检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2019年第12期46卷 3193-3204页

作者：吴麒陈颖邱凯瑞罗倩倩桂林医学院生物化学与分子生物学教研室

【背景】桂林会仙湿地位于喀斯特峰丛洼地和峰丛平原的过渡区,主要由岩溶地下河补给,水质呈现富钙偏碱特征,是一处典型的岩溶湿地环境,湿地沉积物以厌氧环境为主,独特的环境特征使之成为研究新型厌氧微生物的理想场所。氢型产甲烷菌和... 详细信息

【背景】桂林会仙湿地位于喀斯特峰丛洼地和峰丛平原的过渡区,主要由岩溶地下河补给,水质呈现富钙偏碱特征,是一处典型的岩溶湿地环境,湿地沉积物以厌氧环境为主,独特的环境特征使之成为研究新型厌氧微生物的理想场所。氢型产甲烷菌和乙酸型产甲烷菌是环境中有机质厌氧降解的重要参与者,但目前会仙湿地产甲烷菌生理生态功能的研究十分有限。【目的】揭示乙酸盐营养型产甲烷条件和氢气营养型产甲烷条件下岩溶湿地环境古菌群落结构的变化规律和产甲烷菌的主要类群,探讨岩溶环境古菌的功能和相互关系。【方法】以会仙岩溶湿地沉积物为研究材料,分别以乙酸盐和氢气为唯一能源物进行富集培养,结合未添加任何能源底物的对照处理,动态监测产甲烷通量,分别构建了3个共包含146条古菌16S rRNA基因全长序列的文库,以及3个共包含138条甲基辅酶M还原酶基因mcr A基因序列的文库,通过构建系统发育树比较分析不同产甲烷底物培养条件下典型岩溶湿地古菌群落的变化规律。【结果】从乙酸型和氢型产甲烷条件培养物顶空气中都检测到了几乎等浓度的甲烷产生,甲烷八叠球菌是mcr A文库中主要的古菌类群,其中包含了Methanosarcina属古菌、Zoige Cluster I (ZC-I)和ANME-2d Cluster (AD)类群古菌,以及两个相对独立且不包含任何参考序列的分支KT-I和KT-II,可能代表产甲烷菌的新类群;经过两种产甲烷条件的富集培养后,ZC-I、AD和KT-II类群古菌的序列数占比有较为显著的增加(45%–155%);深古菌(Bathyarchaeota)是所有古菌16Sr RNA基因文库的优势类群,序列占比为88%–100%,其中MCG-11亚群最为丰富,占所有深古菌的84%,并且在乙酸盐产甲烷条件下增加了17%。【结论】会仙湿地沉积物中蕴涵着丰富的新型古菌序列,沉积物中主要的氢型产甲烷菌和乙酸型产甲烷菌都来自甲烷八叠球菌目,深古菌在岩溶环境和乙酸型产甲烷条件下可能都发挥着重要的作用。

关键词：产甲烷菌岩溶湿地

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栀子苷抑制甲型流感病毒感染细胞中Toll样受体7/核因子-κB信号通路

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第8期30卷 749-754页

作者：张春晶于海涛齐齐哈尔医学院生物遗传、生物化学与分子生物学教研室 161042

目的研究栀子苷对甲型流感病毒H3N2感染所致的Toll样受体7（Toll-like receptors7,TLR7）及其介导的细胞内转录因子核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）活性及前炎症细胞因子TNF-α和IL-6释放的影响,以探讨栀子苷干预甲型流... 详细信息

