检索结果-内蒙古大学图书馆

中外葡萄与葡萄酒 2010年第1期 4-10页

作者：张宗勤王跃进张剑侠王晶晶田贝贝于建娜高疆生农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学重点实验室西北农林科技大学陕西杨凌712100 塔里木大学新疆阿拉尔843300

以新疆地方葡萄品种木纳格栽培资源为对象,以品种选育为目标,研究了果实性状多样性。初步结果表明,果穗性状(果穗长、穗宽、果穗梗长、果穗重),果粒性状(单粒重、果粒纵横径、果梗长),果实商品性状(果实耐压力、果梗耐拉力、可溶性固形... 详细信息

以新疆地方葡萄品种木纳格栽培资源为对象,以品种选育为目标,研究了果实性状多样性。初步结果表明,果穗性状(果穗长、穗宽、果穗梗长、果穗重),果粒性状(单粒重、果粒纵横径、果梗长),果实商品性状(果实耐压力、果梗耐拉力、可溶性固形物含量),种子性状(种子数、种子鲜重)等指标,均获得了丰富的多样性,大部分多样性植株具有比对照木纳格更优良的特性,其中28、8、13和27号等株系综合性状较好,为进一步研究木纳格葡萄果实性状多样性植株的遗传稳定性及变异植株的生理、分子机理等奠定了材料基础。

关键词：木纳格果实性状多样性新疆阿克苏

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黄冠梨几丁质酶基因家族cDNA全长序列克隆与分析

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农业生物技术学报 2009年第6期17卷 1042-1049页

作者：刘栋峰张朝红王跃进农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学重点实验室西北农林科技大学园艺学院

根据已知植物几丁质酶基因序列的保守区域,设计特异性引物,以梨黄冠(Pyrus hybrid ***)品种叶片为材料,提取RNA,进行反转录,克隆获得5个几丁质酶基因cDNA片段,进一步通过RACE技术获得该基因的全长cDNA序列,依次命名为PyChi1、PyChi2、Py... 详细信息

根据已知植物几丁质酶基因序列的保守区域,设计特异性引物,以梨黄冠(Pyrus hybrid ***)品种叶片为材料,提取RNA,进行反转录,克隆获得5个几丁质酶基因cDNA片段,进一步通过RACE技术获得该基因的全长cDNA序列,依次命名为PyChi1、PyChi2、PyChi3、PyChi4和PyChi5,序列提交GenBanK,登录号为FJ589783、FJ589784、FJ589785、FJ589786和FJ589787。序列分析结果表明,所获得5个几丁质酶基因,都具有完整的ORF和Poly(A)结构,与其它植物几丁质酶基因具有较高的相似性;5个基因的核酸序列的同源性约在35%~53%之间,PyChi1和PyChi4的氨基酸同源性最高,约85%,而与PyChi5约77%;在几丁质酶基因家族分别属于ChitinaseClassesⅠ~Ⅴ,为5个不同类型的成员;不同类型的几丁质酶基因在核酸和氨基酸序列以及功能结构方面都存在着显著的差异,主要表现在肽链特性和基因结构等方面。

关键词：梨几丁质酶基因家族克隆 RACE

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中国野生葡萄醛脱氢酶基因在拟南芥中的过量表达

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果树学报 2009年第1期26卷 37-42页

作者：雷龑王跃进徐伟荣张方方余皓王西平农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学重点实验室西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

将质粒pWR306中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1300,构建了植物中间表达载体pWR-II;将重组质粒pGEM-T-ALDH的醛脱氢酶(ALDH)基因片段定向克隆到pWR-II,构建了葡萄ALDH基因的植物过量表... 详细信息

将质粒pWR306中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1300,构建了植物中间表达载体pWR-II;将重组质粒pGEM-T-ALDH的醛脱氢酶(ALDH)基因片段定向克隆到pWR-II,构建了葡萄ALDH基因的植物过量表达载体pWR-II-ALDH。采用改进冻融法将其导入农杆菌EHA105,采用花序浸蘸法转化拟南芥,获得了潮霉素抗性的转化拟南芥植株。PCR检测证明外源基因已整合进拟南芥基因组,Real-timePCR结果表明ALDH基因在转化植株的表达量远高于野生种。转化植株和野生植株在形态上有一定的差异,说明葡萄ALDH基因在拟南芥中表达对其生长发育有一定影响。

关键词：中国野生葡萄醛脱氢酶基因过量表达载体拟南芥

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风信子DFR基因全长cDNA的克隆及序列分析

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中国农学通报 2009年第24期25卷 62-67页

作者：祁银燕刘雅莉李莉王跃进西北农林科技大学园艺学院农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

以蓝色风信子完全露出蓝色的花蕾为材料,利用RT-PCR和RACE技术,获得风信子DFR基因的全长cDNA。该cDNA全长1252bp,开放阅读框为1098bp,编码366个氨基酸。Blast搜索结果显示,风信子DFR基因核苷酸序列与其它植物已报道的DFR基因具有66%～77... 详细信息

