检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2023年第1期48卷 140-147页

作者：陈美琳李芝奇范琦琦郭思敏蔡琼林瑞超吴嘉瑞赵崇军北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室北京102488

采用斑马鱼幼鱼模型探讨闹羊花对肝脏的毒性作用,根据闹羊花不同浓度暴露处理下受精后4 d斑马鱼幼鱼的存活数计算死亡率,并拟合其量毒曲线初步评估闹羊花的毒性大小,从而通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和吖啶橙(aeridine ... 详细信息

采用斑马鱼幼鱼模型探讨闹羊花对肝脏的毒性作用,根据闹羊花不同浓度暴露处理下受精后4 d斑马鱼幼鱼的存活数计算死亡率,并拟合其量毒曲线初步评估闹羊花的毒性大小,从而通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和吖啶橙(aeridine orange,AO)染色法对比观察闹羊花提取物亚致死浓度处理组和阴性对照组的肝脏表型,并测定对比不同处理组谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的活性以确认闹羊花的肝脏毒性,进一步采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及蛋白质印迹法检测斑马鱼幼鱼体内基因及蛋白的表达水平,并通过气相色谱时间飞行质谱联用(GC-TOF-MS)进行非靶向代谢组学检测,以探讨其作用机制。结果显示,闹羊花对斑马鱼幼鱼的毒性大小呈剂量依赖性,全部致死浓度为1100μg·mL^(-1),亚致死浓度为448μg·mL^(-1);在亚致死浓度下,闹羊花暴露处理能够引起斑马鱼幼鱼肝脏组织结构紊乱,肝细胞凋亡、变性;实验终点的斑马鱼幼鱼体内ALT和AST水平显著提高,且呈剂量依赖性,而闹羊花给药组的斑马鱼幼鱼体内凋亡相关基因及蛋白的表达水平与阴性对照组相比皆显著上升。通过非靶向代谢组学发现闹羊花致肝毒性相关的重要代谢物主要富集于丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等途径。综上推测闹羊花对斑马鱼幼鱼有一定肝毒性,其作用机制或与细胞凋亡相关。

关键词：闹羊花斑马鱼肝毒性细胞凋亡

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基于斑马鱼幼鱼模型药物肝毒性快速评价方法的优化及评价标准初探

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中国药学杂志 2023年第21期58卷 1969-1976页

作者：王璇王敏韩婷文佳程水清张海霞李千赵崇军李向日林瑞超北京中医药大学中药学院北京市中药品质评价重点实验室北京102488

目的以对乙酰氨基酚(APAP)为例,通过优化其对斑马鱼幼鱼肝毒性评价的影响因素和参数,确立基于斑马鱼幼鱼模型的肝毒性快速评价方法及药物肝损伤分级方法。方法利用不同浓度APAP处理斑马鱼幼鱼,在实验终点(药物暴露后48 h/24 h)统计不... 详细信息

