检索结果-内蒙古大学图书馆

血竭乙酸乙酯提取物改善ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的药效与作用机制研究

中国中药杂志 2024年第11期49卷 2973-2980页

作者：赵一慕王鑫玉裴钰洁薛伟刚王俊娇逄雪萍王凌潇赵云芳霍会霞屠鹏飞郑姣李军北京中医药大学中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488 北京大学药学院天然药物与仿生药物国家重点实验室北京100191

探讨血竭乙酸乙酯提取物(EtOAc extract of Draconis Sanguis,DSE)改善ApoE基因敲除小鼠(ApoE^(-/-))动脉粥样硬化的体内药效及作用机制。ApoE^(-/-)小鼠随机分为对照组,模型组,依折麦布阳性药(5 mg·kg^(-1))组和DSE低(100 mg·... 详细信息

探讨血竭乙酸乙酯提取物(EtOAc extract of Draconis Sanguis,DSE)改善ApoE基因敲除小鼠(ApoE^(-/-))动脉粥样硬化的体内药效及作用机制。ApoE^(-/-)小鼠随机分为对照组,模型组,依折麦布阳性药(5 mg·kg^(-1))组和DSE低(100 mg·kg^(-1))、高(200 mg·kg^(-1))剂量组,灌胃给药,持续16周,在给药期间除对照组外,各组小鼠均给予高脂饲料喂饲。给药16周后测量小鼠体质量、肝脏及附睾脂肪质量,检测血脂水平、主动脉流出道斑块面积等指标的差异,评估DSE的体内药效。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱发内皮细胞氧化应激,检测DSE对内皮细胞氧化应激相关蛋白的影响。结果表明,低、高剂量的DSE均改善了动脉粥样硬化ApoE^(-/-)小鼠的附睾脂肪质量和附睾脂肪指数,降低血浆总胆固醇、甘油三酯、非高密度脂蛋白胆固醇水平,减少主动脉流出道斑块面积。体外实验证实,ox-LDL显著增加HUVEC中脂质过氧化标志物4-羟基壬烯醛(4-HNE)的水平,确认DSE通过抑制ox-LDL诱发的血管内皮细胞氧化应激,改善ApoE^(-/-)小鼠的动脉粥样硬化病变程度。

关键词：血竭乙酸乙酯提取物动脉粥样硬化氧化应激脂质过氧化

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基于DNA条形码及HPLC对市售刺五加的种质资源鉴定和质量评价

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药学学报 2024年第7期59卷 2171-2178页

作者：刘珊瑚张志飞黄钰莹刘子齐陈文沁阿木拉哈王馨石玥张晓芹何高洁安克露王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102 黑龙江北草堂中药材有限责任公司黑龙江哈尔滨150900

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺... 详细信息

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺五加的主流种质和质量。本研究从24省47市收集80份刺五加样品并提取DNA,通过PCR扩增atpI和atpB_rbcL基因片段,分析结果表明,2个基因片段联合分析形成7个单倍型(H2、H5、H8、H10、H12、H14、H23),其中来自黑龙江伊春、哈尔滨尚志、黑龙江绥化、辽宁抚顺、辽宁本溪、吉林长白和吉林靖宇的单倍型H2是主流单倍型,占总样本量的58.75%。H14和H23为产地独有单倍型,分别来自黑龙江省双鸭山市饶河县和黑龙江省绥化市明水县。通过HPLC检测市售刺五加样品中的紫丁香苷含量,结果表明73.96%样品紫丁香苷含量符合药典标准。样品间的紫丁香苷含量差异显著,在0.0037%~0.5245%之间,相差0.5208%,说明刺五加市场样品质量参差不齐,但是不同单倍型之间市售刺五加紫丁香苷含量没有显著性差异。市场样品中单倍型H23中的紫丁香苷含量比较高,因此可能是质量比较好的种质。本文对刺五加市场样品的种质资源和药材质量进行研究,有利于指导刺五加市场样品流通、临床合理用药和后续优良品种筛选。

