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第6次全国微生物学与免疫学大会

作者：贺伟峰吴军黄赤兵易绍萱第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市器官移植基础研究所

目的通过逆转录病毒载体将CTLA4Ig转染DCs,探讨转CTLA4Ig树突状细胞(DCsRev)诱导T细胞免疫耐受的可能性及其相应的细胞与分子机制。方法用基因工程的方法构建带EGFP和CTLA4Ig双基因的逆转录病毒表达质粒,转染PA317包装细胞,筛选出EGFP和... 详细信息

目的通过逆转录病毒载体将CTLA4Ig转染DCs,探讨转CTLA4Ig树突状细胞(DCsRev)诱导T细胞免疫耐受的可能性及其相应的细胞与分子机制。方法用基因工程的方法构建带EGFP和CTLA4Ig双基因的逆转录病毒表达质粒,转染PA317包装细胞,筛选出EGFP和CTLA4Ig高效共表达的重组逆转录病毒;应用重组大鼠rGM-CSF、IL-4在体外培养SD大鼠骨髓前体细胞获得大量DCs,培养的DCs经形态学观察、表型检测、功能学实验鉴定;通过流式细胞检测重组逆转录病毒感染后DCs中目的基因CTLA4Ig表达及其表面分子的改变;通过混合淋巴细胞反应(MLR)检测DCsRev体外抑制免疫反应的

关键词：特异性免疫耐受 CTLA4Ig 重组逆转录病毒细胞凋亡

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待移植器官体外支持系统初步研究

待移植器官体外支持系统初步研究

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第6次全国微生物学与免疫学大会

作者：王贵波吴军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市器官移植基础研究所

目的针对待移植手术患者远多于利用的器官数量,而在冷藏保存模式下,器官利用率并不高,也无法进行有效的生物修饰等情况,本研究模拟生理条件保存器官,制备仿生的待移植器官体外支持系统。方法利用自动化控制技术,通过器官保存试验平台大... 详细信息

目的针对待移植手术患者远多于利用的器官数量,而在冷藏保存模式下,器官利用率并不高,也无法进行有效的生物修饰等情况,本研究模拟生理条件保存器官,制备仿生的待移植器官体外支持系统。方法利用自动化控制技术,通过器官保存试验平台大体结构、氧合装置、参数控制单元(温度、湿度、氧气浓度、二氧化碳浓度)的研制和免疫修饰基因载体应用,实现待移植器官体外保存试验平台及待移植器官体外支持系统原理机的制作。结果(1)制作了待移植器官体外保存试验平台,该平台可对试验箱内的温度、湿度、氧气浓度、二氧化碳浓度进行调节。温度控制范围:-20℃～+60℃;二氧化

关键词：移植物保存灌注仪器

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小鼠待移植皮片的制备方法

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中华烧伤杂志 2004年第5期20卷 274-274页

作者：王贵波袁军吴军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

小鼠皮肤移植技术作为一种重要的移植模型,应用较为广泛[1,2],以往制取小鼠皮片采用修剪制皮法,易剪破皮肤,且皮片厚薄不一、制取时间长.本文介绍一种快速有效地制取小鼠待移植皮片的方法,以期为进行与皮肤移植相关的医学实验提供帮助.

关键词：小鼠移植皮片制备移植模型

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微粒皮移植手术方法的改进及临床应用

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中华烧伤杂志 2004年第1期20卷 5-5页

作者：张永生刘旭盛王逸涛第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038 新疆库尔勒解放军第二七三医院烧伤科 841000

一、资料与方法; 1.一般资料:笔者单位1998～2001年收治的烧伤总面积大于50%、Ⅲ度面积20%TBSA以上行早期切痂微粒皮移植术患者35例.采用改进微粒皮移植法(A组)与传统微粒皮移植法[1](B组)相对照.A组18例,其中男16例、女2例.年龄(38.63&... 详细信息

一、资料与方法; 1.一般资料:笔者单位1998～2001年收治的烧伤总面积大于50%、Ⅲ度面积20%TBSA以上行早期切痂微粒皮移植术患者35例.采用改进微粒皮移植法(A组)与传统微粒皮移植法[1](B组)相对照.A组18例,其中男16例、女2例.年龄(38.63±0.51)岁,烧伤总面积(81.16±10.90)%[Ⅲ度(30.08±7.90)%]TBSA,手术面积(35.80±18.20)%;B组17例,其中男16例、女1例,年龄(37.27±0.49)岁,烧伤总面积为(80.05±11.50)%[Ⅲ度(29.16±8.20)% ]TBSA,手术面积(36.20±19.40)%,两组供受皮比例均为1∶ (8～10).

