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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：张丰丰赵宗江张新雪田晨北京中医药大学基础医学院细胞与生化实验室

再生障碍性贫血(AA)是T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。AA的发病机制研究主要集中在免疫功能异常、造血干细胞损伤、造血微环境异常三个方面。近年来,AA中免疫机制异常越来越受到血液研究者的关注。AA的发病机制中细胞因子和细胞内信号... 详细信息

再生障碍性贫血(AA)是T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。AA的发病机制研究主要集中在免疫功能异常、造血干细胞损伤、造血微环境异常三个方面。近年来,AA中免疫机制异常越来越受到血液研究者的关注。AA的发病机制中细胞因子和细胞内信号转导通路更是复杂,免疫机制与T-bet/IFN-γ信号通路在AA发生发展过程中起着重要的作用。本文就T-bet/IFN-γ及其相关信号传导通路在AA中的作用做一综述。

关键词：再生障碍性贫血免疫机制 T-bet/IFN-γ信号通路综述

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糖肾平对体外培养足细胞CD2AP介导的PI3K/Akt信号通路的影响

糖肾平对体外培养足细胞CD2AP介导的PI3K/Akt信号通路的影响

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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：王颖超赵敬赵宗江杨美娟张新雪田晨北京中医药大学基础医学院细胞与生化实验室

目的:观察糖肾平对高糖环境下LPS刺激足细胞凋亡及对PI3K/Akt信号转导通路的影响。方法:体外培养,大鼠肾小球足细胞复苏,于细胞培养瓶内加入γ-干扰素（1ul/1000mL）,含10%胎牛血清足细胞培养液,置于33℃、5%CO细胞培养箱内培养三代,待... 详细信息

目的:观察糖肾平对高糖环境下LPS刺激足细胞凋亡及对PI3K/Akt信号转导通路的影响。方法:体外培养,大鼠肾小球足细胞复苏,于细胞培养瓶内加入γ-干扰素（1ul/1000mL）,含10%胎牛血清足细胞培养液,置于33℃、5%CO细胞培养箱内培养三代,待足细胞生长稳定后;无γ-干扰素足细胞培养液中进行分化培养2周;分化成熟后,以高糖环境下LPS刺激足细胞生长建立模型,分为以下8组:（1）正常组;（2）高糖组;（3）高糖+LPS组;（4）厄贝沙坦组;（5）抑制剂组;（6）糖肾平小剂量组;（7）糖肾平中剂量组;（8）糖肾平大剂量组。采用RT-PCR技术检测各组足细胞中CD2AP、PI3K、AKT、BadmRNA表达。结果:与正常组相比,高糖组和高糖+LPS组足细胞BadmRNA表达明显升高（p<0.01）,PI3KmRNA表达降低（p<0.05）;CD2AP、AKTmRNA表达明显降低（p<0.01）;糖肾平大、中、小剂量组足细胞中BadmRNA表达比高糖组和高糖+LPS组均降低（p<0.05）,糖肾平大、中、小剂量组CD2AP、PI3K、AKTmRNA表达比高糖组和高糖+LPS组均明显升高（p<0.05）,且成量效关系。结论:糖肾平通过干预CDZAP介导PI3K/Akt信号转导通路减少糖尿病肾病足细胞凋亡,可能是其防治糖尿病肾病的作用机制之一。

关键词：糖肾平足细胞 PI3K/Akt 信号转导通路

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糖肾平对高糖+LPS刺激足细胞上皮间质转分化的影响

糖肾平对高糖+LPS刺激足细胞上皮间质转分化的影响

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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：赵敬王颖超赵宗江杨美娟北京中医药大学基础医学院细胞与生化实验室

目的:探讨糖肾平对高糖环境下脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激足细胞上皮间质转分化的影响,并探讨其作用机制。方法:以体外培养大鼠肾小球足细胞为研究对象,以高糖(25mmol/L)、LPS(1ug/mL)刺激足细胞建立模型,分为正常组、高糖组、... 详细信息

