检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1906-1908页

作者：黄赤兵吴军张艮甫陈希炜贺伟峰第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆400037

目的研究负载供体抗原的致耐受性受体树突状细胞(Dendritic cells,DC)对移植肾存活的影响。方法以BN、Lewis大鼠为肾移植供、受体;受体骨髓源性DC负载供体淋巴细胞抗原并与共刺激阻断剂CTLA4Ig共孵育;将上述DC于肾移植前24 h经股静脉... 详细信息

目的研究负载供体抗原的致耐受性受体树突状细胞(Dendritic cells,DC)对移植肾存活的影响。方法以BN、Lewis大鼠为肾移植供、受体;受体骨髓源性DC负载供体淋巴细胞抗原并与共刺激阻断剂CTLA4Ig共孵育;将上述DC于肾移植前24 h经股静脉注入受体(治疗组),未注射DC的受体为对照组;观察各组移植肾存活时间,术后第20天,MTT法检测受体脾细胞对供体及无关抗原刺激的反应。结果移植肾存活时间:与对照组相比,治疗组移植肾存活时间显著延长[(54.6±9.5)d vs(8.3±0.8)d,P<0.01]。术后第20天,治疗组脾细胞对供体抗原刺激的反应明显低于正常对照[(0.17±0.04)vs(0.74±0.06),P<0.01],而受体对无关抗原刺激的反应与正常对照无显著差异[(0.72±0.04)vs(0.69±0.07),P>0.05]。结论负载供体抗原的致耐受性受体DC可以特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应、明显延长大鼠移植肾存活时间。

关键词：树突状细胞抗原负载肾移植免疫耐受

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人CTLA4胞外区突变体在毕赤酵母中的高效表达

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1902-1905页

作者：易绍萱吴军贺伟峰代飞陈希炜张小容第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的根据毕赤酵母密码子偏好,设计并改造人CTLA4胞外区cDNA,构建毕赤酵母分泌型表达载体,以实现人CTLA4胞外区蛋白在毕赤酵母中的高效表达。方法利用PCR定点突变技术,将人CTLA4胞外区cDNA中的毕赤酵母低频使用密码子突变成高频使用密... 详细信息

目的根据毕赤酵母密码子偏好,设计并改造人CTLA4胞外区cDNA,构建毕赤酵母分泌型表达载体,以实现人CTLA4胞外区蛋白在毕赤酵母中的高效表达。方法利用PCR定点突变技术,将人CTLA4胞外区cDNA中的毕赤酵母低频使用密码子突变成高频使用密码子而不改变其氨基酸序列;经DNA序列测定证实后插入毕赤酵母高拷贝表达载体pPIC9K a分泌信号下游,SacⅠ线性化后电转GS115;G418梯度筛选转化菌;PCR鉴定目的基因整合;甲醇诱导表达,SDS-PAGE、Western blotting、肽质量指纹等鉴定表达蛋白。结果成功地对人CTLA4胞外区cDNA进行了定点突变,该突变体在毕赤酵母中能成功表达CTLA4胞外区蛋白。结论为高效表达人CTLA4胞外区蛋白及其功能研究和临床应用奠定了基础。

关键词： CTLA4 PCR定点突变毕赤酵母分泌表达

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耐受T细胞抑制NK细胞和巨噬细胞对大鼠皮肤移植物的排斥

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1892-1895页

作者：解志杰吴军郑峻松彭双发易绍萱陈希炜贺伟峰第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的了解NK细胞和巨噬细胞在T细胞缺乏或T细胞成功重建的情况下对异种移植物排斥的作用。方法在无胸腺裸小鼠、通过混合胸腺移植重建T细胞后裸小鼠和正常免疫健全小鼠分别进行F344大鼠皮肤移植,观察异种皮肤移植物的存活情况,并利用流... 详细信息

目的了解NK细胞和巨噬细胞在T细胞缺乏或T细胞成功重建的情况下对异种移植物排斥的作用。方法在无胸腺裸小鼠、通过混合胸腺移植重建T细胞后裸小鼠和正常免疫健全小鼠分别进行F344大鼠皮肤移植,观察异种皮肤移植物的存活情况,并利用流式细胞仪检测各组受体动物外周血中CD4+和CD8+T细胞的百分率,利用ConA增殖实验和混合淋巴细胞培养检测其体外功能状态。结果在没有清除受体体内NK细胞和巨噬细胞的情况下,正常无胸腺BALB/c裸小鼠上移植的F344大鼠皮肤移植物发生了排斥,平均存活时间为(20.50±2.38)d;而在裸小鼠左肾包膜下移植的F344胎大鼠胸腺组织,却能够正常发育,并有效重建了受体的T细胞免疫,而且诱导了F344大鼠皮肤移植物的长期存活。结论NK细胞和巨噬细胞在异种移植物的排斥中起十分重要的作用,不同组织对NK细胞和巨噬细胞细胞毒性的易感性可能存在一定的差异。对异种供体抗原已产生耐受的T细胞可抑制受体体内NK细胞和巨噬细胞对异种移植物的排斥。

