检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2005年第1期27卷 13-17页

作者：陈君彦李海燕申之义陈化兰于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室内蒙古农业大学动物科学与医学学院全国畜牧兽医总站北京100026 华南农业大学动物科学学院

对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型... 详细信息

对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型SIV的HAI蛋白在 10、11、2 3、87、2 87位都存在高度保守的糖基化位点 ,此外 ,在 2 76位多了一个“_NTT_”糖基化位点 ,与参考毒株SW /IW / 93/ 0 1一致 ,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征。本研究进一步发现 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G ,具有非高致病力毒株分子特征 ;而其受体结合位点在HA蛋白上第 2 2 6位是Q ,第 2 2 8位是G ,可能具有感染禽的潜力。经同源性比较 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/ 4 75 4 / 94的同源性相对最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到 95 7%～ 96 1%和96 5 %～ 97 2 %。由同源性比较结果和进化树分析可见。

关键词： H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR法检测H5亚型禽流感病毒

引用

黑龙江畜牧兽医 2006年第11期 13-15页

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰孙凯魏萍中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

用2株不同致病力的H5亚型禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6,12,24,48,72 h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene RG3 000实时定量PCR仪对H5亚型AIV的HA基因进行检测,试图建立快速检测H5亚型AIV的real-time RT-PCR方法,并用所建立的方法对来自全国各地的疑似H5亚型AIV的病料和咽喉拭子、泄殖腔拭子346份进行检测。结果表明：农业部动物流感重点开放实验室建立的HA基因的teal-time RT-PCR方法可以检测到细胞培养物中和临床样品中是否含有H5亚型AIV,与常规RT-PCR比较,该方法更加特异、准确、快速。

关键词： real—time RT—PCR H5亚型禽流感病毒 HA基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用

引用

中国预防兽医学报 2009年第1期31卷 60-64页

作者：石霖王秀荣杨忠苹陶启蒙王煜武嘉男蔡冬冬包红梅陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室／兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 重庆出入境检验检疫局重庆400020

本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与... 详细信息

本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与胶体金标记的二抗杂交,银染显色后根据灰度值判定结果,从而建立了2种禽病的可视化蛋白芯片鉴别诊断方法。采用该方法对18份现地血清样品进行初步检测,结果显示该芯片可特异性的与相应的抗体杂交,无交叉反应,而且呈现较强的杂交信号,其信号灰度值在阳性血清浓度为50μg/mL～300μg/mL范围内成线性关系(Y=0.426X+4.225)。用该芯片方法和琼扩(AGP)抗体检测方法对18份现地样品进行符合率检测,结果表明该可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且检测灵敏度为是AGP方法的400倍以上。研究表明该方法可用于同步鉴别2种禽病,是一种有效的抗体检测新方法。

关键词：禽流感新城疫可视化诊断蛋白芯片

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组腺病毒rAd-H5HA-EGFP对小鼠免疫保护性的研究

引用

中国兽医学报 2011年第1期31卷 1-5页

作者：吴运谱乔传玲杨焕良展小过陈艳辛晓光陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁沈阳110164 辽宁省动物医学研究院辽宁沈阳110164

将重组腺病毒rAd-H5HA-EGFP以不同免疫剂量接种BALB/c小鼠,通过检测小鼠免疫后的抗体以及抵抗H5N1亚型流感病毒攻击的保护对rAd-H5HA-EGFP的免疫保护性进行了评估。分别以108 TCID50、107 TCID50的rAd5-H5HA-EGFP免疫小鼠,初次免疫后3... 详细信息

将重组腺病毒rAd-H5HA-EGFP以不同免疫剂量接种BALB/c小鼠,通过检测小鼠免疫后的抗体以及抵抗H5N1亚型流感病毒攻击的保护对rAd-H5HA-EGFP的免疫保护性进行了评估。分别以108 TCID50、107 TCID50的rAd5-H5HA-EGFP免疫小鼠,初次免疫后3周进行加强,剂量为2×108 TCID50和2×107 TCID50,同时以接种rAd5-EGFP和PBS的小鼠作为对照。二免后3周,将各组试验小鼠随机分为2组,分别应用106 EID50的SW/FJ/1/01株和CK/HuN/77/05两株H5N1亚型流感病毒进行攻击。结果显示,重组病毒108 TCID50和107 TCID50的免疫剂量均能够诱导高水平的HI抗体生成,rAd-H5HA-EGFP免疫小鼠在受到病毒SW/FJ/1/01和CK/HuN/77/05攻击后,与接种腺病毒rAd-EGFP和PBS的对照组小鼠相比,没有出现明显的体质量减轻,攻毒后病毒在免疫小鼠体内的复制被完全或部分抑制,脏器内检测到的病毒含量明显低于对照组小鼠;免疫小鼠在受到CK/HuN/77/05毒株攻击时,没有出现死亡(0/5),而接种rAd-EGFP和PBS的对照组小鼠均有死亡,死亡比例分别为4/5和5/5。以上结果表明,该重组rAd-H5HA-EGFP对小鼠具有良好的免疫保护性,有望成为1株新型H5N1亚型动物流感疫苗的候选重组毒株。