目的:探讨糖肾平对高糖环境下脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激足细胞上皮间质转分化的影响,并探讨其作用机制。方法:以体外培养大鼠肾小球足细胞为研究对象,以高糖(25mmol/L)、LPS(1ug/mL)刺激足细胞建立模型,分为正常组、高糖组、高糖+LPS组、厄贝沙坦组、抑制剂组、糖肾平小、中、大剂量组。采用RT-PCR方法检测足细胞中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、Smad2/3、整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)、CD2相关蛋白(CD2AP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平。结果:与正常组比较,高糖组和高糖+LPS组足细胞TGF-β、Smad2/3、ILK、α-SMAmRNA表达明显增加(P<0.01),CD2APmRNA表达明显减少(P<0.01);与高糖+LPS组比较,厄贝沙坦组足细胞TGF-β、Smad2/3、α-SMAmRNA表达明显减少(P<0.01),ILKmRNA表达减少(P<0.05),CD2APmRNA表达明显增加(P<0.01);糖肾平大剂量组足细胞TGF-βmRNA表达减少(P<0.05),小、中剂量组表达明显减少(P<0.01);糖肾平小、中、大各剂量组足细胞Smad2/3mRNA表达均明显减少(P<0.01);糖肾平小、大剂量组足细胞ILKmRNA表达减少(P<0.05),中剂量组表达明显减少(P<0.01);糖肾平大剂量组足细胞α-SMAmRNA表达减少(P<0.05);糖肾平小、中、大各剂量组足细胞CD2APmRNA表达均明显增加(P<0.01)。结论:糖肾平能够降低足细胞TGF-β、Smad2/3、ILK、α-SMAmRNA表达,增加CD2APmRNA表达,通过TGF-β-Smad2/3-ILK信号转导通路干预足细胞上皮间质转分化,可能是其防治糖尿病肾病的作用机制之一。

关键词：糖肾平足细胞 TGF-β1/Smad2/3 信号转导通路转分化

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补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠T-bet/IFN-γ信号通路的影响

补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠T-bet/IFN-γ信号通路的...

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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：张丰丰赵宗江张新雪杨美娟田晨北京中医药大学基础医学院细胞与生化实验室

目的:探讨补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺(CTX)诱导再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)大鼠T-bet/IFN-γ信号通路的影响。方法:清洁级雄性SD大鼠85只,随机分为正常组10只,造模组75只,造模组皮下隔天注射苯(1ml/kg)7周,取材前2周连续隔... 详细信息

目的:探讨补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺(CTX)诱导再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)大鼠T-bet/IFN-γ信号通路的影响。方法:清洁级雄性SD大鼠85只,随机分为正常组10只,造模组75只,造模组皮下隔天注射苯(1ml/kg)7周,取材前2周连续隔天腹腔注射环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)(25mg/kg)3次,建立再生障碍性贫血大鼠模型。第三周后灌胃前,按体质量随机分为模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组。观察大鼠一般状态、体质量。第七周处死大鼠,取大鼠股骨、胫骨骨髓,分作两份,分别用铝箔纸包好(PCR实验所用组织的铝箔纸,均提前用DEPC水处理,与做Western blot组织的铝箔纸应分开保存),迅速在液氮中固定,然后转移至-80℃冰箱保存,备以Western blot和RT-PCR实验,检测骨髓IFN-γ、T-bet和GATA-3蛋白及mRNA表达。结果:Western blot检测大鼠骨髓IFN-γ、T-bet、GATA-3蛋白表达:与正常组比较,模型组大鼠骨髓IFN-γ、T-bet蛋白表达升高(P<0.01),模型组大鼠骨髓GATA-3蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,康力龙组、益髓生血组、滋肾生血组骨髓中IFN-γ蛋白表达均明显降低(P<0.05或P<0.01);滋肾生血组IFN-γ蛋白明显低于温肾生血组,有统计学差异(P<0.01)。RT-PCR检测大鼠骨髓IFN-γ、T-bet、GATA-3 mRNA表达:IFN-γmRNA:与正常组相比,模型组大鼠骨髓IFN-γ、T-bet mRNA表达显著升高(P<0.01),GATA-3 mRNA表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,康立龙组、益髓生血组、温肾生血组、滋肾生血组骨髓中IFN-γ、T-bet mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:补肾益髓生血法改善AA大鼠骨髓造血功能、调节其免疫机制、延缓AA病程进展的作用,可能是通过调控脾组织和骨髓IFN-γ/T-bet相关信号转导通路而实现的。本实验研究为"肾藏精,精生髓,髓生血"中医理论提供了实验依据。

关键词：再生障碍性贫血补肾益髓生血法 T-bet/IFN-γ信号通路 RT-PCR Western blot

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再生障碍性贫血实验研究进展

再生障碍性贫血实验研究进展

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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会

作者：张丰丰赵宗江张新雪田晨北京中医药大学基础医学院细胞与生化实验室

再生障碍性贫血(AA)具有治愈难、病势绵延的特点,AA机制一直是血液研究者的研究热点,近年来其机制研究已逐渐深入到分子生物学水平;AA机制的研究离不开动物模型,近年来,为了建立理想的动物模型,很多学者进行了多方面探索和改进。中医药... 详细信息

再生障碍性贫血(AA)具有治愈难、病势绵延的特点,AA机制一直是血液研究者的研究热点,近年来其机制研究已逐渐深入到分子生物学水平;AA机制的研究离不开动物模型,近年来,为了建立理想的动物模型,很多学者进行了多方面探索和改进。中医药在AA的治疗上有一定的优势,也取得了一定的进展。现就近年来有关再生障碍性贫血的实验研究进展做一简要综述。

