检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2023年第2期48卷 336-348页

作者：黄文倩王迎夏田维圣王娟屠鹏飞王晓晖史社坡刘晓北京中医药大学中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

酶作为一种生物催化剂,具有催化效率高、反应选择性强、目标产物专一、反应条件温和、环境友好等优点,是合成复杂有机分子的重要工具。且随着基因测序技术、分子生物学、遗传操作等技术的不断发展,酶的多样性稳步增加,可催化的反应类型... 详细信息

酶作为一种生物催化剂,具有催化效率高、反应选择性强、目标产物专一、反应条件温和、环境友好等优点,是合成复杂有机分子的重要工具。且随着基因测序技术、分子生物学、遗传操作等技术的不断发展,酶的多样性稳步增加,可催化的反应类型也逐步多元化。在酶催化合成过程中,大多数简单反应通过单酶催化即可完成,而很多复杂反应的发生往往需要2个或以上的酶参与催化。因此,将多个酶组合到一起,构建多酶催化级联反应已逐渐成为生物化学领域的一个研究热点。如今,越来越多结构复杂的天然产物的生物合成途径得到解析,具有新颖催化活性的次级代谢酶不断被鉴定、发现并组合应用于结构多样性天然/非天然小分子的酶法合成中。该文总结了一系列多酶催化级联反应的例子,着重介绍了级联催化方法在糖类、核苷类、黄酮类、萜类、生物碱类以及手性分子等化合物合成中的应用,并对多酶催化级联方法目前存在的问题、解决对策及未来发展方向进行了讨论与展望。

关键词：酶催化生物催化多酶催化级联反应

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蛇足石杉内生真菌Penicillium chrysogenum MT-40的代谢产物研究

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中草药 2022年第13期53卷 3904-3911页

作者：贾放放齐博文张蓓蓓王雯静王阳石钰刘晓朱枝祥王娟史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 高平市中医医院山西高平048400

目的研究蛇足石杉Huperziaserrata内生真菌PenicilliumchrysogenumMT-40的代谢产物。方法利用硅胶、SephadexLH-20及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及IR、MS、NMR等数据鉴定化合物的结构;利用体外模型进行抑制... 详细信息

目的研究蛇足石杉Huperziaserrata内生真菌PenicilliumchrysogenumMT-40的代谢产物。方法利用硅胶、SephadexLH-20及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及IR、MS、NMR等数据鉴定化合物的结构;利用体外模型进行抑制血小板ATP释放及抗乙酰胆碱酯酶活性筛选。结果从***-40固体发酵培养后的代谢产物中分离得到了20个化合物,分别鉴定为(±)-N-(3a,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,13a-dodecahydrocyclododeca[d]oxazol-2-yl)-4-hydroxybenzamide(1)、cyclo-(Trp-Tyr)(2)、cyclo-(Trp-Phe)(3)、meleagrin(4)、alternariol(5)、alternariol methyl ether(6)、altenuene(7)、koninginin B(8)、koninginin F(9)、koninginin D(10)、过氧化麦角甾醇(11)、β-谷甾醇(12)、volemolide(13)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(14)、4-hydroxy-3,6-dimethyl-2H-pyran-2-one(15)、对羟基苯甲酸(16)、对羟基苯甲醛(17)、香草酸(18)、对羟基苯乙酸(19)、酪醇(20)。结论化合物1为新化合物,命名为(±)-盘尼西碱A;化合物5在100μmol/L时有一定的抑制血小板释放ATP作用,抑制率为(40.6±5.2)%;所有化合物在100μmol/L时未表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。

关键词：蛇足石杉内生真菌产黄青霉菌生物碱聚酮 (±)-盘尼西碱A alternariol

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专家证据在中医药临床实践指南中的应用思考及建议

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中国循证医学杂志 2023年第11期23卷 1360-1364页

作者：高一城王建新孙媛媛李磊王桂华夏如玉刘芷含陶立元曹蕊冯玉婷高学敏费宇彤北京中医药大学循证医学中心北京100029 北京中医药大学国际循证中医药研究院北京100029 北京GRADE中心北京100029 中国中药协会标准化项目管理办公室北京100061 中国中药协会中西结合药物研究与发展工作委员会北京100061 中国中药协会北京100061 北京大学第三医院临床流行病研究中心北京100191 北京中医药大学北京100029

中医药临床实践指南在制订过程中常面临证据缺乏的困境,指南制订小组往往倾向于基于专家经验或专家意见做出最终的决策,但是受到认知偏倚局限性的限制使得指南的可信度和透明性降低。本文通过厘清专家经验、专家意见与专家证据之间的区... 详细信息

