检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2024年第7期59卷 2171-2178页

作者：刘珊瑚张志飞黄钰莹刘子齐陈文沁阿木拉哈王馨石玥张晓芹何高洁安克露王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102 黑龙江北草堂中药材有限责任公司黑龙江哈尔滨150900

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺... 详细信息

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺五加的主流种质和质量。本研究从24省47市收集80份刺五加样品并提取DNA,通过PCR扩增atpI和atpB_rbcL基因片段,分析结果表明,2个基因片段联合分析形成7个单倍型(H2、H5、H8、H10、H12、H14、H23),其中来自黑龙江伊春、哈尔滨尚志、黑龙江绥化、辽宁抚顺、辽宁本溪、吉林长白和吉林靖宇的单倍型H2是主流单倍型,占总样本量的58.75%。H14和H23为产地独有单倍型,分别来自黑龙江省双鸭山市饶河县和黑龙江省绥化市明水县。通过HPLC检测市售刺五加样品中的紫丁香苷含量,结果表明73.96%样品紫丁香苷含量符合药典标准。样品间的紫丁香苷含量差异显著,在0.0037%~0.5245%之间,相差0.5208%,说明刺五加市场样品质量参差不齐,但是不同单倍型之间市售刺五加紫丁香苷含量没有显著性差异。市场样品中单倍型H23中的紫丁香苷含量比较高,因此可能是质量比较好的种质。本文对刺五加市场样品的种质资源和药材质量进行研究,有利于指导刺五加市场样品流通、临床合理用药和后续优良品种筛选。

关键词：刺五加 DNA条形码分子鉴定紫丁香苷质量评价

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UPLC-Q-TOF-MS结合分子量印迹和质量亏损过滤策略快速筛选并鉴定血竭中黄酮类化学成分

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中国中药杂志 2023年第4期48卷 993-1004页

作者：赵依佳李军宋青青屠鹏飞北京中医药大学中药学院、中药现代研究中心北京100029

血竭为名贵活血化瘀中药,现有研究表明其药效成分群为黄酮类化合物。血竭中黄酮类化合物化学结构的多样性为其化学成分轮廓深入表征带来了巨大的挑战。为了系统表征血竭化学成分轮廓,该研究首先采集化学成分质谱信息,进一步利用分子量印... 详细信息

血竭为名贵活血化瘀中药,现有研究表明其药效成分群为黄酮类化合物。血竭中黄酮类化合物化学结构的多样性为其化学成分轮廓深入表征带来了巨大的挑战。为了系统表征血竭化学成分轮廓,该研究首先采集化学成分质谱信息,进一步利用分子量印迹(molecular weight imprinting,MWI)以及质量亏损过滤(mass defect filtering,MDF)方法处理高分辨数据集,实现血竭中黄酮类化合物的快速鉴定。采用UPLC-Q-TOF-MS采集正离子模式下m/z 100~1000质谱数据;根据前期文献报道中的血竭黄酮类化合物,建立[M+H]+质荷比的数据库,以±10×10^(-3)为误差范围构建分子量印迹,快速检索已知黄酮类化合物,并结合MS2数据确证化学结构。通过已知血竭黄酮类化合物建立MDF的“五点筛选框”,获取可能的目标成分,进一步结合诊断离子(DFI)、中性丢失(NL)和质谱裂解规律,推断化学结构。最终从血竭提取物中初步鉴定了70个黄酮类化合物,包括黄烷氧化同系物类5个、黄烷类12个、二氢查尔酮类1个、黄酮二聚体类49个、三聚体类1个以及其他类型2个。该研究阐明了血竭中黄酮类化学成分组成,同时也表明高分辨质谱技术结合MWI与MDF等数据后处理方法可以实现中药化学成分组成的快速表征。

关键词：血竭黄酮分子量印迹质量亏损过滤 UPLC-Q-TOF-MS

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管花肉苁蓉蔗糖合酶基因的克隆鉴定、蛋白结构及表达分析

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药学学报 2024年第11期59卷 3153-3163页

作者：田维圣闫雅如崔晓雪王迎夏黄文倩赵赛静李军史社坡屠鹏飞刘晓北京中医药大学中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488 山西中医药大学太行本草研究院山西晋中030619 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

