检索结果-内蒙古大学图书馆

中国现代中药 2023年第6期25卷 1199-1206页

作者：陈颖满金辉石玥黄钰莹张晓芹王馨刘珊瑚何高洁安克露王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488

目的:克隆丹参SmRopGEF1基因,研究其编码蛋白的亚细胞定位及其对逆境胁迫的应激反应和激素诱导下的表达水平。方法:根据前期丹参转录组测序结果设计SmRopGEF1基因特异引物,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增SmRopGEF1基因序列;使用生物信息... 详细信息

目的:克隆丹参SmRopGEF1基因,研究其编码蛋白的亚细胞定位及其对逆境胁迫的应激反应和激素诱导下的表达水平。方法:根据前期丹参转录组测序结果设计SmRopGEF1基因特异引物,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增SmRopGEF1基因序列;使用生物信息学方法分析SmRopGEF1蛋白序列特征及进化关系;构建pET28a-SmRopGEF1原核表达载体并转化至大肠埃希氏菌中诱导表达,构建35S启动的SmRopGEF1的绿色荧光蛋白原生质体瞬时表达载体,利用激光共聚焦显微镜观察SmRopGEF1的亚细胞定位;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测逆境胁迫(低温、盐及干旱)和激素诱导(生长素、脱落酸、茉莉酸甲酯)下的基因表达量。结果:丹参SmRopGEF1基因开放阅读框(ORF)全长为1701 bp,编码566个氨基酸,蛋白相对分子质量是62362.99。生物信息学分析显示SmRopGEF1蛋白含有1个PRONE保守结构域,系统进化树分析表明SmRopGEF1蛋白与芡欧鼠尾草和一串红RopGEF1蛋白为高同源蛋白。成功构建pET28a-SmRopGEF1原核表达载体并在大肠埃希氏菌Rosetta(DE3)菌株中表达、纯化出SmRopGEF1重组蛋白。亚细胞定位的结果显示SmRopGEF1存在于植物细胞的细胞核中。qRT-PCR实验结果表明盐胁迫和冷胁迫能够显著提高SmRopGEF1的表达量;干旱胁迫后丹参愈伤中SmRopGEF1表达量下降。茉莉酸甲酯诱导后SmRopGEF1表达量升高。结论:克隆了丹参SmRopGEF1基因,其在抗逆胁迫中起到重要作用并且可能参与茉莉酸甲酯信号转导。研究结果丰富了丹参防御反应机制的研究,为选育丹参抗逆优良品种、提高丹参的产量与品质提供了参考。

关键词：丹参鸟嘌呤核苷酸交换因子序列分析基因表达

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肿瘤耐药性产生机制及中药逆转作用的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第1期28卷 92-99页

作者：黄惠铭杨爱琳田颖颖刘亚鑫欧阳里山屠鹏飞胡仲冬北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 滨州医学院药学院山东烟台264003

恶性肿瘤严重危害人类生命和健康,我国癌症发病率和死亡率逐年上升,攻克肿瘤一直以来都是人类生存的一大难题。化学药物和分子靶向治疗是抗肿瘤临床通用方案,也是首选方案之一,此类药物靶标明确、疗效好,但不良反应大,且肿瘤细胞常常产... 详细信息

恶性肿瘤严重危害人类生命和健康,我国癌症发病率和死亡率逐年上升,攻克肿瘤一直以来都是人类生存的一大难题。化学药物和分子靶向治疗是抗肿瘤临床通用方案,也是首选方案之一,此类药物靶标明确、疗效好,但不良反应大,且肿瘤细胞常常产生耐药性阻碍药效的发挥,从而使肿瘤治疗变得困难,故研究耐药性的产生机制及如何逆转耐药性具有重要的意义。聚焦中药,多年研究发现,其拥有成分复杂、靶点繁多、方组内药味相辅相成、毒性小等居多特点,大量实验研究证明,中药有效成分或其提取部位能够明显抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,诱导其凋亡、自噬、分化、衰老等。临床上已将中药运用于肿瘤的防护、辅助治疗、后期巩固等,中药研究将为逆转肿瘤细胞耐药性及抑制肿瘤细胞开启不一样的新篇章。已有研究表明,中药与化疗药物联用可逆转肿瘤细胞耐药性,增加化疗药物疗效,现已成为肿瘤治疗的主流趋势。此文就肿瘤细胞由保护性自噬、基因突变、酶系的过高表达、信号通路异常、核糖核酸和相关蛋白表达异常等所产生的耐药性机制,以及从中药中分离出的单体成分、单药或其提取部位及经典抗癌名方逆转肿瘤细胞耐药性的机制进行综述,为进一步研究中药抗肿瘤作用奠定基础。