以蓝色风信子完全露出蓝色的花蕾为材料,利用RT-PCR和RACE技术,获得风信子DFR基因的全长cDNA。该cDNA全长1252bp,开放阅读框为1098bp,编码366个氨基酸。Blast搜索结果显示,风信子DFR基因核苷酸序列与其它植物已报道的DFR基因具有66%～77%的相似性,氨基酸序列有62%～73%的相似性。聚类分析表明,最先与风信子聚类合并的是鸢尾,其次与其它单子叶植物聚类,最后与双子叶植物聚类。

关键词： DFR cDNA克隆风信子基因

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华东葡萄抗白粉病杂种后代cDNA文库的构建及EST序列分析

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果树学报 2009年第2期26卷 151-157页

作者：朱自果王跃进史江莉王沛雅张朝红农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学重点实验室西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

以抗白粉病的华东葡萄杂种后代6-12-4株系为试材,利用SMARTTM技术构建了白粉病病原菌诱导的全长cDNA文库。经检测,原始文库滴度为2.50×106pfu·mL-1,重组率达到99%,扩增文库滴度为3.0×109pfu·mL-1,重组率达到95%,插... 详细信息

以抗白粉病的华东葡萄杂种后代6-12-4株系为试材,利用SMARTTM技术构建了白粉病病原菌诱导的全长cDNA文库。经检测,原始文库滴度为2.50×106pfu·mL-1,重组率达到99%,扩增文库滴度为3.0×109pfu·mL-1,重组率达到95%,插入片段长度在500～2000bp。随机挑取300个克隆,测序获得260条质量较高的ESTs,聚类及拼接后,共得到183个一致序列(所获序列已经提交GenBank,登录号为FG579859-FG580039)。经蛋白功能预测分析,获得含有TPR结构域的小的富含谷氨酰胺的蛋白、MYB类转录因子、水通道蛋白、富含脯氨酸蛋白、亲环素蛋白、ACI14蛋白、转脂蛋白等抗病相关基因,涉及到植物的信号转导,胁迫诱导,防卫反应等方面。这些EST序列为利用中国野生华东葡萄进行抗白粉病育种研究和利用提供了有价值的抗病基因片段,为丰富世界葡萄属植物抗白粉病基因提供序列数据。

关键词：葡萄 cDNA文库白粉病 EST

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百合花特异启动子PchsA表达载体的构建及功能分析

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2009年第2期37卷 135-140页

作者：常小丽刘雅莉王跃进徐伟荣张宗勤西北农林科技大学园艺学院农业部西北园艺植物种质资源与遗传改良重点开放实验室陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

【目的】分析从百合中克隆获得的查耳酮合成酶基因(chsA)启动子的组织表达特性。【方法】将chsA启动子片段插入到双元表达载体pCAMBIA 1381中,成功构建了植物表达载体pCAMBIA-CHS,通过根癌农杆菌EHA 105转化拟南芥,用50 mg/L潮霉素对转... 详细信息

【目的】分析从百合中克隆获得的查耳酮合成酶基因(chsA)启动子的组织表达特性。【方法】将chsA启动子片段插入到双元表达载体pCAMBIA 1381中,成功构建了植物表达载体pCAMBIA-CHS,通过根癌农杆菌EHA 105转化拟南芥,用50 mg/L潮霉素对转化植株进行筛选,对阳性植株进行PCR检测和GUS组织化学分析。【结果】PCR检测表明,chsA启动子片段已经整合到拟南芥基因组中,GUS组织化学分析显示,在拟南芥花序中有很强的GUS活性,叶腋处有微量表达,其他组织中不表达。【结论】初步证明百合chsA启动子为花特异表达启动子。

关键词：启动子 GUS基因植物表达载体拟南芥转化

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中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记的克隆、序列分析及辅助育种应用

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果树学报 2009年第4期26卷 456-460页

作者：张剑侠王跃进张艳艳周邦军农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学实验室西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

对中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记OPS03-1300进行了克隆、测序及序列分析,结果表明该标记实际长度是1354bp,因此更名为OPS03-1354,其GenBank登录号为DQ350885。该标记序列与99条来自欧洲葡萄的EST有同源性,其中与1条来自赤霞珠叶片... 详细信息

对中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记OPS03-1300进行了克隆、测序及序列分析,结果表明该标记实际长度是1354bp,因此更名为OPS03-1354,其GenBank登录号为DQ350885。该标记序列与99条来自欧洲葡萄的EST有同源性,其中与1条来自赤霞珠叶片感染葡萄皮尔斯病病原菌后获得的EST同源性为82%,与2条来自赤霞珠果实在不同发育期获得的EST同源性分别为80%和85%。该序列与1条来自中国野生华东葡萄白河-35-1叶片接种霜霉病病原菌后获得的EST同源性为67%。该序列编码葡萄的一种假定蛋白。此外,应用该标记对中国野生葡萄与欧洲葡萄的种间杂交广西-1×京可晶F1代339株、白河-35-1×佳利酿F2代207株进行了辅助选择。

