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生物工程学报 2023年第9期39卷 3605-3614页

作者：葛祥宇史社坡王娟北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

Brasilicardin A(BraA)是从致病性放线菌巴西诺卡菌(Nocardia brasiliensis)IFM 0406中发现的具有显著免疫抑制作用(IC_(50)=0.057μg/mL)的二萜糖苷类化合物。BraA发挥免疫抑制活性的作用机制与现有临床常用的免疫抑制剂不同,BraA通过... 详细信息

Brasilicardin A(BraA)是从致病性放线菌巴西诺卡菌(Nocardia brasiliensis)IFM 0406中发现的具有显著免疫抑制作用(IC_(50)=0.057μg/mL)的二萜糖苷类化合物。BraA发挥免疫抑制活性的作用机制与现有临床常用的免疫抑制剂不同,BraA通过抑制氨基酸转运体L系统的转运进而影响T-淋巴细胞对氨基酸的摄入而发挥免疫抑制作用。相比目前已知的免疫抑制剂环孢菌素A、子囊霉素和他克莫司等,BraA在小鼠混合淋巴细胞反应中显示低毒、高效的优势。因此,BraA作为新型的免疫抑制剂,极具开发潜力,已成为全球免疫抑制剂发现新领域。但其结构复杂、合成困难,原菌种产率低且具有致病性,BraA及其类似物的获得已成为此类新型免疫抑制剂研究的瓶颈。本文综述了BraA的分子特征、药理活性、作用机制、目前获得的BraA类似物和衍生化方面的研究进展,以期为BraA及其类似物的高效生产提供参考。

关键词： brasilicardin A 分子特征免疫抑制活性生物合成机制化学合成

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蛇足石杉中赖氨酸脱羧酶基因的克隆表达及功能鉴定

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药学学报 2022年第11期57卷 3437-3445页

作者：李赛男王雯静张蓓蓓张泽坤葛祥宇杜宇张晓雪王娟史社坡北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

赖氨酸脱羧酶是石杉碱甲等石松生物碱上游生物合成步骤中催化赖氨酸脱羧生成1,5-戊二胺(尸胺)的关键酶。通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)转录组数据的挖掘分析,并结合RT-PCR技术从蛇足石杉中成功克隆出3个赖氨酸脱羧酶基因(HsLDC-L1、... 详细信息

赖氨酸脱羧酶是石杉碱甲等石松生物碱上游生物合成步骤中催化赖氨酸脱羧生成1,5-戊二胺(尸胺)的关键酶。通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)转录组数据的挖掘分析,并结合RT-PCR技术从蛇足石杉中成功克隆出3个赖氨酸脱羧酶基因(HsLDC-L1、HsLDC-L2、HsLDC-L3);利用在线生物信息学分析软件以及DNAMAN、MEGA 7.0等对上述3个基因编码蛋白的性质、二级和三级结构、序列同源性、进化关系等进行了预测分析,发现3个基因编码蛋白均具有植物赖氨酸脱羧酶的保守结构域和活性位点,且与文献报道的产石杉碱甲植物中的赖氨酸脱羧酶具有较近的亲缘关系。进一步尝试利用不同载体在大肠杆菌中对上述3个基因进行表达,结果仅HsLDC-L1与载体pCold TF构建的重组质粒在大肠杆菌*** BL21(DE3)中成功实现可溶性表达,利用Ni^(2+)亲和色谱柱分离纯化得到重组蛋白HsLDC-L1;HsLDC-L1全长由469个氨基酸组成,理论分子质量为50.50 kDa。体外酶活性分析证明HsLDC-L1可以催化赖氨酸脱羧生成尸胺。底物适应性实验发现HsLDC-L1还可以催化鸟氨酸脱羧生成腐胺,但不能催化酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸脱羧。上述结果为进一步研究包括石杉碱甲在内的石松类生物碱的生物合成提供参考,为利用合成生物学策略构建产Δ^(1)-哌啶、石榴碱等石松类生物碱生物合成关键前体的工程菌提供重要的基因元件。

关键词：蛇足石杉赖氨酸脱羧酶基因克隆石杉碱甲石松生物碱

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试论中药涌现性特征

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中国中药杂志 2015年第13期40卷 2480-2485页

