检索结果-内蒙古大学图书馆

实验技术与管理 2010年第10期27卷 42-45,48页

作者：丰平李根茂葛东宇首都医科大学教学实验中心机能实验室北京100069 北京中医药大学基础医学院科研中心北京100029

目的：利用丙三醇水溶液沸点高、性状稳定特点,用之作为热抗原修复液,以求提高热抗原修复温度,使抗原修复更充分,取得免疫组化显色更佳效果。方法：石蜡切片脱蜡到水,入热丙三醇水溶液中,于电热鼓风恒温箱中热抗原修复,接着按照热抗原... 详细信息

目的：利用丙三醇水溶液沸点高、性状稳定特点,用之作为热抗原修复液,以求提高热抗原修复温度,使抗原修复更充分,取得免疫组化显色更佳效果。方法：石蜡切片脱蜡到水,入热丙三醇水溶液中,于电热鼓风恒温箱中热抗原修复,接着按照热抗原修复后之常规免疫组化技术程序进行,并与微波热抗原修复和高压热抗原修复试验比较。结果：热丙三醇水溶液抗原修复的切片标本免疫组化显色清楚,效果比微波热抗原修复和高压热抗原修复的切片标本颜色更深。结论：用丙三醇水溶液做热抗原修复液,能使抗原在更高温度中修复,其免疫组化显色效果比微波热抗原修复和高压热抗原修复更好,技术程序也便利易行。热丙三醇水溶液抗原修复法是免疫组化技术创新,值得推广应用。

关键词：抗原修复丙三醇水溶液免疫组化

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糖尿病大鼠视网膜血管消化铺片技术的改进及技巧探讨

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中国中医眼科杂志 2015年第1期25卷 1-5页

作者：何洁韩静郝改梅吴晏王伟北京中医药大学基础医学院北京100029 北京中医药大学科研实验中心

目的建立适合视网膜血管的消化方法,探讨一种稳定可重复的视网膜血管消化铺片技术。方法一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,另设正常组,36周后取材固定,分别采用胶原酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法三种方法消化... 详细信息

目的建立适合视网膜血管的消化方法,探讨一种稳定可重复的视网膜血管消化铺片技术。方法一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,另设正常组,36周后取材固定,分别采用胶原酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法三种方法消化视网膜血管,观察并对比三种方法制作的铺片效果;对铺片进行形态学观察,并比较正常组与模型组毛细血管面积密度及内皮细胞/周细胞数比值的变化。结果胶原酶消化程度不足以显示出视网膜血管结构;胰蛋白酶消化法残存较多的神经胶质细胞及其他组织细胞,不能完全显示视网膜血管网;胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法能完整显示出视网膜血管网,形态结构清晰,可以观察血管的面积分布、管径变化及管壁细胞结构。与正常组相比,模型组视网膜毛细血管排列紊乱,毛细血管面积密度显著升高(P<0.01);内皮细胞增生,周细胞减少,内皮细胞数与周细胞数比值升高(P<0.01)。结论胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法是最适合视网膜血管的消化方法,结合良好规范的操作技巧可以稳定的重复视网膜血管消化铺片技术。

关键词：视网膜血管消化铺片糖尿病视网膜病变消化法

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基于UHPLC Q-Exactive Orbitrap MS^(n)和分子网络技术快速鉴定吴茱萸汤中化学成分

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中国中药杂志 2023年第1期48卷 71-81页

作者：权建野范斌刘安孙健陈鹏王春国赵永烈张村邓欣祺荆志伟中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029 中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100700

《伤寒论》名方吴茱萸汤是首批《古代经典名方目录》收载品种,全方由吴茱萸、人参、生姜、大枣4味药组成,具有温中补虚、散寒降逆之功,临床应用广泛,疗效显著。经典名方化学组成是其物质基准和量值传递的重要前提,该研究旨在建立高分辨... 详细信息