关键词：微粒皮移植手术方法技术改进创面感染

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烧伤患者的康复治疗需求

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中国临床康复 2004年第32期8卷 7185-7185页

作者：黄嵩胡嘉念解放军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤研究国家重点实验室重庆市400038

大面积烧伤患者,组织修复时间长,及时有效的康复治疗是恢复患者肢体功能的主要措施。四肢尤其是手部,暴露在外,更是容易受伤的部位,损伤重时恢复时间较长,若长期固定会严重影响肢体功能的恢复。康复的早期介入可以减少功能受限的发生,... 详细信息

大面积烧伤患者,组织修复时间长,及时有效的康复治疗是恢复患者肢体功能的主要措施。四肢尤其是手部,暴露在外,更是容易受伤的部位,损伤重时恢复时间较长,若长期固定会严重影响肢体功能的恢复。康复的早期介入可以减少功能受限的发生,伤后及时的积极治疗可以避免永久性功能受限的发生,对于存在永久性功能障碍的患者,还可采用康复手段,通过代偿、补偿、矫正、适应等方式改善这类患者的功能、活动和参与能力成为社会有用的一员。烧伤治疗最终目标是创面的修复和功能的恢复,需要应用康复医学的手段解决。

关键词：烧伤康复治疗运动治疗作业治疗物理因子治疗心理康复

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大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔状态改变及其机制

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第三军医大学学报 2003年第18期25卷 1606-1608页

作者：梁晚益黄跃生杨宗城第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔(PTP)状态改变及其机制.方法 Wistar大鼠48只随机分为正常对照组、烧伤1、3、6、12、24 h组(30%Ⅲ度烫伤).所有大鼠处死前5 min均从颈外静脉推注0.5 mmol/L 2-[3H]去氧葡糖([3H]DOG),测... 详细信息

目的探讨大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔(PTP)状态改变及其机制.方法 Wistar大鼠48只随机分为正常对照组、烧伤1、3、6、12、24 h组(30%Ⅲ度烫伤).所有大鼠处死前5 min均从颈外静脉推注0.5 mmol/L 2-[3H]去氧葡糖([3H]DOG),测定伤后各组大鼠心肌线粒体[3H]DOG、cyt c、MDA含量及[Ca2+]m.结果①大鼠烧伤后1 h心肌线粒体[3H]DOG及cyt c含量与正常对照组无明显差异,但3、6、12、24 h心肌线粒体[3H]DOG含量明显高于正常对照组,cyt c含量明显低于对照组,分别是对照组的68.8%、50.0%、77.1%、72.9%.②大鼠烧伤后3、6、12、24 h心肌线粒体 MDA含量及[Ca2+]m显著高于正常对照组.③伤后心肌线粒体[3H]DOG含量与[Ca2+]m、MDA均呈显著正相关,相关系数分别为0.854 7、0.911 7(P<0.01).结论烧伤后1 h心肌线粒体PTP状态无明显改变,但伤后3、6、12、24 h PTP开放明显增加,线粒体Ca2+超载及自由基增加可能是烧伤后PTP开放的重要原因.

关键词：烧伤线粒体通透性转换孔心肌

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c-fos反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理大鼠心肌细胞保护作用的实验研究

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第三军医大学学报 2003年第18期25卷 1599-1601页

作者：胡安根黄跃生第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨c-fos反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞的保护作用.方法烧伤血清采自30%TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠;采用含1%O2的混合气体作为缺氧模型;采用基因重组技术构建c-fos反义基因重组体;由Lipofectamine kit介导心肌细胞转染... 详细信息

目的探讨c-fos反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞的保护作用.方法烧伤血清采自30%TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠;采用含1%O2的混合气体作为缺氧模型;采用基因重组技术构建c-fos反义基因重组体;由Lipofectamine kit介导心肌细胞转染;于缺氧复合烧伤血清处理1,3,7 h不同时相点采用RT-PCR检测c-fos mRNA的表达变化,采用Western blot检测c-fos蛋白,肌钙蛋白-T(TnT)和β-微管蛋白(β-Tubulin)的表达变化.结果加入烧伤血清并造成缺氧的非转染心肌细胞(下文称非转染组),c-fos mRNA和蛋白显著表达,3 h达到最高峰,与正常对照组比较,TnT和β-Tubulin表达显著下降,7 h降至最低水平;转染c-fos反义基因重组体(下文称转染组)后,c-fos mRNA和蛋白表达显著下降,TnT和β-Tubulin表达却显著回升.结论缺氧复合烧伤血清处理产生的c-fos会引起心肌细胞损伤,c-fos反义基因重组体转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞具有保护作用.