作者：柴兴云北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

动植物因环境胁迫产生的次生代谢产物,是自然进化造就的主动性和适应性结果。中国古人与历代医家经反复尝试、理性思索及几千年有效临床实践,决定了中药治疗疾病多成分优于单一成分的整体性特点,并形成具有涌现性特征的复杂系统。中药... 详细信息

动植物因环境胁迫产生的次生代谢产物,是自然进化造就的主动性和适应性结果。中国古人与历代医家经反复尝试、理性思索及几千年有效临床实践,决定了中药治疗疾病多成分优于单一成分的整体性特点,并形成具有涌现性特征的复杂系统。中药涌现性特征源于其成分多样性和不同成分之间复杂的关联性。如何获得具有等效作用并具有涌现性的新组分实体,是中药新药创制的一项重要基础性工作。目前对中药涌现性特征的理解和技术方法有待于进一步完善,认识和研究中药需要整体观和还原论方法的有机结合。

关键词：涌现性整体作用新组分实体复杂体系中药

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茄的化学成分及药理作用研究进展

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中草药 2013年第18期44卷 2615-2622页

作者：孙晶顾宇凡李曼曼苏小琴李辉李军屠鹏飞北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

茄是一种药食两用植物,富含咖啡酰奎宁酸酯衍生物、黄酮类、生物碱类、甾体皂苷类等多种化学成分,具有抗炎、镇痛、抗氧化、调血脂、降血糖和抗肿瘤等多种生物活性。综述了国内外对茄的化学成分及药理作用研究进展,并对茄的开发利用前... 详细信息

茄是一种药食两用植物,富含咖啡酰奎宁酸酯衍生物、黄酮类、生物碱类、甾体皂苷类等多种化学成分,具有抗炎、镇痛、抗氧化、调血脂、降血糖和抗肿瘤等多种生物活性。综述了国内外对茄的化学成分及药理作用研究进展,并对茄的开发利用前景进行展望,为进一步合理开发和综合利用茄的药用资源提供有益参考。

关键词：茄咖啡酰奎宁酸酯黄酮生物碱甾体皂苷

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龙血竭酚类成分研究

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中草药 2014年第11期45卷 1511-1514页

作者：苏小琴李曼曼顾宇凡孙晶张静黄正霍会霞张倩赵云芳北京中医药大学中药现代研究中心北京 100029 北京中医药大学中药学院北京 100102 北京中医药大学中药现代研究中心北京 100029

目的研究龙血竭Draconis Resina的酚类化学成分.方法利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及半制备液相等色谱方法分离纯化,结合其理化性质及MS、NMR等光谱数据鉴定化合物的结构.结果从龙血竭醋酸乙酯提取部位分离得到14个化合物,分别鉴定... 详细信息

目的研究龙血竭Draconis Resina的酚类化学成分.方法利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及半制备液相等色谱方法分离纯化,结合其理化性质及MS、NMR等光谱数据鉴定化合物的结构.结果从龙血竭醋酸乙酯提取部位分离得到14个化合物,分别鉴定为4’-羟基-1’,4”-二甲氧基查尔烷(1)、7-羟基-5,4’-二甲氧基-2-苯基苯并呋喃(2)、紫檀芪(3)、3,4’-二羟基-5-甲氧基二苯乙烯(4)、5,7,4’-三羟基二氢黄酮(5)、瑞士松素(6)、7-羟基二氢黄酮(7)、甘草素(8)、对羟基苯甲酸甲酯(9)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(10)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(11)、2,4-二羟基苯乙酮(12)、3,4-二羟基烯丙基苯(13)和β-谷甾醇(14).结论化合物1为新天然产物,化合物2为首次从百合科植物中分离得到,化合物5、9～12为首次从龙血树属植物中分离得到,化合物6～7为首次从剑叶龙血树中分离得到.