《伤寒论》名方吴茱萸汤是首批《古代经典名方目录》收载品种,全方由吴茱萸、人参、生姜、大枣4味药组成,具有温中补虚、散寒降逆之功,临床应用广泛,疗效显著。经典名方化学组成是其物质基准和量值传递的重要前提,该研究旨在建立高分辨质谱(HR-MS)和分子网络整合的快速分析经典名方吴茱萸汤中化学成分的方法。采用AQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。分别在正、负离子模式下,采集Q-Exactive Orbitrap MS数据,根据MS/MS碎片模式的相似性创建GNPS分子网络,运用Cytoscape 3.6.1软件筛选结构相似的分子簇,最后根据对照品比对,并结合保留时间信息、高分辨质谱精确相对分子质量和MS/MS碎片信息对吴茱萸汤中化学成分进行快速准确鉴定。在吴茱萸汤中共鉴定出105种化学成分。该研究可为经典名方吴茱萸汤进一步的质量控制、基准物质研究以及药效物质研究等提供参考数据,同时也为中药化学成分的快速定性分析提供借鉴。

关键词：吴茱萸汤 UHPLC Q-Exactive Orbitrap MS 分子网络多级碎片

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基于单抗的间接竞争ELISA检测黄连解毒汤中栀子苷在小鼠体内的代谢

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中日友好医院学报 2014年第3期28卷 161-164页

作者：吴婷婷屈会化张桂亮续洁琨王雪茜赵琰王庆国北京中医药大学基础医学院北京中医药大学科研实验中心北京100029

目的：应用自主研制的栀子苷单克隆抗体建立的间接竞争ELISA（icELISA）法，检测黄连解毒汤灌胃给药后小鼠体内栀子苷的含量，分析药代动力学参数。方法：icELISA方法学验证；小鼠给药后分17个时间点取血，10μl／只，icELISA法检测栀... 详细信息

目的：应用自主研制的栀子苷单克隆抗体建立的间接竞争ELISA（icELISA）法，检测黄连解毒汤灌胃给药后小鼠体内栀子苷的含量，分析药代动力学参数。方法：icELISA方法学验证；小鼠给药后分17个时间点取血，10μl／只，icELISA法检测栀子苷。结果：该方法的线性范围是1．17—37．5μg／ml，最低检测限0．14～0．45μg／ml，最低定量检测限1．17μg／ml；日内和日间精密度均≤10％；回收率96．38％-103．38％；栀子苷含药血浆样品室温放置12h稳定性好。本实验测得的栀子苷在小鼠体内的达峰时间和平均滞留时间与文献报道基本～致。结论：基于栀子苷单克隆抗体的icELISA法能够高通量、快速、准确检测生物样品中栀子苷，具有良好的应用前景。

关键词：间接竞争ELISA 栀子苷黄连解毒汤药代动力学小鼠

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甘遂半夏汤加减甘遂甘草不同给药次数对腹水大鼠肝脏病理形态的影响

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环球中医药 2016年第5期9卷 534-539页

作者：张建美许皖钟赣生赵桐贾旭柳海艳郭岩松修琳琳王思睿北京中医药大学基础医学院北京中医药大学基础医学院方药系中国中医药出版社北京中医药大学科研实验中心

目的同给药次数条件下的甘遂半夏汤加减甘遂甘草反药组合对腹水模型大鼠肝脏病理形态的影响。方法采用Walker-256细胞制造癌性腹水模型,将Wistar大鼠按体重随机分为空白组、模型组、阳性对照组、全方给药一次组、去草给药一次组、去... 详细信息

