检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2015年第7期31卷 936-939页

作者：刘晓婷张沂顾立刚吴珺邱泽计于卓男王玥琦北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒重点实验室北京100029 北京中医药大学基础医学院关键技术中心北京100029

目的研究黄芩苷对流感病毒H1N1感染A549细胞诱导的凋亡干预作用,探讨黄芩苷抗流感病毒感染的作用机制。方法采用基因芯片技术研究流感病毒感染细胞后细胞内凋亡信号通路中相关基因转录的变化。同时,采用荧光定量PCR检测各组细胞中天门... 详细信息

目的研究黄芩苷对流感病毒H1N1感染A549细胞诱导的凋亡干预作用,探讨黄芩苷抗流感病毒感染的作用机制。方法采用基因芯片技术研究流感病毒感染细胞后细胞内凋亡信号通路中相关基因转录的变化。同时,采用荧光定量PCR检测各组细胞中天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-8(caspase-8)和caspase-3的mRNA表达的变化。Western blot法检测各组细胞中的相关蛋白的变化。结果利用基因芯片技术,通过KEGG pathway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp7、Casp8、Casp10、TRAIL、MYD88、IL1A、和IL1B明显上调;与H1N1感染组比较,奥司他韦对照组对差异表达基因Casp3、Casp4和Casp8明显下调;黄芩苷高剂量组对差异表达基因Casp3、Casp4、Casp6和Casp8明显下调;黄芩苷低剂量组除上述差异表达基因外,还明显下调了IL1RAP和Cn。qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组caspase-3和-8的mRNA表达均明显升高。与H1N1感染组比较,奥司他韦对照组、黄芩苷高低剂量组的caspase-3和-8的mRNA表达均明显降低(P<0.01);并且,黄芩苷低剂量组的治疗效果优于高剂量组;该结果和基因芯片表达的结果基本相符。结论流感病毒体外感染细胞A549后诱导凋亡,黄芩苷能通过调控天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白家族介导凋亡通路的相关基因表达,对病毒感染诱导的细胞凋亡有干预作用,从而发挥抗病毒作用。

关键词：黄芩苷流感病毒H1N1 人肺腺癌上皮细胞A549 基因芯片细胞凋亡天冬半胱氨酸蛋白酶

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川芎嗪对甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究

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中华中医药杂志 2017年第6期32卷 2680-2683页

作者：于卓男林树鹏顾立刚吴珺邱泽计刘晓婷北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒实验室北京100029

目的:研究川芎嗪(TMP)对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法:培养A549细胞,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照(N)组、H1V1感染(M)组、奥司他韦对照(D)组,TMP高剂量(S)组及TMP低剂量(J)组... 详细信息

目的:研究川芎嗪(TMP)对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法:培养A549细胞,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照(N)组、H1V1感染(M)组、奥司他韦对照(D)组,TMP高剂量(S)组及TMP低剂量(J)组。采用RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中IL-1β、IL-10、INF-γ、TNF-αm RNA及蛋白表达。结果:与N组比较,M组IL-1β、IL-10、TNF-αm RNA表达显著升高,而INF-γm RNA表达显著降低(P<0.01);与M组比较,D、S、J组IL-1β、IL-10、TNF-αm RNA表达均明显降低(P<0.01)。M组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α蛋白表达较N组显著升高(P<0.05);与M组比较,S、J组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:TMP可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-αm RNA表达及蛋白分泌,减轻炎性反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡。

关键词：川芎嗪甲型流感病毒H1N1 炎性细胞因子人肺腺癌A549细胞

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中华危重病急救医学 2013年第6期25卷 322-326页

作者：卢娜娜刘琪顾立刚周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥张沂北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒重点实验室 100029 北京中日友好医院山西中医学院

目的观察疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒性肺炎小鼠自然杀伤细胞（NK细胞）毒性相关信号转导通路差异基因表达的调控作用。方法将90只ICR小鼠按随机数字表法分为对照（N）组、模型（M）组、奥司他韦（C）组以及中药疏风宣肺方高、中... 详细信息

