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清开灵有效组分对大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注损伤模型核转录因子-κB的影响

中西医结合学报 2009年第2期7卷 135-139页

作者：高永红邢雁伟袁拯忠朱陵群李澎涛王硕仁北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700 中国中医科学院广安门医院心内科北京100053 温州医学院第一医院中医科浙江温州325000 北京中医药大学基础医学院脑病研究室北京100029

目的:建立大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注损伤模型,探讨清开灵有效组分牛胆酸、猪胆酸、黄芩苷、栀子苷和珍珠母对其的保护作用是否与调节核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)活化有关。方法:体外培养大鼠脑微血管内皮细... 详细信息

目的:建立大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注损伤模型,探讨清开灵有效组分牛胆酸、猪胆酸、黄芩苷、栀子苷和珍珠母对其的保护作用是否与调节核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)活化有关。方法:体外培养大鼠脑微血管内皮细胞(microvascular endothelial cell,MVEC),氧糖剥夺法模拟缺血再灌注损伤,建立体外缺血再灌注损伤模型。随机分为模型组、尼莫地平组、猪胆酸组、黄芩苷组、栀子苷组、珍珠母组和牛胆酸组,并设正常MVEC为正常对照组,每组设6孔。使用免疫细胞化学法观察NF-κB蛋白表达情况并进行图像分析。结果:光学显微镜下观察,正常组MVEC胞核的位置形成空腔,胞浆内见淡棕黄色均匀颗粒。模型组NF-κB细胞核的染色强度明显高于胞浆,活化后移位至细胞核;用药各组NF-κB在胞浆近胞核处有少量阳性表达,在胞核的表达明显弱于模型组。对各组MVEC NF-κB表达强度的图像分析显示,模型组胞核与胞浆的透光度比值低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),用药各组透光度比值显著高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:清开灵有效组分可能通过拮抗NF-κB活化抑制内皮细胞损伤。

关键词：脑微血管内皮细胞缺血再灌注损伤清开灵有效组分核转录因子-κB 大鼠体外研究

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原发性高血压患者血液炎症状态下的血小板聚集功能及其相关中医证候的研究

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北京中医药 2009年第3期28卷 175-178页

作者：索红亮王硕仁吴爱明吕晞滢孙逸坤张冬梅石凤芹北京中医药大学 2006级博士研究生100029 北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京市普通高校中医内科学重点实验室100700

目的探讨高血压不同危险分层患者血液炎症状态下的血小板聚集功能及其相关中医证候特点。方法检测124例原发性高血压(EH)不同危险分层患者的高敏C反应蛋白(Hs-CRP)及血小板-白细胞聚集(全血PAgT)等指标,同时进行患者中医临床证候的判别... 详细信息

目的探讨高血压不同危险分层患者血液炎症状态下的血小板聚集功能及其相关中医证候特点。方法检测124例原发性高血压(EH)不同危险分层患者的高敏C反应蛋白(Hs-CRP)及血小板-白细胞聚集(全血PAgT)等指标,同时进行患者中医临床证候的判别,对其相关指标进行描述性统计及差异性检验,研究各危险分层患者血清Hs-CRP及全血PAgT水平及其与中医证候的相关性。结果中、高危组及无心脑血管梗塞发生史的甚高危Ⅰ组人群Hs-CRP水平明显低于急性缺血性事件组,差异有统计学意义(P<0.05);中、高危组人群全血PAgT水平明显低于急性缺血性事件组(P<0.05);与曾有心脑血管梗塞发生的甚高危Ⅱ组比较,各组、各指标差异无统计学意义(P>0.05);与无证可辨和虚证患者相比,实证与虚实相兼者Hs-CRP水平明显增高(P<0.05)。结论EH的危险分层与Hs-CRP、全血PAgT显著相关,中危及以上危险人群Hs-CRP与全血PAgT处于相对高水平状态,反映炎症及血小板聚集水平较高,可能易发生血栓事件,应早期预防。

关键词：原发性高血压高敏C反应蛋白血小板-白细胞聚集危险分层中医证候

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活血注射液对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化的影响

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中国中药杂志 2008年第13期33卷 1617-1621页

作者：朱陵群王硕仁赵明镜崔巍牛福玲北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点试验室北京市重点实验室气血研究实验室北京100700

目的:观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响,并探讨核转录因子kappa B(NF-κB)在其中的调控作用。方... 详细信息

目的:观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响,并探讨核转录因子kappa B(NF-κB)在其中的调控作用。方法:HUVEC与单核细胞的黏附率用蛋白定量法检测;ICAM-1,VCAM-1 mRNA和蛋白表达分别用RT-PCR技术和流式细胞仪检测;NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值用免疫细胞化学法测定。结果:ox-LDL作用HUVEC后12,24 h时,人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高,HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高,HUVEC的NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高,明显高于正常组(P<0.05,P<0.01),而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率和HUVEC ICAM-1,VCAM-1 mRNA和蛋白表达水平,以及显著降低HUVEC中NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值,与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),这种作用随着剂量的增加而增强。结论:活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1,VCAM-1 mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-κB p65的活性,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。