关键词：肿瘤逆转耐药性中药作用机制

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龙血竭抗肿瘤作用研究进展

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中国中药杂志 2021年第8期46卷 2037-2044页

作者：田颖颖杨爱琳陈孝男李嘉琪唐雷梦媛黄惠铭刘亚鑫邱海玲欧阳里山李军屠鹏飞胡仲冬北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

作为我国的传统中药,龙血竭具有活血化瘀、软坚散结、收敛止血、清肿止痛、调经理血等功效,被誉为"活血圣药",临床上其已被广泛应用于治疗多种疾病。随着对龙血竭研究的深入,其在抗肿瘤方面的药用价值不断显现。现代药理研究... 详细信息

作为我国的传统中药,龙血竭具有活血化瘀、软坚散结、收敛止血、清肿止痛、调经理血等功效,被誉为"活血圣药",临床上其已被广泛应用于治疗多种疾病。随着对龙血竭研究的深入,其在抗肿瘤方面的药用价值不断显现。现代药理研究表明,龙血竭发挥抗肿瘤作用主要是通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导DNA损伤和细胞周期阻滞、诱导肿瘤细胞衰老、诱导肿瘤细胞自噬、抑制肿瘤细胞的转移能力和血管生成以及逆转肿瘤细胞多药耐药性等机制来实现的。该文重点总结了龙血竭提取物及其化学成分在抗肿瘤方面的研究进展,以期为龙血竭的深入研究和开发利用提供新的参考。

关键词：龙血竭抗肿瘤作用机制

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藏族药矮紫堇抗急性心肌缺血的网络药理学研究

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中国中药杂志 2021年第12期46卷 3058-3065页

作者：周晓春黄美雯焦顺刚戈福星陈攀龙刘长鑫高小力屠鹏飞柴兴云北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

通过SciFinder及CNKI数据库完成化合物搜索,并在FAFdurgs4、SEA Search Server数据库进行类药性筛选,结合在OMIM、GeneCards、DurgBank等疾病靶点数据库中搜索到的急性心肌缺血相关靶点集,并借助Cytoscape软件建立“化学成分-靶点-通路... 详细信息

通过SciFinder及CNKI数据库完成化合物搜索,并在FAFdurgs4、SEA Search Server数据库进行类药性筛选,结合在OMIM、GeneCards、DurgBank等疾病靶点数据库中搜索到的急性心肌缺血相关靶点集,并借助Cytoscape软件建立“化学成分-靶点-通路-疾病”网络,预测矮紫堇抗急性心肌缺血的潜在活性成分。通过STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络并预测网络中的核心靶点,利用DAVID数据库、R软件对核心靶点进行富集分析,最后利用Autodock Vina等软件将网络中预测到的潜在活性成分与核心靶点进行分子对接验证。结果显示,矮紫堇与急性心肌缺血相关的化合物共60个,涉及73个潜在的靶点,GO功能富集分析得到282条生物学过程(BP)、49条细胞成分(CC)、78条分子功能(MF);KEGG富集到85条通路,涉及酒精中毒通路、内分泌抵抗通路、钙离子信号通路、cAMP信号通路、血管内皮生长因子信号通路及心肌细胞的肾上腺素能信号转导通路等。网络拓扑分析结果表明,矮紫堇抗急性心肌缺血的关键成分可能为四氢巴马汀、四氢非洲防己碱、N-反式-阿魏酰去甲辛弗林、N-顺式-对香豆酰去甲辛弗林、N-反式-对香豆酰去甲肾上腺素、N-反式-对香豆酰去甲辛弗林,核心靶点包括CDH23、SCN4B、NFASC。分子对接结果显示,矮紫堇的关键成分与核心靶点具有稳定的结合活性。该研究为进一步阐明矮紫堇抗急性心肌缺血的药效物质、后续的临床应用及开发提供了一定的参考。

关键词：矮紫堇急性心肌缺血网络药理学分子对接药效物质作用机制

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非手性-手性色谱-预测多反应监测法分析中药毛前胡的化学成分

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色谱 2021年第6期39卷 642-651页

作者：许霞李婷贾金茹汤慧婷李军赵云芳宋月林北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

中药毛前胡为伞形科植物短片藁本Ligusticum brachylobum Franch.的干燥根,主要用于治疗风热咳嗽痰多、痰热喘满、咯痰黄稠等证,富含香豆素类化学成分,含有多组对映异构体和非对映异构体。为了深入研究毛前胡的化学成分组成,特别是对映... 详细信息

