检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医院用药评价与分析 2025年第1期25卷 121-124,128页

作者：高墨含马家乐李军北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029

急性髓系白血病是当前发病率最高的白血病类型之一,且预后不良。目前,中西医治疗急性髓系白血病均取得了一定进展,但仍存在疗效不佳、不良反应大、并发症严重等缺陷。该文梳理中西医常用的治法及药物作用机制,分析二者治疗原理上的相似... 详细信息

急性髓系白血病是当前发病率最高的白血病类型之一,且预后不良。目前,中西医治疗急性髓系白血病均取得了一定进展,但仍存在疗效不佳、不良反应大、并发症严重等缺陷。该文梳理中西医常用的治法及药物作用机制,分析二者治疗原理上的相似之处,通过案例探讨,总结归纳中西医结合治疗急性髓系白血病的优势,展望未来发展路径,为探索新疗法、研制新药物提供参考。

关键词：急性髓系白血病西药治疗中药治疗中西医结合治疗

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基于DNA条形码及HPLC对市售黄芩的种质资源鉴定和质量评价

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中国中药杂志 2022年第7期47卷 1814-1823页

作者：张靖晗刘珊瑚张志飞石玥满金辉尹光耀王馨刘凤波王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

黄芩Scutellaria baicalensis是我国常用的大宗药材,该研究根据以前的叶绿体基因组测序结果,选取trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA序列对市售黄芩样品进行种质资源鉴定,并通过HPLC测定市售样品的黄芩苷含量,以期确定检测黄芩市场样品的... 详细信息

黄芩Scutellaria baicalensis是我国常用的大宗药材,该研究根据以前的叶绿体基因组测序结果,选取trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA序列对市售黄芩样品进行种质资源鉴定,并通过HPLC测定市售样品的黄芩苷含量,以期确定检测黄芩市场样品的最佳DNA条形码,市场样品的种质资源和质量。该研究从我国24个省收集104份样品并提取DNA进行PCR扩增,trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA 3段序列的扩增效率分别为100%、59.62%、25.96%;序列分析结果表明利用trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA分别能够鉴定5、4、2个基因型,但是与野生型基因型序列不相同,3段序列联合分析仅形成6个基因型;系统进化树和遗传距离分析结果表明,trnH-psbA片段可用于鉴别黄芩真伪样品,因此trnH-psbA片段为鉴定市场样品种质资源最佳片段,对其所鉴定的市场样品基因型(THap1~THap5)进行分析,发现THap2为市场样品主要流通基因型,占总样品量的86.55%,说明市场黄芩样品种质资源比较少。HPLC检测市售黄芩样品中的黄芩苷含量结果表明,所有采集的市售黄芩样品黄芩苷含量均超过药典规定标准,样品之间黄芩苷含量差异显著,最大相差12.21%,说明市售黄芩样品质量参差不齐,而且不同采集省份和各个基因型之间的黄芩苷含量没有显著性差异。该研究为建立黄芩鉴定标准化体系提供依据,有利于指导黄芩市场样品的流通及临床科学合理用药。

关键词：黄芩 DNA条形码分子鉴定质量评价

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基于叶绿体基因matK及UPLC对市售大黄的种质资源鉴定和质量分析

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药学学报 2022年第2期57卷 514-524页

作者：满金辉石玥张靖晗张志飞尹光耀王馨刘凤波张媛王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

大黄是多基原大宗常用药材,不同基原大黄其药理活性存在一定差异。本研究基于叶绿体基因matK序列对市售大黄饮片的种质资源进行鉴定,通过UPLC对其总蒽醌和游离蒽醌含量进行测定,以期确定市售大黄的主要种质及质量。本研究从27省40市收... 详细信息

大黄是多基原大宗常用药材,不同基原大黄其药理活性存在一定差异。本研究基于叶绿体基因matK序列对市售大黄饮片的种质资源进行鉴定,通过UPLC对其总蒽醌和游离蒽醌含量进行测定,以期确定市售大黄的主要种质及质量。本研究从27省40市收集89份市售大黄样品并提取DNA,通过PCR扩增matK基因,扩增的matK基因序列的分析结果表明,收集的市售大黄样品都是同一基原,即掌叶大黄,共鉴定了其8个基因型:Rp1、Rp2、Rp3、Rp4、Rp5、Rp6、Rp10和Rp12,其中来自甘肃、四川和云南省的Rp4和Rp6是主要流通基因型,分别占总样品量40.45%和37.08%。系统发育树结果表明,8个基因型主要分成2大支,其中主要基因型Rp4和Rp6聚在同一大支,遗传距离分析结果表明8个基因型遗传距离在0.001~0.010之间。利用UPLC检测市场样品中的总蒽醌和游离蒽醌含量结果表明,93.26%样品符合药典标准。样品之间总蒽醌含量和游离蒽醌的含量差异显著,其中游离蒽醌相差1.01%;总蒽醌含量相差3.79%,说明市售大黄样品质量存在参差不齐的现象,但是不同采集省份之间市售大黄总蒽醌和游离蒽醌含量没有显著性差异,各基因型之间的大黄样品中总蒽醌和游离蒽醌含量没有显著性差异。本文对大黄市场样品的种质资源、产地来源和药材质量进行研究,有利于指导大黄市场样品流通及临床科学合理用药,为其他中药材市场样品种质及质量鉴定提供参考。