关键词：血管内皮细胞单核细胞细胞黏附分子核转录因子kappa B 活血注射液

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心衰心气虚病证结合动物模型的研究思路

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北京中医药大学学报 2008年第5期31卷 306-307,311页

作者：赵明镜吴爱明王硕仁北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室北京市重点实验室北京中医药大学东直门医院气血研究室北京100700

证候是中医辨证论治的基础,辨证论治是中医理论的核心和精华,深入研究中医证候是促进中医学术发展的关键。从中医证候入手复制不同证候的动物模型,对于提高临床疗效和中医基础理论研究具有重要意义。[第一段]

关键词：心力衰竭心气虚证病证结合动物模型

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黄芪多糖对缺氧再复氧后人心脏微血管内皮细胞ICAM-1 VCAM-1表达的影响

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辽宁中医杂志 2008年第2期35卷 293-295页

作者：朱海燕陈立新朱陵群北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室北京100700 北京王府中西医结合医院心血管内科北京102209 北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室北京100700

目的：观察黄芪多糖对缺氧再复氧损伤的人心脏微血管内皮细胞细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）蛋白表达的影响。方法：以体外缺氧缺糖模拟体内缺血,复氧复糖模拟再灌注复制缺血再灌注损伤模型;采用免疫细胞化... 详细信息

目的：观察黄芪多糖对缺氧再复氧损伤的人心脏微血管内皮细胞细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）蛋白表达的影响。方法：以体外缺氧缺糖模拟体内缺血,复氧复糖模拟再灌注复制缺血再灌注损伤模型;采用免疫细胞化学法和图象定量分析系统观察ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的变化。结果：人心脏微血管内皮细胞复苏48-72h后呈铺路石样生长,在15个细胞倍增周期内,其形态、生物、生理学特性稳定。与正常对照组比较,缺氧再复氧可明显增加ICAM-1、VCAM-1蛋白在人心脏微血管内皮细胞的表达（P〈0.01）。黄芪多糖能降低两者的表达,其中100μg/mL抑制ICAM-1表达的作用显著（P〈0.05）,100、50μg/mL减少VCAM-1表达的作用明显（P〈0.01）。结论：黄芪多糖通过减少缺血再灌注损伤的人心脏微血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1的表达,抑制白细胞的浸润,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。

关键词：黄芪多糖微血管内皮细胞黏附分子缺氧复氧

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黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞缺氧再复氧损伤后核因子-κB表达的影响

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辽宁中医杂志 2008年第1期35卷 7-9页

目的:观察人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)缺血再灌注损伤后核因子-κB(NF-κB)的表达变化,探讨黄芪多糖治疗心肌缺血再灌注损伤的机制。方法:以体外缺氧再复氧复制缺血再灌注损伤模型。免疫细胞化学染色法观察NF-κB的蛋白分布,荧光实时定... 详细信息

目的:观察人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)缺血再灌注损伤后核因子-κB(NF-κB)的表达变化,探讨黄芪多糖治疗心肌缺血再灌注损伤的机制。方法:以体外缺氧再复氧复制缺血再灌注损伤模型。免疫细胞化学染色法观察NF-κB的蛋白分布,荧光实时定量PCR检测NF-κB mRNA的表达。结果:缺氧再复氧后,NF-κB发生核转位,其mRNA表达较正常对照组明显增加(P<0.05)。黄芪多糖可抑制NF-κB的核转位,并降低NF-κBmRNA的表达,其中黄芪多糖50μg/mL剂量组降低NF-κBmRNA表达的作用与缺氧再复氧组比较差异显著(P<0.05)。结论:黄芪多糖通过抑制缺氧再复氧后HCMEC的NF-κB信号通路,降低炎症相关基因的激活,从而减轻心肌缺血再灌注损伤时的炎症反应。

关键词：黄芪多糖微血管内皮细胞缺氧复氧核因子-κB

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实验室有害试剂使用防护及废弃物处理管理的探讨

实验室有害试剂使用防护及废弃物处理管理的探讨

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第五届中国实验室信息管理系统(LIMS)学术研讨会及实验室管理协作服务交流会

作者：闫彦芳张壮王硕仁北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室，北京，100700 北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室，北京，100700

@@生物医药实验室在教学、科研过程中广泛使用各种生物制品和有机溶剂，这些物质及其废弃物对人体和周围环境都具有不同程度的危害。许多化学试剂具有毒性、腐蚀性、易燃性、致癌性、致畸性，同时，在探索科学规律和研发新产品的同时，... 详细信息

@@生物医药实验室在教学、科研过程中广泛使用各种生物制品和有机溶剂，这些物质及其废弃物对人体和周围环境都具有不同程度的危害。许多化学试剂具有毒性、腐蚀性、易燃性、致癌性、致畸性，同时，在探索科学规律和研发新产品的同时，也产生了各种各样的废弃物。这些原料和废弃物产生的环境危害，虽然在数量与强度方面不及工业企业单位，但也会对实验室、实验室所在建筑物和周边环境造成污染，对实验室研究人员身体健康造成损害。如果没有相应处理、缺乏控制措施，有毒有害物质则可能发生泄漏和排放，造成更广泛的环境污染问题。当今社会日益重视环境问题，为控制实验试剂及其废弃物的污染，应努力探索新方法解决防护闯题、污染问题。