蔗糖合酶是植物糖代谢途径中的关键酶,能催化糖基供体尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖的生成。本研究通过转录组数据分析从富含糖苷类化合物的传统中药管花肉苁蓉中克隆获得一个蔗糖合酶基因并命名为CtSus。该基因开放阅读... 详细信息

蔗糖合酶是植物糖代谢途径中的关键酶,能催化糖基供体尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖的生成。本研究通过转录组数据分析从富含糖苷类化合物的传统中药管花肉苁蓉中克隆获得一个蔗糖合酶基因并命名为CtSus。该基因开放阅读框长2418 bp,编码蛋白含805个氨基酸,序列分析显示,该蛋白包含植物蔗糖合酶保守结构域,与同目植物中的蔗糖合酶具有密切的亲缘进化关系。将CtSus与已鉴定功能的糖基转移酶UGT71BD1协同进行体外全细胞转化,结果显示,CtSus的引入能显著提高UGT71BD1催化糖基化反应的转化率。利用pColdTM TF表达载体实现了CtSus在大肠杆菌中的可溶性表达,并通过体外酶促反应验证了CtSus在UDP存在的情况下催化蔗糖分解生成UDP-葡萄糖的活性。实时荧光定量PCR结果显示CtSus基因在管花肉苁蓉不同部位及干旱胁迫后肉苁蓉悬浮细胞中的表达模式与苯乙醇苷类化合物积累模式一致。进一步通过蛋白三维结构预测及分子对接探讨了该酶与底物结合的关键氨基酸及其相互作用。本研究鉴定获得了肉苁蓉中一个新的蔗糖合酶基因,为活性糖基供体的体外酶法合成提供了新的途径,亦为肉苁蓉糖苷类化合物生物合成工程菌的构建提供了新的基因元件。

关键词：管花肉苁蓉蔗糖合酶糖苷类化合物尿苷二磷酸-葡萄糖酶催化

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氯化钠诱导白木香悬浮细胞合成苯乙基色酮类成分的LC-MS分析

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中国中药杂志 2023年第9期48卷 2480-2489页

作者：杜宇张晓雪张泽坤王雯静张蓓蓓张明亮王阳葛祥宇史社坡北京中医药大学中药学院、中药现代研究中心北京100029

采用超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)结合超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)对氯化钠诱导的白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性和定量分析。UPLC-Q-Exactive-MS和UPLC-QQQ-MS/M... 详细信息

采用超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)结合超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)对氯化钠诱导的白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性和定量分析。UPLC-Q-Exactive-MS和UPLC-QQQ-MS/MS均采用Waters T3色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相分别进行梯度洗脱色谱分离,质谱分析均采用电喷雾正离子模式采集。利用UPLC-Q-Exactive-MS从氯化钠诱导的白木香悬浮细胞样品中鉴定出苯乙基色酮类化合物47个,其中简单苯乙基色酮及其苷22个、四羟基四氢苯乙基色酮10个、三元氧环四氢苯乙基色酮15个。通过UPLC-QQQ-MS/MS技术对氯化钠诱导处理后白木香悬浮细胞中25个苯乙基色酮进行了定量。通过2种液质联用技术快速、高效地对氯化钠诱导白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性、定量分析,为利用体外培养等生物技术制备沉香中主要的药效和香味物质苯乙基色酮提供重要参考。

关键词：白木香悬浮细胞沉香苯乙基色酮 LC-MS

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三叉苦中的抗炎成分研究

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中国中药杂志 2025年

作者：魏荷琳王涛孙静静黄志强肖驿泽李军屠鹏飞泸州职业技术学院北京中医药大学北京中医药研究院中医药现代研究中心北京大学医学部药学院天然与仿生药物国家重点实验室

三叉苦为芸香科蜜茱萸属植物三桠苦Melicope pteleifolia的茎及带叶嫩枝，味苦、性寒，具有清热解毒、祛风除湿的功效，主治咽喉肿痛、疟疾、黄疸型肝炎、风湿骨痛、湿疹、皮炎和疮疡等。该研究通过LC-MS技术和1H-NMR导向分离法，从三... 详细信息