中医药临床实践指南在制订过程中常面临证据缺乏的困境,指南制订小组往往倾向于基于专家经验或专家意见做出最终的决策,但是受到认知偏倚局限性的限制使得指南的可信度和透明性降低。本文通过厘清专家经验、专家意见与专家证据之间的区别,提出专家证据在中医药临床实践指南制订中的学科优势和必要性,并提供推荐意见形成环节使用专家证据的方法学设计和实施细节,保留中医药经验性特色的同时一定程度上改善证据缺乏的困境,具有一定的实际应用价值。

关键词：专家证据专家意见专家经验中医药临床实践指南

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指纹图谱及网络药理学联合分析芪胶升白胶囊的药效成分及机制

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中国中药杂志 2023年第6期48卷 1526-1534页

作者：王倩姜俊许霞张仕林刘莉宋青青李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京102488 山东省食品药品检验研究院山东济南250100 贵州汉方药业有限公司贵州贵阳550000

芪胶升白胶囊(以下简称芪胶)具有补血益气的功效,临床常用于癌症的辅助治疗,防治肿瘤放化疗所引起的白细胞减少症,但其作用机制尚不明确。该研究基于指纹图谱和网络药理学预测分析芪胶的药效成分及作用机制。首先,采用HPLC建立20批芪胶... 详细信息

芪胶升白胶囊(以下简称芪胶)具有补血益气的功效,临床常用于癌症的辅助治疗,防治肿瘤放化疗所引起的白细胞减少症,但其作用机制尚不明确。该研究基于指纹图谱和网络药理学预测分析芪胶的药效成分及作用机制。首先,采用HPLC建立20批芪胶的指纹图谱,并利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)对结果进行相似度评价,结果显示相似度大于0.97。同时,通过对照品指认了其中阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、芒柄花黄素、宝霍苷I和Z-藁本内酯等11个共有峰。采用网络药理学方法建立芪胶“成分-靶标-通路”网络,并结合文献,分析得出芪胶中阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮等10个关键成分,可能通过调控EGFR、RAF1、PIK3R1和RELA等10个潜在靶标,参与PI3K-Akt和MAPK等关键信号通路辅助治疗肿瘤、癌症及白细胞减少症。采用AutoDock Vina对关键靶点和成分进行分子对接验证,对接结合能均小于-5 kcal·mol^(-1),表明10个关键成分与各潜在的靶标具有良好的结合活性。综上,该研究建立了芪胶HPLC指纹图谱,结合网络药理学方法初步揭示了芪胶的药效成分及作用机制,为芪胶质量控制与深入的开发提供参考。

关键词：芪胶升白胶囊指纹图谱网络药理学癌症白细胞减少症

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川芎化学成分研究

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中药材 2022年第4期45卷 848-852页

作者：刘洁冯梦晗杨晓芹李月婷贾志鑫肖红斌北京中医药大学北京中医药研究院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学中药学院北京100029

目的:研究川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的化学成分。方法:采用HPD100大孔树脂、PRP-512A大孔树脂、MCI树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶等柱色谱方法及制备液相色谱技术分离纯化,运用核磁共振波谱、质谱等波谱学技术结合理化... 详细信息

目的:研究川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的化学成分。方法:采用HPD100大孔树脂、PRP-512A大孔树脂、MCI树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶等柱色谱方法及制备液相色谱技术分离纯化,运用核磁共振波谱、质谱等波谱学技术结合理化性质鉴定化合物结构。结果:从川芎70%乙醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为:3,4-二甲氧基-5-羟基苯丙酮(1)、4-羟基-3-甲氧基苯丙酮(2)、1-(3,4-二羟基苯基)-1-戊酮(3)、4,7-二羟基-3-丁基苯酞(4)、阿魏酸(5)、臭矢菜素B(6)、(Z)-藁本内酯(7)、洋川芎内酯A(8)、3,4-二甲氧基苯丙酮(9)、4-[(E)-3-乙氧基-1-丙烯基]-2-甲氧基苯酚(10)、洋川芎内酯I(11)、洋川芎内酯H(12)、4-羟基-3-丁基苯酞(13)。结论:其中,化合物1为新化合物,化合物2、6、9、10为首次从该植物中分离得到。

关键词：川芎提取分离化学成分酚类苯酞类

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管花肉苁蓉花中二氢黄酮醇4-还原酶的克隆、表达分析和酶活性鉴定

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药学学报 2023年第4期58卷 1079-1089页

作者：邱海玲王方明高博闻米芯雨张泽坤杜宇史社坡屠鹏飞王晓晖北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 包头医学院内蒙古包头014060

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是花色素苷生物合成途径的关键酶,在植物花色调控中发挥重要作用。本研究通过管花肉苁蓉花转录组数据分析,利用RT-PCR技术克隆出一条DFR基因并命名为CtDFR,其开放阅读框(ORF)长1263... 详细信息

