检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中西医结合杂志 2010年第7期30卷 729-732页

作者：景姗顾立刚周芸李澎涛北京东直门医院消化内科北京100700 北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室

目的观察毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染靶细胞的影响。方法用MTT法及双抗体夹心ELISA法检测毒热平注射液低、中、高(2.1、8.5、17.0μg/mL)剂量对正常小鼠、感染流感病毒亚甲型鼠肺适应株(F... 详细信息

目的观察毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染靶细胞的影响。方法用MTT法及双抗体夹心ELISA法检测毒热平注射液低、中、高(2.1、8.5、17.0μg/mL)剂量对正常小鼠、感染流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的脾细胞数目、产生干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、及T细胞杀伤FM1感染巨噬细胞Ana-1功能的影响。结果毒热平注射液体外能抑制刀豆蛋白A(Con A)诱导的正常小鼠脾细胞的增殖,抑制Th2型细胞因子IL-10的产生,促进Th1型细胞因子IFN-γ的产生;能保护FM1感染的小鼠脾细胞,并抑制其产生Th2型细胞因子IL-10,而使Th1型细胞因子IFN-γ水平保持在一定的范围内;还能直接增强T细胞对FM1感染的靶细胞(Ana-1)的杀伤能力(P<0.05,P<0.01)。结论毒热平注射液体外作用于小鼠T细胞,可增强有利于抗FM1感染的免疫应答。

关键词：毒热平注射液流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1) T细胞体外实验

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毒热平注射液对甲型流感病毒H3N2体外感染细胞中TLR7信号通路的影响

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中华中医药杂志 2010年第2期25卷 194-197页

作者：牛旭艳张春晶顾立刚北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室北京100029

目的:观察甲型流感病毒H3N2感染人胚肾上皮细胞(HEK-293T)细胞及人肺腺癌上皮细胞(A549)细胞后,对NF-κB转录活性以及TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA的影响,探讨H3N2对体外感染细胞中TLR7信号通路的影响及清热解毒中药毒热平注射液的... 详细信息

目的:观察甲型流感病毒H3N2感染人胚肾上皮细胞(HEK-293T)细胞及人肺腺癌上皮细胞(A549)细胞后,对NF-κB转录活性以及TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA的影响,探讨H3N2对体外感染细胞中TLR7信号通路的影响及清热解毒中药毒热平注射液的干预作用。方法:采用MTT法体外检测各组药物对293T、A549细胞增殖的影响;H3N2感染293T细胞后,利用双荧光素酶报告系统,以利巴韦林、清开灵注射液为药物对照,检测毒热平注射液各浓度组细胞中NF-κB相对荧光素酶活性;H3N2感染A549细胞后,RT-PCR方法检测各组细胞中TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA水平。结果:MTT结果显示,毒热平、利巴韦林、清开灵注射液各浓度不影响细胞正常增殖(P>0.05)。报告基因结果显示,与细胞对照组相比,H3N2感染组细胞NF-κB转录活性显著增高(P<0.01);与H3N2感染组相比,利巴韦林0.5μg/mL,清开灵1/128稀释组,毒热平1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL组均可不同程度下调NF-κB的转录活性(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H3N2病毒组的TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA表达明显增高(P<0.01);与H3N2感染组相比,一定浓度的药物组TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA表达量明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:流感病毒H3N2攻击细胞可以显著上调TLR7受体的表达和核因子NF-κB转录活性,并引起下游相关靶基因的表达增多。毒热平注射液可以下调H3N2引起的TLR7信号通路的激活,抑制NF-κB的转录活性,减少下游炎性因子TNF-α、IL-8、IFN-β的表达。关键词:H3N2;毒热平注射液;NF-κB;双荧光素酶报告系统;TLR7;

关键词： H3N2 毒热平注射液 NF—κB 双荧光素酶报告系统 TLR7 信号转导

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毒热平注射液对巨噬细胞TIR信号通路的影响

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中国中药杂志 2010年第6期35卷 741-744页

作者：张艳丽王宁萍顾立刚李澎涛宁夏医科大学病原生物学与免疫学教研室宁夏银川750004 北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室北京100029

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞TIR(Toll/IL-1 receptors)信号传导通路的影响。方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10,1 mg.L-1含药维持... 详细信息