关键词：重组腺病毒 rAd-H5HA-EGFP 流感病毒 H5N1亚型免疫保护性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国H3亚型流感病毒生态学与分子进化的研究

引用

中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 144-146页

作者：崔尚金李建伟金红李海燕唐秀英于康震王秀荣刘尚高 Y Guan K F Shortridge M Deries 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 国家动物流感中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094 香港大学微生物系

病毒生态学与分子进化是一门新兴的学科 ,研究病毒在各种环境中的关系 ,可以为今后病毒的研究与防治奠定基础。本研究首次详细对我国 14株鸭、鸡等禽流感和马、猪等动物的流感病毒的生态学与分子进化进行了分析研究 ,初步摸清了这些病... 详细信息

病毒生态学与分子进化是一门新兴的学科 ,研究病毒在各种环境中的关系 ,可以为今后病毒的研究与防治奠定基础。本研究首次详细对我国 14株鸭、鸡等禽流感和马、猪等动物的流感病毒的生态学与分子进化进行了分析研究 ,初步摸清了这些病毒在我国的流行与进化情况 ,为今后流感病毒疫苗的应用奠定了理论基础。

关键词：中国 H3亚型流感病毒生态学分子进化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

引用

畜牧与兽医 2013年第10期45卷 6-9页

作者：林源柳金雄陈普成姜永萍华荣虹邬丽李奇蒙丁蕾蕾刘毅刘道新陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128 湖南省动物疫病预防与控制中心湖南长沙410007

用原核表达并纯化的鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,筛选到1株分泌针对DTMUV的E蛋白的单抗融合细胞,并命名为LY12。Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明,所获得细... 详细信息

用原核表达并纯化的鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,筛选到1株分泌针对DTMUV的E蛋白的单抗融合细胞,并命名为LY12。Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明,所获得细胞分泌的抗体只与DTMUV的E蛋白发生特异性反应,与日本脑炎病毒(JEV)和西尼罗病毒(WNV)无交叉反应。进一步鉴定该单抗的抗体亚类为IgG1,轻链为κ链。抗E蛋白单克隆抗体的制备为DTMUV的诊断和相关基础研究奠定了基础。

关键词：鸭坦布苏病毒 E蛋白单克隆抗体鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

虎源伪狂犬病毒的鉴定及gB基因分析

引用

中国病原生物学杂志 2014年第12期9卷 1057-1060页

作者：李元果高晓龙桑晓宇王海军张成林王爱荣于志君任志广郑学星冯娜王铁成杨松涛黄耕高玉伟夏咸柱胡永浩甘肃农业大学甘肃兰州730070 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病重点实验室吉林长春130122 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点实验室黑龙江哈尔滨150001 北京动物园北京100081

目的对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析。方法采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进行PCR扩增、测序并构建进化树;经负染法染色后用电子显微镜观察... 详细信息

目的对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析。方法采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进行PCR扩增、测序并构建进化树;经负染法染色后用电子显微镜观察病毒形态结构;取研磨组织液接种家兔,观察病毒的致病力。结果 PCR扩增组织样品为gB基因、gD基因阳性,基因序列经blast比对伪狂犬病毒。将gB基因通过序列测定分析并与GenBank中近4年公布的9株伪狂犬病毒gB基因比对,同源性为99.5%-100%。进化树分析该病毒与2012年北京家猪分离株属同一进化分支。组织研磨液置电镜观察,见病毒呈圆形,直径100nm左右,有囊膜,为具有典型特征的疱疹病毒样病毒粒子。家兔接种组织研磨液后出现啃咬接种部位,抽搐,嘶叫等伪狂犬病症状。结论本研究在病死虎体内检测到伪狂犬病毒,表明濒危野生动物虎已受到伪狂犬病毒病的威胁。