目的以对乙酰氨基酚(APAP)为例,通过优化其对斑马鱼幼鱼肝毒性评价的影响因素和参数,确立基于斑马鱼幼鱼模型的肝毒性快速评价方法及药物肝损伤分级方法。方法利用不同浓度APAP处理斑马鱼幼鱼,在实验终点(药物暴露后48 h/24 h)统计不同处理组斑马鱼的死亡率,并绘制“死亡率—浓度”效应曲线,计算最大耐受浓度(LC0)和半数致死浓度(LC_(50));考察并优化斑马鱼幼鱼在APAP毒性研究中的相关影响因素,包括斑马鱼鱼龄[3 dpf、4 dpf(受精后天数:dpf)]、给药暴露时间(48 h、24 h)和孔板(6孔板、12孔板;6 mL、4 mL),并从以上3个水平设计正交实验,建立斑马鱼肝毒性模型的最佳实验条件参数。另择3 dpf斑马鱼幼鱼[3 dpf-48 hpe-12孔板(暴露后小时:hpe)]与选定条件(4 dpf-24 hpe-12孔板)进行比较,以表型评价、组织病理学评价、体内凋亡评价、生化指标及肝脏区域面积作为系统生物学评价指标,确认斑马鱼整体肝毒性评价的方法和损伤参照标准。结果以实验所得各组LC_(50)为指标,通过正交实验优化得到建立毒性模型的最佳实验条件参数为:选择4 dpf的斑马鱼幼鱼置于12孔板中给药暴露24 h;与对照组相比,各暴露组斑马鱼幼鱼肝脏透明度下降、颜色变暗且卵黄囊吸收延迟;肝脏组织结构松散、肝细胞空泡化严重;吖啶橙染色可见黄绿色荧光,提示存在肝细胞凋亡;谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平均呈显著性升高;肝脏面积表现出剂量依赖性的减小,以此确认方法的合理性。相关性分析结果证明以斑马鱼幼鱼肝面积的变化值(δ)评价斑马鱼肝损伤的可靠性,并以该指标初步建立了斑马鱼幼鱼的肝损伤评级。结论考察并优化得到最佳斑马鱼幼鱼急性毒性评价参数,确认斑马鱼幼鱼肝毒性评价方法并建立斑马鱼幼鱼的肝损伤评级,为基于斑马鱼幼鱼模型快速评估药物肝毒性提供了参考。

关键词：对乙酰氨基酚斑马鱼评价标准药物肝毒性

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生长方式及年限对防风品质影响研究

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中国中药杂志 2023年第15期48卷 4106-4114页

作者：杨琳琳李千王璇程水清文佳王旭星张海霞徐新房李向日北京中医药大学中药学院、北京市中药品质评价重点实验室北京102488

为研究不同生长方式及年限对防风品质的影响,通过色差仪量化防风样品粉末表观颜色,计算总色值(E^(*)ab),采用HPLC同时测定样品中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷和3′-O-当归酰亥茅酚含量,利用多元统计方法对样品粉... 详细信息

为研究不同生长方式及年限对防风品质的影响,通过色差仪量化防风样品粉末表观颜色,计算总色值(E^(*)ab),采用HPLC同时测定样品中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷和3′-O-当归酰亥茅酚含量,利用多元统计方法对样品粉末色度值与5种成分含量进行聚类分析、主成分分析、偏最小二乘法判别分析及Pearson相关性分析。结果表明防风样品粉末总色值(E^(*)ab)野生防风<多年生防风<一年生防风;野生防风的升麻素、亥茅酚苷和3′-O-当归酰亥茅酚含量显著高于多年生防风及一年生防风;多元统计分析结果显示,多年生防风质量差异大,其品质虽不及野生防风,但接近野生防风,优于一年生防风;3′-O-当归酰亥茅酚含量、E^(*)ab、b^(*)、L^(*)和升麻素含量的变量投影重要性(VIP)均>1,升麻素含量的VIP亦接近于1;升麻素苷、升麻素、亥茅酚苷和3′-O-当归酰亥茅酚含量与E^(*)ab呈显著负相关,而5-O-甲基维斯阿米醇苷含量与E^(*)ab不存在线性相关。生长方式及年限对防风品质有影响,防风粉末色度值与5种成分能客观判定防风的品质,可考虑将3′-O-当归酰亥茅酚和升麻素作为防风生长过程控制的质量标志物。

关键词：防风生长方式生长年限色度值升麻素 3′-O-当归酰亥茅酚多元统计分析

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基于斑马鱼模型的复方苦参注射液安全性及治疗炎症性肠病的有效性评价

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中国实验方剂学杂志 2025年第4期31卷 71-78页

作者：陈小橹李嘉琪陈林珍陈祺马志强赵崇军北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室/国家中医药管理局中药炮制技术传承基地北京102488