关键词：大黄 matK基因分子鉴定质量评价

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三七PnMYB1R1基因的克隆、亚细胞定位与不同胁迫下的表达分析

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药学学报 2022年第5期57卷 1506-1515页

作者：石玥满金辉江伟业张靖晗张志飞尹光耀王馨黄钰莹张媛王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以三七(Panax notoginseng)为材料,设计特异引物,克隆了三七中1R-MYB转录因子PnMYB1R1基因,并进行氨基酸序列分析、原核表达... 详细信息

MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以三七(Panax notoginseng)为材料,设计特异引物,克隆了三七中1R-MYB转录因子PnMYB1R1基因,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、转录活性分析、组织特异性分析及非生物胁迫下的诱导表达分析。PnMYB1R1基因开放阅读框(ORF)长738 bp,编码245个氨基酸,蛋白分子质量27.0 kD。序列分析及系统进化树结果表明PnMYB1R1包含1个保守的R3结构域,属于1R-MYB型转录因子中的TRF-like类蛋白。构建原核表达载体pET28a-PnMYB1R1并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达PnMYB1R1重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。亚细胞定位实验结果表明PnMYB1R1定位于植物细胞的细胞核中。转录活性分析显示PnMYB1R1转录因子具有转录激活活性。实时荧光定量PCR结果表明PnMYB1R1基因在三七主根中表达量最高,茎、叶次之,须根中表达量最低。盐、低温及干旱胁迫均能够影响主根、须根、茎、叶中PnMYB1R1基因的表达水平,其中盐胁迫能够显著提高主根、须根、茎和叶中PnMYB1R1基因的表达水平。本研究为进一步揭示1R-MYB转录因子在三七中防御反应中作用奠定基础。

关键词：三七 PnMYB1R1 原核表达亚细胞定位转录活性表达分析

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蛇足石杉内生真菌Penicillium chrysogenum MT-40的代谢产物研究

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中草药 2022年第13期53卷 3904-3911页

作者：贾放放齐博文张蓓蓓王雯静王阳石钰刘晓朱枝祥王娟史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 高平市中医医院山西高平048400

目的研究蛇足石杉Huperziaserrata内生真菌PenicilliumchrysogenumMT-40的代谢产物。方法利用硅胶、SephadexLH-20及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及IR、MS、NMR等数据鉴定化合物的结构;利用体外模型进行抑制... 详细信息

目的研究蛇足石杉Huperziaserrata内生真菌PenicilliumchrysogenumMT-40的代谢产物。方法利用硅胶、SephadexLH-20及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及IR、MS、NMR等数据鉴定化合物的结构;利用体外模型进行抑制血小板ATP释放及抗乙酰胆碱酯酶活性筛选。结果从***-40固体发酵培养后的代谢产物中分离得到了20个化合物,分别鉴定为(±)-N-(3a,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,13a-dodecahydrocyclododeca[d]oxazol-2-yl)-4-hydroxybenzamide(1)、cyclo-(Trp-Tyr)(2)、cyclo-(Trp-Phe)(3)、meleagrin(4)、alternariol(5)、alternariol methyl ether(6)、altenuene(7)、koninginin B(8)、koninginin F(9)、koninginin D(10)、过氧化麦角甾醇(11)、β-谷甾醇(12)、volemolide(13)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(14)、4-hydroxy-3,6-dimethyl-2H-pyran-2-one(15)、对羟基苯甲酸(16)、对羟基苯甲醛(17)、香草酸(18)、对羟基苯乙酸(19)、酪醇(20)。结论化合物1为新化合物,命名为(±)-盘尼西碱A;化合物5在100μmol/L时有一定的抑制血小板释放ATP作用,抑制率为(40.6±5.2)%;所有化合物在100μmol/L时未表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。

关键词：蛇足石杉内生真菌产黄青霉菌生物碱聚酮 (±)-盘尼西碱A alternariol

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产姜黄素大肠杆菌工程菌的构建

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生物工程学报 2021年第6期37卷 2077-2084页