目的同给药次数条件下的甘遂半夏汤加减甘遂甘草反药组合对腹水模型大鼠肝脏病理形态的影响。方法采用Walker-256细胞制造癌性腹水模型,将Wistar大鼠按体重随机分为空白组、模型组、阳性对照组、全方给药一次组、去草给药一次组、去遂给药一次组、去草遂给药一次组、全方给药二次组、去草给药二次组、去遂给药二次组、去草遂给药二次组,共计11组。给药一次组每天上午给药1次,给药二次组上午、下午各给药1次,一二次组每天给药总量一致。腹水长成14天后取材,摘取肝脏,制成病理切片,在光镜下观察大鼠肝脏的病理形态变化,并进行半定量评分。结果模型组肝细胞损伤严重,全方给药一次组及二次组肝损伤较模型组明显减轻,且一次组的减轻程度大于二次组。与全方一次组比较,去草一次组、去遂一次组、去草遂一次组肝损伤加重;与全方二次组比较,去草二次组、去遂二次组、去草遂二次组肝损伤加重。结论全方给药一次组和二次组对肝损伤均有一定的改善作用,给药一次组的改善作用优于给药二次组;全方组损伤修复及抗炎作用优于全方去掉一味或两味反药组。

关键词：反药组合甘遂甘草肝脏病理形态

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中医药治疗冠心病的文献质量评价

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中医杂志 2012年第20期53卷 1734-1736页

作者：郭齐田昕杨傲然吴丹王志国江苏大学基础医学与医学技术学院北京中医药大学基础医学院北京市中西医结合医院中国中医科学院医学实验中心

目的对中医药治疗冠心病的文献进行质量评价,明确中医药治疗冠心病的疗效及存在的问题。方法检索中国生物医学文献光盘、中文生物医学期刊文献数据库、中医药科技文献数据库、维普中文科技期刊数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库... 详细信息

目的对中医药治疗冠心病的文献进行质量评价,明确中医药治疗冠心病的疗效及存在的问题。方法检索中国生物医学文献光盘、中文生物医学期刊文献数据库、中医药科技文献数据库、维普中文科技期刊数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、中国医学学术会议论文数据库中1982年1月至2012年1月有关中医药治疗冠心病的临床研究文献,制定冠心病治疗性文献系统质量评价及信息采集表,对纳入文献的随机方法、分配隐匿、诊断标准、疗效评定标准、基线可比性、盲法、随访、病例失访、退出、脱落、统计方法等方面进行评价。结果符合纳入标准的文献共82篇。其中多中心研究8篇(9.7%);有明确诊断标准67篇(82.0%);采用部级、局级标准为纳入标准的37篇(45.1%),有明确疗效判定标准的73篇(89.0%);做组间均衡性比较64篇(78.0%);正确使用随机分配方法及实施盲法均为8篇(9.8%);82篇文献均未描述对受试对象的依从性检测;有随访和失访记录分别为5篇(6.1%)和2篇(2.4%);明确所用统计方法58篇(70.7%),但均无后验性统计分析;记录不良反应及安全性72篇(87.8%)。结论中医药治疗冠心病临床研究缺乏多中心研究,诊断和疗效评定标准交叉混用,组间均衡性、随机分配和随访、失访等有关研究方案质量的评价较低。

关键词：冠心病中医药疗法文献质量评价

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基于亲和层析方法研究栀子苷的药物靶标

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现代生物医学进展 2016年第15期16卷 2811-2815页

作者：张琦张子剑谭琰王旭赵洁张傲哲李亚楠万亮琴华茜北京中医药大学基础医学院北京100029 北京中医药大学科研实验中心北京100029

目的:运用亲和层析方法初步探索栀子苷的特异结合蛋白。方法:采用环氧氯丙烷(Epichlorohydrin,ECH)作为活化试剂对琼脂糖凝胶进行环氧基修饰,通过偶联栀子苷与环氧活化的琼脂糖凝胶(epoxy activated Sepharose CL-6B,EAS6B),制备以栀子... 详细信息