关键词：刺五加 DNA条形码分子鉴定紫丁香苷质量评价

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红花中3个新的查耳酮碳苷类化合物

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中国中药杂志 2025年

作者：包家旭王永祥张娴杨亚珠林悦尹娇娇赵云芳霍会霞屠鹏飞李军北京中医药大学中药学院北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京大学药学院天然药物及仿生药物全国重点实验室

采用大孔树脂、硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20以及半制备型HPLC对红花化学成分进行研究。通过其理化性质及UV-Vis、IR、HR-ESI-MS、NMR谱学技术建立化合物平面结构，通过比较计算与实验ECD确定了绝对构型。从红花95%乙醇... 详细信息

采用大孔树脂、硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20以及半制备型HPLC对红花化学成分进行研究。通过其理化性质及UV-Vis、IR、HR-ESI-MS、NMR谱学技术建立化合物平面结构，通过比较计算与实验ECD确定了绝对构型。从红花95%乙醇提取物大孔树脂30%乙醇洗脱部位分离得到6个黄酮碳苷类化合物，分别鉴定为红花醌苷F（1）、5-羟基红花新苷（2）、异-5-羟基红花新苷（3）、异红花素C（4）、红花素C（5）、维采宁-2（6），其中化合物1～3为新的查耳酮碳苷。化合物1、2、4、5在50 μmol·L-1浓度下能够显著提高氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）诱导损伤的H9C2心肌细胞存活率，表明化合物1、2、4、5具有良好的心肌损伤保护活性。

关键词：红花化学成分查耳酮碳苷心肌保护活性

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管花肉苁蓉蔗糖合酶基因的克隆鉴定、蛋白结构及表达分析

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药学学报 2024年第11期59卷 3153-3163页

作者：田维圣闫雅如崔晓雪王迎夏黄文倩赵赛静李军史社坡屠鹏飞刘晓北京中医药大学中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488 山西中医药大学太行本草研究院山西晋中030619 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

蔗糖合酶是植物糖代谢途径中的关键酶,能催化糖基供体尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖的生成。本研究通过转录组数据分析从富含糖苷类化合物的传统中药管花肉苁蓉中克隆获得一个蔗糖合酶基因并命名为CtSus。该基因开放阅读... 详细信息

蔗糖合酶是植物糖代谢途径中的关键酶,能催化糖基供体尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖的生成。本研究通过转录组数据分析从富含糖苷类化合物的传统中药管花肉苁蓉中克隆获得一个蔗糖合酶基因并命名为CtSus。该基因开放阅读框长2418 bp,编码蛋白含805个氨基酸,序列分析显示,该蛋白包含植物蔗糖合酶保守结构域,与同目植物中的蔗糖合酶具有密切的亲缘进化关系。将CtSus与已鉴定功能的糖基转移酶UGT71BD1协同进行体外全细胞转化,结果显示,CtSus的引入能显著提高UGT71BD1催化糖基化反应的转化率。利用pColdTM TF表达载体实现了CtSus在大肠杆菌中的可溶性表达,并通过体外酶促反应验证了CtSus在UDP存在的情况下催化蔗糖分解生成UDP-葡萄糖的活性。实时荧光定量PCR结果显示CtSus基因在管花肉苁蓉不同部位及干旱胁迫后肉苁蓉悬浮细胞中的表达模式与苯乙醇苷类化合物积累模式一致。进一步通过蛋白三维结构预测及分子对接探讨了该酶与底物结合的关键氨基酸及其相互作用。本研究鉴定获得了肉苁蓉中一个新的蔗糖合酶基因,为活性糖基供体的体外酶法合成提供了新的途径,亦为肉苁蓉糖苷类化合物生物合成工程菌的构建提供了新的基因元件。

关键词：管花肉苁蓉蔗糖合酶糖苷类化合物尿苷二磷酸-葡萄糖酶催化

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蛇足石杉中赖氨酸脱羧酶基因的克隆表达及功能鉴定

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药学学报 2022年第11期57卷 3437-3445页