目的研究栀子苷对甲型流感病毒H3N2感染所致的Toll样受体7（Toll-like receptors7,TLR7）及其介导的细胞内转录因子核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）活性及前炎症细胞因子TNF-α和IL-6释放的影响,以探讨栀子苷干预甲型流感病毒作用的分子生物学机制.方法甲型流感病毒H3N2作为刺激因素,利用双荧光素酶顺式报告系统和免疫荧光实验检测栀子苷对NF-κB转录活性及NF-κB核转位的影响.RT-PCR法进一步验证栀子苷对NF-κB上下游靶基因TLR7、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平的影响.结果通过NF-κB双萤光素酶报告系统检测发现,与正常对照组比较,病毒感染的细胞中NF-κB荧光素酶报告活性明显升高与病毒损伤组比较,栀子苷治疗组NF-κB荧光素酶报告活性明显受到抑制.荧光倒置显微镜下观察NF-κB p65磷酸化水平及核转位变化结果显示,病毒感染的细胞中NF-κB磷酸化水平及人核率明显升高与病毒损伤组比较,栀子苷治疗组NF-κB磷酸化水平及入核率明显受到抑制.RT-PCR结果显示栀子苷能明显抑制病毒诱导的TLR7、TNF-α和IL-6 mRNA的高表达.结论栀子苷可拮抗甲型流感病毒H3N2感染细胞中TLR7介导的细胞内转录因子NF-κB信号转导通路的活化,并可抑制其下游靶基因TNF-α和IL-6 mRNA的高表达水平来发挥抗病毒感染的作用.

关键词：栀子苷甲型H3N2流感病毒 Toll样受体7/核因子-κB信号通路炎症细胞因子

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蛋白激酶CK2抑制剂TBB对甲状腺鳞癌细胞株SW579 CK2β和Akt表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2012年第2期38卷 276-280页

作者：刘超刘洋赵颂王翠瑶肖建英辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁锦州121001

目的:观察四溴苯三唑(TBB)对甲状腺鳞癌SW579细胞株CK2β和Akt表达的影响,探讨TBB抗甲状腺癌的作用机制。方法:体外培养SW579细胞,实验分为对照组(未加任何处理组和DMSO组)、TBB组(终浓度为25μmol·L-1)和Wortmannin组(终浓度为100... 详细信息

目的:观察四溴苯三唑(TBB)对甲状腺鳞癌SW579细胞株CK2β和Akt表达的影响,探讨TBB抗甲状腺癌的作用机制。方法:体外培养SW579细胞,实验分为对照组(未加任何处理组和DMSO组)、TBB组(终浓度为25μmol·L-1)和Wortmannin组(终浓度为100 nmol·L-1)。MTT比色法测定细胞生长抑制率,同时测定蛋白激酶CK2的活性。采用RT-PCR方法检测SW579细胞CK2β及Akt的mRNA表达,分析各处理组CK2β及Akt基因表达变化。采用Western blotting方法检测SW579细胞CK2β及Akt的蛋白表达,分析各处理组CK2β及Akt的蛋白表达变化。结果:与对照组比较,TBB组SW579细胞生长抑制率明显增加(P<0.01),细胞内CK2的活性明显降低(P<0.01)。RT-PCR结果表明,与对照组比较,TBB组CK2β的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),Akt的mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。Western blotting结果表明,与未处理组比较,Wortmannin组内源性CK2的活性无明显变化(P>0.05),TBB组CK2β的表达明显降低(P<0.01),同时Akt Thr308和Ser473磷酸化状态受到抑制(P<0.01),总Akt水平无明显变化。结论:TBB可降低SW579细胞蛋白激酶CK2β的表达,进而再下调Akt的活性。

关键词：四溴苯三唑甲状腺鳞癌 CK2β Akt/PKB SW579

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蛋白激酶A对CDC25B蛋白S149与S321位点磷酸化的修饰抑制小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂

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生理学报 2012年第1期64卷 33-40页

作者：肖建英刘超孙小涵于秉治中国医科大学生物化学与分子生物学教研室沈阳l10001 辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室锦州121001

在小鼠1-细胞期受精卵,蛋白激酶A（protein kinase A,PKA）可通过磷酸化细胞分裂周期25B（cell division cycle25B,CDC25B）的321位Ser引起受精卵分裂阻滞。本文旨在研究PKA对CDC25B149位点Ser的磷酸化对小鼠受精卵发育的影响,及其与32... 详细信息