目的:运用亲和层析方法初步探索栀子苷的特异结合蛋白。方法:采用环氧氯丙烷(Epichlorohydrin,ECH)作为活化试剂对琼脂糖凝胶进行环氧基修饰,通过偶联栀子苷与环氧活化的琼脂糖凝胶(epoxy activated Sepharose CL-6B,EAS6B),制备以栀子苷为配基的亲和介质,以高效液相色谱法验证其偶联。利用栀子苷-EAS6B亲和介质,从小鼠脑组织总蛋白中筛选特异结合蛋白。结果:优化偶联条件后,得到最佳的活化反应条件:15%ECH、0.8 mol/L Na OH于37℃反应3 h,环氧基密度达到122μmol/m L,琼脂糖凝胶亲和介质的偶联量为19.53%,偶联率为17.08μmol/m L。从小鼠脑组织总蛋白中筛选得到3个栀子苷特异结合蛋白的条带,经质谱鉴定,发现主要是由热休克蛋白、脑酸溶性蛋白和谷氨酰胺合成酶等组成。结论:确立了琼脂糖凝胶环氧活化的最佳条件,制备了栀子苷-EAS6B亲和介质并应用其筛选出栀子苷的结合蛋白。

关键词：栀子苷亲和层析环氧活化琼脂糖凝胶高效液相色谱

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大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液对损伤神经元的保护作用(英文)

大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液对损伤神经元的保护作用(英文)

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2006国际传统医药创新与发展态势论坛

作者：胡京红司银楚洪庆涛李卫红黄翔张建平李澎涛北京中医药大学基础医学院科研中心北京中医药大学基础医学院科研中心北京中医药大学基础医学院科研中心北京中医药大学基础医学院科研中心北京中医药大学基础医学院科研中心北京中医药大学基础医学院科研中心北京中医药大学基础医学院科研中心

目的:通过大鼠脑微管内皮细胞培养技术,建立拟缺血损伤模型,制备正常、损伤及天麻素干预的内皮细胞条件培养液,作用于正常及损伤神经元,并检测神经元的活性。方法:采用体外培养的脑微血管内皮细胞,模拟脑缺血损伤,探讨脑微血管内皮细胞... 详细信息

目的:通过大鼠脑微管内皮细胞培养技术,建立拟缺血损伤模型,制备正常、损伤及天麻素干预的内皮细胞条件培养液,作用于正常及损伤神经元,并检测神经元的活性。方法:采用体外培养的脑微血管内皮细胞,模拟脑缺血损伤,探讨脑微血管内皮细胞正常和病理条件培养液对正常、损伤神经元的作用。结果:正常内皮细胞条件培养液对正常神经元活性无明显影响;对缺血损伤神经元有增强其活性的作用(P<0．05);对缺血再灌注损伤神经元初起可增强其活性,并逐渐增强,至6h达高峰,随后其活性逐渐下降。缺血损伤内皮细胞条件培养液可降低正常神经元的活性(P<0．05);明显降低损伤神经元和缺血再灌神经元活性(P<0．05)。天麻素干预的内皮细胞条件培养液有增强正常神经元活性的趋势;明显提高损伤神经元活性(P<0．06);对缺血再灌神经元初起可增强其活性;随后其活性逐渐降低。结论:未受损的内皮细胞对受损的神经元具有一定的保护趋势;当内皮细胞自身损伤情况下,可产生一些物质对脑细胞造成直接损害,中药天麻素在合适的时间和浓度下可通过内皮细胞发挥一的抗缺血神经元损伤的作用。

关键词：脑缺血条件培养液内皮细胞神经元

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17 β-雌二醇免疫调节作用对缺血性脑卒中的影响

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中华老年心脑血管病杂志 2017年第6期19卷 662-664页

作者：何芳刘雪梅王凤丽张允岭王新祥北京中医药大学基础医学院 100029 北京中医药大学东方医院实验中心

雌激素是维持女性生殖功能的代表性激素,同时也能调节几乎所有身体组织的病理生理过程,包括中枢神经系统。许多临床前研究表明,雌激素,特别是17β-雌二醇,对脑卒中后缺血性脑损伤具有保护作用。17β-雌二醇的神经保护作用有多种机制,既... 详细信息