作者：张乐丁宁海燕闫雅茹李娜李赛男屠鹏飞刘晓史社坡北京中医药大学中药现代研究中心

姜黄素是姜科植物的特征性成分,具有重要的药理活性。文中利用姜黄素生物合成关键酶β-酮酰辅酶A合酶(Diketide-CoA synthase,DCS)基因和姜黄素合酶(Curcumin synthase,CURS)基因构建非天然融合基因DCS::CURS,并将其与4-香豆酰辅酶A连接... 详细信息

姜黄素是姜科植物的特征性成分,具有重要的药理活性。文中利用姜黄素生物合成关键酶β-酮酰辅酶A合酶(Diketide-CoA synthase,DCS)基因和姜黄素合酶(Curcumin synthase,CURS)基因构建非天然融合基因DCS::CURS,并将其与4-香豆酰辅酶A连接酶(4-coumarate coenzyme A ligase,4CL)和乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl coenzyme A carboxylase,ACC)基因共同引入大肠杆菌Escherichia coli,构建由阿魏酸合成姜黄素的工程大肠杆菌,利用LB培养基和改良的M9培养基进行两步发酵。通过对生长培养阶段诱导蛋白表达方法和发酵培养阶段接种菌体量、培养基组成及发酵培养时间等条件的优化,并在发酵培养阶段加入大孔吸附树脂降低产物在培养液中的累积等方法,姜黄素的合成产率达到386.8mg/L。本研究首次将非天然融合基因DCS::CURS用于合成姜黄素工程菌的构建,得到了姜黄素产率较高的大肠杆菌菌株,为后续通过进一步复杂的代谢网络优化、构建姜黄素合成能力更强的工程菌提供参考。

关键词：大肠杆菌姜黄素非天然融合蛋白工程菌

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管花肉苁蓉花中二氢黄酮醇4-还原酶的克隆、表达分析和酶活性鉴定

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药学学报 2023年第4期58卷 1079-1089页

作者：邱海玲王方明高博闻米芯雨张泽坤杜宇史社坡屠鹏飞王晓晖北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 包头医学院内蒙古包头014060

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是花色素苷生物合成途径的关键酶,在植物花色调控中发挥重要作用。本研究通过管花肉苁蓉花转录组数据分析,利用RT-PCR技术克隆出一条DFR基因并命名为CtDFR,其开放阅读框(ORF)长1263... 详细信息

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是花色素苷生物合成途径的关键酶,在植物花色调控中发挥重要作用。本研究通过管花肉苁蓉花转录组数据分析,利用RT-PCR技术克隆出一条DFR基因并命名为CtDFR,其开放阅读框(ORF)长1263 bp,编码420个氨基酸,蛋白分子质量为47.5 kDa。序列分析表明CtDFR具有NADPH结合域和底物特异性结合域。实时荧光定量PCR表明CtDFR在管花肉苁蓉的红、紫色花中高表达,相对表达量分别是白色花的4.04、19.37倍。构建原核表达载体pET-28a-CtDFR,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,成功表达CtDFR蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。体外酶活性分析表明,重组蛋白CtDFR能催化二氢山柰酚、二氢槲皮素、二氢杨梅素生成无色天竺葵素、无色矢车菊素、无色飞燕草素。亚细胞定位实验结果表明CtDFR主要定位于细胞质中。本研究结果表明CtDFR在管花肉苁蓉花色调控中起到重要作用,为进一步探讨管花肉苁蓉花色形成及调控机制研究奠定了基础。

关键词：管花肉苁蓉花色二氢黄酮醇4-还原酶表达分析酶活性分析亚细胞定位

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指纹图谱及网络药理学联合分析芪胶升白胶囊的药效成分及机制

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中国中药杂志 2023年第6期48卷 1526-1534页

作者：王倩姜俊许霞张仕林刘莉宋青青李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京102488 山东省食品药品检验研究院山东济南250100 贵州汉方药业有限公司贵州贵阳550000

芪胶升白胶囊(以下简称芪胶)具有补血益气的功效,临床常用于癌症的辅助治疗,防治肿瘤放化疗所引起的白细胞减少症,但其作用机制尚不明确。该研究基于指纹图谱和网络药理学预测分析芪胶的药效成分及作用机制。首先,采用HPLC建立20批芪胶... 详细信息