关键词： β-微管蛋白肌钙蛋白-T 反义基因缺氧烧伤血清 c-fos 基因转染 PcDNA3.1(+)

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HSP70基因静脉注射对严重烧伤大鼠肠粘膜保护作用的实验研究

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第三军医大学学报 2003年第18期25卷 1626-1628页

作者：李晓鲁彭毅志袁志强黄跃生杨宗城第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的为严重烧伤后肠粘膜损伤的防治提供可行性的基因治疗途径.方法大鼠静脉注射含HSP70基因的重组腺病毒载体,通过严重烧伤后肠粘膜病理形态学改变、损伤指数统计及血清中乳酸脱氢酶含量的变化观察基因转染后保护效应.结果静脉转染HSP7... 详细信息

目的为严重烧伤后肠粘膜损伤的防治提供可行性的基因治疗途径.方法大鼠静脉注射含HSP70基因的重组腺病毒载体,通过严重烧伤后肠粘膜病理形态学改变、损伤指数统计及血清中乳酸脱氢酶含量的变化观察基因转染后保护效应.结果静脉转染HSP70基因的大鼠烧伤后肠粘膜组织病理改变较单纯烧伤组减轻,损伤指数明显降低,血清中乳酸脱氢酶含量明显下降.结论大鼠静脉注射含HSP70基因的重组腺病毒载体可保护严重烧伤后肠粘膜的缺血缺氧性损伤.为严重烧伤早期缺血缺氧性损伤的防治提供可行性的基因治疗途径.

关键词：烧伤缺血缺氧热休克蛋白质类70 腺病毒

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二氮嗪对严重烧伤大鼠心肌损害的保护作用及其机制

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第三军医大学学报 2003年第19期25卷 1731-1733页

作者：梁晚益黄跃生杨宗城第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨二氮嗪对严重烧伤早期心肌损害的保护作用及其机制.方法健康成年Wistar大鼠24只,随机分为正常对照组、烧伤组和烧伤二氮嗪处理组(n=8).烧伤组、烧伤二氮嗪处理组大鼠造成30%TBSA Ⅲ度烧伤,伤后30 min经腹腔补液,烧伤二氮嗪处理... 详细信息

目的探讨二氮嗪对严重烧伤早期心肌损害的保护作用及其机制.方法健康成年Wistar大鼠24只,随机分为正常对照组、烧伤组和烧伤二氮嗪处理组(n=8).烧伤组、烧伤二氮嗪处理组大鼠造成30%TBSA Ⅲ度烧伤,伤后30 min经腹腔补液,烧伤二氮嗪处理组同时于颈外静脉推注二氮嗪(剂量10 mg/kg).烧伤组和烧伤二氮嗪处理组动物于伤后6 h抽血并活杀,测定线粒体K+内流、呼吸功能、Ca2+浓度([Ca2+]m)、MDA及血清LDH、CK.结果二氮嗪处理组线粒体K+内流速率明显高于正常组与烧伤组,且线粒体呼吸控制率(RCR)、Ⅲ态呼吸速率(ST3)明显高于烧伤组,而[Ca2+]m、MDA含量显著低于烧伤组, Ⅳ态呼吸速率(ST4)与正常对照组无显著差异;同时二氮嗪处理组血清CK、LDH显著低于烧伤组,分别是烧伤组的63.7%和52.0%.结论二氮嗪可减轻严重烧伤早期心肌细胞损害,其机制可能与开放线粒体K+通道,抑制线粒体Ca2+超载及减少自由基产生有关.

关键词：烧伤二氮嗪线粒体心肌

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p38激酶途径介导缺氧复合烧伤血清所致乳鼠心肌细胞损害

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第三军医大学学报 2003年第18期25卷 1596-1598页

作者：张家平黄跃生杨宗城第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的观察缺氧复合烧伤血清对心肌细胞p38激酶和JNK活化的影响,探讨p38激酶在缺氧复合烧伤血清损伤心肌细胞中的作用.方法免疫印迹化学发光法检测缺氧复合烧伤血清作用培养心肌细胞前后p38激酶及JNK磷酸化程度,观察p38激酶抑制剂SB20358... 详细信息

目的观察缺氧复合烧伤血清对心肌细胞p38激酶和JNK活化的影响,探讨p38激酶在缺氧复合烧伤血清损伤心肌细胞中的作用.方法免疫印迹化学发光法检测缺氧复合烧伤血清作用培养心肌细胞前后p38激酶及JNK磷酸化程度,观察p38激酶抑制剂SB203580预先处理,对心肌细胞p38激酶磷酸化、心肌细胞活力、培养液中LDH活性及凋亡的影响.结果缺氧复合烧伤血清使心肌细胞p38激酶迅速、持续活化,而JNK活化不明显;10 μmol/L SB203580可有效抑制p38激酶活化,并显著降低细胞培养液中LDH活性及细胞凋亡率,改善心肌细胞活力.结论 MAPKs家族两条应激活化的信号途径当中,p38激酶途径是缺氧复合烧伤血清作用条件下心肌细胞主要被激活途径,并较早参与介导心肌细胞损害.

关键词：心肌细胞蛋白激酶p38 缺氧烧伤血清

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