在小鼠1-细胞期受精卵,蛋白激酶A（protein kinase A,PKA）可通过磷酸化细胞分裂周期25B（cell division cycle25B,CDC25B）的321位Ser引起受精卵分裂阻滞。本文旨在研究PKA对CDC25B149位点Ser的磷酸化对小鼠受精卵发育的影响,及其与321位点的关系。质粒pBSK-CDC25B-WT（野生型）、pBSK-CDC25B-S149A（149位Ser突变成Ala）、pBSK-CDC25B-S321A（321位Ser突变成Ala）、pBSK-CDC25B-S149A/S321A（149位和321位Ser联合突变成Ala）体外转录成mRNAs;显微注射入小鼠S期受精卵中,在PKA抑制剂H-89预处理的M16培养基中培养,观察其对受精卵发育、有丝分裂成熟促进因子（matu-ration promoting factor,MPF）活性及CDC2-Tyr15磷酸化状态的影响。结果显示,H-89呈剂量（0~50μmol/L）依赖性的方式加速小鼠受精卵卵裂。然后选择卵裂率接近100%、H-89（40μmol/L）培养的小鼠受精卵,与对照组相比,CDC25B各种mRNAs注射组受精卵卵裂率明显增高,MPF活性提前达到高峰;CDC2-Tyr15磷酸化状态和MPF活性变化相一致,以上结果说明,CDC25B蛋白的149位Ser也是PKA在体内调控CDC25B的重要靶点。因此在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,PKA对小鼠CDC25B蛋白S149位点与S321位点的磷酸化修饰可能是控制受精卵G2/M转换的重要方式。

关键词：细胞分裂周期25B 蛋白激酶A 有丝分裂成熟促进因子 H-89 小鼠受精卵

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佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响

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中国药学杂志 2014年第10期49卷 837-842页

作者：林碧华万树伟刘付梅崔仲宜张鑫李祥勇广东医学院生物化学与分子生物学教研室广东东莞523000

目的探讨佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响及可能的作用机制。方法利用CCK-8法测定佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1的体外抑制活性,并绘制1、10、100μmol·L-13个浓度的佛手柑内酯对2种鼻咽癌细胞作用后的生长曲线,然后利用P... 详细信息

目的探讨佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响及可能的作用机制。方法利用CCK-8法测定佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1的体外抑制活性,并绘制1、10、100μmol·L-13个浓度的佛手柑内酯对2种鼻咽癌细胞作用后的生长曲线,然后利用PI染料法检测各组细胞的周期分布。利用Western blotting检测CDK4、CDK6、CDK2、Cyclin D1和Cyclin E2的蛋白表达量,并检测各组β-catenin、GSK-3β及GSK-3β的S9位点蛋白磷酸化水平。结果佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1具有较显著的体外抑制活性,呈明显的浓度依赖性(CNE-2:r=0.926,P<0.05;HONE-1:r=0.959,P<0.05)及时间依赖性(CNE-2:r=0.991,P<0.05;HONE-1:r=0.963,P<0.05),随着佛手柑内酯浓度的增加,两鼻咽癌细胞处于G0-G1期的细胞数目比例上升,S期与G2-M的比例下降。相对于对照组,佛手柑内酯能显著降低实验组细胞CDK4、CDK6、CDK2、Cyclin D1、Cyclin E2和β-catenin的蛋白表达量,但对GSK-3β的蛋白表达水平无显著影响,对GSK-3β的S9位点蛋白磷酸化水平的影响也无明显规律。结论佛手柑内酯能通过阻滞鼻咽癌细胞周期运行抑制其体外增殖能力,这一过程可能与部分周期蛋白的下调及wnt/β-catenin信号通路的被抑制有关。

关键词：佛手柑内酯鼻咽癌细胞周期 β-catenin GSK-3β

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基于分子信标策略的CRISPR/Cas12a荧光传感器用于循环肿瘤DNA的放大检测