中药毛前胡为伞形科植物短片藁本Ligusticum brachylobum Franch.的干燥根,主要用于治疗风热咳嗽痰多、痰热喘满、咯痰黄稠等证,富含香豆素类化学成分,含有多组对映异构体和非对映异构体。为了深入研究毛前胡的化学成分组成,特别是对映异构体的组成,研究建立了非手性-手性色谱-预测多反应监测法(achiral-chiral-LC predictive MRM),同步实现毛前胡化学成分的化学选择性和立体选择性分离,以及高灵敏度定性分析。非手性色谱和手性液相色谱-串联质谱系统结合了RP-C18色谱柱的高效化学选择性分离能力以及手性色谱柱的立体选择性优势,有效避免了中心切割非手性-手性二维液相色谱构造复杂、重现性难以满足定量要求等缺陷。采用小内径核-壳型RP-C18色谱柱作为前端化学分离柱,实现结构类似香豆素的高效化学选择性分离;采用反相大内径AD-RH手性色谱柱,实现对映异构体的手性拆分;采用预测多反应监测模式,实现化学成分的高灵敏度检出;利用增强子离子扫描模式(EPI)采集各色谱峰的二级质谱信息,鉴定化学结构。通过定量离子对、定性离子对及两者的比值,判定是否为对映异构体。利用所构建的非手性-手性色谱耦联系统从毛前胡中共鉴定出60个化学成分,其中8对香豆素对映异构体得到了良好分离。本研究为毛前胡以及含有对映异构体中药的深入定性、定量分析提供可靠的方法。

关键词：非手性-手性色谱预测多反应监测对映异构体拆分角型吡喃香豆素毛前胡

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基于血浆代谢组学和网络药理学探讨芎芷地龙汤治疗偏头痛的作用机制

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Journal of Traditional Chinese Medical Sciences 2023年第4期10卷 427-439,522页

作者：刘美斯王青卢姿含王力苇赵仕博 Shi Selinda 赵永烈北京中医药大学第三附属医院脑病科中国人民解放军总医院第六医学中心中医科北京中医药大学中药学院中药现代研究中心华盛顿大学医学中心移植中心

目的:基于网络药理学和血浆代谢组学探讨芎芷地龙汤(Xiongzhi Dilong decoction,XZDLD)对降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)诱导的偏头痛的作用机制。方法:采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱... 详细信息

目的:基于网络药理学和血浆代谢组学探讨芎芷地龙汤(Xiongzhi Dilong decoction,XZDLD)对降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)诱导的偏头痛的作用机制。方法:采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(ultra-high-performance liquid chromatography-linear trap quadrupole orbitrap mass spectrometry,UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)对XZDLD的化学成分进行鉴定。经硬脑膜套管注射CGRP建立偏头痛大鼠模型,通过观察大鼠偏头痛样行为、测定机械痛阈和温度痛阈评估XZDLD治疗偏头痛的疗效。基于网络药理学和血浆代谢组学的联合分析识别其治疗偏头痛的关键靶点,并应用蛋白免疫印迹法和免疫组织化学对相关蛋白进行验证。结果:应用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS共识别出方中38个化合物。与模型大鼠相比,XZDLD各组在前30分钟显著改善了偏头痛样行为(均P<0.05),并在第19‒22天提高了机械痛阈(均P<0.05),在第20‒22天提高了温度痛阈(均P<0.05)。基于网络药理学识别出128个XZDLD治疗偏头痛的潜在靶点。基于血浆代谢组学识别出在对照组、模型组和XZDLD组中有17种不同的内源性代谢产物,主要与色氨酸和酪氨酸代谢途径相关。将二者联合分析后确定了6个关键靶点进行验证:MAOA、MAOB、CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1和ADH1C。与模型组相比,XZDLD显著降低了MAOA、MAOB和CYP1B1蛋白的表达(P=0.024;P=0.004;P=0.039),并升高了CYP1A1、CYP1A2和ADH1C的表达(P=0.033;P=0.045;P=0.027)。结论:芎芷地龙汤可以改善大鼠偏头痛样行为,提高痛阈,其作用机制可能与调节色氨酸和酪氨酸代谢途径有关,为其临床应用提供依据,同时为偏头痛研究提供思路。

关键词：芎芷地龙汤偏头痛超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法网络药理学血浆代谢组学

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超高效液相色谱-三重四极杆质谱法用于含阿胶中成药中胶类皮源检测研究

