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徐州工程学院学报（自然科学版） 2022年第3期37卷 33-40页

作者：韩伟陈炼茹郑丹婷卜原玲姚泽远华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海200237 华东理工大学药学院上海市新药设计重点实验室上海200237

以沪农灵芝、龙芝2号子实体为原料,分别采用微波提取、碱提醇沉法得到灵芝水溶性和碱溶性多糖.水溶性多糖经体积分数30%、50%、80%乙醇分步沉淀,分别得到不同组分的多糖GLPa、GLPb和GLPc溶液;碱溶性多糖经DEAE-纤维素52柱和葡聚糖凝胶Se... 详细信息

以沪农灵芝、龙芝2号子实体为原料,分别采用微波提取、碱提醇沉法得到灵芝水溶性和碱溶性多糖.水溶性多糖经体积分数30%、50%、80%乙醇分步沉淀,分别得到不同组分的多糖GLPa、GLPb和GLPc溶液;碱溶性多糖经DEAE-纤维素52柱和葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析,得到纯化的碱溶性多糖GLPj.采用高效凝胶渗透色谱对不同多糖组分的均一性进行了鉴定,同时测定了相对分子质量.结果表明,低体积分数乙醇沉淀得到的水溶性多糖GLPa相对分子质量达百万级,高体积分数乙醇沉淀得到的水溶性多糖GLPb和GLPc相对分子质量为十万级,碱溶性多糖GLPj相对分子质量小于1万.体外抗氧化活性实验表明,各灵芝多糖均具有还原能力,对羟基自由基及DPPH自由基具有一定的清除作用,灵芝水溶性多糖普遍比碱溶性多糖表现出更好的抗氧化活性,其中GLPa的各项能力较其他多糖均为最佳,抗氧化活性可能与相对分子质量有关.

关键词：灵芝水溶性多糖碱溶性多糖相对分子质量抗氧化活性

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高速逆流色谱法制备灵芝萜烯酮醇

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菌物学报 2021年第5期40卷 1190-1199页

作者：彭小芳田振韩伟王晨光冯娜张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研究分中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学上海201306

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件... 详细信息

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件,获得的最佳条件为:溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(V/V/V/V,12:24:18:9),流速2.0mL/min,转速900r/min,上样量500mg,一次上样可得到纯度为90.9%的灵芝萜烯酮醇52.1mg,得率达到10.4%。该方法具有操作简单、污染小、成本低、得率和纯度高的特点,是规模化制备灵芝萜烯酮醇的一种新方法。

关键词：灵芝活性三萜快速制备

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基于UPLC-MS/MS定量检测法优化灵芝三萜热回流提取工艺的研究

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菌物学报 2021年第9期40卷 2480-2494页

作者：彭小芳程池露唐庆九张劲松唐传红王晨光冯娜韩伟华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2... 详细信息

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2灵芝子实体作为提取原料,以三萜含量和提取物得率为指标,通过单因素和响应面实验对灵芝三萜的热回流工艺进行优化,获得的最佳条件为:乙醇浓度75%、提取时间2.5h、液料比14:1、提取次数2次。对获得的最佳提取工艺进行中试实验,灵芝子实体乙醇提取物的得率为6.10%,三萜含量为11.8591mg/g。研究结果可为灵芝三萜的工业大规模提取提供理论依据,为灵芝高附加值产品的开发利用提供技术支撑。

关键词：三萜类化合物液质联用分析中试提取响应面优化

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定向采收‘沪农灵芝1号’高三萜和水溶性多糖原料研究

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食用菌学报 2023年第1期30卷 113-122页

作者：马延梅周帅冯娜刘艳芳王金艳唐庆九韩伟张劲松华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法和高效排阻色谱-多角度激光散射(HPSEC-MALLS)法检测灵芝(Ganoderma lucidum)‘沪农灵芝1号’不同生长期(接种后2~7个月,分别命名为P1~P6)子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量,并结合子实体和菌... 详细信息