作者：李赛男王雯静张蓓蓓张泽坤葛祥宇杜宇张晓雪王娟史社坡北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

赖氨酸脱羧酶是石杉碱甲等石松生物碱上游生物合成步骤中催化赖氨酸脱羧生成1,5-戊二胺(尸胺)的关键酶。通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)转录组数据的挖掘分析,并结合RT-PCR技术从蛇足石杉中成功克隆出3个赖氨酸脱羧酶基因(HsLDC-L1、... 详细信息

赖氨酸脱羧酶是石杉碱甲等石松生物碱上游生物合成步骤中催化赖氨酸脱羧生成1,5-戊二胺(尸胺)的关键酶。通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)转录组数据的挖掘分析,并结合RT-PCR技术从蛇足石杉中成功克隆出3个赖氨酸脱羧酶基因(HsLDC-L1、HsLDC-L2、HsLDC-L3);利用在线生物信息学分析软件以及DNAMAN、MEGA 7.0等对上述3个基因编码蛋白的性质、二级和三级结构、序列同源性、进化关系等进行了预测分析,发现3个基因编码蛋白均具有植物赖氨酸脱羧酶的保守结构域和活性位点,且与文献报道的产石杉碱甲植物中的赖氨酸脱羧酶具有较近的亲缘关系。进一步尝试利用不同载体在大肠杆菌中对上述3个基因进行表达,结果仅HsLDC-L1与载体pCold TF构建的重组质粒在大肠杆菌*** BL21(DE3)中成功实现可溶性表达,利用Ni^(2+)亲和色谱柱分离纯化得到重组蛋白HsLDC-L1;HsLDC-L1全长由469个氨基酸组成,理论分子质量为50.50 kDa。体外酶活性分析证明HsLDC-L1可以催化赖氨酸脱羧生成尸胺。底物适应性实验发现HsLDC-L1还可以催化鸟氨酸脱羧生成腐胺,但不能催化酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸脱羧。上述结果为进一步研究包括石杉碱甲在内的石松类生物碱的生物合成提供参考,为利用合成生物学策略构建产Δ^(1)-哌啶、石榴碱等石松类生物碱生物合成关键前体的工程菌提供重要的基因元件。

关键词：蛇足石杉赖氨酸脱羧酶基因克隆石杉碱甲石松生物碱

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北苍术特异性DNA条形码筛选、种质资源鉴定及遗传多样性分析

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药学学报 2023年第6期58卷 1693-1704页

作者：尹光耀袁林王馨张志飞陈颖刘珊瑚满金辉石玥黄钰莹张晓芹王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 国家药品监督管理局北京100037 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

北苍术Atractylodes chinensis具有重要药用价值和经济价值。本研究利用Illumina平台测序获得4份不同产地的北苍术的叶绿体全基因组序列,筛选特异DNA条形码,并利用特异DNA条形码对不同产区北苍术样品种质资源鉴定及居群的遗传多样性分... 详细信息

北苍术Atractylodes chinensis具有重要药用价值和经济价值。本研究利用Illumina平台测序获得4份不同产地的北苍术的叶绿体全基因组序列,筛选特异DNA条形码,并利用特异DNA条形码对不同产区北苍术样品种质资源鉴定及居群的遗传多样性分析。该4份北苍术叶绿体全基因组均为典型的环状四分体结构,均注释112个基因。比较基因组学研究结果表明ccsA和trnC-GCA_petN是潜在的北苍术种内鉴别的特异DNA条形码。选择ccsA和trnC-GCA_petN对来自9省14产区的256份样品进行PCR扩增,扩增效率为100%。序列分析结果表明ccsA和trnC-GCA_petN分别有11和22个变异位点,分别能鉴定16和22个单倍型,两段序列联合分析鉴定39个单倍型,命名为Hap1~Hap39,其中占比最多和分布最广的基因型为Hap9。单倍型多样性(Hd)=0.896,核苷酸多样性(Pi)=0.002 22,说明北苍术在物种水平上有较高的遗传多样性。各单倍型的遗传距离为0.000 00~0.004 88,说明各个单倍型之间有较小的遗传差异。系统进化树分析结果表明, 39个单倍型有很近的亲缘关系,并且与除白术外其余同属类群形成明显的两个分支。本研究为后续鉴定北苍术产地来源和后续种质资源保护和育种方面起到重要作用。