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是花色素苷生物合成途径的关键酶,在植物花色调控中发挥重要作用。本研究通过管花肉苁蓉花转录组数据分析,利用RT-PCR技术克隆出一条DFR基因并命名为CtDFR,其开放阅读框(ORF)长1263 bp,编码420个氨基酸,蛋白分子质量为47.5 kDa。序列分析表明CtDFR具有NADPH结合域和底物特异性结合域。实时荧光定量PCR表明CtDFR在管花肉苁蓉的红、紫色花中高表达,相对表达量分别是白色花的4.04、19.37倍。构建原核表达载体pET-28a-CtDFR,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,成功表达CtDFR蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。体外酶活性分析表明,重组蛋白CtDFR能催化二氢山柰酚、二氢槲皮素、二氢杨梅素生成无色天竺葵素、无色矢车菊素、无色飞燕草素。亚细胞定位实验结果表明CtDFR主要定位于细胞质中。本研究结果表明CtDFR在管花肉苁蓉花色调控中起到重要作用,为进一步探讨管花肉苁蓉花色形成及调控机制研究奠定了基础。

关键词：管花肉苁蓉花色二氢黄酮醇4-还原酶表达分析酶活性分析亚细胞定位

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基于体内暴露量的丹荷颗粒质量标志物研究

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中草药 2021年第9期52卷 2608-2616页

作者：潘绮雪陈奎奎马兆臣李月婷刘璐璐屈碧琼刘明妍刘洁贾志鑫肖红斌北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

目的基于丹荷颗粒中15个特征性成分(丹酚酸B、虎杖苷、大黄素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、白藜芦醇、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、橙皮苷、川陈皮素、荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、去氢荷叶碱、乌药碱)在大鼠血浆暴露... 详细信息

目的基于丹荷颗粒中15个特征性成分(丹酚酸B、虎杖苷、大黄素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、白藜芦醇、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、橙皮苷、川陈皮素、荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、去氢荷叶碱、乌药碱)在大鼠血浆暴露量的测定,筛选丹荷颗粒中适于作为质量标志物(quality marker,Q-Marker)的成分。方法以EC-C18柱为预柱、ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18柱为色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,采用动态多反应监测扫描质谱,建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法;大鼠ig丹荷颗粒,采集不同时间点的血浆样品,并测定血浆样品中各特征性成分的质量浓度,计算其血浆暴露量;确定体内高暴露的成分,对其进一步进行活性及制剂含量分析,依据体内暴露量、高暴露成分活性、制剂相应成分含量确定Q-Marker。结果丹酚酸B、虎杖苷、大黄素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、白藜芦醇、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、橙皮苷、川陈皮素、荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、去氢荷叶碱、乌药碱在大鼠血浆中暴露量分别为(1340.45±167.64)、(232.49±37.05)、(677.51±71.61)、(33.99±20.74)、(281.53±32.32)、(25.01±4.90)、(16.85±2.88)、(11.89±2.69)、(113.71±23.05)、(11.13±1.94)、(168.69±42.68)、(2595.00±314.78)、(9.55±1.36)、(1.29±0.11)、(13.96±0.88)ng.h/mL,其中丹酚酸B、虎杖苷、大黄素、金丝桃苷、紫云英苷、橙皮苷、荷叶碱具有调血脂活性且在制剂中质量分数均大于0.1 mg/g。结论丹酚酸B、虎杖苷、大黄素、槲皮素、橙皮苷、柚皮苷和荷叶碱可作为丹荷颗粒的Q-Marker。

关键词：丹荷颗粒暴露量质量标志物高效液相色谱-串联质谱定量分析丹酚酸B 虎杖苷大黄素槲皮素橙皮苷柚皮苷荷叶碱

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川芎对白芷中4种香豆素类化合物吸收及清除的影响

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药学学报 2021年第7期56卷 1804-1810页

作者：刘力榕贾志鑫闫晓宁朱美霞方聪冯梦晗黄蓓蓓刘洁李乾肖红斌北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

为研究白芷配伍川芎前后其中4种香豆素类化合物(佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素)在大鼠体内的药代动力学行为变化,建立超高效液相色谱-荧光检测法(UPLC-FLD法)并对大鼠单次给药后不同时间点血浆中的药物浓度进行测定,使... 详细信息