关键词： NK细胞巨噬细胞胸腺移植异种移植

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以Bacmid-杆状病毒系统表达人CTLA4胞外区蛋白的研究

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1899-1901页

作者：贺伟峰易绍萱陈希炜吴军第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的在Bacmid-杆状病毒-昆虫细胞系统中表达人CTLA4。方法采用PCR技术,自pUC19-CTLA4Ig质粒中获取人CTLA4胞外区cDNA,将其克隆入pFastBacl质粒中,经DNA自动测序仪进行DNA序列鉴定,并进一步将其转座入Bacmid中,在昆虫细胞HzAM1中进行表... 详细信息

目的在Bacmid-杆状病毒-昆虫细胞系统中表达人CTLA4。方法采用PCR技术,自pUC19-CTLA4Ig质粒中获取人CTLA4胞外区cDNA,将其克隆入pFastBacl质粒中,经DNA自动测序仪进行DNA序列鉴定,并进一步将其转座入Bacmid中,在昆虫细胞HzAM1中进行表达,采用SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果在昆虫细胞表达系统中表达出完全糖基化的人CTLA4胞外区重组蛋白。结论人CTLA4胞外区cDNA在Bacmid-杆状病毒-昆虫细胞系统中得到了表达。

关键词： CTLA4 杆状病毒 Hz细胞 Bacmid

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CTLA4Ig诱导免疫耐受的体外研究

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1896-1898页

作者：姜庆吴军易绍萱陈希炜罗高兴贺伟峰第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的观察CTLA4Ig在诱导人外周血T细胞免疫耐受中的作用。方法以结核菌素刺激人外周血淋巴细胞,观察不同剂量CTLA4Ig对外周血淋巴细胞增殖反应的影响;观察CTLA4Ig和CsA(环孢霉素A)对再次结核菌素刺激和非相关第三者APC细胞刺激淋巴细胞... 详细信息

目的观察CTLA4Ig在诱导人外周血T细胞免疫耐受中的作用。方法以结核菌素刺激人外周血淋巴细胞,观察不同剂量CTLA4Ig对外周血淋巴细胞增殖反应的影响;观察CTLA4Ig和CsA(环孢霉素A)对再次结核菌素刺激和非相关第三者APC细胞刺激淋巴细胞增殖反应的影响,IL-2的变化,以及外源性IL-2对免疫耐受诱导的影响。结果CT-LA4Ig抑制淋巴细胞增殖呈剂量依赖关系,20μg/ml时抑制作用最强;CTLA4Ig能诱导免疫耐受并与CsA有协同作用;外源性IL-2能抑制免疫耐受的诱导。结论CTLA4Ig能抑制淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌释放,CTLA4Ig和CsA联合应用能更彻底抑制淋巴细胞增殖和IL-2的分泌释放,并诱导免疫耐受;外源性IL-2能逆转免疫耐受。

关键词： CTLA4Ig T细胞免疫耐受细胞增殖

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器官移植的困难与对策

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1875-1877页

作者：吴军第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

从天体演化到基本粒子的衰变似乎都遵循某种从产生到消失的过程.这一自然规律在生物界表现得尤为明显,生老病死似乎是不可抗拒的.

关键词：移植医学胸腺调节性T细胞树突状细胞免疫耐受

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CD4^+CD25^+T_(reg)细胞调节T细胞的作用机制分析

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1881-1884页

作者：郑峻松吴军易绍萱贺伟峰陈希炜解志杰彭双发代飞第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市组织器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系。方法对比分析Treg细胞与效... 详细信息

目的通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系。方法对比分析Treg细胞与效应性T细胞膜分子CTLAA4、CD28表达和细胞因子IL-10、TGF-β1分泌水平;以TransWell Milli-cell-PCF分隔培养槽分隔培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系,采用向共培养及分隔培养体系加入与不加入IL-10、TGF-β1抗体的阻断方法,检测Treg细胞对不同组混合淋巴细胞反应的抑制效率。结果 Treg细胞分泌IL-10和TGF-β1的浓度水平明显高于效应性T细胞,Treg细胞培养上清中IL-10和TGF-β1水平分别达到(380±36.3)pg/ml和(790±56.8)pg/ml,Treg细胞分泌IL-10和TGF-β1的浓度水平与效应性T细胞比较,均有显著性差异(P<0.01)。共刺激分子CTLA4、CD28在Treg细胞和效应性T细胞膜表面的表达水平存在明显差异,Treg细胞以表达CTLA4为主。Treg细胞对共培养体系混合淋巴细胞反应的抑制效率明显高于分隔培养,通过分泌IL-10对效应性T细胞的抑制作用亦明显强于通过TGF-β1。结论细胞接触机制是Treg细胞抑制效应性T细胞的主要作用机制,而细胞因子机制中。