关键词：苍术叶绿体基因组 DNA条形码单倍型遗传多样性

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沉香中倍半萜类化学成分研究

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中国中药杂志 2022年第16期47卷 4385-4390页

作者：张航马家乐昝妮利王嵘晔赵云芳宋月林郑姣屠鹏飞霍会霞李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

采用硅胶、ODS和半制备HPLC等色谱技术对沉香石油醚部位进行化学成分研究。通过其理化性质及IR、UV、MS、NMR等谱学数据共鉴定了8个倍半萜类化合物,分别为(4S,5S,7R,10S)-5,7-dihydroxy-11-en-eudesmane(1)、(7R,10S)-eudesma-4-en-11,15-diol(2)、(2R,4S,5R,7R)-2-hydroxyeremophila-9,11-dien-8-one(3)、7α-H-9(10)-ene-11,12-epoxy-8-oxoeremophilane(4)、(+)-9β,10β-epoxyeremophila-11(13)-en(5)、4(14)-eudesmene-8α,11-diol(6)、12,15-dioxo-selina-4,11-dien(7)、2β,8aα-dihydroxy-11-en-eremophilane(8)。其中化合物1和2为新化合物,通过计算ECD确定了其绝对构型。化合物1、4、6~8在20μmol·L浓度时能显著改善牛磺胆酸(TCA)诱导的GES-1人胃黏膜细胞损伤,其细胞保护率分别为23.51%±2.79%、16.10%±1.25%、24.45%±4.89%、17.48%±2.93%、21.44%±2.39%。

关键词：沉香化学成分倍半萜胃黏膜细胞保护

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苦参不同组织中生物碱类成分的LC-MS分析

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中草药 2023年第8期54卷 2388-2397页

作者：张晓雪杜宇张泽坤王雯静张蓓蓓张明亮海丽娜王阳葛祥宇史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京振东光明药物研究院有限公司北京100085

目的通过对苦参Sophora flavescens不同组织样品中生物碱类成分的LC-MS分析,探讨苦参中生物碱类成分的质谱裂解规律及其在不同样品中的异同。方法首先利用UPLC-Q-Exactive-OrbitrapMS对5年生苦参根中的生物碱类成分进行全面的鉴定分... 详细信息

目的通过对苦参Sophora flavescens不同组织样品中生物碱类成分的LC-MS分析,探讨苦参中生物碱类成分的质谱裂解规律及其在不同样品中的异同。方法首先利用UPLC-Q-Exactive-OrbitrapMS对5年生苦参根中的生物碱类成分进行全面的鉴定分析。再利用UPLC-QQQ-MS/MS技术,对苦参无菌幼苗不同组织部位(根、茎、叶)、苦参愈伤组织中的生物碱类成分进行定量分析,比较各样品中生物碱类成分的异同。结果从5年生苦参根中共鉴定出47个生物碱类成分;利用UPLC-QQQ-MS/MS对其中17个主要的生物碱类成分进行了定量分析,发现不同苦参样品中生物碱类成分差异明显,其中苦参无菌幼苗各组织部位中生物碱的含量相对较高。结论建立了一种苦参生物碱类成分快速定性定量分析方法,从5年生苦参根中快速鉴定出47种生物碱;通过对苦参不同组织样品中17个生物碱类成分的定量分析,为后续利用比较转录组测序技术,挖掘并鉴定苦参中生物碱类成分生物合成关键酶的研究奠定基础。

关键词：苦参生物碱定性定量分析 UPLC-Q-Exactive-Orbitrap MS UPLC-QQQ-MS/MS

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槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞增殖的作用

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中国实验方剂学杂志 2022年第1期28卷 79-84页

