检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：于莹莹乔书培孙婴宁宋鹤张潇飞闫晓红李辉王宁农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室东北农业大学动物科学技术学院齐齐哈尔大学生命科学与农林学院

鸡IGFBP2基因1196C>A单核苷酸多态性(SNP)与肉鸡的腹脂重和腹脂率显著相关。该SNP位于IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR),生物信息学分析显示,该位点恰好位于gga-miR-456-3p的一个潜在靶基因结合区,提示该SNP位点可能是功能性SNP,它可... 详细信息

鸡IGFBP2基因1196C>A单核苷酸多态性(SNP)与肉鸡的腹脂重和腹脂率显著相关。该SNP位于IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR),生物信息学分析显示,该位点恰好位于gga-miR-456-3p的一个潜在靶基因结合区,提示该SNP位点可能是功能性SNP,它可能影响gga-miR-456-3p对IGFBP2基因表达的调控作用。为确认该SNP是否为功能性SNP,本研究分别构建了该SNP位点C和A等位基因的双荧光素酶报告基因载体,比较分析了这两个等位基因在DF1细胞和鸡前脂肪细胞中对报告基因活性和表达的影响;并利用miRNA mimics和inhibitor分析了gga-miR-456-3p对内源性IGFBP2的表达调控作用。结果发现,在DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,A等位基因的报告基因活性均显著高于C等位基因(P<0.05)。进一步的实验证实,gga-miR-456-3p调控IGFBP2基因的表达,且SNP(1196C>A)影响gga-miR-456-3p对鸡IGFBP2基因的表达调控作用。本研究证实IGFBP2基因是gga-miR-456-3p的一个靶基因,而且其3′UTR区的1196C>A是一个功能性SNP。本研究对于鸡的分子辅助选择育种以及IGFBP2基因在脂肪沉积中调控机制的阐明具有重要意义。

关键词：鸡 IGFBP2基因单核苷酸多态性 3′非编码区 gga-miR-456-3p

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鸡FBXO38转录剪接体1的克隆、表达和功能分析

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生物化学与生物物理进展 2013年第9期40卷 845-858页

作者：张志威孙婴宁荣恩光李辉王宁农业部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院齐齐哈尔161006

F-box蛋白（F-box proteins）广泛存在于真核生物，并且成员众多，功能多样．FBXO蛋白是一类C端没有亮氨酸重复序列（leucine-rich repeats，LRRs）和WD重复序列（WD repeats）的F-box蛋白．本研究利用PCR和克隆测序的方法从鸡腹部脂肪... 详细信息

F-box蛋白（F-box proteins）广泛存在于真核生物，并且成员众多，功能多样．FBXO蛋白是一类C端没有亮氨酸重复序列（leucine-rich repeats，LRRs）和WD重复序列（WD repeats）的F-box蛋白．本研究利用PCR和克隆测序的方法从鸡腹部脂肪组织获得一个未知全长编码区序列（coding sequence，CDS），序列分析显示，该序列是鸡FBXO38的一个转录体，本研究将其命名为鸡FBXO38基因转录本1（gallus gallus FBXO38 transcript variant 1，gFBXO38t1）．Real-time reverse transcriptase-PCR分析显示，gFBXO38t1广泛表达于肉鸡多种组织，其中胰腺、回肠和腹部脂肪组织中表达水平较高．进一步分析发现，gFBXO38t1在高、低脂系1～12周龄肉鸡腹部脂肪组织中均有表达，并且在3和4周龄时，低脂肉鸡腹部脂肪组织中gFBXO38t1的表达水平显著高于高脂肉鸡（P 〈 0.05），其余时间点两系间没有显著差异（P 〉 0.05）．在鸡前脂肪细胞（stromal- vascular cells，SV）诱导分化过程中，gFBXO38t1的表达量随着脂肪细胞分化而呈现下降趋势，此外，gFBXO38t1在前脂肪细胞中的表达量明显高于成熟脂肪细胞（fat cells，FC；P 〈 0.05），暗示gFBXO38t1可能是鸡脂肪组织形成的负调控因子．报告基因分析显示，过表达gFBXO38t1抑制CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer-binding protein α，C/EBPα）、脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase，LPL）、脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FASN）和脂肪酸结合蛋白4（fatty acid-binding protein 4，FABP4）基因的启动子活性（P 〈 0.05），从另一个角度提示了gFBXO38t1对鸡脂肪组织形成具有抑制作用．同时过表达鸡KLF7和gFBXO38t1并不能显著增强过表达gFBXO38t1对鸡LPL、FASN和FABP4基因启动子活性的调控作用，暗示gFBXO38t1对这些基因的调控不完全依赖于鸡转录因子KLF7．本研究为进一步研究鸡脂肪细胞分化和FBXO38的生物学功能提供参考．