关键词：再生障碍性贫血发病机制动物模型综述

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二苯乙烯苷对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞外氨基酸,细胞内钙离子浓度的影响

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中国实验方剂学杂志 2015年第15期21卷 111-115页

作者：焦玥李涛马淑骅欧阳竞峰王毅孙丹丹王丹巧梁嵘中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 北京中医药大学基础医学院北京100029

目的:观察二苯乙烯苷(TSG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨相关机制。方法:以SH-SY5Y细胞为研究对象,以100μmol·L-16-OHDA建立SH-SY5Y细胞损伤模型,以浓度6.25,12.5,25,50,100,200μmol·L-1TSG作... 详细信息

目的:观察二苯乙烯苷(TSG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨相关机制。方法:以SH-SY5Y细胞为研究对象,以100μmol·L-16-OHDA建立SH-SY5Y细胞损伤模型,以浓度6.25,12.5,25,50,100,200μmol·L-1TSG作用损伤的SH-SY5Y细胞,另设空白组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,观察不同浓度的TSG对其的保护作用,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化,高效液相-荧光法检测上清液中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu),抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果:与空白组比较,模型组细胞存活率降低,游离钙明显增多(P<0.01),细胞外Glu及GABA浓度明显升高(P<0.01);与模型组比较,TSG预处理24 h可以改善6-OHDA造成的细胞存活率的下降,其中12.5μmol·L-1的细胞保护作用最为明显(P<0.05),明显降低内游离钙含量,明显降低细胞外Glu及GABA浓度(P<0.05,P<0.01),TSG对其有明显的抑制作用。结论:TSG可能通过减轻钙超载及兴奋性毒性对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞起到保护作用。

关键词：二苯乙烯苷 6-羟基多巴胺钙离子氨基酸

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中医药防治肾性贫血的研究进展

中医药防治肾性贫血的研究进展

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第十二次全国中西医结合实验医学专业委员会暨第七次湖南省中西医结合神经科专业委员会学术年会

作者：黄雅薇赵宗江程明秀徐昌君北京中医药大学基础医学院细胞与生化实验室

肾性贫血(RA)是由复合性多因素造成慢性肾衰竭的最常见的合并症,主要由体内红细胞生成素(EPO)相对缺乏导致。现代医学应用人类重组红细胞生成素等方法治疗肾性贫血己取得较好疗效,但治疗价格昂贵,且存在较多不良反应。故众多中医学者从... 详细信息

肾性贫血(RA)是由复合性多因素造成慢性肾衰竭的最常见的合并症,主要由体内红细胞生成素(EPO)相对缺乏导致。现代医学应用人类重组红细胞生成素等方法治疗肾性贫血己取得较好疗效,但治疗价格昂贵,且存在较多不良反应。故众多中医学者从中医传统理论出发,结合临床辩证施治、积极探索中医药RA的中医治疗方法。目前中医药在RA的治疗上疗效显著、有一定的优势,取得了一定的进展。现就近年来有中医药防治肾性贫血的研究

关键词：肾性贫血中医药防治综述文献

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槲芪散抗CCl_4诱导大鼠肝纤维化的药效及对肝细胞增殖与凋亡的影响

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中西医结合肝病杂志 2013年第2期23卷 95-97,I0001页

作者：续畅刘泽洲李志红李健唐炳华牛建昭李军祥北京中医药大学基础医学院细胞生物化学实验室北京100029 北京中医药大学东直门医院北京中医药大学东方医院

目的:观察槲芪散抗四氯化碳(CCl4)诱发大鼠肝纤维化的疗效,初步探讨该药对肝细胞增殖和凋亡的影响。方法:腹腔注射"CCl4-橄榄油"混悬液制备大鼠肝纤维化模型;槲芪散(高、低两个剂量)灌胃给药,治疗时间4周;放免法测定大鼠血清... 详细信息

目的:观察槲芪散抗四氯化碳(CCl4)诱发大鼠肝纤维化的疗效,初步探讨该药对肝细胞增殖和凋亡的影响。方法:腹腔注射"CCl4-橄榄油"混悬液制备大鼠肝纤维化模型;槲芪散(高、低两个剂量)灌胃给药,治疗时间4周;放免法测定大鼠血清中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及纤粘连蛋白(FN)的含量,肝组织石蜡切片进行HE、Mallory、TUNEL(缺口末端标记技术)及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学显色。结果:肝纤维化大鼠血清中ColⅠ、HA、LN、FN含量均显著升高(P<0.05);阳性对照药(肝脾康)、槲芪散高剂量治疗组大鼠血清ColⅠ及槲芪散低剂量治疗组大鼠血清LN的含量显著下降(P<0.05);而HA及FN含量未见明显改变。组织病理学检测可见,肝脾康及槲芪散治疗组大鼠肝组织胶原含量显著减少、病理程度显著减轻;免疫组化结果显示肝脾康及槲芪散治疗组大鼠肝组织增殖细胞减少、凋亡细胞显著增多。结论:槲芪散抗实验性肝纤维化药效显著,其初步药理机制是抑制肝组织内细胞外基质的过度合成,抑制肝细胞的过度增殖,促进肝细胞的凋亡。