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法和高效排阻色谱-多角度激光散射(HPSEC-MALLS)法检测灵芝(Ganoderma lucidum)‘沪农灵芝1号’不同生长期(接种后2~7个月,分别命名为P1~P6)子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量,并结合子实体和菌基的产量计算三萜和水溶性多糖的产量。结果表明:子实体中灵芝酸C2、G含量在P1、P2期较高,灵芝烯酸B和灵芝酸D、F、DM含量在P2期最高,灵芝酸B、A、S、T和总三萜含量在P1期最高;菌基中灵芝酸C2、A、D、DM和灵芝烯酸B含量在P1期最高,灵芝酸G含量在P 5期最高,灵芝酸B、S含量在P 6期最高,灵芝酸F含量在P 1、P 6期较高,灵芝酸T、总三萜含量在P 5、P 6期较高。子实体中灵芝酸C2、G、B、D、F、DM,灵芝烯酸B,总三萜产量在P2期最高;灵芝酸A产量在P3期最高;灵芝酸S、T产量在P1期最高。菌基中灵芝酸C2、G、B、A、D、F、DM,灵芝烯酸B产量在P1期最高;灵芝酸S、T产量在P2期最高;总三萜产量在P1、P2期较高。子实体和菌基中的水溶性多糖含量和产量均在P1期最高。研究结果将为‘沪农灵芝1号’子实体的定向采收提供科学数据和指导。

关键词：灵芝三萜多糖栽培超高效液相色谱-质谱高效排阻色谱-多角度激光散射

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利用高速逆流色谱技术制备灵芝酮三醇

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食用菌学报 2020年第2期27卷 77-83页

作者：岳亚文田振张劲松王晨光韩伟唐庆九冯娜周帅上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海200237 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学上海201306

以沪农灵芝(Ganoderma lucidum)1号子实体为原料,经过87%乙醇提取、D101大孔树脂富集、乙醇梯度洗脱获得弱极性三萜组分。采用高速逆流色谱技术,以正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(V∶V∶V∶V=5∶6∶5∶5)为溶剂体系,对该三萜组分中灵芝酮... 详细信息

以沪农灵芝(Ganoderma lucidum)1号子实体为原料,经过87%乙醇提取、D101大孔树脂富集、乙醇梯度洗脱获得弱极性三萜组分。采用高速逆流色谱技术,以正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(V∶V∶V∶V=5∶6∶5∶5)为溶剂体系,对该三萜组分中灵芝酮三醇的制备工艺进行研究,在转速900 r·min^-1、流速3 mL·min^-1条件下,一次上样400 mg灵芝弱极性三萜组分,可得到纯度为91.6%的灵芝酮三醇26.8 mg。

关键词：灵芝子实体弱极性三萜大孔树脂高速逆流色谱

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双水相法萃取灵芝醇提液中三萜类化合物的工艺优化

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徐州工程学院学报（自然科学版） 2023年第4期38卷 5-13页

作者：韩伟姚泽远卜原玲王承潇华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海200237 华东理工大学药学院上海市新药设计重点实验室上海200237 昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650000

通过构建无机盐-乙醇双水相体系萃取灵芝三萜类化合物.考察了13种无机盐与乙醇构成的醇-盐体系对灵芝三萜萃取效率,发现NaH_(2)PO_(4)-乙醇体系萃取率最高.采用单因素试验考察了NaH_(2)PO_(4)水溶液质量浓度、乙醇和NaCl质量分数、水相p... 详细信息

通过构建无机盐-乙醇双水相体系萃取灵芝三萜类化合物.考察了13种无机盐与乙醇构成的醇-盐体系对灵芝三萜萃取效率,发现NaH_(2)PO_(4)-乙醇体系萃取率最高.采用单因素试验考察了NaH_(2)PO_(4)水溶液质量浓度、乙醇和NaCl质量分数、水相pH对回收率的影响,并通过正交试验得到优化的工艺条件:NaH_(2)PO_(4)、水、乙醇、灵芝醇提液的质量分数分别为10%、53%、27%和10%,水相pH值为5.同时还比较了双水相和碱提酸溶2种分离纯化方法,发现双水相法灵芝三萜萃取率为47.366%,高于碱提酸溶法的44.933%,且双水相法萃取过程更为简便绿色.