关键词： F—box蛋白 KLF7 鸡脂肪组织转录调控

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高、低脂鸡脂肪组织ATGL基因的表达及其激素调控的差异分析

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畜牧兽医学报 2013年第12期44卷 1874-1881页

作者：史铭欣荣恩光周纬男史洪岩李辉王宁农业部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

为研究脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）在鸡脂肪沉积中的作用，并分析肾上腺素和胰高血糖素对高、低脂鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因表达的影响，本研究利用半定量RT-PCR分析鸡ATGL基因的组织表达谱；利用Real-timeRT-PCR分析ATGL基因及其... 详细信息

为研究脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）在鸡脂肪沉积中的作用，并分析肾上腺素和胰高血糖素对高、低脂鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因表达的影响，本研究利用半定量RT-PCR分析鸡ATGL基因的组织表达谱；利用Real-timeRT-PCR分析ATGL基因及其活化因子Comparative gene identification-58（CGI-58）基因在1～7周龄东北农业大学肉鸡高、低腹脂双向选择品系（NEAUHLF）第16世代鸡群脂肪组织中的表达差异，以及肾上腺素和胰高血糖素对高、低脂系肉鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因表达的影响。结果显示，ATGL基因在鸡腹部脂肪、皮下脂肪、嗉囊周围脂肪、肌胃周围脂肪、肾脏及肝脏中表达量较高；低脂系肉鸡腹部脂肪组织ATGL和CGI-58基因的表达总体均高于高脂系鸡，且均在第2周龄达到显著性差异（P％0．05）；肾上腺素和胰高血糖素都能够上调高脂系鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因的表达，并促进机体的脂肪分解，暗示高脂系鸡对2种激素的刺激相对敏感。本研究结果为揭示高、低脂肉鸡脂肪性状差异的原因以及ATGL在鸡脂肪沉积中的作用奠定了基础。

关键词：肉鸡 ATGL基因基因表达肾上腺素胰高血糖素

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绵羊Dlx3基因启动子活性及其多态性与羊毛品质性状的关联

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中国农业科学 2013年第3期46卷 614-622页

作者：裴文宇云杰荣恩光杨华王志鹏王守志李辉王宁东北农业大学动物科学技术学院/农业部鸡遗传育种重点实验室/黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

【目的】通过开展绵羊Dlx3基因启动子结构、活性、多态性及其与羊毛品质性状的关联等分析,揭示Dlx3基因在绵羊毛囊发育中的作用及其作用机制。【方法】采用PCR扩增Dlx3基因起始密码子上游1.5 kb区域,利用荧光素酶报告基因技术分析Dlx3... 详细信息

【目的】通过开展绵羊Dlx3基因启动子结构、活性、多态性及其与羊毛品质性状的关联等分析,揭示Dlx3基因在绵羊毛囊发育中的作用及其作用机制。【方法】采用PCR扩增Dlx3基因起始密码子上游1.5 kb区域,利用荧光素酶报告基因技术分析Dlx3基因启动子活性,采用测序方法寻找Dlx3基因启动子区SNP,并利用PCR-RFLP技术进行SNP分型。【结果】①Dlx3基因启动子近端序列的保守性较高,该区域内人、鼠及绵羊都具有23个保守的转录因子结合位点和一个CpG岛,而启动子的远端序列的保守性较低;②Dlx3基因的启动子在绵羊胚胎成纤维细胞中具有启动子活性;③Dlx3基因启动子的-1 551—-1 108 bp与-1 108—-707 bp区域对启动子活性影响较大;④Dlx3基因启动子区SNP位点(G-1166A)多态性与羊毛卷曲度显著相关。【结论】①Dlx3基因启动子在绵羊胚胎成纤维细胞中有活性;②Dlx3基因启动子的近端序列组成在人、鼠和绵羊中较为保守,而其远端序列的保守性较低,但是Dlx3基因启动子的远端序列对启动子活性影响较大;③Dlx3基因启动子区G-1166A位点是羊毛卷曲度的一个分子标记。