目的:采用斑马鱼模型对复方苦参注射液(CKI)安全性/有效性进行整体评价,并探讨可能的作用机制。方法:将斑马鱼暴露于不同浓度CKI溶液中,统计24 h后的死亡率;在亚致死浓度(<LC_(10))和安全剂量浓度(<LC_(0))下暴露24 h,基于斑马鱼... 详细信息

目的:采用斑马鱼模型对复方苦参注射液(CKI)安全性/有效性进行整体评价,并探讨可能的作用机制。方法:将斑马鱼暴露于不同浓度CKI溶液中,统计24 h后的死亡率;在亚致死浓度(评价CKI安全性。通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立斑马鱼肠炎模型,以斑马鱼肠道中性红染色面积变化、中性粒细胞数量变化、阿尔新蓝染色面积变化,结合体内紧密连接蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、肿瘤坏死因子(TNF)-α与前列腺素E_(2)(PGE_(2))含量等指标,综合评价CKI对炎症性肠病(IBD)的治疗有效性;使用网络药理学预测CKI治疗IBD的作用机制,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术验证。结果:在安全性评价中,与空白组比较,亚致死浓度CKI能够引起斑马鱼肝脏细胞凋亡、肝脏面积减小、肝脏组织结构排列松散紊乱及明显空泡化等病理特征,而安全剂量暴露处理不会对上述指标造成明显变化。在有效性评价中,与模型组比较,安全剂量的CKI能呈剂量依赖性增加肠道中性红染色面积,改善肠道吞噬功能;减少肠道中性粒细胞聚集情况;增加阿尔新蓝染色面积,增强肠道杯状细胞分泌情况;显著增加Occludin及ZO-1含量;减少TNF-α及PGE_(2)含量;网络药理学分析得到CKI治疗IBD潜在靶点288个,蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析度值排名前5的靶点分别为表皮生长因子受体A(EGFRA)、蛋白激酶B1(Akt1)、热休克蛋白90(HSP90AA1)、禽肉瘤病毒致癌基因同源物(SRC)、原癌基因(JUN);京都基因与基因组百科全书(KEGG)结果显示,CKI治疗IBD可能与Wnt信号通路、胆碱能突触通路有关,Real-time PCR结果验证了以上通路。结论:超剂量使用CKI能诱导斑马鱼出现明显肝损伤;而合理使用CKI不会造成明显毒性反应,且能通过调控Wnt通路实现对IBD治疗作用。

关键词：斑马鱼复方苦参注射液炎症性肠病安全性有效性作用机制

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基于斑马鱼模型的吴茱萸碱肝损伤及抗骨质疏松症作用机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第4期31卷 79-86页

作者：李嘉琪陈小橹陶晓宇陆珊范琦琦吴嘉瑞赵崇军北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室/国家中医药管理局中药炮制技术传承基地北京102488

目的:基于斑马鱼模型研究吴茱萸碱(EVO)的肝损伤和治疗骨质疏松症的活性,并利用网络药理学和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)探究EVO治疗骨质疏松症的作用机制。方法:随机选取受精后3 d(3 dpf)的斑马鱼暴露于不同浓度EVO溶液... 详细信息

目的:基于斑马鱼模型研究吴茱萸碱(EVO)的肝损伤和治疗骨质疏松症的活性,并利用网络药理学和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)探究EVO治疗骨质疏松症的作用机制。方法:随机选取受精后3 d(3 dpf)的斑马鱼暴露于不同浓度EVO溶液96 h,在暴露终点统计不同浓度处理组中斑马鱼的死亡率,绘制“量-毒”曲线,并计算10%致死浓度(LC_(10))。结合肝脏转基因斑马鱼[CZ16(***(fabp 10a:ds Red;ela31:EGFP))]的肝脏表型、吖啶橙染色和病理组织切片等确认EVO的肝损伤。在此基础上,利用泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松症模型,以头骨发育情况、头骨茜素红染色面积与累积光密度值为指标评价安全剂量EVO的抗骨质疏松症活性。基于网络药理学预测EVO治疗骨质疏松症的作用机制,并通过Real-time PCR技术进行验证。结果:EVO对7 dpf斑马鱼的LC_(10)为0.4 mg·L^(-1);与空白组比较,亚致死浓度(实验结果显示EVO可以调控上述靶点的同时,也能够调控成骨细胞与破骨细胞相关基因。结论:EVO过高剂量会导致斑马鱼的肝损伤产生肝损伤,而在安全剂量条件下,EVO能够调节相关靶点发挥抗骨质疏松症活性,为EVO的临床安全用药提供了参考,也为骨质疏松症的新药开发提供了思路。