三叉苦为芸香科蜜茱萸属植物三桠苦Melicope pteleifolia的茎及带叶嫩枝，味苦、性寒，具有清热解毒、祛风除湿的功效，主治咽喉肿痛、疟疾、黄疸型肝炎、风湿骨痛、湿疹、皮炎和疮疡等。该研究通过LC-MS技术和1H-NMR导向分离法，从三桠苦叶氯仿和正丁醇提取物的多个流分中分离得到19个化合物，分别鉴定为isoleptonol（1）、leptaones B～E（2～5）、木栓酮（6）、evodionol（7）、对羟基苯甲酸乙酯（8）、litseachromolaevane A（9）、3'，4'，7-三甲氧基槲皮素（10）、香草木宁（11）、8-（1-hydroxyethyl）-5，6，7-trimethoxy-2，2-dimethyl-2H-1-benzopyran（12）、对羟基桂皮酸乙酯（13）、3-hydroxy-9-methyl-6H-benzo[c]chromen-6-one（14）、仙鹤草内酯（15）、7-羟基香豆素（16）、scopoletin（17）、异黄芩素（18）、仙鹤草内酯-6-O-葡萄糖苷（19）。其中，新化合物包括1个色烯类和4个混源萜类（1～5）。对分离鉴定的新化合物1～5进行了体外抗炎活性筛选，结果显示5个化合物均具有一定的抑制脂多糖（LPS）/干扰素-γ（IFN-γ）诱导的BV2细胞中一氧化氮（NO）生成的作用，IC50在12.25～36.48 μmol·L-1。

关键词：三叉苦化学成分结构解析抗炎活性

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北苍术特异性DNA条形码筛选、种质资源鉴定及遗传多样性分析

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药学学报 2023年第6期58卷 1693-1704页

作者：尹光耀袁林王馨张志飞陈颖刘珊瑚满金辉石玥黄钰莹张晓芹王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 国家药品监督管理局北京100037 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

北苍术Atractylodes chinensis具有重要药用价值和经济价值。本研究利用Illumina平台测序获得4份不同产地的北苍术的叶绿体全基因组序列,筛选特异DNA条形码,并利用特异DNA条形码对不同产区北苍术样品种质资源鉴定及居群的遗传多样性分... 详细信息

北苍术Atractylodes chinensis具有重要药用价值和经济价值。本研究利用Illumina平台测序获得4份不同产地的北苍术的叶绿体全基因组序列,筛选特异DNA条形码,并利用特异DNA条形码对不同产区北苍术样品种质资源鉴定及居群的遗传多样性分析。该4份北苍术叶绿体全基因组均为典型的环状四分体结构,均注释112个基因。比较基因组学研究结果表明ccsA和trnC-GCA_petN是潜在的北苍术种内鉴别的特异DNA条形码。选择ccsA和trnC-GCA_petN对来自9省14产区的256份样品进行PCR扩增,扩增效率为100%。序列分析结果表明ccsA和trnC-GCA_petN分别有11和22个变异位点,分别能鉴定16和22个单倍型,两段序列联合分析鉴定39个单倍型,命名为Hap1~Hap39,其中占比最多和分布最广的基因型为Hap9。单倍型多样性(Hd)=0.896,核苷酸多样性(Pi)=0.002 22,说明北苍术在物种水平上有较高的遗传多样性。各单倍型的遗传距离为0.000 00~0.004 88,说明各个单倍型之间有较小的遗传差异。系统进化树分析结果表明, 39个单倍型有很近的亲缘关系,并且与除白术外其余同属类群形成明显的两个分支。本研究为后续鉴定北苍术产地来源和后续种质资源保护和育种方面起到重要作用。

关键词：苍术叶绿体基因组 DNA条形码单倍型遗传多样性

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蛇足石杉中赖氨酸脱羧酶基因的克隆表达及功能鉴定

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药学学报 2022年第11期57卷 3437-3445页

作者：李赛男王雯静张蓓蓓张泽坤葛祥宇杜宇张晓雪王娟史社坡北京中医药大学中药现代研究中心北京100029

赖氨酸脱羧酶是石杉碱甲等石松生物碱上游生物合成步骤中催化赖氨酸脱羧生成1,5-戊二胺(尸胺)的关键酶。通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)转录组数据的挖掘分析,并结合RT-PCR技术从蛇足石杉中成功克隆出3个赖氨酸脱羧酶基因(HsLDC-L1、... 详细信息