目的观察疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒性肺炎小鼠自然杀伤细胞（NK细胞）毒性相关信号转导通路差异基因表达的调控作用。方法将90只ICR小鼠按随机数字表法分为对照（N）组、模型（M）组、奥司他韦（C）组以及中药疏风宣肺方高、中、低剂量（SH、SM、SL）组和解表清里方高、中、低剂量（JH、JM、JL）组，每组10只。采用流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1滴鼻感染方法制备流感病毒性肺炎模型；N组以0．05m1等渗盐水滴鼻。于制模后2h，C组给予奥司他韦11．375mg·kg-1·d-1灌胃；SH、SM、SL组给予疏风宣肺方（主要药物金银花、连翘、板蓝根等）3．76、1．88、***-1·d-1灌胃；JH、JM、JL组给予解表清里方（主要药物麻黄、石膏、生甘草等）4．36、2．18、1．09g·kg-1.d-1灌胃；N组及M组则灌胃等量生理盐水；各组均0．2mud，连用4d。提取肺组织总RNA，采用基因芯片筛选出NK细胞毒性信号转导通路相关的差异表达基因，以I表示信号强度；并采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质免疫印迹试验（Weslernblotting）对部分基因进行验证。结果在NK细胞毒性相关信号转导通路中，M组较N组上调差异基因43个。用药治疗后，SM组下调差异表达基因36个，JM组下调差异表达基因29个，SL组下调差异表达基因22个，JH组下调差异表达基因21个，SH组下调差异表达基因20个，儿组下调差异表达基因10个；SH、SL、JH、JM、JI组表达下调的基因均包括在SM组的表达谱中，表明中剂量疏风宣肺方调控NK细胞毒性作用最显著。荧光定量PCR和Westernblotting测定结果显示，与M组比较，疏风宣肺方与解表清里方各剂量组对肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的mRNA及蛋白表达均有显著抑制作用，疏风宣肺方和解表清里方均以中剂量组最低（TNF—αmRNA：1．07±0．19、1．19±0．14比3．20±0．56，均P〈0．01）。结论流感病毒感染后在宿主细胞内增殖即成为带有病毒抗原的靶细胞，并激活NK细胞毒性信号转导通路的相关基因表达增加，被NK细胞识别并杀伤；两种方药可下调NK细胞中表达上调的差异基因，下调机制与其能明确减少流感病毒性肺炎体内靶抗原、减弱NK细胞识别活化作用有关。

关键词：流感病毒性肺炎疏风宣肺方解表清里方自然杀伤细胞基因芯片小鼠

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流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性细胞因子表达及疏风宣肺方和解表清里方的调控作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第3期30卷 254-257页

作者：卢娜娜刘琪顾立刚吴珺邱泽计张洪春晁恩祥张沂于卓男北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒实验室山西中医学院山西太原030024 北京中日友好医院

目的研究流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性细胞因子表达及疏风宣肺方和解表清里方的调控作用。方法制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组、肺炎模型组、奥司他韦对照组、疏风宣肺方大、中、小剂量组(SL、SM和SS),解表清里方大、... 详细信息

目的研究流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性细胞因子表达及疏风宣肺方和解表清里方的调控作用。方法制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组、肺炎模型组、奥司他韦对照组、疏风宣肺方大、中、小剂量组(SL、SM和SS),解表清里方大、中、小剂量组(JL、JM和JS)。提取总RNA,采用基因芯片Pathway分析,挑选参与调控炎症相关通路中的靶基因。同时,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对IL-1β、IL-8、IL-10、CCL5(RANTES)、ICAM-1的mRNA表达水平进行验证。采用Western blot法对肺组织IL-1β的表达进行验证。结果模型组差异表达基因IL-1β、CXCR2、CCL5、IL-10、IL-6、IL-18、TGF-β1、CCL2明显上调,较正常组差异显著。各剂量治疗组对IL-1β、CXCR2、IL-10、IL-6表达有显著的下调作用,SM及SS组下调IL-18、TGF-β1、CCL2、CCL5基因的表达,JM及JL组下调差异表达基因IL-18、CCL5。qRT-PCR和Western blot法结果显示,两种方药各剂量组均可降低IL-1β的mRNA与蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。SM组和JM组对IL-8、IL-10、RANTES、ICAM-1的mRNA有显著抑制(P<0.05或P<0.01)。qRT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论疏风宣肺方和解表清里方均可抑制流感病毒感染后肺组织的免疫炎症损伤。

关键词：疏风宣肺方解表清里方肺炎流感病毒炎症细胞因子

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毒热平注射液对FM1流感病毒感染小鼠的抗病毒作用研究

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北京中医药大学学报 2009年第6期32卷 394-397,401,I0001页

作者：曾郁敏贾翎邱泽计吴珺顾立刚北京中医药大学基础医学院中医药防治病毒性疾病教育部重点实验室北京100029

目的观察毒热平注射液对FM1流感病毒致小鼠感染的抗病毒作用。方法采用FM1流感病毒感染小鼠作为模型,测定其对感染小鼠死亡保护率及平均生活日的影响;测定其对感染小鼠体重及肺指数的影响;通过对肺脏标本进行HE染色,光镜观察感染小鼠肺... 详细信息