关键词：吴茱萸碱斑马鱼肝损伤骨质疏松症作用机制

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玄参净制去芦的必要性研究

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世界中医药 2024年第14期19卷 2055-2061,2071页

作者：程水清叶先文徐新房文佳潘美芳高欣宇王旭星任洪民李千张海霞李向日北京中医药大学中药学院中药炮制研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室北京102488

目的:探究去除玄参芦头对净制玄参药材是否具有必要性。方法:通过对比不同批次玄参药材根和芦头净制后得率、含水量以及浸出物,采用高效液相色谱法比较哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、麦角甾苷、肉桂酸5个主要活性成分含量,并采用苯酚-... 详细信息

目的:探究去除玄参芦头对净制玄参药材是否具有必要性。方法:通过对比不同批次玄参药材根和芦头净制后得率、含水量以及浸出物,采用高效液相色谱法比较哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、麦角甾苷、肉桂酸5个主要活性成分含量,并采用苯酚-硫酸法测定玄参多糖,且对上述成分进行主成分分析(PCA),采用脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(BV-2细胞)建立炎症模型,通过测定细胞上清液中一氧化氮(NO)的释放量,考察玄参根和芦头的抗炎活性,综合评价去除芦头的必要性。结果:玄参中芦头占药材重量的10%~20%,玄参根中浸出物高于芦头;PCA结果显示将玄参根和芦头区分为2大类,哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸以及多糖类活性成分以玄参根中含量高,但芦头中也有较大的贡献,而玄参芦头以安格洛苷C、麦角甾苷含量较多;玄参根和芦头的抗炎活性比较,差异无统计学意义。结论:按照传统习惯,玄参净制去芦具有一定的科学道理,但玄参芦头具有一定的药用价值,在提取物制备等方面进一步挖掘利用。

关键词：玄参玄参芦头净制多组分同时测定多糖主成分分析 BV-2细胞抗炎活性

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乌梅炭炮制过程中颜色与内在质量的相关性及其炮制终点研究

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中国药房 2023年第3期34卷 289-293页

作者：杨琳琳辛洁萍李千张海霞安锦漪陈思羽冯春兰王天舒徐新房李向日北京中医药大学中药学院/北京市中药品质评价重点实验室北京102488

目的研究乌梅炭炮制过程中颜色与内在质量的相关性,为乌梅炭炮制终点的确定提供参考。方法利用色差仪对乌梅炭粉末进行色度值测定,选择水分、水溶性浸出物、枸橼酸和鞣质含量对乌梅炭进行内在质量测定,分析不同炮制时间下乌梅炭色度... 详细信息