关键词：虎伪狂犬病毒 PCR鉴定 gB基因进化分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感监测分析

引用

中国家禽 2013年第17期35卷 58-60页

作者：黄建龙王昌建王卫国邓国华谭丹范仲鑫朱春霞何世成汪洪冰刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

为了解环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况,2011~2012年先后3次对东洞庭湖、南洞庭湖和西洞庭湖区的149个鸭场进行监测,在40个鸭场检测到低致病性禽流感病毒,场间阳性率为26.8%,其中有2个鸭场混合感染多种低致病性禽流感病毒。... 详细信息

为了解环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况,2011~2012年先后3次对东洞庭湖、南洞庭湖和西洞庭湖区的149个鸭场进行监测,在40个鸭场检测到低致病性禽流感病毒,场间阳性率为26.8%,其中有2个鸭场混合感染多种低致病性禽流感病毒。在鸭拭子和环境拭子中共分离到有H3、H4、H6、H9、H10、H11和H12等7种亚型的低致病性禽流感病毒,其中H3和H4亚型的分离率较高,拭子的病毒分离率为3.88%,表明在洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况较为严重。

关键词：环洞庭湖区低致病性禽流感场间阳性率分离率监测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达H5亚型禽流感同义(Consensus)HA蛋白的重组质粒构建及体外表达

引用

中国预防兽医学报 2012年第7期34卷 510-513页

作者：常晓飞赵双成田石柳金雄王靖飞曾显营胡永浩姜永萍陈化兰甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730007 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病诊断与技术服务中心黑龙江哈尔滨150001

为研究禽流感病毒(AIV)H5亚型同义Consensus HA(Cons-HA5)基因的重组表达质粒在体外的表达情况,本研究通过对从NCBI流感数据库中获得的5000条H5亚型AIV的HA蛋白的序列比对、分析获得一条同义HA蛋白,将其相对应的核苷酸序列进行鸡体偏嗜... 详细信息

为研究禽流感病毒(AIV)H5亚型同义Consensus HA(Cons-HA5)基因的重组表达质粒在体外的表达情况,本研究通过对从NCBI流感数据库中获得的5000条H5亚型AIV的HA蛋白的序列比对、分析获得一条同义HA蛋白,将其相对应的核苷酸序列进行鸡体偏嗜性密码子优化,人工合成Cons-HA5基因并克隆于真核表达载体pCAGGS中构建重组表达质粒pCACons-HA5。将重组质粒转染293-T细胞,在激光共聚焦显微镜下观察转染后不同时间HA蛋白的表达情况,同时在转染后24 h、48 h后分别进行表达蛋白的western blot检测。结果表明,pCACons-HA5转染293-T细胞后,其表达的HA蛋白先分布于细胞质中,而后转移至细胞膜表面;westernblot鉴定结果表明,Cons-HA5重组蛋白可以与AIV多克隆血清反应分子量约为70 ku。该重组质粒的构建将为进一步Cons-HA5核酸免疫对H5亚型不同抗原群AIV的交叉保护免疫效力研究奠定基础。

关键词： H5亚型禽流感病毒同义HA基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达

H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会

作者：王全英乔传玲张洪波陈化兰申之义中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室内蒙古农业大学动物医学系

从含有禽流感病毒A／Goosc／Guangdong/1／96(H5N1)NA基因的质粒PMD18-TNA中切下NA基因片段,将其亚克隆到pSY538中的痘病毒早晚期启动子LP2EP2的下游,又将LacZ基因克隆到该质粒中,然后将同时含有NA及LacZ基因的片段再亚克隆到禽痘病毒载... 详细信息

从含有禽流感病毒A／Goosc／Guangdong/1／96(H5N1)NA基因的质粒PMD18-TNA中切下NA基因片段,将其亚克隆到pSY538中的痘病毒早晚期启动子LP2EP2的下游,又将LacZ基因克隆到该质粒中,然后将同时含有NA及LacZ基因的片段再亚克隆到禽痘病毒载体pSY681中,从而构建出表达AIVNA蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体。用脂质体介导的方法将转移栽体转染已感染禽痘病毒S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞,在X-gal存在的条件下,经过蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化、PCR和Wlestern-blot检测等,结果获得了能稳定表达该蛋白的重组禽痘病毒,为进一步探讨NA蛋白的免疫原性奠定了基础．

关键词：禽流感病毒 NA基因重组禽痘病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：