关键词：调节性T细胞细胞因子细胞接触机制

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烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究

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第三军医大学学报 2003年第18期25卷 1602-1605页

作者：党永明黄跃生陈丽峰第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038

目的探讨40%Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义.方法采用40%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型,蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定HIF-1α蛋白水平表达,免疫组化法定位显示HIF-1α表达.结... 详细信息

目的探讨40%Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义.方法采用40%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型,蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定HIF-1α蛋白水平表达,免疫组化法定位显示HIF-1α表达.结果烫伤后大鼠心肌组织内HIF-1α蛋白表达量明显升高.左、右心室HIF-1α蛋白表达不同,HIF-1α蛋白表达增加主要定位于细胞核.结论严重烧伤可以诱导心肌组织HIF-1α蛋白表达增加.左心室对照组HIF-1蛋白含量明显高于右心室.HIF-1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内,诱导下游因子表达.

关键词：烧伤心肌缺血缺氧诱导因子-1α 免疫印迹免疫组化

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细胞因子及胸腺微环境影响T_(reg)细胞增殖机制研究

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1885-1887页

作者：郑峻松吴军易绍萱贺伟峰陈希炜解志杰彭双发第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所重庆市组织器官移植基础研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038

目的通过体外培养体系添加细胞因子和在体细胞因子胸腺注射的方法,探索扩增低比例低增殖活性的Treg细胞的有效体内外方法。方法采用不同浓度细胞因子IL-10和TGF-β1作为诱导剂,分析二因子体外诱导Treg细胞增殖的有效性及最适浓度,同时... 详细信息

目的通过体外培养体系添加细胞因子和在体细胞因子胸腺注射的方法,探索扩增低比例低增殖活性的Treg细胞的有效体内外方法。方法采用不同浓度细胞因子IL-10和TGF-β1作为诱导剂,分析二因子体外诱导Treg细胞增殖的有效性及最适浓度,同时以二因子胸腺注射的方法,分析在成年鼠体内诱导Treg细胞增殖的可能性。结果 150 ng/mlIL-10浓度能够明显诱导Treg细胞增殖,经48、96、144 h诱导后,其增殖比例分别达到10％、18％和20%,而TGF-β1的使用浓度需达到300ng/ml;IL-10胸腺注射后同样可提高Treg细胞的比例[第7天(5.50±1.38)％,P<0.05;第10天(6.65±2.54)％,P<0.01];TGF-β1诱导后第5天的比例为(5.19±1.69)％,较对照组也有明显升高(P<0.05)。结论体外培养体系添加诱导因子增殖的方法是扩增低比例低增殖活性Treg细胞的首选方法,IL-10体内外诱导Treg细胞增殖的效能均强于TGF-β1。

关键词：调节性T细胞细胞增殖细胞因子胸腺

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烫伤大鼠肠粘膜前列腺素水平与前列腺素转移因子mRNA表达的变化

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中华烧伤杂志 2003年第5期19卷 279-281页

作者：孟德胜汪仕良第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038 重庆市第三军医大学大坪医院药剂科 400042

目的　探讨烫伤大鼠肠粘膜前列腺素E2 (PGE2 )、前列腺素I2 (PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )水平和前列腺素转移因子 (PGT)mRNA表达变化及其意义。　方法　以 30 %TBSAⅢ度烫伤大鼠为模型 ,以放射免疫法测定肠粘膜中PGE2 、PGI2 、TXA2 的含... 详细信息

目的　探讨烫伤大鼠肠粘膜前列腺素E2 (PGE2 )、前列腺素I2 (PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )水平和前列腺素转移因子 (PGT)mRNA表达变化及其意义。　方法　以 30 %TBSAⅢ度烫伤大鼠为模型 ,以放射免疫法测定肠粘膜中PGE2 、PGI2 、TXA2 的含量 ,用原位杂交检测PGTmRNA表达。　结果　大鼠肠粘膜PGE2 、PGI2 水平在伤后 12h升高 ,随后明显降低 (P <0.0 5～ 0.0 1);TXA2 水平在伤后 2 4、4 8h明显高于正常水平 (P <0.0 5 );PGTmRNA表达在伤后有增加的趋势。　结论　烫伤后肠粘膜PGE2 水平降低及TXA2 水平升高 ,可能是肠粘膜损伤的机制之一 ;

关键词：烫伤大鼠肠粘膜前列腺素前列腺素转移因子 mRNA表达

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