关键词：绵羊 Dlx3基因启动子活性单核苷酸多态性关联分析

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中国美利奴羊皮肤POU2F3基因及其剪接体的克隆与表达分析

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畜牧兽医学报 2013年第8期44卷 1189-1197页

作者：荣恩光乔书培于磊闫晓红杨华李辉王宁农业部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832000

旨在研究绵羊POU2F3(POU class 2homeobox 3)基因的组织表达规律,并克隆中国美利奴羊(新疆军垦型)POU2F3基因多种剪接体的全长编码区(Coding sequence,CDS区)。采用半定量RT-PCR方法分析绵羊POU2F3基因的组织表达特性;采用RT-PCR扩增绵... 详细信息

旨在研究绵羊POU2F3(POU class 2homeobox 3)基因的组织表达规律,并克隆中国美利奴羊(新疆军垦型)POU2F3基因多种剪接体的全长编码区(Coding sequence,CDS区)。采用半定量RT-PCR方法分析绵羊POU2F3基因的组织表达特性;采用RT-PCR扩增绵羊POU2F3基因的全长CDS区,克隆后进行测序分析。组织表达谱分析表明,POU2F3基因仅在绵羊部分内脏器官和组织中表达,其中在皮肤组织中的表达量较高;POU2F3基因在超细毛品系羊体表不同部位皮肤组织中的表达水平差异不显著(P>0.05),在细毛羊和粗毛羊体侧皮肤中的表达量也不存在显著性差异(P>0.05);序列分析结果表明,POU2F3基因在绵羊皮肤组织中至少存在4种mR-NA剪接形式,相应的开放阅读框(Open reading frame,ORF)长度依次为1 290、1 191、666和666bp,分别编码429、396、221和221个氨基酸。中国美利奴羊(新疆军垦型)POU2F3基因在皮肤组织中具有较高表达水平;绵羊POU2F3基因在皮肤组织中除了全长的POU2F3蛋白外,至少还有2种不同的蛋白剪接体。本研究为阐明绵羊POU2F3基因的功能以及开展优质细毛羊的培育工作奠定了基础。

关键词：中国美利奴羊 POU2F3基因基因表达基因克隆蛋白剪接体

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BMP7基因多态性与肉鸡生长和体组成性状的关联研究

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中国家禽 2013年第3期35卷 6-10页

作者：程博涵冷丽王守志陈曦李辉农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030

为探讨鸡BMP7基因多态性对肉鸡生长和体组成性状的影响,选用东北农业大学肉鸡高、低脂双向选择品系(第6、8、10世代)、AA肉鸡随机群体为试验材料,分析了BMP7基因多态性与肉鸡生长和体组成性状的相关。结果发现在BMP7基因编码区第567bp... 详细信息

为探讨鸡BMP7基因多态性对肉鸡生长和体组成性状的影响,选用东北农业大学肉鸡高、低脂双向选择品系(第6、8、10世代)、AA肉鸡随机群体为试验材料,分析了BMP7基因多态性与肉鸡生长和体组成性状的相关。结果发现在BMP7基因编码区第567bp处存在1个C→T的变异位点。关联分析结果表明,该变异位点在第8世代高脂系群体中对跖骨长有极显著影响(P<0.01);在第10世代高脂系群体中对腺胃重、腺胃比率、胸宽、大胸肌重有显著影响(P<0.05),对股骨重有极显著影响(P<0.01)。因此,BMP7基因可能是影响肉鸡骨骼性状的重要基因之一。

关键词： BMP7基因肉鸡单核苷酸多态性生长体组成性状

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转基因鸡的制作及研究展望

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中国家禽 2013年第18期35卷 2-5页

作者：刘文利李辉农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030

鉴于转基因鸡在输卵管生物反应器、抗病育种及发育生物学等多种领域的广阔前景,鸡的转基因技术正受到广泛的关注。本文主要就转基因鸡的研究进展、制作方法和存在的问题进行了介绍,并对转基因鸡的前景进行了分析。

关键词：转基因鸡生物反应器研究进展

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鸡肝脏基础型脂肪酸结合蛋白和肝脏脂肪酸结合蛋白配基结合特性分析

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中国家禽 2013年第10期35卷 6-10页

作者：赵玉芳冷丽王守志张慧王宇祥王启贵李辉农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030 重庆市畜牧科学院重庆402460