目的研究乌梅炭炮制过程中颜色与内在质量的相关性,为乌梅炭炮制终点的确定提供参考。方法利用色差仪对乌梅炭粉末进行色度值测定,选择水分、水溶性浸出物、枸橼酸和鞣质含量对乌梅炭进行内在质量测定,分析不同炮制时间下乌梅炭色度值、水分、水溶性浸出物、枸橼酸和鞣质含量的动态变化趋势,对颜色和上述指标含量进行相关性分析,建立内在质量-色度值回归方程。同时结合主成分分析(PCA)、层次聚类分析(HCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)法分析乌梅炭不同炮制时间的差异,以确定其炮制终点。结果随着炮制时间的延长,样品颜色逐渐加深;样品色度值L*与E*先升高后下降,色度值a*与b*下降,最终均趋于稳定;样品中水溶性浸出物、枸橼酸与鞣质含量均呈先升高后下降的趋势,样品中水分含量随炮制时间的延长而下降,最后趋于稳定。相关性分析结果显示,水分、水溶性浸出物、枸橼酸、鞣质含量与L*、a*、b*、E*均呈显著正相关(P<0.001)。PCA及HCA结果显示,不同炮制时间的乌梅炭饮片可聚为2类:0~30 min炮制样品与40~60 min炮制样品。PLS-DA发现,水分和水溶性浸出物是乌梅炭炮制过程中的重要质量指标,b*是乌梅炭炮制过程中的重要色度指标。炮制50 min和60 min样品的色度值无明显差别,炮制60 min样品的水分、水溶性浸出物、枸橼酸与鞣质含量小于炮制50 min的样品。结论乌梅炭颜色与内在质量具有一定相关性,乌梅炭的炒制应以40~50 min为宜。

关键词：乌梅炭炒炭色度值水分水溶性浸出物枸橼酸鞣质相关性分析

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斑马鱼在中药品质评价中的应用进展

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中国实验方剂学杂志 2025年第4期31卷 58-70页

作者：李嘉琪陈小橹吴嘉瑞陶晓宇范琦琦戴胜云赵崇军北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室/国家中医药管理局中药炮制技术传承基地北京102488 中国食品药品检定研究院北京102629

作为新型的模式生物,斑马鱼逐步在科研领域崭露头角,其独特的生物学特性和优势使其在中药品质评价中扮演着日益重要的角色。相较于其他常见的实验动物,高通量繁殖、体外快速生长和胚胎透明性的优势使斑马鱼逐步成为中药品质评价的理想模... 详细信息

作为新型的模式生物,斑马鱼逐步在科研领域崭露头角,其独特的生物学特性和优势使其在中药品质评价中扮演着日益重要的角色。相较于其他常见的实验动物,高通量繁殖、体外快速生长和胚胎透明性的优势使斑马鱼逐步成为中药品质评价的理想模型,为中药研究提供了全新的视角和方法。随着中药在全球范围内的关注度不断提升,如何科学、准确地进行中药品质评价成为了重要课题。斑马鱼模型的引入,为中药品质评价带来了新的突破进展。为进一步促进斑马鱼在中药品质评价中的应用,在前期研究基础上,文章系统检索和梳理了2023年以来斑马鱼在中药品质评价中的应用情况,对斑马鱼在中药有效性评价中常用疾病模型和指标、中药有效成分作用机制等方面研究进行重点整理,对斑马鱼在中药安全性评价中的应用和中药质量控制中的典型范例进行了展示,并指出了斑马鱼模型在中药品质评价使用过程中所面临的限制条件。这些问题的解决将有助于进一步提高斑马鱼在中药品质评价中的准确性和可靠性。文章从斑马鱼在中药有效性评价、安全性评价和质量控制3个方面展开论述,以期为未来中药相关标准的建立、促进中医药现代化提供参考。

关键词：斑马鱼中药品质评价研究进展

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基于斑马鱼模型的中药安全性评价研究进展

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中草药 2022年第1期53卷 278-287页

作者：范琦琦李芝奇陈美琳赵崇军林瑞超北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室北京102488

毒性中药的临床使用是中医药的特色,在慢性疾病和重大疾病的救治过程中应用广泛。但是毒性中药的毒性研究数据相对较少,在一定程度上不能为系统阐述毒性中药的理论和临床安全使用提供充分的参考依据。中药配伍、炮制是中医药临床减毒增... 详细信息