关键词：灵芝三萜双水相体系萃取正交试验工艺优化

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分级醇沉竹荪多糖的结构及抗氧化活性比较

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徐州工程学院学报（自然科学版） 2023年第1期38卷 61-70页

作者：韩伟卜原玲姚泽远王承潇华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海200237 华东理工大学药学院上海市新药设计重点实验室上海200237 昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650000

通过缓冻协同微波法提取竹荪多糖,以20%~80%乙醇分级制备得到4种多糖组分,分别为PI-20、PI-40、PI-60和PI-80;采用UV、FI-IR、HPSEC-MALLS-RI、HPAEC对多糖结构进行分析.结果表明4种组分均含有少量蛋白质,但未检测到糖醛酸存在,PI-20和P... 详细信息

通过缓冻协同微波法提取竹荪多糖,以20%~80%乙醇分级制备得到4种多糖组分,分别为PI-20、PI-40、PI-60和PI-80;采用UV、FI-IR、HPSEC-MALLS-RI、HPAEC对多糖结构进行分析.结果表明4种组分均含有少量蛋白质,但未检测到糖醛酸存在,PI-20和PI-40多糖含量均在50%以上;低浓度乙醇醇沉的多糖PI-20和PI-40的相对分子质量达到千万级,而高体积分数乙醇醇沉的多糖相对分子质量在万级水平;20%~60%醇沉多糖均由Gal、Glu和Man构成,PI-80仅由Glu和Man组成.4种醇沉多糖组分均具有一定的抗氧化能力,在3种抗氧化试验中,4种醇沉组分PI-80综合抗氧化能力最佳,清除ABTS自由基半抑制质量浓度为0.2484 mg/mL,PI-40综合抗氧化活性最弱,清除ABTS自由基半抑制质量浓度为2.9043 mg/mL.

关键词：竹荪多糖分级醇沉抗氧化活性

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利用大孔树脂分离灵芝菌丝体中水溶性抗氧化成分

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徐州工程学院学报（自然科学版） 2022年第1期37卷 22-30页

作者：韩伟郑丹婷姚泽远卜原玲冯杰华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海200237 华东理工大学药学院上海市新药设计重点实验室上海200237 华东理工大学药学院上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心上海201403

通过静态吸附-解吸实验对8种不同极性大孔树脂对灵芝菌丝体中水溶性抗氧化成分的吸附进行筛选,确定中等极性的HPD-400大孔树脂为最佳.对上样后的大孔树脂利用不同体积比的乙醇(30%、50%、70%、95%)进行梯度洗脱,对比不同极性洗脱液的抗... 详细信息

通过静态吸附-解吸实验对8种不同极性大孔树脂对灵芝菌丝体中水溶性抗氧化成分的吸附进行筛选,确定中等极性的HPD-400大孔树脂为最佳.对上样后的大孔树脂利用不同体积比的乙醇(30%、50%、70%、95%)进行梯度洗脱,对比不同极性洗脱液的抗氧化活性,发现30%的乙醇可以洗脱绝大部分的抗氧化活性物质.将HPD-400大孔树脂分离后得到的30%乙醇洗脱物与水提物的体外抗氧化活性EC_(50)进行对比,结果表明经大孔树脂的富集,提取液的DPPH·清除能力可提高1倍,ABTS^(+)·清除能力可提高3倍,但羟自由基的清除能力有所降低,说明大孔树脂可有效富集具有DPPH·和ABTS^(+)·清除能力的水溶性抗氧化成分.