为探讨鸡肝脏基础型脂肪酸结合蛋白(Lb-FABP)和肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)蛋白的配基结合属性,诱导表达并利用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化了鸡的GST/Lb-FABP和GST/L-FABP融合蛋白,得到的GST/Lb-FABP和GST/L-FABP融合蛋白大... 详细信息

为探讨鸡肝脏基础型脂肪酸结合蛋白(Lb-FABP)和肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)蛋白的配基结合属性,诱导表达并利用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化了鸡的GST/Lb-FABP和GST/L-FABP融合蛋白,得到的GST/Lb-FABP和GST/L-FABP融合蛋白大小分别为38ku和40ku。将鸡的Lb-FABP和L-FABP分别与1,8-ANS探针结合,结果显示Lb-FABP和L-FABP均表现出对荧光探针的较强结合能力;为进一步测定棕榈酸、花生四烯酸、油酸、胆汁酸和维甲酸这5种配体与Lb-FABP和L-FABP结合的特异性和亲合力,使用这些脂质分子与1,8-ANS探针进行置换分析,结果表明鸡Lb-FABP与维甲酸结合能力最强,而L-FABP与油酸的结合能力最强。本研究结果为深入探究Lb-FABP和L-FABP的生物学功能提供了良好的基础。

关键词：鸡肝脏基础型脂肪酸结合蛋白肝脏脂肪酸结合蛋白结合属性

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鸡U6核内小RNA基因的克隆与分析

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中国畜牧杂志 2013年第5期49卷 17-21页

作者：孙婴宁王维世高媛李辉王宁东北农业大学动物科学技术学院.黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006

本研究旨在获得鸡U6 snRNA的全序列,并对其序列、启动子及拷贝数等进行分析。本实验通过RT-PCR、克隆、测序获得了鸡U6 snRNA的部分序列(94 bp)。根据测序结果和鸡全基因组序列数据,结合生物信息学分析,结果获得了鸡U6 snRNA的全长序列(... 详细信息

本研究旨在获得鸡U6 snRNA的全序列,并对其序列、启动子及拷贝数等进行分析。本实验通过RT-PCR、克隆、测序获得了鸡U6 snRNA的部分序列(94 bp)。根据测序结果和鸡全基因组序列数据,结合生物信息学分析,结果获得了鸡U6 snRNA的全长序列(106 bp),该序列与人U6 snRNA序列相似性为100%,在鸡基因组中有4个拷贝,其中3个成簇存在于28号染色体上一段2 kb长的DNA片段上;另一个位于18号染色体。已有研究报道,这4个基因拷贝的5′侧翼区均具有启动子活性,说明它们是真基因。结果表明:这4个U6 snRNA基因启动子区均含有潜在的远端序列元件(DSE)、近端序列元件(PSE)和TATA box等RNA聚合酶Ш启动子元件。本研究成功获得了鸡U6 snRNA的全长序列,为选用U6基因作为内参基因开展鸡miRNA定量表达分析以及鸡U6基因的转录调控研究奠定基础。

关键词：核内小RNA 克隆启动子鸡

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绵羊YWHAZ基因的表达、克隆及其与羊毛品质性状的关联分析

绵羊YWHAZ基因的表达、克隆及其与羊毛品质性状的关联分析

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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会

作者：云杰马广伟荣恩光王守志李辉王宁农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

本文以中国美利奴羊为实验材料,克隆并测序了绵羊YWHAZ基因完整的CDS区;利用Real-time RT-PCR方法,检测了YWHAZ基因在绵羊组织中的表达情况.结果表明,中国美利奴羊YWHAZ基因的CDS区全长738bp,编码245个氨基酸.YWHAZ基因在皮肤组织中表... 详细信息

本文以中国美利奴羊为实验材料,克隆并测序了绵羊YWHAZ基因完整的CDS区;利用Real-time RT-PCR方法,检测了YWHAZ基因在绵羊组织中的表达情况.结果表明,中国美利奴羊YWHAZ基因的CDS区全长738bp,编码245个氨基酸.YWHAZ基因在皮肤组织中表达相对较低.研究发现2个SNP位点与羊毛细度、细度离散、细度标准差显著相关或极显著相关.

关键词：美利奴羊基因表达品质性状关联分析 YWHAZ基因

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