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第十届肉苁蓉暨沙生药用植物学术研讨会

作者：李春王启新董健藤屠鹏飞北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

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荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分定性分析

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中国中药杂志 2018年第18期43卷 3708-3714页

作者：刘文静曹妍宋青青郑健赵云芳屠鹏飞李军宋月林北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中国食品药品检定研究院北京100050

荒漠肉苁蓉为著名补益类中药肉苁蓉的2种基原植物之一,为寄生植物。一般在其出土前挖取带鳞片的肉质茎作为药用,而出土、开花后的木质化茎和花一般被丢弃。为了探讨这些非传统药用部位的药用价值,该文利用高效液相色谱-离子阱-飞行时间... 详细信息

荒漠肉苁蓉为著名补益类中药肉苁蓉的2种基原植物之一,为寄生植物。一般在其出土前挖取带鳞片的肉质茎作为药用,而出土、开花后的木质化茎和花一般被丢弃。为了探讨这些非传统药用部位的药用价值,该文利用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术(HPLC-IT-TOF-MS)对荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分进行深入的定性分析。样品粉末经50%甲醇-水超声提取后,采用Capcell core ADME色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水系统梯度洗脱;正/负离子自动多级质谱模式采集高分辨质谱数据;利用对照品推导主要化学类型的质谱裂解规律并指认部分信号,结合对比文献数据以及解析高分辨质谱数据,共对发现的62个信号中的39个进行了结构注释,主要成分包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木质素苷类、糖类等。荒漠肉苁蓉花及木质化茎与肉质茎的化学成分轮廓差异较大,不能等同使用,但其含有较为丰富的木质素和环烯醚萜苷类成分,具有一定的开发利用价值。

关键词：荒漠肉苁蓉花和木质化茎苯乙醇苷类质谱裂解规律

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白木香丙二烯氧化物环化酶基因(AsAOC1)的克隆与表达分析

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药学学报 2018年第3期53卷 467-475页

作者：董先娟李铁铮冯莹莹王晓晖高博闻北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京中医药大学中药学院北京102488 包头医学院内蒙古包头014060

丙二烯氧化物环化酶(allene oxide cyclase,AOC)是茉莉酸生物合成途径中的一个关键酶,在植物防御反应中发挥重要作用。本研究根据白木香转录组高通量测序结果设计引物扩增,利用RT-PCR技术从白木香中首次克隆得到1个AOC基因,命名为AsAOC1... 详细信息

丙二烯氧化物环化酶(allene oxide cyclase,AOC)是茉莉酸生物合成途径中的一个关键酶,在植物防御反应中发挥重要作用。本研究根据白木香转录组高通量测序结果设计引物扩增,利用RT-PCR技术从白木香中首次克隆得到1个AOC基因,命名为AsAOC1,并进行生物学信息分析、原核表达和纯化、组织特异性分析及非生物胁迫和激素诱导表达分析。白木香AsAOC1基因的开放阅读框(ORF)长753 bp,编码251个氨基酸,其蛋白分子质量是27.46 kD。生物学信息分析表明AsAOC1蛋白包含1个保守的allene_ox_cyc结构域,系统进化树显示AsAOC1蛋白与川桑(Morus notabilis)AOC蛋白具有较高的同源性。构建原核表达载体pET28a-As AOC1并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达AsAOC1重组蛋白,利用Ni^(2+)亲和色谱纯化得到可溶性AsAOC1重组蛋白。实时荧光定量PCR检测结果表明AsAOC1基因在茎中表达量最高,根与茎尖次之,叶中表达量最低。盐、干旱、低温以及重金属胁迫均能够诱导白木香愈伤组织中AsAOC1基因表达;茉莉酸甲酯、水杨酸、赤霉素和脱落酸诱导后,愈伤组织中AsAOC1基因的表达量明显上升。本研究为进一步研究茉莉酸途径在白木香结香机制和植物防御反应中作用奠定基础。

关键词：白木香丙二烯氧化物环化酶茉莉酸生物学信息分析原核表达表达分析

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保元汤调控AT1/P38MAPK/TGF-β途径改善心肌纤维化防治心力衰竭的机制研究

保元汤调控AT1/P38MAPK/TGF-β途径改善心肌纤维化防治心力衰竭的...