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中国药学杂志 2023年第3期58卷 260-265页

作者：李婷程显隆王郡瑶李明华郭晓晗李向日马潇魏锋马双成北京中医药大学中药炮制研究中心北京市中药品质评价重点实验室北京102488 中国食品药品检定研究院北京100050 甘肃省药品检验研究院兰州730000

目的建立含阿胶中成药阿胶补血口服液、阿归养血颗粒中阿胶类皮源检测方法,包括阿胶的专属性检测方法,以及猪皮源、马皮源、牛皮源掺伪检查研究。方法采用胰蛋白酶对用0.01 g·mL^(-1)NH4HCO3溶解的阿归养血颗粒及阿胶补血口服液中... 详细信息

目的建立含阿胶中成药阿胶补血口服液、阿归养血颗粒中阿胶类皮源检测方法,包括阿胶的专属性检测方法,以及猪皮源、马皮源、牛皮源掺伪检查研究。方法采用胰蛋白酶对用0.01 g·mL^(-1)NH4HCO3溶解的阿归养血颗粒及阿胶补血口服液中阿胶进行酶解,利用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QqQ-MS)对样品进行检测。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3-C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为体积分数0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~25 min,95%A→80%A;25~40 min,80%A→50%A),流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量5μL;离子化模式为ESI+,进行多反应监测,选择阿胶特征分子离子峰m/z 539.8(双电荷)→612.4和m/z 539.8(双电荷)→923.8;马源寡肽A特征分子离子峰m/z 386.4(双电荷)→322.3和m/z 386.4(双电荷)→377.3;新阿胶特征分子离子峰m/z 774.5(双电荷)→799.8和m/z 774.5(双电荷)→1034.6;黄明胶特征分子离子峰m/z 641.3(双电荷)→726.2和m/z 641.3(双电荷)→783.3作为检测离子对。结果10批市售阿归养血颗粒和10批阿胶补血口服液样品中均可检出阿胶的特征肽段,其中的3批阿归养血颗粒样品和2批阿胶补血口服液样品中同时检出了马皮特征肽。结论所建立的方法经方法学验证,专属性强,可用于中成药中阿胶的检测及掺伪检查。

关键词：阿归养血颗粒阿胶补血口服液特征肽段专属性鉴别超高效液相色谱-三重四极杆质谱

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槐耳蛋白聚糖TPG-1抑制人肝癌SK-HEP-1细胞生长的机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第1期28卷 72-78页

作者：杨爱琳黄惠铭刘亚鑫欧阳里山范海涛屠鹏飞胡仲冬北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京电子科技职业学院生物工程学院北京100029

目的:蛋白聚糖TPG-1具有良好的抗肝癌活性,本研究进一步探究蛋白聚糖TPG-1抗肝癌的分子作用机制。方法:用槐耳蛋白聚糖TPG-1(0,0.05,0.1,0.25,0.5,1 g·L^(-1))处理人肝癌SK-HEP-1细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测槐耳蛋白聚糖TPG-1... 详细信息

目的:蛋白聚糖TPG-1具有良好的抗肝癌活性,本研究进一步探究蛋白聚糖TPG-1抗肝癌的分子作用机制。方法:用槐耳蛋白聚糖TPG-1(0,0.05,0.1,0.25,0.5,1 g·L^(-1))处理人肝癌SK-HEP-1细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测槐耳蛋白聚糖TPG-1对SK-HEP-1细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测TPG-1对SK-HEP-1细胞凋亡的影响。对经TPG-1处理过的人肝癌SK-HEP-1细胞进行基因芯片检测分析,探讨TPG-1抗肝癌的分子作用机制。结果:与空白组比较,槐耳蛋白聚糖TPG-1能够显著抑制人肝癌SK-HEP-1细胞的增殖能力(P<0.01)。TPG-1(1 g·L^(-1))作用于SK-HEP-1细胞48 h,SK-HEP-1细胞凋亡率显著增加(P<0.01),且TPG-1给药能够显著促进细胞凋亡重要执行者含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3和Caspase-7的剪切水平(P<0.01)。与空白组比较,TPG-1(0.1 g·L^(-1))能够抑制SK-HEP-1细胞的迁移能力(P<0.05)。基因芯片检测分析结果显示,TPG-1处理后,SK-HEP-1细胞中差异表达基因有971个,其中表达上调基因486个,表达下调基因485个。基因本体(GO)和通路(Pathway)分析结果显示表达差异基因的功能主要涉及白细胞介素-6(IL-6)生物合成、抗原加工与呈递、超氧化物歧化酶活性、丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶(MAPKKK)级联反应的正调控、自然杀伤(NK)细胞趋化、趋化因子生物合成等。此外,表达差异基因所涉及的信号通路主要包括核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体信号通路,凋亡,Toll样受体信号通路,维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-Ⅰ)样受体信号通路,T细胞受体信号通路及趋化因子信号通路等。蛋白免疫印迹法结果显示,TPG-1(1 g·L^(-1))能够显著激活SK-HEP-1细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路(P<0.01)。结论:槐耳蛋白聚糖TPG-1能够抑制人肝癌SK-HEP-1细胞增殖及迁移能力并促进其发生凋亡,MAPK信号通路的激活可能与TPG-1发挥抑制人肝癌SK-HEP-1细胞生长作用有关。