关键词：龙血竭剑叶龙血树酚类化合物 4'-羟基-1',4"-二甲氧基查尔烷二苯乙烯二氢黄酮

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蛇足石杉内生真菌产黄青霉菌MT-40中xanthocillin类似物生物合成基因簇的挖掘及鉴定

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生物工程学报 2023年第9期39卷 3814-3826页

作者：王雯静张蓓蓓张明亮张泽坤王阳葛祥宇杜宇张晓雪刘晓王娟王晓晖史社坡北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

Xanthocillin具有显著的抗菌活性,结构中含有独特的异腈基。本文通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)内生真菌产黄青霉菌(Penicillium chrysogenum)MT-40基因组的测序分析,利用本地BLAST等生物信息学分析工具挖掘具有合成xanthocillin类... 详细信息

Xanthocillin具有显著的抗菌活性,结构中含有独特的异腈基。本文通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)内生真菌产黄青霉菌(Penicillium chrysogenum)MT-40基因组的测序分析,利用本地BLAST等生物信息学分析工具挖掘具有合成xanthocillin类似物潜力的基因簇,结合米曲霉(Aspergillus oryzae)NSAR1异源表达技术实现基因簇中关键基因的功能鉴定。结果成功从内生真菌*** MT-40中发现一个合成xanthocillin类似物的生物合成基因簇(命名为for),for基因簇中的关键生物合成基因forB编码的异腈基合成酶可以催化合成2-formamido-3-(4-hydroxyphenyl)acrylic acid,基因forG编码的P450酶可以催化2-formamido-3-(4-hydroxyphenyl)acrylic acid的二聚化生成xanthocillin类似物N,N′-(1,4-bis(4-hydroxyphenyl)buta-1,3-diene-2,3-diyl)diformamide。本文研究结果为进一步从真菌中发现xanthocillin类似物提供参考。

关键词：异腈类化合物 xanthocillin 米曲霉蛇足石杉内生真菌

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没药中2个新倍半萜类化合物

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中草药 2023年第3期54卷 688-694页

作者：梁乃允黄惠铭王超超裴钰洁王勃开杜梦霍会霞宋月林郑姣赵云芳李军北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学、北京中医药研究院、中药现代研究中心北京100029

目的研究没药(地丁树Commiphora myrrha的干燥树脂)的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱技术对没药的化学成分进行分离纯化,结合理化性质和NMR、MS等谱学数据进行结构鉴定。结果从没药正己烷部位... 详细信息

目的研究没药(地丁树Commiphora myrrha的干燥树脂)的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱技术对没药的化学成分进行分离纯化,结合理化性质和NMR、MS等谱学数据进行结构鉴定。结果从没药正己烷部位共分离得到了8个倍半萜类化合物,分别鉴定为(4R,5S)-呋喃杜松-6(1),7(8),9(10)-三烯-5-醇乙酸酯(1)、(1E,3S,4R,8S)-吉玛-3-甲氧基-8-羟基-1,10(15),7(11)-三烯-6-羰基-8,12-内酯(2)、gajutsulactone A(3)、1-hydroxyeudesma-3,7(11)-dien-8-one(4)、1-hydroxyeudesma-4(14),7(11)-dien-8-one(5)、5β-10α-hydroxy-2α-methoxy-6-oxoguaia-7(11),8-dien-8,12-olide(6)、(2R,4R,5S)-2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)E-烯-6-酮(7)、1(10)Z,4Z-蓬莪术二烯-6-酮(8)。结论化合物1和2为新化合物,命名为去甲氧基没药萜烯B和没药萜G。化合物3~5为首次从没药属植物中分离得到。化合物5对人肝癌HepG2细胞增殖具有明显的抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)为(4.43±1.39)μmol/L。

关键词：没药属没药倍半萜去甲氧基没药萜烯B 没药萜G gajutsulactone A 1-hydroxyeudesma-4(14) 7(11)-dien-8-one

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蛇麻烷型倍半萜及其药理活性研究进展

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中国中药杂志 2018年第22期43卷 4380-4390页

作者：焦顺刚张瑞飞李俊俊沙娜·吾肯张和新歌屠鹏飞柴兴云北京中医药大学中药学院中药现代研究中心

蛇麻烷型倍半萜广泛分布于植物和微生物多个科属中,其从化学结构角度可分为α-humulene,β-humulene,γ-humulene 3大类。目前已有98个蛇麻烷型倍半萜被分离鉴定,并显示有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等药理作用。该文对蛇麻烷型倍半萜... 详细信息

蛇麻烷型倍半萜广泛分布于植物和微生物多个科属中,其从化学结构角度可分为α-humulene,β-humulene,γ-humulene 3大类。目前已有98个蛇麻烷型倍半萜被分离鉴定,并显示有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等药理作用。该文对蛇麻烷型倍半萜的成分和药理活性进行了归纳总结,以期为进一步研究应用提供参考,并对其构效关系的研究提供一定的依据。