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分析化学 2023年第2期51卷 184-193页

作者：张函笑代晓春周亚楠吕旭珍弓韬赵旭华于保锋山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

构建了一种以分子信标（Molecular beacon, MB）为信号探针的CRISPR/Cas12a生物传感器，用于循环肿瘤DNA(Circular tumor DNA, ctDNA)的快速放大检测。MB具有良好的稳定性，其颈部末端分别标记有荧光素（FAM）和四甲基罗丹明（TAMRA）... 详细信息

构建了一种以分子信标（Molecular beacon, MB）为信号探针的CRISPR/Cas12a生物传感器，用于循环肿瘤DNA(Circular tumor DNA, ctDNA)的快速放大检测。MB具有良好的稳定性，其颈部末端分别标记有荧光素（FAM）和四甲基罗丹明（TAMRA）两种荧光基团。ctDNA不存在时，CRISPR/Cas12a体系无活性，无法切割MB，因此MB两端的荧光基团由于形成发夹结构的颈部相互靠近而发生荧光共振能量转移（Fluorescence resonance energy transfer, FRET），显示出TAMRA的荧光。当ctDNA存在时，ctDNA特异性识别Cas12a/crRNA二元复合物并激活Cas12a的反式切割活性。由于单链DNA是Cas12a最敏感的底物，因此MB的环部单链首先被切割，继而引起颈部双链的解离而导致两种荧光团彼此远离，无法发生FRET，最终显示出FAM的荧光信号。对MB环部的碱基数目、MB浓度以及crRNA与Cas12a的浓度比例等实验条件进行了优化。在最优条件下，1.7～500 pmol/L范围内，ctDNA浓度与传感器在518 nm处的荧光强度呈线性关系，检出限为0.6 pmol/L(3σ)。将此传感器用于血清样品中ctDNA的检测，回收率在93%～110%之间。

关键词： CRISPR 生物传感器荧光共振能量转移循环肿瘤DNA

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基质金属蛋白酶介导的人肿瘤坏死因子α融合蛋白的构建和表达

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生物医学工程学杂志 2011年第3期28卷 534-537页

作者：赵乔佳杰侯敢黄迪南陈书勇广东医学院生物化学与分子生物学教研室湛江524023

为了提高人肿瘤坏死因子α(hTNF-α)靶向性,同时降低其在体内的毒副作用,应用现代基因工程技术对hTNF-α进行改造,构建融合蛋白成为新的途径。本文利用基因工程的方法成功构建hTNF-α与基质金属蛋白酶-1(MMP1)f、oldon序列的重组质粒,... 详细信息

为了提高人肿瘤坏死因子α(hTNF-α)靶向性,同时降低其在体内的毒副作用,应用现代基因工程技术对hTNF-α进行改造,构建融合蛋白成为新的途径。本文利用基因工程的方法成功构建hTNF-α与基质金属蛋白酶-1(MMP1)f、oldon序列的重组质粒,将该质粒转化至Rosetta2(DE3),在一定条件下,经异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白可溶性表达,后用谷胱甘肽(GST)树脂纯化试剂盒进行纯化,得到融合蛋白的纯化产物。为以后的科研和临床应用打下基础。

关键词：人肿瘤坏死因子-α 基质金属蛋白酶-1 基因工程融合蛋白

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原子吸收光谱法测定南瓜吸收镉的研究

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光谱学与光谱分析 2006年第8期26卷 1557-1559页

作者：李贞霞荆瑞俊董卫华李新峥刘弘河南科技学院园艺系河南新乡453003 新乡医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003

利用原子吸收分光光度计对南瓜吸收重金属镉的特性进行了研究。结果表明,随着镉浓度的增加,南瓜对镉的吸收量增大;随着水培时间的延长,南瓜对镉的吸收量增加,水培8 h后吸收量基本趋于饱和;吸收高峰在水培后2 h时出现,而后随时间的延长... 详细信息