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞TIR(Toll/IL-1 receptors)信号传导通路的影响。方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10,1 mg.L-1含药维持液继续培养,分别于12,24 h弃细胞上清液并收集细胞,提取巨噬细胞RNA,进行实时定量PCR反应(RT-PCR),动态测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞TIR信号传导通路中各信号蛋白:Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(MyD88),IL-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子相关激酶6(TRAF6)和核因子κB(NF-κB)mRNA表达水平的影响。结果:毒热平注射液可剂量依赖性地下调病毒感染巨噬细胞TLR7,MyD88,IRAK4,TRAF6,NF-κB mRNA的表达水平。结论:毒热平注射液能通过调节TIR信号传导通路各信号蛋白的活性发挥抗病毒感染作用。

关键词： Ana一1 毒热平注射液流感病毒 TIR TLR7

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毒热平注射液对流感病毒感染的巨噬细胞分泌NO的影响

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中国免疫学杂志 2010年第5期26卷 445-448页

作者：张艳丽王宁萍顾立刚李澎涛宁夏医科大学病原生物学与免疫学系银川750004 北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室北京100029

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞分泌NO的影响。方法:用100TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用6个不同浓度的含药维持液继续培养,分别于6、12、24和3... 详细信息

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞分泌NO的影响。方法:用100TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用6个不同浓度的含药维持液继续培养,分别于6、12、24和36小时收集细胞上清液,用Griess试剂法检测其释放NO的水平。同时提取1μg/ml药物组作用24小时后的细胞mRNA和核蛋白,利用RealTimePCR法和Westernblot技术,检测毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平的影响。结果:在药物作用的不同时间,60、30和10μg/ml各剂量组均能显著下调病毒感染巨噬细胞NO的分泌水平,且具有剂量依赖性;该药可明显下调病毒感染巨噬细胞NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平。结论:毒热平可通过下调细胞核因子-κB活性,抑制病毒感染巨噬细胞NO的分泌,发挥抗病毒感染作用。

关键词：毒热平流感病毒巨噬细胞 NF-κB NO

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犀角地黄汤合银翘散对流感病毒性肺炎小鼠肺病毒滴度和肺组织病理改变的影响

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北京中医药大学学报 2010年第11期33卷 739-744,793页

作者：郝钰李季倩吴莹吴珺路广林黄启福北京中医药大学中医药防治病毒性疾病教育部重点实验室北京100029

目的观察经典合方犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠的治疗作用,分析病毒滴度与肺组织病理改变的关系。方法 ICR小鼠120只随机分为6组:正常组,模型组,犀角地黄汤合银翘散中药高、中、低剂量组,利巴韦林组,25μL 50LD50... 详细信息

目的观察经典合方犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠的治疗作用,分析病毒滴度与肺组织病理改变的关系。方法 ICR小鼠120只随机分为6组:正常组,模型组,犀角地黄汤合银翘散中药高、中、低剂量组,利巴韦林组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒鼠肺适应株感染的小鼠肺炎模型(除正常组外),感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃;中药高、中、低剂量组分别给予中药46、23、11.5 g/(kg.d)灌胃;利巴韦林组腹腔注射利巴韦林注射液0.1 g/(kg.d);各组均给药2次/d,连续给药7 d。每日观察小鼠的生存率、平均存活天数,体重、体温的变化至感染后14 d。BALB/c小鼠72只随机分为4组,正常组、模型组、中药中剂量组和利巴韦林组,在感染后的24、6、d分别取材,动态观察小鼠肺匀浆中病毒血凝滴度、肺组织切片在光镜和电镜下的病理改变。结果临床等效剂量(中剂量)的犀角地黄汤合银翘散可明显降低感染小鼠的死亡率,延长生存时间,增加体重和升高体温。感染组肺病毒滴度在第2天最高,随后显著下降,而肺组织病理改变在第6天达高峰,二者不同步。犀角地黄汤合银翘散在第2天可降低肺匀浆中的病毒滴度,第4天、第6天与模型组比无差异;在第6天可明显减轻感染小鼠肺组织炎症病变。结论犀角地黄汤合银翘散对小鼠流感病毒性肺炎有明显的治疗作用,直接的抗病毒增殖非其主要作用,可能主要通过抑制机体的炎症级联反应发挥作用。

关键词：犀角地黄汤合银翘散病毒性肺炎流感病毒病毒滴度病理小鼠

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黄芩主要成分体外抗甲型流感病毒作用的研究

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北京中医药大学学报 2010年第8期33卷 541-545页

作者：吴莹金叶智吴珺于雪飞郝钰北京中医药大学中医药防治病毒性疾病教育部重点实验室北京100029

目的比较黄芩的主要成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素体外抗甲型流感病毒FM1感染的作用,明确黄芩抗流感病毒的主要有效成分。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对狗肾细胞株(MDCK)的最大无毒浓度(TC0)及半数... 详细信息