雌激素是维持女性生殖功能的代表性激素,同时也能调节几乎所有身体组织的病理生理过程,包括中枢神经系统。许多临床前研究表明,雌激素,特别是17β-雌二醇,对脑卒中后缺血性脑损伤具有保护作用。17β-雌二醇的神经保护作用有多种机制,既包括激活大脑多种神经保护通路,也包括调节缺血性脑卒中局部和全身免疫反应。

关键词：卒中雌激素类雌二醇氧化性应激白细胞介素1β 白细胞介素6 肿瘤坏死因子α 细胞凋亡

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黄芩素抑制小胶质细胞活化及保护SH-SY5Y神经细胞的机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第10期29卷 93-101页

作者：尹梦霞欧阳竞锋崔拓拓刘鑫孙梦菲荆志伟中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室北京100700 北京中医药大学东方医院北京100078 中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100700

目的:探讨黄芩素(BAI)对脂多糖(LPS)激活的BV-2细胞条件培养基下SH-SY5Y细胞损伤的干预作用及机制。方法:用LPS 1 mg·L^(-1)激活BV-2细胞建立LPS组条件培养基,同时设置空白组、BAI低、中、高浓度组(4、8、16μmol·L^(-1)),使... 详细信息

目的:探讨黄芩素(BAI)对脂多糖(LPS)激活的BV-2细胞条件培养基下SH-SY5Y细胞损伤的干预作用及机制。方法:用LPS 1 mg·L^(-1)激活BV-2细胞建立LPS组条件培养基,同时设置空白组、BAI低、中、高浓度组(4、8、16μmol·L^(-1)),使用各组条件培养基培养SH-SY5Y细胞。通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒测定干预后各组BV-2细胞的细胞活力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组BV-2细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量;采用免疫组化(IHC)观察SH-SY5Y细胞中α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达情况,免疫荧光(IF)法观察SH-SY5Y细胞中核转录因子-κB p65蛋白(NF-κB p65,以下简称p65)核转移情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SH-SY5Y细胞Toll样受体4(TLR4)、p65、磷酸化(p)-p65、髓样分化因子88(My D88)蛋白表达情况。结果:与空白组比较,LPS组中BV-2细胞活力显著降低(P<0.01),细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量均显著升高(P<0.01);与LPS组比较,BAI低、中、高浓度组细胞活力显著升高(P<0.01),细胞上清液中TNF-α均显著降低(P<0.01),BAI高浓度(16μmol·L^(-1))组细胞上清液中IL-6含量明显降低(P<0.05),BAI中、高浓度组细胞上清液中IL-1β含量显著降低(P<0.01)。条件培养基处理SH-SY5Y细胞的结果显示,与空白组比较,LPS组SH-SY5Y细胞中p65蛋白表达向核内聚集,TH蛋白表达显著下降(P<0.01),α-syn、TLR4、My D88、p-p65蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01);与LPS组比较,BAI低、中、高浓度组SH-SY5Y细胞中p65蛋白表达逐渐分散至细胞质中,TH蛋白表达均显著升高(P<0.01),α-syn蛋白表达均显著降低(P<0.01),BAI高浓度组TLR4、My D88、p-p65蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),BAI中浓度组p-p65和My D88蛋白表达均明显降低(P<0.05),BAI低浓度组My D88蛋白表达明显降低(P<0.05)。各组p65蛋白表达差异无统计学意义。结论:BAI能够抑制BV-2细胞激活,从而抑制LPS造成的炎症反应,进而进一步抑制炎症对SH-SY5Y细胞的损伤,其作用机制可能在于调节TLR4/My D88/NF-κB信号通路,减轻炎症反应,发挥神经保护作用。

关键词：帕金森病脂多糖(LPS) 黄芩素(BAI) Toll样受体4(TLR4)

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