利用原子吸收分光光度计对南瓜吸收重金属镉的特性进行了研究。结果表明,随着镉浓度的增加,南瓜对镉的吸收量增大;随着水培时间的延长,南瓜对镉的吸收量增加,水培8 h后吸收量基本趋于饱和;吸收高峰在水培后2 h时出现,而后随时间的延长而逐渐降低。酸性和碱性条件较中性条件下南瓜植株对镉的吸收量均有下降,在pH 3条件下吸收量最小,pH 7条件下吸收量最大。

关键词：南瓜镉原子吸收光谱法

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人白细胞介素18突变体的构建及其功能(英文)

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生物化学与生物物理学报 2003年第5期35卷 409-415页

作者：傅奕裴冬生孙兵沈万华陆梁胡书群赵惠仁扬州大学医学院生化教研室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心苏州大学附属医院神经外科徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心扬州225001 徐州221002 苏州215001

为研究人白细胞介素 18(hIL 18)结构与功能的关系 ,用PCR定点突变技术分别构建了N末端、C末端缺失突变体(ΔNC)和IL 1特征样序列突变体S154A/Y156F/E157P/C163 T (S)。将突变体cDNA与原核表达载体 pJW 2重组并转化大肠杆菌DH5α ,经热... 详细信息

为研究人白细胞介素 18(hIL 18)结构与功能的关系 ,用PCR定点突变技术分别构建了N末端、C末端缺失突变体(ΔNC)和IL 1特征样序列突变体S154A/Y156F/E157P/C163 T (S)。将突变体cDNA与原核表达载体 pJW 2重组并转化大肠杆菌DH5α ,经热诱导表达蛋白质 ,SDS PAGE证实表达的目的蛋白质以包涵体形式存在。菌体经超声破碎后 ,包涵体以 2mol/L尿素洗涤 ,8mol/L尿素溶解 ,并经SephadexG 75柱纯化 ,纯度可达 95 %以上。突变体蛋白质经逐步稀释复性后 ,以诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生干扰素 γ(IFN γ)及对核因子 κB(NF κB)的激活能力为指标 ,检测突变体的生物学活性。结果显示ΔNC、S这 2个突变体对IFN γ的诱生能力显著低于野生型hIL 18,分别为野生型hIL 18的 13%和 4 8%。同时 ,ΔNC、S对NF κB的激活能力也低于野生型hIL 18,分别为野生型hIL 18的 6 9.7%和 89.8%。这些结果表明缺失的片段或突变的位点对hIL 18的功能有重要的作用。

关键词：白细胞介素-18 结构与功能干扰素-γ 核因子-κB 定点突变

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哺乳动物Hippo信号通路:肿瘤治疗的新标靶

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遗传 2012年第3期34卷 269-280页

作者：许传铭万福生南昌大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室南昌330006

Hippo信号通路是首次在果蝇中发现具有调节细胞增殖与凋亡作用的信号通路。最近发现果蝇Hippo信号通路的组成、分子作用机制和生物学功能在进化过程中高度保守。Hippo信号通路在胚胎发育中对细胞的生长分化、组织器官形成以及成体干细... 详细信息

Hippo信号通路是首次在果蝇中发现具有调节细胞增殖与凋亡作用的信号通路。最近发现果蝇Hippo信号通路的组成、分子作用机制和生物学功能在进化过程中高度保守。Hippo信号通路在胚胎发育中对细胞的生长分化、组织器官形成以及成体干细胞的维持和自稳态的保持等方面具有重要作用。同时,Hippo信号通路与Wnt信号通路、Notch信号通路等相互作用、密切联系,在肿瘤的发生、发展过程中也起到关键作用。文章综述了哺乳动物Hippo信号通路的作用机理、与其他信号通路和蛋白质因子的相互联系及与肿瘤的关系,对于肿瘤的诊断、预防和治疗具有一定的参考价值。

关键词：哺乳动物 Hippo信号通路肿瘤

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