关键词：灵芝菌丝体体外抗氧化大孔树脂分离

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灵芝发酵谷物的营养成分、功效及安全性评价

灵芝发酵谷物的营养成分、功效及安全性评价

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中国菌物学会2024年学术年会

作者：颜梦秋姜幸怡冯杰张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室

固态发酵是一种可用于从灵芝中提取天然代谢产物的创新技术手段。与液态发酵相比,无需进行劳动密集型的菌丝体分离过程。然而,大多数相关研究集中在灵芝本身的开发利用,而忽视了可食用且营养丰富的介质—功能性谷物的潜力。本研究探索... 详细信息

固态发酵是一种可用于从灵芝中提取天然代谢产物的创新技术手段。与液态发酵相比,无需进行劳动密集型的菌丝体分离过程。然而,大多数相关研究集中在灵芝本身的开发利用,而忽视了可食用且营养丰富的介质—功能性谷物的潜力。本研究探索了几种可食用谷物(小麦、大米和小麦粉)作为灵芝固态发酵的底物,并通过评估营养成分、功效指标和安全性因素,系统地评价了灵芝发酵谷物。结果表明,灵芝在不同底物上的固态发酵会影响谷物中蛋白质、多糖、三萜、维生素B、C和E的含量。经过发酵后的小麦粉在蛋白质、多糖、三萜和维生素C、E含量上的提升最为显著,分别提高了105.4%、136.4%、74.2%、1436.3%和24.7%。发酵后的大米在维生素B含量的提升上最高,达到了517.9%。此外,所得的发酵谷物还表现出增强的抗氧化和抗炎特性。通过检测几种重金属离子(As、Cd、Cr、Hg、Pb)的含量,对谷物的安全性进行了评估。结果表明,发酵谷物重金属离子含量的积累减少了10.7%-21.1%。

关键词：灵芝谷物固体发酵营养评价功效食品安全

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振荡静置循环培养方式对灵芝菌丝体三萜含量的影响

振荡静置循环培养方式对灵芝菌丝体三萜含量的影响

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：姜幸怡韩伟冯杰张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室

灵芝(Ganoderma lucidum)作为一种历史悠久的食药两用型真菌其药用价值广泛,灵芝三萜作为其主要活性物质具有抗肿瘤、抗氧化等药理活性。目前液态发酵生产灵芝三萜的方式主要有传统的液态深层发酵和振荡-静置两阶段培养两种方式,但采用... 详细信息

灵芝(Ganoderma lucidum)作为一种历史悠久的食药两用型真菌其药用价值广泛,灵芝三萜作为其主要活性物质具有抗肿瘤、抗氧化等药理活性。目前液态发酵生产灵芝三萜的方式主要有传统的液态深层发酵和振荡-静置两阶段培养两种方式,但采用这两种方式工业化生产灵芝三萜具有一定的局限性。本研究利用液态发酵以提高灵芝三萜含量并实现规模化应用为目的,对发酵方式进行了优化。本文采用了一种新的培养工艺:振荡-静置循环培养,该培养工艺能够结合振荡培养生物量较高、静置培养三萜含量较高的优点,利用现有规模化生产设备,有效提高灵芝三萜的含量。本文还结合遗传算法构建人工神经网络模型对振荡-循环培养方式进行寻优,研究结果表明:模型拟合度可达0.9989,均方误差MSE为:0.2098,具有较高的准确性。最终优化得出液态发酵高产灵芝三萜的最佳培养方式为振荡4.3d静置1.5d振荡1.6d静置1.5d。在此条件下,灵芝三萜的含量为38.63 mg/g,较优化前提高了65.01%;此外,此培养条件下能兼顾灵芝菌丝体的生物量,灵芝三萜得率为296.16mg/L,较优化前提高了16.60%,且培养周期缩短至8.9d。本研究提供了一种经济有效的液态发酵培养方式,不仅简化了工艺流程、缩短了发酵周期,还可以有效改善传统培养方式的弊端,具有广阔的应用前景,为液态发酵高产灵芝三萜的规模化应用提供了参考。

关键词：液态发酵灵芝三萜振荡-静置循环培养人工神经网络

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