关键词：实验室有害试剂使用防护废弃物处理

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三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2008年第5期14卷 55-58页

作者：陈志刚朱陵群王席玲张壮闫彦芳牛福玲北京中医药大学东方医院神经内科北京100078 北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和脑病研究室北京100700

目的:观察三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用。方法:建立缺氧/缺糖再给氧模型,模拟缺血再灌注损伤。流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞乳酸脱氢酶(LDH... 详细信息

目的:观察三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用。方法:建立缺氧/缺糖再给氧模型,模拟缺血再灌注损伤。流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出和一氧化氮(NO)的产生量。结果:神经细胞缺氧/缺糖5 h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并显著增加LDH的漏出和NO的产生,并随再给氧时间的延长而增加。三七总皂苷能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,减少LDH的漏出和NO的过量产生,三七总皂苷的作用随剂量增加而增加。结论:三七总皂苷具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用,这种作用可能与降低或抑制一氧化氮合酶(NOS)活性,减少NO的过量产生有关。

关键词：三七总皂苷神经细胞凋亡一氧化氮缺氧/缺糖

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党参HPLC半制备成分C对缺氧/缺糖损伤中大鼠海马神经细胞的保护作用及其机制

党参HPLC半制备成分C对缺氧/缺糖损伤中大鼠海马神经细胞的保护作...

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中华中医药学会脑病分会成立大会暨2008年全国中医脑病学术研讨会

作者：张壮林燕张佰特闫彦芳牛福玲孙塑伦高永红朱陵群崔巍王硕仁北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室

目的:党参HPLC半制备成分C对缺氧/缺糖损伤中大鼠海马神经细胞的保护作用及其机制。方法:①实验于北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室、中医内科学教育部重点实验室(北京中医药大学)完成。选用出生1d的Wistar大鼠,雌雄不拘。②分... 详细信息

目的:党参HPLC半制备成分C对缺氧/缺糖损伤中大鼠海马神经细胞的保护作用及其机制。方法:①实验于北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室、中医内科学教育部重点实验室(北京中医药大学)完成。选用出生1d的Wistar大鼠,雌雄不拘。②分离海马神经细胞进行原代培养,采用无糖Earle's液和密闭缺氧罐进行缺氧/缺糖处理造模。③四唑盐比色法(MTT)测定细胞存活率;Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)原位双染法荧光显微镜观察细胞坏死率、凋亡率,评价药效。结果:党参HPLC半制备成分C可以显著降低缺氧/缺糖损伤中大鼠海马神经细胞的死亡率、凋亡率。结论:党参HPLC半制备成分C对海马神经细胞有保护作用,减轻脑组织缺血/缺氧性的损伤。

关键词：党参HPLC半制备成分C 海马神经细胞缺氧/缺糖扶正护脑

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早期应用活血和益气中药抑制心衰大鼠左室重构和凋亡的对比研究

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中国中药杂志 2007年第8期32卷 710-714页

作者：赵明镜王硕仁李敏王振涛朱陵群崔巍吕滢中医内科学教育部重点实验室中医内科学北京市重点实验室北京中医药大学附属东直门医院气血研究室北京100700

目的:比较早期应用活血、益气中药,抑制心梗后心衰大鼠左室重构和心肌细胞凋亡的作用特点。方法:结扎大鼠左冠状动脉致心梗后心力衰竭,随机分为模型组、活血组(8 ***-1)、益气组(8 ***-1)、气血组(***-1)、西药组(卡托普利10.125 ***-1)... 详细信息

目的:比较早期应用活血、益气中药,抑制心梗后心衰大鼠左室重构和心肌细胞凋亡的作用特点。方法:结扎大鼠左冠状动脉致心梗后心力衰竭,随机分为模型组、活血组(8 ***-1)、益气组(8 ***-1)、气血组(***-1)、西药组(卡托普利10.125 ***-1),另外有假手术组作为对照。于大鼠心梗后次日给药、疗程分别为4,8周。采用阻抗法测定心功能;病理染色图象分析测定左室腔周长和面积、单位面积内心肌细胞核数、单位面积内胶原的含量;TUNEL法测定心肌细胞凋亡百分率以及放射免疫法测定心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量。结果:各治疗组都改善了心衰大鼠左室收缩功能、减小左室腔面积、抑制胶原增殖、AngⅡ含量和心肌细胞凋亡,与模型组比较有显著差异;活血组给药8周改善心脏指数(C I)、减小左室腔面积、降低心肌AngⅡ的结果与假手术组已无显著性区别;活血组心肌细胞凋亡率显著低于益气药组。结论:活血、益气中药均有抑制心衰左室重构和心肌细胞凋亡,延缓心衰发展的作用,且活血组8周的效果最佳。

关键词：心力衰竭左室重构细胞凋亡活血中药益气中药

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