芪胶升白胶囊(以下简称芪胶)具有补血益气的功效,临床常用于癌症的辅助治疗,防治肿瘤放化疗所引起的白细胞减少症,但其作用机制尚不明确。该研究基于指纹图谱和网络药理学预测分析芪胶的药效成分及作用机制。首先,采用HPLC建立20批芪胶的指纹图谱,并利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)对结果进行相似度评价,结果显示相似度大于0.97。同时,通过对照品指认了其中阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、芒柄花黄素、宝霍苷I和Z-藁本内酯等11个共有峰。采用网络药理学方法建立芪胶“成分-靶标-通路”网络,并结合文献,分析得出芪胶中阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮等10个关键成分,可能通过调控EGFR、RAF1、PIK3R1和RELA等10个潜在靶标,参与PI3K-Akt和MAPK等关键信号通路辅助治疗肿瘤、癌症及白细胞减少症。采用AutoDock Vina对关键靶点和成分进行分子对接验证,对接结合能均小于-5 kcal·mol^(-1),表明10个关键成分与各潜在的靶标具有良好的结合活性。综上,该研究建立了芪胶HPLC指纹图谱,结合网络药理学方法初步揭示了芪胶的药效成分及作用机制,为芪胶质量控制与深入的开发提供参考。

关键词：芪胶升白胶囊指纹图谱网络药理学癌症白细胞减少症

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蛇足石杉内生真菌Cladosporium tenuissimum MT-35的代谢产物研究

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天然产物研究与开发 2022年第6期34卷 981-986页

作者：石璠钰杨洪芸莫婷齐博文王雯静张蓓蓓刘晓史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 宁夏回族医药研究所银川750021

为研究蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum MT-35)的代谢产物,本实验采用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法从蛇足石杉极细枝孢菌*** MT-35的糙米发酵物中分离出10个化合物,根据化合物的理化性质及MS、NMR数据分别鉴... 详细信息

为研究蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum MT-35)的代谢产物,本实验采用硅胶柱色谱及半制备液相色谱等方法从蛇足石杉极细枝孢菌*** MT-35的糙米发酵物中分离出10个化合物,根据化合物的理化性质及MS、NMR数据分别鉴定为4-hydroxy-3-methoxy-2(1 H)-quinolinone(1)、acropyrone(2)、lumichrome(3)、(1 H-indol-3-yl)oxoacetamide(4)、1,6-dihydro-1-methyl-6-oxo-3-pyridinecarboxylic acid(5)、尿嘧啶(6)、过氧化麦角甾醇(7)、麦角固醇(8)、9(Z),12(Z)-十八碳二烯酰胺(9)、8-O-4-dehydrodiferulic acid(10)。除化合物7和8外,其他化合物均为首次从***中分离得到。对分离鉴定的化合物进行体外抗炎和抗乙酰胆碱酯酶活性筛选,结果表明化合物3、7、8、9对脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞释放一氧化氮具有抑制活性,IC_(50)值分别为36.8±1.0、13.9±0.2、36.6±0.0、53.2±1.4μmol/L,其余化合物在浓度为100μmol/L时,对RAW 264.7细胞NO释放无明显抑制活性;化合物3对乙酰胆碱酯酶具有一定的抑制活性,IC_(50)为77.9±11.1μmol/L,其余化合物在浓度为100μmol/L时,对乙酰胆碱酯酶无明显抑制活性.

关键词：蛇足石杉内生真菌极细枝孢菌结构鉴定抗炎活性抗乙酰胆碱酯酶活性

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多酶催化级联反应在天然产物酶法合成中的应用研究进展

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中国中药杂志 2023年第2期48卷 336-348页

作者：黄文倩王迎夏田维圣王娟屠鹏飞王晓晖史社坡刘晓北京中医药大学中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

酶作为一种生物催化剂,具有催化效率高、反应选择性强、目标产物专一、反应条件温和、环境友好等优点,是合成复杂有机分子的重要工具。且随着基因测序技术、分子生物学、遗传操作等技术的不断发展,酶的多样性稳步增加,可催化的反应类型... 详细信息

酶作为一种生物催化剂,具有催化效率高、反应选择性强、目标产物专一、反应条件温和、环境友好等优点,是合成复杂有机分子的重要工具。且随着基因测序技术、分子生物学、遗传操作等技术的不断发展,酶的多样性稳步增加,可催化的反应类型也逐步多元化。在酶催化合成过程中,大多数简单反应通过单酶催化即可完成,而很多复杂反应的发生往往需要2个或以上的酶参与催化。因此,将多个酶组合到一起,构建多酶催化级联反应已逐渐成为生物化学领域的一个研究热点。如今,越来越多结构复杂的天然产物的生物合成途径得到解析,具有新颖催化活性的次级代谢酶不断被鉴定、发现并组合应用于结构多样性天然/非天然小分子的酶法合成中。该文总结了一系列多酶催化级联反应的例子,着重介绍了级联催化方法在糖类、核苷类、黄酮类、萜类、生物碱类以及手性分子等化合物合成中的应用,并对多酶催化级联方法目前存在的问题、解决对策及未来发展方向进行了讨论与展望。

关键词：酶催化生物催化多酶催化级联反应

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