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第十届全国中医药博士生学术论坛

作者：孟慧王启新卢文吉孙小仟董健藤刘一舟李春屠鹏飞北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

目的：探讨保元汤对心肌梗死(MI)后心力衰竭(HF)大鼠心肌纤维化(MF)的影响及其机制. 方法：体内实验通过利用左冠状动脉前降支结扎术制备MI后HF动物模型,利用超声、血生化、病理切片染色和Western Blot等技术进行相应指标的检测.在... 详细信息

目的：探讨保元汤对心肌梗死(MI)后心力衰竭(HF)大鼠心肌纤维化(MF)的影响及其机制. 方法：体内实验通过利用左冠状动脉前降支结扎术制备MI后HF动物模型,利用超声、血生化、病理切片染色和Western Blot等技术进行相应指标的检测.在机制研究中,体外实验采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激构建H9C2大鼠心肌细胞损伤模型,给予400、600、800μg/mL保元汤提取物冻干粉以及AngⅡ1型受体(AT1)抑制剂RNH6270进行干预,利用Western Blot技术检测相关蛋白的表达情况. 结果：与模型组比较,保元汤可以显著提高HF大鼠的左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)(P＜0.05),同时抑制左心室内径(LVID)的扩张;此外,可以有效降低循环中ANP、BNP以及AngⅡ的含量(P＜0.01);病理结果显示,保元汤可以能够有效抑制MF程度以及心肌组织中AngⅡ的生成(P＜0.05);Western Blot结果显示保元汤可以下调缺血心肌组织中血管紧张素转化酶(ACE)1以及AT1的表达;同时下调AT1受体下游的磷酸化-P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)、转化生长因子β(TGF-β)、Smad3的表达以及上调ACE2的表达;细胞实验结果显示保元汤可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞中AT1以及其下游P38MAPK的激活,同时下调TGF-β以及Smad3蛋白的表达. 结论：保元汤能有效抑制MI后大鼠缺血区域的纤维化程度,减缓HF进程,其机制与保元汤调控AT1/P38MAPK/TGF-β途径相关.

关键词：保元汤实验药理磷酸化-P38丝裂原活化蛋白激酶转化生长因子β 蛋白表达心力衰竭心肌纤维化

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中药化学生物学——“中药化学”与“生物学”交叉形成的新兴学科

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中国中药杂志 2019年第5期44卷 849-860页

作者：曾克武姜勇王晶叶敏李军艾晓妮宋月林韩利文刘可春屠鹏飞北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所山东济南250103

中医药学是我国最具原创特色的科学领域,是中国走向世界的一张名片。但是由于中医药学自身遵循一套区别于西方现代医学体系的独特的科学思想和理论体系,长期以来难以被现代社会广泛接受与认可,也严重影响了中医药的国际化。因此,如何创... 详细信息

中医药学是我国最具原创特色的科学领域,是中国走向世界的一张名片。但是由于中医药学自身遵循一套区别于西方现代医学体系的独特的科学思想和理论体系,长期以来难以被现代社会广泛接受与认可,也严重影响了中医药的国际化。因此,如何创建一套既体现中医药自身特色,又能够桥接现代科学理论的研究策略,全面系统地揭示中医药的独特科学内涵,一直是人们关注的热点问题。课题组经过在中药学领域多年的实践探索与科学思想凝练,首次提出了中药化学生物学(traditional Chinese medicine chemical biology,TCM chemical biology,TCMCB)的概念。其核心思想就是以中医药理论为指导,将中药药效成分作为化学工具,探讨中药调控生命过程的科学本质,架起中医与现代医学之间的桥梁。特别是中药化学生物学聚焦于阐释中药作用靶点和分子机制,发现中药调控疾病进程的基本规律,最终科学诠释中医药理论。该研究思路不仅科学诠释中医药防治疾病的分子机制,而且发现活性分子及其作用靶点,促进创新药物的发展;探讨生命过程的科学本质和疾病发生发展的规律,促进生命科学和现代医学的发展,具有重要意义。该文详细介绍了中药化学生物学的定义、学术思想、研究方法及其技术体系、科学意义,以期为中医药学发展提供新的研究思路和学术思想。

关键词：中药化学生物学中药学中药化学化学生物学

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基于代谢组学的中药质量及机制研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第8期20卷 1373-1380页

作者：贾志鑫徐文娟马恺悦肖红斌北京中医药大学北京中医药研究院北京100029 北京中医药大学中药分析与转化研究中心北京100029 北京中医药大学生命科学学院北京100029 北京中医药大学中药学院北京100029

中药质量控制及作用机制阐明是中药现代化面临的关键科学问题。代谢组学具有整体性、系统性的特点,与中药多靶点、整体协调机制具有一致性,已成为系统论指导下研究中药质量及作用机制的有效平台,其应用有利于提高中药质量,推动中药新药... 详细信息

