检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第5期26卷 385-388页

作者：赵林清钱渊朱汝南邓洁王芳 Li Yan 首都儿科研究所病毒研究室北京市感染与免疫中心实验室北京100020 加拿大公共卫生署国家微生物实验室流感和呼吸道病毒实验室

目的了解北京地区婴幼儿急性呼吸道感染与新近报道的人细小病毒（human bocavirus,HBoV）的关系.方法选择2003年11月至2004年2月收集的经间接免疫荧光和/或病毒分离排除了常见呼吸道病毒感染的急性呼吸道感染患儿标本319例,应用针对HBoV... 详细信息

目的了解北京地区婴幼儿急性呼吸道感染与新近报道的人细小病毒（human bocavirus,HBoV）的关系.方法选择2003年11月至2004年2月收集的经间接免疫荧光和/或病毒分离排除了常见呼吸道病毒感染的急性呼吸道感染患儿标本319例,应用针对HBoV的NP1基因的PCR引物进行HBoV基因片段检测,随机选取HBoV基因检测阳性标本中的5例,对其PCR扩增产物直接进行核苷酸序列测定.将所测到的序列与GenBank中的基因序列进行比较分析.结果319例标本中HBoV基因检测阳性的为13例,其阳性检出率占本组检测标本的4.1%;HBoV阳性检出率在本组的毛细支气管炎患儿中最高,达10.9%（5/46）,其次为支气管炎患儿（6.3%,2/32）;HBoV检测阳性标本的患儿年龄主要分布于5个月～5岁,尤其是＜1岁的患儿;其中6～7个月的患儿中HBoV检测阳性的占50%（2/4）,9～10个月的患儿中阳性的占25%（2/8）,其次为5～6个月的患儿（18.2%）、11个月～1岁的患儿（14.3%）及8～9个月的患儿（12.5%）;在＜5个月的总计103例患儿中以及＞5岁的28例患儿中均未检测到HBoV阳性标本;基因序列分析表明,本研究中5例北京的HBoV之间基因序列的同源性在99.7%～100%之间;与st1、st2株的同源性为99.2%～99.4%.结论本研究结果提示北京地区部分儿科患者的急性呼吸道感染与HBoV有关,且HBoV感染在低年龄组儿童中更为常见.

关键词：急性呼吸道感染儿科细小病毒人Boca病毒(HBoV)

来源：评论

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北京地区人Boca病毒全基因组序列及生物信息学分析

引用

中华微生物学和免疫学杂志 2007年第5期27卷 389-393页

目的了解北京地区人Boca病毒（human Bocavirus，HBoV）的基因组编码特征，并对其基因组编码的非结构蛋白NS1、核蛋白NP-1以及病毒外壳蛋白VP1及VP2的二级结构等特性进行预测分析。方法从已证明为HBoV阳性的2份临床标本BJ3064、BJ3722... 详细信息

目的了解北京地区人Boca病毒（human Bocavirus，HBoV）的基因组编码特征，并对其基因组编码的非结构蛋白NS1、核蛋白NP-1以及病毒外壳蛋白VP1及VP2的二级结构等特性进行预测分析。方法从已证明为HBoV阳性的2份临床标本BJ3064、BJ3722中应用针对NS1、NP-1、VP1、VP2基因组3′末端的引物对经PCR扩增得到预期片段，将扩增产物直接测序后得到基因组序列；运用生物信息学的方法，对HBoVBJ3064基因组编码的各蛋白的二级结构及其他生物学特性进行了预测分析。结果测序结果显示HBoVBJ3064及BJ3722基因组序列全长均为5299bp，有4个主要的COS（codmgdomainsequences），分别编码NS1、NP-1、VP1和VP2蛋白。序列同源性比较结果显示BJ3064与BJ3722间基因组序列的同源性达99．9％；与ST1比较，同源性为99．4％-99．5％；与ST2比较，同源性为99．8％；与BPV及MVC比较，同源性低于45％；与细小病毒B19的同源性仅为5％左右；基因组系统进化树分析显示BJ3064、BJ3722与S12在一簇中，ST1属另一簇。NS1、NP-1、VP1及VP2蛋白二级结构中主要为无规卷曲，其他结构如α螺旋、β片层、β转角在不同蛋白中占有不同比例；各蛋白均无明显的跨膜结构域；NS1、NP-1属不稳定蛋白，VP1、VP2属稳定蛋白。结论全基因组序列的确定进一步证明北京地区发现的BJ3064、BJ3722是典型的人Boca病毒，相对于ST1，BJ3064、BJ3722与S12之间进化关系更密切；蛋白二级结构等生物信息学分析将有益于对此新发现病毒的进一步深入研究，如蛋白的表达、分离纯化以及蛋白检测条件的选择等。