赖氨酸脱羧酶是石杉碱甲等石松生物碱上游生物合成步骤中催化赖氨酸脱羧生成1,5-戊二胺(尸胺)的关键酶。通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)转录组数据的挖掘分析,并结合RT-PCR技术从蛇足石杉中成功克隆出3个赖氨酸脱羧酶基因(HsLDC-L1、HsLDC-L2、HsLDC-L3);利用在线生物信息学分析软件以及DNAMAN、MEGA 7.0等对上述3个基因编码蛋白的性质、二级和三级结构、序列同源性、进化关系等进行了预测分析,发现3个基因编码蛋白均具有植物赖氨酸脱羧酶的保守结构域和活性位点,且与文献报道的产石杉碱甲植物中的赖氨酸脱羧酶具有较近的亲缘关系。进一步尝试利用不同载体在大肠杆菌中对上述3个基因进行表达,结果仅HsLDC-L1与载体pCold TF构建的重组质粒在大肠杆菌*** BL21(DE3)中成功实现可溶性表达,利用Ni^(2+)亲和色谱柱分离纯化得到重组蛋白HsLDC-L1;HsLDC-L1全长由469个氨基酸组成,理论分子质量为50.50 kDa。体外酶活性分析证明HsLDC-L1可以催化赖氨酸脱羧生成尸胺。底物适应性实验发现HsLDC-L1还可以催化鸟氨酸脱羧生成腐胺,但不能催化酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸脱羧。上述结果为进一步研究包括石杉碱甲在内的石松类生物碱的生物合成提供参考,为利用合成生物学策略构建产Δ^(1)-哌啶、石榴碱等石松类生物碱生物合成关键前体的工程菌提供重要的基因元件。

关键词：蛇足石杉赖氨酸脱羧酶基因克隆石杉碱甲石松生物碱

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清毒稳心方通过抑制cGAS/STING/NF-κB通路介导的炎症反应减轻阿霉素诱导的心脏毒性

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中国中药杂志 2025年

作者：杨智王军高升孙小仟赵江峰何佳乐岳建伟徐江林王伟李春广州中医药大学基础医学院中医药广东省实验室广州中医药大学中药学院方证研究所包头医学院第二附属医院广东省中医院心血管科证候与方剂基础研究教育部重点实验室(北京中医药大学) 北京中医药大学中医药研究院中药现代研究中心

探究清毒稳心方对阿霉素诱导的心脏毒性的保护作用和机制，以及对环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）/干扰素刺激基因（STING）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的调节作用。C57BL/6J小鼠随机分为对照组，模型组，普伐他汀组(40 mg·k... 详细信息

探究清毒稳心方对阿霉素诱导的心脏毒性的保护作用和机制，以及对环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）/干扰素刺激基因（STING）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的调节作用。C57BL/6J小鼠随机分为对照组，模型组，普伐他汀组(40 mg·kg-1)，清毒稳心方低(1.3 g·kg-1)、中(2.6 g·kg-1)、高(5.2 g·kg-1)组，每组6只。采用尾静脉注射阿霉素的方法构建阿霉素诱导的心脏毒性（DIC）小鼠模型，造模后各组连续灌胃4周。取材后采用超声、乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白（TNⅠ）评估其心功能，苏木精-伊红（HE）和马松（Masson）染色评估心肌组织病理情况，逆转录聚合酶链式反应检测法（RT-qPCR）检测心脏组织炎症因子白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α和IL-1β炎性因子的相对表达量，网络药理学和分子对接预测清毒稳心方与DIC的关键通路，Western blot检测心肌组织STING蛋白表达。随后使用STING敲除(STINGKO)鼠构建表达抑制模型，进一步验证STING通路相关蛋白表达变化和炎症表达。结果显示，C57BL/6J动物实验中，清毒稳心方低、中、高剂量能够不同程度升高EF、FS，降低心肌损伤标志物LDH和TNⅠ，降低心脏组织中IL-6、IL-1β、TNF-α炎症mRNA水平，HE和Masson染色显示炎性细胞明显减少，心肌细胞排列较为整齐，血管周围纤维化面积减轻，其中清毒稳心方高剂量组改善效果最佳；通过网络药理学和分子对接预测清毒稳心方与DIC的关键通路是STING通路；清毒稳心方组上调磷酸化STING（p-STING）/STING蛋白。在STINGKO鼠实验中，野生型（WT）小鼠与C57BL/6J小鼠心功能评价和炎症指标检测结果一致，清毒稳心方组下调磷酸化TANK 结合激酶 1（p-TBK1）、磷酸化干扰素调节因子 3（p-IRF3）、磷酸化核因子 κB（p-NF-κB）蛋白；STINGKO组中，清毒稳心方组与模型组相比差异无统计学意义，WT组和STINGKO组模型组相比有显著差异。上述结果表明，清毒稳心方能有效减轻阿霉素诱导的心脏毒性，其机制可能与抑制cGAS/STING/NF-κB通路的炎症反应相关。