毒性中药的临床使用是中医药的特色,在慢性疾病和重大疾病的救治过程中应用广泛。但是毒性中药的毒性研究数据相对较少,在一定程度上不能为系统阐述毒性中药的理论和临床安全使用提供充分的参考依据。中药配伍、炮制是中医药临床减毒增效的有效手段,准确而系统阐释配伍、炮制原理对中医药安全有效性至关重要。近年来,由于特定的生理学优势,斑马鱼已经逐步成为药物(中药)毒性研究的模型生物,逐步被用于各种有毒物质的筛选和评价。对近年来利用斑马鱼进行中药毒性评价、炮制减毒、配伍减毒及毒性机制研究等进行总结,以期为斑马鱼在中药毒性评价中的广泛应用和相关毒性标准的建立提供参考。

关键词：中药斑马鱼模型毒性安全性评价炮制配伍减毒

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基于斑马鱼模型的仙灵骨葆抗骨质疏松(效)-肝损伤(毒)转化机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第4期31卷 87-94页

作者：李秋熳钱玥朱子萱宋源邓茜戴胜云赵崇军北京中医药大学针灸推拿学院北京100105 南京大学医学院临床医学南京210093 中国食品药品检定研究院北京100050 北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室北京102488

目的:本研究旨在基于斑马鱼模型探讨仙灵骨葆(XLGB)对肝损伤及治疗骨质疏松症之间的关联及其转化机制。方法:选取受精后4 d(4 dpf)的斑马鱼,暴露于不同浓度的XLGB溶液(0.7、0.35 mg·L^(-1))中96 h,在暴露结束时,统计不同浓度处理... 详细信息

目的:本研究旨在基于斑马鱼模型探讨仙灵骨葆(XLGB)对肝损伤及治疗骨质疏松症之间的关联及其转化机制。方法:选取受精后4 d(4 dpf)的斑马鱼,暴露于不同浓度的XLGB溶液(0.7、0.35 mg·L^(-1))中96 h,在暴露结束时,统计不同浓度处理组中斑马鱼的死亡率,绘制剂量-毒性曲线,以确定10%亚致死浓度(LC_(10))。在此基础上,以转基因斑马鱼[Tg(fabp1a:dsRed;ela3l:EGFP)gz15],通过测量肝脏面积、吖啶橙染色和病理组织切片等指标,验证亚致死浓度XLGB对肝损的影响。利用泼尼松龙(PNSL)诱导斑马鱼骨质疏松症模型,以头骨茜素红染色面积与累积光密度值为指标评价XLGB的抗骨质疏松症活性;进而比较健康和骨质疏松状态下XLGB对肝脏损伤的差异;结合网络药理学和实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)预测XLGB毒效转化机制。结果:XLGB对8 dpf斑马鱼的LC_(10)为0.7 mg·L^(-1);与空白组比较,亚致死浓度(LC_(10)=0.7 mg·L^(-1)、1/2LC_(10)=0.35 mg·L^(-1))的XLGB显著增加肝细胞凋亡数量,导致肝脏组织排列紊乱、空泡化明显,肝脏荧光面积显著减小(P<0.01);与空白组比较,泼尼松龙模型组斑马鱼头骨矿化面积和累积光密度值显著减少(P<0.01);与模型组比较,0.7、0.35 mg·L^(-1)XLGB处理组斑马鱼头骨的矿化面积、累积光密度值均显著增加(P<0.01)。与空白组比较,0.7 mg·L^(-1)XLGB对骨质疏松疾病模型斑马鱼的肝脏没有明显影响。网络药理学和Real-time PCR实验结果显示,XLGB的毒效转化可能与不同机体状态下肿瘤蛋白53(TP53)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、白细胞介素-6(IL-6)、碱性磷酸酶(ALP)等关键靶点的表达水平差异相关。结论:在一定条件下,XLGB会诱导正常斑马鱼产生肝损伤,而在骨质疏松条件下,XLGB不仅能够发挥明显的抗骨质疏松症活性且肝损伤会得到显著缓解,这就为XLGB的临床安全用药提供了参考,也为中药“以毒攻毒”和“有故无殒”理论提供了真实证据。

关键词：仙灵骨葆斑马鱼肝损伤骨质疏松症

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