关键词：槲芪散/药效学肝纤维化四氯化碳增殖凋亡

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干姜治疗急性肺损伤的药效物质及作用机制

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中药药理与临床 2024年第3期40卷 74-83页

作者：朱萱萱于清源王心威李军梅孟硕任钧国彭勍刘建勋中国中医科学院西苑医院基础医学研究所中药药理北京市重点实验室北京100091 北京中医药大学西苑临床医学院北京100029 广东药科大学中医药研究院广州510006

目的:正交试验法优选干姜的乙醇回流提取工艺,分析鉴定干姜的化学成分,利用网络药理学、分子对接和实验验证研究策略,探讨干姜治疗急性肺损伤(ALI)的药效物质及作用机制。方法:以6-姜辣素含量和出膏率为指标,采用正交试验筛选乙醇浓度... 详细信息

目的:正交试验法优选干姜的乙醇回流提取工艺,分析鉴定干姜的化学成分,利用网络药理学、分子对接和实验验证研究策略,探讨干姜治疗急性肺损伤(ALI)的药效物质及作用机制。方法:以6-姜辣素含量和出膏率为指标,采用正交试验筛选乙醇浓度、溶剂倍量、提取时间和提取次数的最优水平,并进行验证。利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)在正、负离子模式下对干姜中化学成分进行定性分析;再对鉴定出来的化学成分进行网络药理学分析,获得干姜治疗ALI的核心成分、关键靶点和相关通路,采用分子对接技术验证核心成分与靶点蛋白的结合活性。通过脂多糖(LPS)诱导建立ALI模型,通过计算肺系数、观察肺组织切片来评估肺的损伤程度,测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子和氧化应激指标的含量,Western blot法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)及p-AKT1的蛋白表达。结果:最佳提取工艺为干姜加10倍量80%乙醇加热回流提取3次,每次1 h。通过LC-MS技术分析得到干姜提取液中45种化学成分,筛选后得到活性成分31个,与ALI疾病交集的靶点有139个。KEGG富集分析中共得到154条信号通路,如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、Ras信号通路等,大多与调节免疫性炎症有关。分子对接结果验证核心成分与关键靶点有较好结合力。HE染色结果显示,与正常对照组相比,模型对照组肺泡结构紊乱,肺泡间隙明显增宽并伴大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润,肺系数明显升高(P<0.01),TNF-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β的含量显著升高(P<0.01),髓过氧化物酶(MPO)含量显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)含量明显降低(P<0.05),肺组织中TNF-α及p-AKT1蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比,各给药组小鼠肺组织结构损伤均有所减轻,中性粒细胞及炎性细胞浸润减少,肺系数明显降低(P<0.05),TNF-α、IL-6、IL-1β、MPO、丙二醛(MDA)含量明显降低,SOD含量明显升高,肺组织中TNF-α及p-AKT1蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:干姜提取液对ALI的治疗作用显著,其作用机制可能与下调小鼠肺组织TNF-α及p-AKT1的蛋白表达,缓解炎症反应和氧化应激有关。

关键词：干姜急性肺损伤超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱网络药理学分子对接实验验证正交试验炎症因子蛋白激酶

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浅析中医学阴阳与性激素的辨证统一关系

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中医研究 2009年第3期22卷 1-3页

作者：王大伟牛建昭王继峰孙丽萍北京中医药大学基础医学院细胞生物化学实验室北京100029

阴阳学说是中国古代哲学对事物的高度抽象和分类概括,是用阴阳这个概念来解释自然界两种相互对立和相互消长的物质现象,并认为阴阳的对立和消长是事物本身所固有的,进而认为阴阳的对立和消长是宇宙的基本规律。这是中医学的理论基础。... 详细信息

阴阳学说是中国古代哲学对事物的高度抽象和分类概括,是用阴阳这个概念来解释自然界两种相互对立和相互消长的物质现象,并认为阴阳的对立和消长是事物本身所固有的,进而认为阴阳的对立和消长是宇宙的基本规律。这是中医学的理论基础。在中医学理论体系中,处处体现着阴阳学说的思想。阴阳学说被用以说明人体的组织结构、生理功能及病理变化,并用于指导疾病的诊断和治疗。[第一段]

关键词：中医学阴阳性激素辨证

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