关键词：蛇麻烷型倍半萜化学成分药理活性

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白木香纤维素合酶家族基因的鉴定及表达分析

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药学学报 2024年第1期59卷 253-264页

作者：米芯雨邱海玲关范圆郑语嫣王晓晖史社坡北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488

纤维素合酶(cellulose synthase,CesA)是纤维素生物合成途径中的一类关键酶,在植物生长发育和植物防御反应中有着重要的作用。本研究利用白木香基因组数据库,通过生物信息学手段,对白木香纤维素合酶家族成员及其编码蛋白的理化特性、蛋... 详细信息

纤维素合酶(cellulose synthase,CesA)是纤维素生物合成途径中的一类关键酶,在植物生长发育和植物防御反应中有着重要的作用。本研究利用白木香基因组数据库,通过生物信息学手段,对白木香纤维素合酶家族成员及其编码蛋白的理化特性、蛋白保守基序、染色体定位、启动子区域等进行预测分析。系统分析鉴定了21个白木香AsCesA基因,并发现AsCesA蛋白主要分布于质膜,氨基酸数目为390~1261个,分子质量为43.35~142.58 kD,等电点分布在5.67~8.86,均含跨膜结构域,数目为6~8;系统进化分析表明21个AsCesA分为3个亚组;保守基序分析表明,不同AsCesA蛋白的motif组成有一定差异,但均含有motif2、motif6、motif7和motif10。顺式作用元件分析表明,AsCesA基因家族具有响应植物激素作用、非生物胁迫和生物进程相关的顺式作用元件。分析NaCl诱导不同时刻的白木香愈伤组织的转录组数据,选择了7个具有差异表达的AsCesA并分析其在非生物胁迫下的表达量变化。实时荧光定量PCR结果表明,盐、低温、干旱和重金属胁迫均能不同程度影响白木香中7个AsCesA基因的表达水平。其中AsCesA1、AsCesA3和AsCesA20均能响应低温、盐胁迫、干旱胁迫和重金属胁迫,推测这3个基因可能在白木香响应非生物胁迫中发挥重要作用。对不同非生物胁迫下的纤维素含量进行测定,白木香愈伤组织中纤维素含量变化与纤维素合酶的表达量趋势基本一致。本研究为进一步揭示纤维素合酶在白木香中防御反应中作用奠定基础。

关键词：白木香纤维素合酶生物信息学非生物胁迫表达分析

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地桃花中酚苷类成分研究

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中国药学杂志 2019年第13期54卷 1060-1065页

作者：齐博文贾放放苏聪罗源丁宁杨洪芸江芳芳徐溪平王晓晖史社坡北京中医药大学中药学院中药现代研究中心

目的研究地桃花(Urena lobata L.)中酚苷类成分。方法利用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及MS、NMR等光谱数据鉴定化合物结构,并利用脂多糖(LPS)诱导的RAW264. 7细胞... 详细信息

目的研究地桃花(Urena lobata L.)中酚苷类成分。方法利用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及MS、NMR等光谱数据鉴定化合物结构,并利用脂多糖(LPS)诱导的RAW264. 7细胞模型对分离得到的单体化合物进行抗炎活性筛选。结果从地桃花体积分数95%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离鉴定12个酚苷类化合物:苯甲醇-7-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、苯乙醇-8-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、苯乙醇-8-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、丁香酚-1-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、6-甲氧基丁香酚-1-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、3,4,5-三甲氧基苯甲醇-7-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、4-O-(甘油-2-基)-二氢松柏醇-1’-O-β-D-吡喃甘露糖苷(7)、苯甲醇-7-O-β-D-吡喃木糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、3,5-二甲氧基-4-羟基苯乙醇-8-O-β-D-葡萄糖苷(9)、3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、苯乙醇-8-O-β-D-吡喃木糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)和3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)。结论化合物2~8,10~12为首次从锦葵科植物中分离得到,化合物3,8,9,11对LPS诱导RAW264. 7细胞中NO的释放具有抑制活性,IC50分别为(40. 5±4. 9),(31. 9±4. 6),(37. 7±3. 3)和(36. 1±4. 6)μmol·L^-1。

关键词：地桃花提取分离酚苷结构鉴定抑制一氧化氮生成

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