目的观察毒热平注射液对FM1流感病毒致小鼠感染的抗病毒作用。方法采用FM1流感病毒感染小鼠作为模型,测定其对感染小鼠死亡保护率及平均生活日的影响;测定其对感染小鼠体重及肺指数的影响;通过对肺脏标本进行HE染色,光镜观察感染小鼠肺部不同的病理改变;测定其对感染小鼠肺脏匀浆中的病毒滴度的影响,观察其直接杀伤病毒的能力。结果在观察的时间内,毒热平注射液中剂量组与模型组比较,可显著延长其存活率(P<0.05);与模型组相比,毒热平可显著延长动物平均生存时间,中剂量组(P<0.05),大剂量组(P<0.05);显著降低小鼠的肺指数,大剂量组(P<0.01),中剂量组(P<0.001);毒热平中、小剂量组体重较模型组有显著性差异(P<0.05);对肺脏进行大体及光镜下观察,均可发现模型组病变最为严重,毒热平不同剂量组对病毒感染小鼠的肺脏病变均有不同程度的改善作用;毒热平注射液中剂量组可明显降低肺匀浆中病毒滴度,与模型组比较(P<0.05)。结论毒热平注射液在体内可有效抑制病毒增殖,减轻受试动物肺部病变,降低肺指数,提高存活率,从而发挥抗病毒治疗的作用,为其临床应用提供了实验依据。

关键词：毒热平注射液抗病毒实验研究小鼠

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不同治法方药对流感病毒性肺炎小鼠MMPs和TIMPs表达影响的研究

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中华中医药杂志 2014年第2期29卷 411-414页

作者：卢娜娜刘琪顾立刚周旭澎吴珺邱泽计张洪春晁恩祥张沂北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒实验室北京100029 山西中医学院太原030024 北京中日友好医院北京100029

目的:探讨不同治法方药对流感病毒性肺炎小鼠基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)表达的作用。方法:制备小鼠甲型流感病毒性肺炎模型,随机分为正常组(N),模型组(M),达菲组(C),疏风宣肺方大、中、小剂量组(SL、SM和S... 详细信息

目的:探讨不同治法方药对流感病毒性肺炎小鼠基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)表达的作用。方法:制备小鼠甲型流感病毒性肺炎模型,随机分为正常组(N),模型组(M),达菲组(C),疏风宣肺方大、中、小剂量组(SL、SM和SS),解表清里方大、中、小剂量组(JL、JM和JS)。采用基因芯片筛选MMPs和TIMPs的差异基因;荧光定量PCR对部分差异基因进行验证。结果:与N组相比,M组差异基因MMP-9、TIMP-1、MMP-3、MMP-14、MMP-19明显上调及MMP-2、TIMP-2明显下调。与M组相比,SM、SS和JM组对MMP-9、MMP-3、MMP-14、MMP-19基因具有显著的下调作用,显著上调TIMP-2的基因表达;荧光定量PCR显示,SM、SS和JM、JS组对MMP-9、MMP-1表达有显著抑制(P<0.05,P<0.01)。结论:疏风宣肺方调节甲型流感病毒性肺炎小鼠MMPs和TIMPs表达,抑制流感病毒感染后的肺组织炎症损伤,且治疗作用优于解表清里方。

关键词：疏风宣肺方解表清里方流感病毒性肺炎小鼠基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制剂

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人参皂苷Rg1和Rb1对流感病毒感染细胞的影响及其机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第10期29卷 894-898页

作者：张春晶顾立刚牛旭艳王甫彭桂英北京中医药大学基础医学院中西医结合基础中医药防治病毒性疾病教育部重点实验室 100029 齐齐哈尔医学院生化与分子生物学教研室

目的研究人参皂苷Rg1和Rb1对流感病毒感染所致的细胞氧化应激损伤、细胞内转录因子（NF—KB和AP—1）转录活性及前炎症细胞因子IL-8释放的影响。方法甲型流感病毒H3N2作为刺激因素，以DCFH—DA为探针，流式细胞仪检测细胞内活性氧（iRO... 详细信息

目的研究人参皂苷Rg1和Rb1对流感病毒感染所致的细胞氧化应激损伤、细胞内转录因子（NF—KB和AP—1）转录活性及前炎症细胞因子IL-8释放的影响。方法甲型流感病毒H3N2作为刺激因素，以DCFH—DA为探针，流式细胞仪检测细胞内活性氧（iROS）产生水平。利用双荧光素酶顺式报告系统，榆测人参皂苷Rg1和Rb1对NF—κB—luc及AP-1-luc相对荧光素酶值的影响。RT—PCR法进一步验证人参皂苷Rg1和Rb1对TL-8mRNA表达水平的影响。结果病毒感染后细胞中ROS产生增加45％～55％，而给予有效浓度人参皂苷Rg1和Rb1后，荧光强度降低，与正常细胞内自由基含量基本相同。通过NF-κB及AP-1双荧光素酶报告系统检测发现，与正常对照组比较，病毒感染的细胞中NF—κB及AP-1荧光素酶报告活性明显升高；与病毒损伤组比较，人参皂苷Rg1、Rb1治疗组NF—κB及AP—1荧光素酶报告活性明显受到抑制。RT—PCR结果显示人参皂苷Rg1和Rh1能明显抑制病毒诱导的1L-8mRNA表达水平的变化，使之趋近于正常对照组水平。结论人参皂苷Rg1和Rb1可拈抗病毒感染细胞中ROS产生水平、降低氧化应激敏感的信号传导通路Nn-κB及AP-1的转录活性，并抑制二者下游靶基因IL-8表达。