为研究白芷配伍川芎前后其中4种香豆素类化合物(佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素)在大鼠体内的药代动力学行为变化,建立超高效液相色谱-荧光检测法(UPLC-FLD法)并对大鼠单次给药后不同时间点血浆中的药物浓度进行测定,使用DAS 3.2.8求算药物的药代动力学参数,SPSS 20.0软件分析白芷配伍川芎前后主要药代动力学参数的变化。结果表明:配伍川芎后,佛手柑内酯、氧化前胡素及欧前胡素的药时曲线下面积(AUC_(0-24 h))分别增加177.2%、97.14%和54.43%,AUC_(0-∞)分别增加282.3%、104.2%和75.40%,清除率(CL_(Z)/F)分别降低68.26%、51.08%和43.98%;4种香豆素类化合物药峰浓度(C_(max))均显著升高;佛手柑内酯的表观分布容积(VZ/F)显著减小。该结果表明川芎可以促进白芷中香豆素类化合物的吸收,同时减缓其在体内的消除速率,提高其生物利用度。本研究中动物实验方案已获得北京中医药大学实验动物伦理委员会的批准(批准号:BUCM-4-2020083105-3072)。

关键词：白芷川芎香豆素药代动力学 UPLC-FLD

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黄芪中黄酮类化合物的超临界流体色谱分离方法研究

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分析测试学报 2021年第9期40卷 1311-1317页

作者：赵淑军董姣姣刘洁贾志鑫闫晓宁郁映婷陈奕君李月婷肖红斌北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

考察了超临界流体色谱(SFC)中的色谱柱、改性剂、添加剂、流速、柱温和背压等因素对9种黄酮类成分(包括芒柄花素、异鼠李素、毛蕊异黄酮、山奈酚、槲皮素、紫云英苷、芒柄花苷、异槲皮苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷)分离的影响,与高效液相色谱... 详细信息

考察了超临界流体色谱(SFC)中的色谱柱、改性剂、添加剂、流速、柱温和背压等因素对9种黄酮类成分(包括芒柄花素、异鼠李素、毛蕊异黄酮、山奈酚、槲皮素、紫云英苷、芒柄花苷、异槲皮苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷)分离的影响,与高效液相色谱法(HPLC)进行了比较,并建立了黄芪饮片中5种主要黄酮类化合物的SFC分析方法。采用Agilent ZORBAX RX-SIL色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)进行分离,CO2-0.1%磷酸甲醇溶液为流动相梯度洗脱,流速为3 mL/min;柱温为35℃;背压为10 MPa,9种黄酮类化合物可在10 min内实现基线分离。5种黄酮类化合物在一定质量浓度范围内均具有良好的线性关系(r^(2)≥0.9632),检出限为10.69~16.21μg/mL,日内相对标准偏差(RSD)为1.3%~2.0%;日间RSD为1.6%~2.2%。5种黄酮类化合物在48 h内具有良好的稳定性,重复性为3.6%~6.0%,回收率为91.8%~112%。与HPLC法相比,9种化合物的保留时间顺序基本相反,SFC法更快速、经济环保,且其保留及选择性受色谱柱、改性剂和添加剂的影响较大,添加剂对色谱峰形影响明显。

关键词：超临界流体色谱(SFC) 高效液相色谱黄芪黄酮类化合物快速分析

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蛇足石杉内生真菌Cladosporium tenuissimum MT-35的代谢产物研究

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天然产物研究与开发 2022年第6期34卷 981-986页

作者：石璠钰杨洪芸莫婷齐博文王雯静张蓓蓓刘晓史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 宁夏回族医药研究所银川750021

为研究蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum MT-35)的代谢产物,本实验采用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法从蛇足石杉极细枝孢菌*** MT-35的糙米发酵物中分离出10个化合物,根据化合物的理化性质及MS、NMR数据分别鉴... 详细信息

为研究蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum MT-35)的代谢产物,本实验采用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法从蛇足石杉极细枝孢菌*** MT-35的糙米发酵物中分离出10个化合物,根据化合物的理化性质及MS、NMR数据分别鉴定为4-hydroxy-3-methoxy-2(1 H)-quinolinone(1)、acropyrone(2)、lumichrome(3)、(1 H-indol-3-yl)oxoacetamide(4)、1,6-dihydro-1-methyl-6-oxo-3-pyridinecarboxylic acid(5)、尿嘧啶(6)、过氧化麦角甾醇(7)、麦角固醇(8)、9(Z),12(Z)-十八碳二烯酰胺(9)、8-O-4-dehydrodiferulic acid(10)。除化合物7和8外,其他化合物均为首次从***中分离得到。对分离鉴定的化合物进行体外抗炎和抗乙酰胆碱酯酶活性筛选,结果表明化合物3、7、8、9对脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞释放一氧化氮具有抑制活性,IC_(50)值分别为36.8±1.0、13.9±0.2、36.6±0.0、53.2±1.4μmol/L,其余化合物在浓度为100μmol/L时,对RAW 264.7细胞NO释放无明显抑制活性;化合物3对乙酰胆碱酯酶具有一定的抑制活性,IC_(50)为77.9±11.1μmol/L,其余化合物在浓度为100μmol/L时,对乙酰胆碱酯酶无明显抑制活性.

关键词：蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌结构鉴定抗炎活性抗乙酰胆碱酯酶活性

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