关键词：中国野生葡萄抗黑痘病基因 RAPD标记克隆序列分析标记辅助育种

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秦岭山区野生猕猴桃资源遗传多样性分析

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2009年第7期37卷 129-134,139页

作者：魏艳霞王飞吕俊辉姚春潮刘利花胡英建西北农林科技大学园艺学院农业部西北园艺植物种质资源及遗传改良重点开放实验室/陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100 平顶山市林业技术推广站河南平顶山467000 西安市猕猴桃研究所陕西周至710400

【目的】利用有效的分子标记技术,对秦岭山区野生猕猴桃的遗传多样性及系统进化关系进行研究,为猕猴桃新种质的挖掘和品种遗传改良奠定基础。【方法】利用随机扩增多态性DNA标记（RAPD）技术,对采自秦岭山区的野生猕猴桃24个优良单株和... 详细信息

【目的】利用有效的分子标记技术,对秦岭山区野生猕猴桃的遗传多样性及系统进化关系进行研究,为猕猴桃新种质的挖掘和品种遗传改良奠定基础。【方法】利用随机扩增多态性DNA标记（RAPD）技术,对采自秦岭山区的野生猕猴桃24个优良单株和中华猕猴桃等6个种或变种及其品种的22份资源进行了遗传多样性和亲缘关系分析。【结果】通过引物筛选,用16个RAPD引物对46份猕猴桃资源扩增出235条带,其中227条为多态性条带,多态性位点比例为96.29%;各猕猴桃资源间的遗传距离为0.139 53-0.807 34;UPGMA聚类分析结果显示,‘野生99-13’与‘武植2号’、‘魁蜜’、‘金阳1号’、‘武植6号’、‘中华♂’和‘广西红肉’等中华系列猕猴桃（*** Planch.）聚在一起,其余23份野生猕猴桃与‘哑特’、‘秦美’、‘徐冠’、‘徐香’等猕猴桃品种遗传距离较近。【结论】24份秦岭野生猕猴桃资源中,‘野生99-13’属中华系列猕猴桃,其余23份均属于美味猕猴桃（*** ***）。

关键词：秦岭山区野生猕猴桃 RAPD 遗传多样性

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木纳格葡萄营养系变异初选研究

木纳格葡萄营养系变异初选研究

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第十五届全国葡萄学术研讨会

作者：张宗勤王跃进张剑侠王晶晶田贝贝于建娜高疆生农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室，陕西省农业分子生物学重点实验室，西北农林科技大学，杨凌 712100 塔里木大学，新疆阿拉尔 843300

以新疆地方葡萄品种木纳格栽培资源为对象，以品种选育为目标，以葡萄果实性状为指标，开展了营养系变异筛选研究，初步结果表明，果穗性状(果穗长、穗宽、果穗梗长、果穗重)，果粒性状(单粒重、果粒纵横径、果梗长)，果实商品性状(果... 详细信息

以新疆地方葡萄品种木纳格栽培资源为对象，以品种选育为目标，以葡萄果实性状为指标，开展了营养系变异筛选研究，初步结果表明，果穗性状(果穗长、穗宽、果穗梗长、果穗重)，果粒性状(单粒重、果粒纵横径、果梗长)，果实商品性状(果实耐压力、果梗耐拉力、可溶性固形物含量)，种子性状(种子数，种子鲜重)等指标考虑，都获得了丰富的变异，其中大部分变异系具有比对照木纳格更优良的特性一项至多项。其中28、8、13和27号等株系综合性状较好。为进一步研究初选变异系的遗传稳定性及变异的生理、分子机理等奠定了材料基础。

关键词：遗传稳定性果穗性状品种选育葡萄

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中国野生葡萄抗霜霉病基因RAPD标记的筛选

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果树学报 2008年第6期25卷 816-820页

作者：张艳艳张剑侠王跃进农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室陕西省农业分子生物学实验室西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

以抗病的中国野生华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)白河-35-1(Baihe-35-1)与感病的欧洲葡萄佳利酿(Carignane)杂交F2代为试材,从520条随机引物中筛选出21条可以扩增多态性DNA片断的随机引物,从中获得了6个抗霜霉病基因的RAPD标记,对这... 详细信息

以抗病的中国野生华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)白河-35-1(Baihe-35-1)与感病的欧洲葡萄佳利酿(Carignane)杂交F2代为试材,从520条随机引物中筛选出21条可以扩增多态性DNA片断的随机引物,从中获得了6个抗霜霉病基因的RAPD标记,对这些标记回收、克隆、测序后,将得到的6个标记分别记录为:S294-369,S202-527,S382-615,S221-677,S416-1224和S390-725。通过分析这6个RAPD标记在F2代植株中的表现,证明这些标记都与霜霉病抗性的基因有连锁关系。这将为葡萄抗霜霉病育种的分子标记辅助选择提供分子依据。

关键词：中国野生葡萄霜霉病抗病基因 RAPD标记

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