作者：杨爱琳刘亚鑫黄惠铭欧阳里山谢锦欣刘东晓王龙燕屠鹏飞胡仲冬北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B;(Lamin B;)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10 g·L^(-1)槐耳清膏在不同时间下对人前... 详细信息

目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B;(Lamin B;)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10 g·L^(-1)槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用。采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响。借助蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3),自噬相关蛋白3(Atg3),自噬相关蛋白5(Atg5),自噬相关蛋白7(Atg7)的表达。采用CCK-8法检测槐耳清膏与自噬抑制剂(Bafilomycin A1)联合给药及槐耳清膏单独给药对细胞增殖的作用。通过Western blot检测槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B;表达的影响,并采用RNA干扰技术探究Lamin B;在槐耳抗人前列腺癌VCaP细胞增殖中的作用。结果:与空白组比较,槐耳清膏能抑制人前列腺癌VCaP细胞的增殖(P<0.01),且呈时间与浓度依赖性。槐耳清膏给药后可促进VCaP细胞中自噬溶酶体的生成。与空白组比较,槐耳清膏能上调VCaP细胞中与自噬进程密切相关的蛋白LC3-Ⅱ,Atg3,Atg5,Atg7表达水平(P<0.05),槐耳清膏能够诱导VCaP细胞自噬的发生。进一步研究发现抑制自噬能够降低人前列腺癌VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P<0.05)。与空白组比较,槐耳清膏给药能够抑制人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B;蛋白表达(P<0.01),下调Lamin B;蛋白表达,在一定程度上也能够减弱VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P<0.01)。结论:自噬活化和Lamin B;表达下调可能参与了槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用,能够为槐耳临床应用提供一定的理论基础。

关键词：槐耳清膏人前列腺癌VCaP细胞自噬核纤层蛋白B 细胞增殖

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血竭石油醚提取物对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的抗肿瘤作用

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中国实验方剂学杂志 2022年第1期28卷 85-91页

作者：黄惠铭田颖颖庞道然刘亚鑫欧阳里山屠鹏飞李军胡仲冬北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

目的:研究血竭石油醚提取物(SDPEF)对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、体外迁移能力及自噬的影响,并阐明其分子作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测SDPEF(0,20,40,60,80 mg·L^(-1))作用24,48,72 h时,对人胃... 详细信息

目的:研究血竭石油醚提取物(SDPEF)对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、体外迁移能力及自噬的影响,并阐明其分子作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测SDPEF(0,20,40,60,80 mg·L^(-1))作用24,48,72 h时,对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞体外增殖的影响。借助Hoechst染色实验观察不同浓度的SDPEF作用48 h后对HGC-27和MGC-803细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度SDPEF作用48 h,对HGC-27和MGC-803细胞凋亡率的影响。采用细胞划痕实验观察不同浓度SDPEF在不同作用时间点对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞体外迁移能力的影响。借助吖啶橙染色实验检测不同浓度SDPEF对HGC-27和MGC-803细胞自噬的影响。利用蛋白免疫印迹法检测SDPEF作用人胃癌HGC-27和MGC-803细胞48 h后对信号通路相关蛋白表达水平的调控作用。结果:与空白组比较,SDPEF(30 mg·L^(-1))组人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的增殖和体外迁移能力明显降低(P<0.05),且具有浓度与时间依赖性;SDPEF(60 mg·L^(-1))还能够诱导人胃癌HGC-27和MGC-803细胞凋亡(P<0.01)和自噬的发生。与空白组比较,SDPEF(60 mg·L^(-1))能够下调磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达(P<0.05,P<0.01),且能够下调磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达水平(P<0.01),提示SDPEF可能是通过抑制mTOR/STAT3信号通路来抑制人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的增殖、迁移并诱导其发生凋亡和自噬。结论:mTOR/STAT3信号通路下调可能参与了SDPEF的抗胃癌作用。该研究能够为血竭抗肿瘤作用研究提供一定的参考。

关键词：血竭石油醚提取物人胃癌细胞增殖凋亡迁移自噬

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