关键词：人参皂苷Rg1和Rb1 甲型H3N2流感病毒氧化应激核因子-κB 激活蛋白-1

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疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H_1N_1感染的A549细胞凋亡的影响

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西部中医药 2015年第5期28卷 7-10页

作者：葛世杰刘晓婷张沂卢娜娜顾立刚吴珺邱泽计张洪春晁恩祥北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒重点实验室北京100029 北京中日友好医院

目的:探讨疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌上皮细胞A549,甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后,以达菲为药物对照组,利用基因芯片技术通过KEGG pat hway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。研... 详细信息

目的:探讨疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌上皮细胞A549,甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后,以达菲为药物对照组,利用基因芯片技术通过KEGG pat hway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。研究疏风宣肺方与解表清里方凋亡信号通路中基因转录的变化;同时采用荧光定量PCR检测各组细胞中的肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)、Fas配体(Fas L)及天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)m RNA表达的变化;West er n bl ot t i ng法检测各组细胞中蛋白的变化。结果:与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp8、Casp9、Fas、Fasl明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Casp8、Casp7、Fas、Fasl明显下调;q RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均显著升高(P<0.01);与H1N1感染组比较,疏风宣肺组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P<0.05),解表清里组Caspas e-3、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P<0.05)。同时疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Wes t er n bl ot t i ng结果显示,H1N1感染组Fas、Fas L蛋白细胞较对照组显著升高(P<0.05)。与H1N1感染组比较,2种方药的Fas、Fas L表达均显著降低(P<0.05);q RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论:疏风宣肺方与解表清里方均可调控甲型流感病毒感染后的Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L表达,可对抗流感病毒感染后的细胞凋亡。

关键词：流感病毒人肺腺癌A549细胞细胞凋亡疏风宣肺方解表清里方

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痰热清注射液对流感病毒FM_1感染小鼠的保护作用

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中国中医药信息杂志 2006年第12期13卷 39-41页

作者：郑金粟顾立刚李澎涛邱泽计李根茂北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒教育部重点实验室北京100029

目的研究痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠的保护作用。方法观察痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用,以及肺指数和肺组织病理形态学变化,同时检测肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度。结果痰热清注射液治... 详细信息

目的研究痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠的保护作用。方法观察痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用,以及肺指数和肺组织病理形态学变化,同时检测肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度。结果痰热清注射液治疗组对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的保护作用,死亡保护率与模型组小鼠比较,差异显著(P<0.05);肺组织病理形态学观察发现,痰热清注射液治疗组肺部炎症反应较模型组有显著改善。另外,痰热清注射液对肺组织匀浆中流感病毒血凝滴度具有明显的抑制作用。结论痰热清注射液(4mL/kg)对流感病毒FM1感染小鼠具有明显的保护作用。这种保护作用与痰热清注射液在体内抑制流感病毒增殖、减轻肺部炎症反应有关。

关键词：痰热清注射液流感病毒亚甲型鼠肺适应株肺指数

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疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒H1N1感染人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路作用的研究

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中医药学报 2015年第2期43卷 23-26页

作者：葛世杰卢娜娜刘晓婷张沂顾立刚吴珺邱泽计张洪春晁恩祥北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒重点实验室北京100029 北京中日友好医院北京100029

目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中... 详细信息

目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中的Toll样受体3(Toll-like receptor3,TLR3)、Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、激活核因子Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)的mRNA及蛋白表达的变化。结果:在TLR3/7相关信号传导通路中,与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显下调。qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均显著升高(P<0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组的TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),解表清里方对TLR3/7、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。同时,疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Western blotting结果显示,H1N1感染组TLR3/7、NF-κB蛋白较正常组显著升高(P<0.05)。与H1N1感染组比较,两种方药的TLR3/7、NF-κB表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:疏风宣肺方和解表清里方可以抑制流感病毒H1N1所诱导的TLR3/7信号通路活化,下调活性NF-κB的转录活性,发挥抗流感病毒的作用。

关键词：疏风宣肺方解表清里方流感病毒人肺腺癌A549细胞 TLR3/7信号通路

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