关键词：人Boca病毒(HBDV) 基因组序列生物信息学分析

来源：评论

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北京地区人群中人Boca病毒血清抗体的分析

引用

中华儿科杂志 2008年第2期46卷 111-114页

作者：赵林清钱渊朱汝南邓洁王芳董慧瑾 Li Yan 中国协和医科大学研究生院 100730 首都儿科研究所病毒研究室加拿大公共卫生署国家微生物实验室流感和呼吸道病毒实验室

目的通过对血清中人Boca病毒（HBoV）主要衣壳蛋白VP2特异性IgG抗体进行检测，初步了解北京地区人群中这种新发现的病毒的感染状况。方法以大肠杆菌表达的HBoV主要衣壳蛋白VP2为抗原，应用Western—blot方法，对1996年4月至1997年3月取... 详细信息

目的通过对血清中人Boca病毒（HBoV）主要衣壳蛋白VP2特异性IgG抗体进行检测，初步了解北京地区人群中这种新发现的病毒的感染状况。方法以大肠杆菌表达的HBoV主要衣壳蛋白VP2为抗原，应用Western—blot方法，对1996年4月至1997年3月取自首都儿科研究所附属儿童医院健康查体者及北京宣武医院非呼吸道感染患者的血清标本共677份进行HBoV VP2蛋白特异性IgG抗体检测。设抗组氨酸抗体及兔抗HBoV-VP2多肽特异性免疫血清为阳性血清对照。结果（1）677份血清标本中，抗HBoV VP2蛋白的IgG抗体阳性400份，总检出率为59．1％。（2）被检对象中，〈1个月的婴儿抗体阳性率为45．3％，1个月～的婴儿抗体阳性率为41．4％，2个月～的婴儿抗体阳性率最低（31．3％），6个月～至7岁龄抗体阳性检出率在45．6％～69．7％，7岁后直至40岁，抗体阳性检出率维持在70％左右；50岁后则为61．8％～62．8％。结论早在1996年北京地区的人群中就有59．1％曾经感染过HBoV，说明这种病毒是一种新发现的病毒而不是新出现的病毒，北京地区人群中该病毒的感染较常见。6个月龄以前的婴儿为易感人群。

关键词：细小病毒科病毒结构蛋白质类免疫球蛋白G 印迹法,蛋白质

来源：评论

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北京地区新近报道的人Boca病毒VP1、VP2蛋白编码区基因序列分析

引用

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1087-1091页

作者：赵林清钱渊朱汝南邓洁王芳 Li Yan 首都儿科研究所病毒研究室北京市感染与免疫中心实验室100020 中国协和医科大学研究生院在读博士加拿大公共卫生署国家微生物实验室流感和呼吸道病毒实验室

目的了解北京地区新近报道的人Boca病毒(human bocavirus,HBoV)主要结构蛋白编码区基因的特征。方法选择已经过初步研究证明为HBoV NP1基因检测为阳性的2份临床标本BJ3064、BJ3722,应用针对HBoV VP1蛋白编码区基因的PCR引物进行扩增,对... 详细信息