中药质量控制及作用机制阐明是中药现代化面临的关键科学问题。代谢组学具有整体性、系统性的特点,与中药多靶点、整体协调机制具有一致性,已成为系统论指导下研究中药质量及作用机制的有效平台,其应用有利于提高中药质量,推动中药新药研发。本文对基于代谢组学的中药质量及机制研究进行了综述,介绍了代谢组学研究进展及其在中药整体性评价、中药质量标志物、中药药效/毒性作用机制研究中的应用,并对代谢组学在中药相关领域的发展趋势进行了展望。

关键词：代谢组学中药质量标志物作用机制毒性机制

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藏族药矮紫堇的化学成分研究

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中国中药杂志 2018年第9期43卷 1758-1763页

作者：尹旭张倩张和新歌沙娜·吾肯李俊俊焦顺刚杨丰庆屠鹏飞柴兴云北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 重庆大学化学化工学院重庆401331

通过硅胶、ODS、Sephadex LH-20及半制备HPLC等色谱方法从藏族药矮紫堇Corydalis hendersonii的乙醇提取物中分离得到9个生物碱类和2个酚苷类化合物,其结构经波谱分析和与文献数据对比鉴定为groenlandicine（1）,小檗碱（2）,普罗托品（... 详细信息

通过硅胶、ODS、Sephadex LH-20及半制备HPLC等色谱方法从藏族药矮紫堇Corydalis hendersonii的乙醇提取物中分离得到9个生物碱类和2个酚苷类化合物,其结构经波谱分析和与文献数据对比鉴定为groenlandicine（1）,小檗碱（2）,普罗托品（3）,隐品碱（4）,N-反式-阿魏酰去甲辛弗林（5）,3-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-N-[2-（4-hydroxy-phenyl）-2-methoxyethyl]acrylamide（6）,N-顺式-对香豆酰去甲辛弗林（7）,N-反式-对香豆酰去甲肾上腺素（8）,N-顺式-阿魏酰去甲辛弗林（9）,apocynin（10）,glucoacetosyringone（11）,其中化合物10,11为属内首次报道,化合物1,2,5-9为该种内首次报道。以上化合物经PC12细胞体外抗损伤及体外抑制血小板聚集实验评价,结果显示,化合物5和7在10μmol·L-1时对PC12细胞具有一定的保护作用;化合物2对由凝血酶（THR）,二磷酸腺苷（ADP）和花生四烯酸（AA）诱导的家兔血小板聚集抑制率均超过60%,化合物3对THR诱导的血小板抑制率为（60.33±2.27）%。

关键词：藏药矮紫堇抗血小板聚集生物碱酚苷

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白木香S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆与表达分析

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药学学报 2018年第10期53卷 1743-1752页

作者：董先娟冯莹莹刘晓齐博文闫雅如丁宁吴云高博闻王晓晖北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 包头医学院药学院内蒙古包头014060

S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmethioninesynthetase,SAMS)是植物代谢过程中的一个关键酶,在植物响应生物与非生物胁迫中发挥着重要作用。本研究根据白木香转录组高通量测序结果结合RACE、RT-PCR技术从白木香愈伤组织中首次克隆得到1... 详细信息

S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmethioninesynthetase,SAMS)是植物代谢过程中的一个关键酶,在植物响应生物与非生物胁迫中发挥着重要作用。本研究根据白木香转录组高通量测序结果结合RACE、RT-PCR技术从白木香愈伤组织中首次克隆得到1个SAMS基因,命名为AsSAMS1,并对其进行生物学信息分析、原核表达与纯化、组织特异性分析及非生物胁迫和激素诱导表达分析。白木香AsSAMS1基因的开放阅读框(ORF)长1 183bp,编码393个氨基酸,其蛋白分子质量是43.13kDa。生物学信息分析表明AsSAMS1蛋白含有3个SAMS的特征序列,系统进化树显示AsSAMS1蛋白与野大豆(Glycine soja) SAMS蛋白具有较高的同源性。构建原核表达载体pET28a-AsSAMS1并在大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中成功表达AsSAMS1重组蛋白,利用Ni^(2+)亲和色谱纯化得到可溶性AsSAMS1重组蛋白。实时荧光定量PCR检测结果表明AsSAMS1基因在茎中表达最高,叶和茎尖次之,在根中表达最低。盐、干旱、低温以及重金属胁迫均能够提高AsSAMS1的表达量和其产物S-腺苷甲硫氨酸的含量;茉莉酸甲酯、水杨酸、脱落酸、赤霉素也能够诱导白木香愈伤组织中AsSAMS1基因表达。本研究可以为进一步研究S-腺苷甲硫氨酸合成酶在白木香结香机制和植物防御反应中的作用奠定基础。

关键词：白木香 S-腺苷甲硫氨酸合成酶生物学信息分析原核表达表达分析

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荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分定性分析

荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分定性分析

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第十届肉苁蓉暨沙生药用植物学术研讨会

作者：刘文静曹妍宋青青郑健赵云芳屠鹏飞李军宋月林北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中国食品药品检定研究院北京100050

荒漠肉苁蓉为著名补益类中药肉苁蓉的两种基原植物之一，为寄生植物.一般在其出土前挖取带鳞片的肉质茎作为药用，而出土、开花后的木质化茎和花一般被丢弃.为了探讨这些传统非药用部位的药用价值，本文利用高效液相色谱-离子阱-飞行时... 详细信息

荒漠肉苁蓉为著名补益类中药肉苁蓉的两种基原植物之一，为寄生植物.一般在其出土前挖取带鳞片的肉质茎作为药用，而出土、开花后的木质化茎和花一般被丢弃.为了探讨这些传统非药用部位的药用价值，本文利用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术(HPLC-IT-TOF-MS)对荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分进行深入的定性分析.样品粉末经50％甲醇-水超声提取后，采用Capcell core ADME色谱柱，乙腈-0.1％甲酸水系统梯度洗脱;正/负离子自动多级质谱模式采集高分辨质谱数据;利用对照品推导主要化学类型的质谱裂解规律并指认部分信号，结合对比文献数据以及解析高分辨质谱数据，共对发现的62个信号中的39个进行了结构注释，主要成分包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木质素苷类、糖类等.荒漠肉苁蓉花及木质化茎与肉质茎的化学成分轮廓差异较大，无法替代传统药用部位使用.

关键词：荒漠肉苁蓉非药用部位苯乙醇苷类质谱裂解规律

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肉苁蓉不同提取部位改善肾阳虚大鼠性能力的影响

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中国实验方剂学杂志 2018年第22期24卷 95-101页

作者：王启新陈则华罗琥捷卢文吉李春屠鹏飞北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 无限极(中国)有限公司广州510663 北京中医药大学中医学院北京100029

目的：观察肉苁蓉不同提取部位对氢化可的松致肾阳虚模型大鼠性能力的影响。方法：将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、阳虚模型组、肉苁蓉总寡糖组、肉苁蓉总多糖组、肉苁蓉苯乙醇总苷组。连续14 d肌肉注射氢化可的松制备肾阳虚动物模型... 详细信息

目的：观察肉苁蓉不同提取部位对氢化可的松致肾阳虚模型大鼠性能力的影响。方法：将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、阳虚模型组、肉苁蓉总寡糖组、肉苁蓉总多糖组、肉苁蓉苯乙醇总苷组。连续14 d肌肉注射氢化可的松制备肾阳虚动物模型,给药组按肉苁蓉生药量2.3 g·kg-1对应给予肉苁蓉总寡糖103.82 mg·kg-1,肉苁蓉总多糖115.64 mg·kg-1,肉苁蓉苯乙醇总苷201.48 mg·kg-1水溶液,每日1次。14 d后测定各组大鼠的勃起潜伏期,交配能力各指标（包括捕捉潜伏期、捕捉次数、射精潜伏期、射精次数、捕捉率、射精率等）,脏器湿重及精浆果糖含量,血浆环磷酸腺苷（c AMP）/环磷酸乌苷（c GMP）值,血清激素睾酮（T）,雌二醇（E2）,促卵泡生成素（FSH）,促黄体生成素（LH）及促性腺激素释放激素（GnRH）水平,观察睾丸病理形态变化。结果：肉苁蓉不同提取部位对肾阳虚大鼠的勃起功能、交配能力、脏器湿重及精浆果糖含量,血浆c AMP/c GMP值,血清激素水平,睾丸病理形态变化均有作用。其中肉苁蓉苯乙醇总苷提取物能够显著缩短大鼠的勃起潜伏期（P〈0.05）及捕捉潜伏期（P〈0.01）,显著增加捕捉次数（P〈0.01）,睾丸（P〈0.05）,精囊腺（P〈0.01）湿重及精浆果糖含量（P〈0.05）,显著升高血浆c AMP/c GMP值（P〈0.01）及血清T（P〈0.01）,FHS（P〈0.01）,GnRH（P〈0.05）水平,显著降低血清E2（P〈0.05）,LH（P〈0.05）水平,显著改善睾丸病理形态。结论：肉苁蓉不同提取部位可通过调控氢化可的松致肾阳虚大鼠模型的激素水平不同程度提高其性能力,其中苯乙醇总苷可显著改善肾阳虚大鼠性能力相关指标。

关键词：肉苁蓉肾阳虚性能力苯乙醇苷寡糖多糖

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