关键词：清毒稳心方阿霉素心脏毒性 STING 炎症敲除鼠

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适用于LC-MS的衍生化技术研究及应用进展

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中国现代应用药学 2024年第20期41卷 2777-2788页

作者：刘文静陈蔚宋月林屠鹏飞河南中医药大学药学院郑州450046 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

衍生化技术通过将目标分析物转化为易于分离和电离的衍生物,可以显著提高复杂基质中痕量化合物检测的分离度、灵敏度和(或)选择性,目前在LC-MS分析中已得到了广泛的应用。本文系统总结了各类衍生化技术的基本原理和优势,综述了不同类型... 详细信息

衍生化技术通过将目标分析物转化为易于分离和电离的衍生物,可以显著提高复杂基质中痕量化合物检测的分离度、灵敏度和(或)选择性,目前在LC-MS分析中已得到了广泛的应用。本文系统总结了各类衍生化技术的基本原理和优势,综述了不同类型的化学衍生化反应及其在食品、药物、生命科学和环境分析等领域的应用进展。此外,本文还归纳了稳定同位素标记衍生化技术与酶法衍生化技术的研究进展。本文将为衍生化LC-MS技术的进一步发展和应用提供参考,为中药、生物样品等复杂样品的精准分析提供借鉴。

关键词：液相色谱-质谱联用药物分析化学衍生化稳定同位素标记酶法衍生化

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麒麟竭果实化学成分及其抑制血小板活性成分的研究

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世界中医药 2024年第10期19卷 1386-1391页

作者：裴钰洁庞道然邹秋玉王勃开罗扬淦黄豪朱枝祥霍会霞赵云芳屠鹏飞李军北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学/北京中医药研究院/中药现代研究中心北京100029 北京大学药学院/天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

目的:研究麒麟竭Daemonorops draco Bl.果实乙醇提取物(血竭)的乙酸乙酯提取部位中化学成分及其抑制血小板活化活性。方法:采用硅胶、ODS、LH-20凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱技术对麒麟竭果实乙醇提取物的乙酸乙酯部位的化学成分进... 详细信息

目的:研究麒麟竭Daemonorops draco Bl.果实乙醇提取物(血竭)的乙酸乙酯提取部位中化学成分及其抑制血小板活化活性。方法:采用硅胶、ODS、LH-20凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱技术对麒麟竭果实乙醇提取物的乙酸乙酯部位的化学成分进行分离纯化,结合^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS等波谱学数据进行结构鉴定,采用凝血酶诱导的血小板活化释放ATP模型对化学成分进行活性筛选。结果:从麒麟竭果实乙醇提取物的乙酸乙酯提取部位中分离得到11个化合物。分别鉴定为Ethyl 4,6-dihydroxy-2-methoxy-3-methylbenzoate(1)、6-羟基-2,4-二甲氧基-3-甲基苯乙醇(2)、4,6-二羟基-2-甲氧基-3-甲基苯甲醛(3)、对羟基苯甲酸乙酯(4)、4-羟基苯甲酸甲酯(5)、3,5-二氯水杨酸(6)、对羟基苯甲醛(7)、Pinocembrin(8)、Strobopinin(9)、7-羟基-5-甲氧基-6-甲基二氢黄酮(10)和Ozoroalide(11)。结论:化合物1为新化合物,化合物2和3为新天然产物。化合物3、7和9可以明显地抑制凝血酶诱导的血小板活化释放ATP。

关键词：棕榈科黄藤属麒麟竭化学成分小分子酚酸二氢黄酮抑制血小板活化

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