxoo的生物学功能、细胞定位以及在其它植物中的表达等奠定基础。

关键词： Harpinxoo蛋白多克隆抗体 Western blot 转基因表达分析

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棉花黄萎病菌毒素结合位点初探

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棉花学报 2005年第1期17卷 29-32页

作者：刘凤权胡白石农业部病虫监测与治理重点实验室南京农业大学植保学院南京210095

以纯化的棉花黄萎病菌毒素(PLPC)免疫新西兰白兔制备了PLPC特异性抗血清。将PLPC(15μg·ml 1)用不同浓度的抗体(1～20μg·ml 1IgG)吸附后处理泗棉3号的切根苗,毒素所引起的症状都有不同程度的减轻。表明所制备的抗体在与毒素... 详细信息

以纯化的棉花黄萎病菌毒素(PLPC)免疫新西兰白兔制备了PLPC特异性抗血清。将PLPC(15μg·ml 1)用不同浓度的抗体(1～20μg·ml 1IgG)吸附后处理泗棉3号的切根苗,毒素所引起的症状都有不同程度的减轻。表明所制备的抗体在与毒素发生特异性免疫学反应的同时,可部分封闭毒素分子上与毒素受体结合的位点。利用竞争ELISA测定了泗棉3号幼苗子叶的质膜制剂与PLPC的结合活性。结果表明,质膜制剂与毒素结合后能部分阻断毒素与其抗体的免疫学反应,即质膜制剂中含有毒素的结合位点。分别用胰蛋白酶和煮沸处理质膜制剂后,质膜制剂对毒素与其抗体的反应的抑制作用消失,初步表明质膜制剂中与毒素结合的是蛋白质。

关键词：质膜棉花黄萎病毒素切根苗子叶幼苗新西兰白兔结合位点结合活性纯化

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植物病原细菌中活性氧的释放和调节

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科学通报 1998年第19期43卷 2068-2073页

作者：李红玉王金生南京农业大学植物保护学系农业部病虫监测与治理重点实验室南京210095

一些植物病原细菌 ,包括Xanthomonasoryzaepv .oryzae及其毒性基因突变体Xan thomonascampestrispv .campestris,Erwiniacarotovorasubsp .carotovora等自身具有产生O-2 ,H2 O2 等活性氧的功能 ,且受到Ca2 +、氧浓度及NADPH的调节 .热敏感分析表明 ,病原菌中产生活性氧的成分可能是特殊的蛋白或酶类 ,并且这些成分可分泌到培养液中 .以水稻白叶枯病菌为例研究发现 ,水稻组分对其活性氧释放具有明显诱导作用 .

关键词：植物病原细菌活性氧释放信号传递调节

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