关键词：槐耳蛋白聚糖TPG-1 人肝癌SK-HEP-1细胞基因芯片丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路

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利用直接注射-多级质谱全扫描法快速分析片仔癀化学成分组

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中国中药杂志 2022年第13期47卷 3501-3510页

作者：贾金茹李菡屠鹏飞于娟赵云芳宋月林北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 漳州片仔癀药业股份有限公司福建漳州363000

名优中药片仔癀(Pien-Tze-Huang,PTH)为国家绝密配方,目前公布的组成药味包括三七、牛黄、蛇胆、麝香,具有清热解毒、凉血化瘀、消肿止痛等功效。阐明片仔癀的化学成分组成,是建立其质量标准、揭示体内药效物质和作用机制的前提。因此,... 详细信息

名优中药片仔癀(Pien-Tze-Huang,PTH)为国家绝密配方,目前公布的组成药味包括三七、牛黄、蛇胆、麝香,具有清热解毒、凉血化瘀、消肿止痛等功效。阐明片仔癀的化学成分组成,是建立其质量标准、揭示体内药效物质和作用机制的前提。因此,该研究采用直接注射-多级质谱全扫描法(DI-MS/MS^(ALL))分析片仔癀样品,快速、深入地阐明片仔癀的化学成分组成。阐明中药化学成分组成的核心是构建MS^(1)-MS^(2)数据列表,并进一步根据多级质谱信息鉴定化学结构。多级质谱全扫描技术(MS/MS^(ALL))采用气态分段技术(GPF),结合质谱高灵敏度、高分辨率、特异性强的优势,可以在直接注射(DI)模式下采集每个表观质量数窗口的二级质谱图,快速实现MS^(1)-MS^(2)数据列表的构建,进而根据所得到的高分辨MS~1和MS~2质谱数据推导质谱裂解途径,并结合数据库检索以及相关文献数据匹配。从片仔癀中初步鉴定了52个化学成分的结构,包括16个皂苷类化合物、24个胆汁酸类化合物、9个脂肪酸类化合物、2个糖类化合物以及1个其他类化合物。与传统的LC-MS相比,DI-MS/MS^(ALL)分析时间短,可以同时检测不同极性的化学成分。因此,该研究采用DI-MS/MS^(ALL)技术全面、快速地阐明片仔癀的化学成分组成,同时为中药复方化学成分组成快速、全面定性分析提供了有力的分析工具。

关键词：直接注射-多级质谱全扫描片仔癀化学成分组 MS^(1)-MS^(2)数据列表质谱裂解途径

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没药中一个新的杜松烷型倍半萜

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药学学报 2021年第3期56卷 831-834页

作者：王超超夏晖梁乃允王嵘晔王鑫玉姚会娜霍会霞屠鹏飞李军北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029

采用硅胶、ODS及半制备型HPLC等色谱分离技术,对没药正己烷提取物化学成分进行系统的分离纯化,结合其理化性质、波谱数据(UV、IR、MS、NMR)和X-ray单晶衍射实验鉴定化合物的结构。从没药正己烷提取物中分离鉴定了5个杜松烷型倍半萜类化... 详细信息

采用硅胶、ODS及半制备型HPLC等色谱分离技术,对没药正己烷提取物化学成分进行系统的分离纯化,结合其理化性质、波谱数据(UV、IR、MS、NMR)和X-ray单晶衍射实验鉴定化合物的结构。从没药正己烷提取物中分离鉴定了5个杜松烷型倍半萜类化合物,分别鉴定为(3S,4R)-3,9-二甲氧基没药酮(1)、9-甲氧基没药酮(2)、没药酮(3)、commiterpene B(4)和comosoneⅡ(5)。其中化合物1为新化合物,通过X-ray单晶衍射实验确定了其绝对构型。化合物5为首次从该属植物中分离得到。

关键词：没药橄榄科没药属杜松烷型倍半萜

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