目的了解北京地区新近报道的人Boca病毒(human bocavirus,HBoV)主要结构蛋白编码区基因的特征。方法选择已经过初步研究证明为HBoV NP1基因检测为阳性的2份临床标本BJ3064、BJ3722,应用针对HBoV VP1蛋白编码区基因的PCR引物进行扩增,对所获得的PCR扩增产物直接进行核苷酸序列测定。将所测到的序列与GenBank中的基因序列进行比较分析和种系进化分析。结果从标本BJ3064及BJ3722中扩增得到HBoV VP1蛋白编码区全基因的PCR扩增产物为2016 bp,编码671个氨基酸。VP2蛋白是在不改变开放性读码框架(ORF)的情况下,由VP1蛋白编码区内起始合成,并与VP1终止于同一终止密码子,长度为1629 bp,编码542个氨基酸。与HBoV原型株ST1、ST2株相比较,BJ3064、BJ3722的VP1及VP2蛋白无论是核苷酸水平还是氨基酸水平的同源性均超过98％,但与同属细小病毒的BPV及MVC相应位置的序列相比较,同源性较低,其中核苷酸序列同源性低于60％,而氨基酸序列同源性低于50％。VP1及VP2蛋白的编码区基因进化分析显示, BJ3064、BJ3722与ST2之间进化关系较ST1更密切。在BJ3064、BJ3722的VP1蛋白中,也存在类似于MVC的保守性磷酸酯酶A2特异性位点的活性基序(HDXXY)及Ca2+结合位点。结论已得到HBoV的结构蛋白VP1和VP2的全基因,将为儿科急性呼吸道感染中该病毒的病原作用、地位及其在各年龄组人群中的血清学特征的深入研究打下坚实的基础。

关键词：人Boca病毒(HBoV) 基因序列分析 VP1蛋白编码区 VP2蛋白编码区

来源：评论

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北京地区人Boca病毒外壳蛋白VP2的原核表达及抗原性初步分析

北京地区人Boca病毒外壳蛋白VP2的原核表达及抗原性初步分析

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：赵林清钱渊董慧瑾朱汝南邓洁王芳首都儿科研究所病毒研究室、北京市感染与免疫中心实验室加拿大公共卫生署国家微生物实验室流感和呼吸道病毒实验室

目的获得新发现的北京地区人 Boca（HBoV）病毒主要外壳蛋白 VP2, 为对该病毒病原学的深入研究打下基础。方法从已证明为 HBoV 阳性的临床标本 BJ3722中经聚合酶链反应（PCR）扩增得到 HBoV VP2蛋白编码区基因片段,将其克隆至 pUCm-T ... 详细信息

目的获得新发现的北京地区人 Boca（HBoV）病毒主要外壳蛋白 VP2, 为对该病毒病原学的深入研究打下基础。方法从已证明为 HBoV 阳性的临床标本 BJ3722中经聚合酶链反应（PCR）扩增得到 HBoV VP2蛋白编码区基因片段,将其克隆至 pUCm-T 载体中,然后再亚克隆至原核表达载体 pET30b（+）,经双酶切、 PCR、序列测定等方法挑选、鉴定阳性克隆,得到重组表达质粒 pET30b-VP2,转化大肠杆菌 BL21（DE3）,在不同的温度下利用 IPTG 诱导蛋白表达;对得到的蛋白表达产物粗提物经 Ni亲和层析纯化后,利用抗组氨酸抗体、兔抗 HBoV-VP2多肽免疫血清及人血清进行抗原性初步分析。结果 BJ3722 VP2基因正确插入 pET30b 中,读码框架正确,表明得到了预期的 pET30b-VP2重组原核表达质粒。比较25℃、 30℃、37℃三个不同的温度下的蛋白表达产物,以25℃1mM IPTG 诱导培养过夜后产生的带6个组氨酸标记的重组 VP2蛋白量最大,主要以包涵体形式存在。VP2 蛋白粗提物经 Ni亲和层析,在 pH 4.5时获得较理想的纯化结果。Western blot 显示所表达的蛋白能够与抗组氨酸特异性抗体、兔抗 HBoV-VP2蛋白多肽免疫血清以及人血清发生反应。结论本研究构建成功了重组 pET30b-VP2原核表达质粒, 改善表达及纯化条件,得到了较大量的 HBoV VP2蛋白表达,并初步证明表达产物具有抗原特异性,可用于 HBoV 的深入研究。

关键词：人 Boca 病毒主要外壳蛋白 VP2 原核表达抗原特异性

来源：评论

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