目的比较黄芩的主要成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素体外抗甲型流感病毒FM1感染的作用,明确黄芩抗流感病毒的主要有效成分。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对狗肾细胞株(MDCK)的最大无毒浓度(TC0)及半数中毒浓度(TC50),通过细胞病变效应(CPE)法观察药物对病毒致细胞病变作用的影响。MTT法检测药物不同浓度的抗病毒有效率,Probit回归法计算黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对病毒感染的半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI),荧光法检测黄芩苷对病毒神经氨酸酶活力的影响。结果黄芩苷对流感病毒所致的细胞病变作用有明显的抑制作用,当黄芩苷浓度在0.0156～0.1250g/L时,细胞存活率明显高于病毒感染组,其中以0.1250g/L组的细胞存活率最高,抗病毒有效率达94.6%,其IC50为0.0162g/L,TI为21.34;黄芩素对流感病毒所致的细胞病变有一定的抑制作用,当黄芩素浓度在0.0860g/L时,抗病毒有效率达48.72%,其IC50为0.0778g/L,TI为8.89;汉黄芩素对流感病毒所致的细胞病变无抑制作用,其IC50为0.0236g/L,TI为0.051。当黄芩苷浓度?0.0313g/L时,能明显降低病毒神经氨酸酶的活力。结论黄芩主要成分中抗流感病毒的作用为黄芩苷>黄芩素>汉黄芩素,说明黄芩抗流感病毒的主要有效成分是黄芩苷。

关键词：黄芩苷黄芩素汉黄芩素流感病毒体外

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利用生物芯片技术检测人参皂苷Rg1对小鼠树突状细胞功能调控相关基因表达的影响

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中国免疫学杂志 2010年第12期26卷 1086-1090页

作者：周英武彭桂英顾立刚殷胜骏北京中医药大学中医药防治病毒性疾病教育部重点实验室北京100029

目的:利用基因芯片技术检测人参皂苷Rg1对小鼠骨髓来源DC细胞功能调控相关基因表达的影响。方法:分离C57小鼠骨髓细胞,经GM-CSF、IL-4体外诱导培养6天的未成熟DC细胞(iDC)经不同因素处理并分为:对照组(Ⅰ)、人参皂苷Rg1组(Ⅱ)、内毒素(L... 详细信息

目的:利用基因芯片技术检测人参皂苷Rg1对小鼠骨髓来源DC细胞功能调控相关基因表达的影响。方法:分离C57小鼠骨髓细胞,经GM-CSF、IL-4体外诱导培养6天的未成熟DC细胞(iDC)经不同因素处理并分为:对照组(Ⅰ)、人参皂苷Rg1组(Ⅱ)、内毒素(LPS)组(Ⅲ)、Rg1+LPS组(Ⅳ),24小时后收集各组细胞,抽提总RNA,利用树突状和抗原呈递细胞基因芯片对细胞功能相关基因进行检测。结果:(Ⅱ/Ⅰ)上调≥2倍基因23个,下调≥2倍基因45个;(Ⅲ/Ⅰ)上调≥2倍基因15个,下调≥2倍基因47个;(Ⅳ/Ⅱ)上调≥2倍基因35个,下调≥2倍基因15个;(Ⅳ/Ⅲ)上调≥2倍基因37个,下调≥2基因10个。这些基因功能主要涉及细胞因子分泌及其受体表达、抗原摄取、抗原提呈、细胞表面受体、信号传导。结论:人参皂苷Rg1对DC作用涉及多个基因的表达调控,这些基因控制并影响着DC功能、分化和成熟,为进一步寻找药物靶点提供了线索。

关键词：人参皂苷Rg1 树突状细胞基因芯片

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毒热平注射液对吞噬细胞系Ana-1核因子-κB的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第10期26卷 996-997,1001页

作者：张艳丽王宁萍顾立刚李澎涛宁夏医科大学病原生物学与免疫学教研室宁夏银川750004 北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室北京100029

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞核因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法:用100TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10mg/L和1mg/L浓度含药维持液继续培养... 详细信息

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞核因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法:用100TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10mg/L和1mg/L浓度含药维持液继续培养,分别于12h和24h弃细胞上清液并收集细胞,提取巨噬细胞RNA和核蛋白,进行实时定量PCR反应(RT-PCR)和Western blot实验,动态测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(MyD88)mRNA和NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平的影响。结果:毒热平注射液可剂量依赖性地下调病毒感染巨噬细胞TLR7、MyD88mRNA的表达、NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平。结论:毒热平注射液能通过调节MyD88依赖的信号传导通路下调细胞核因子-κB活性发挥抗病毒感染作用。

关键词：毒热平流感病毒巨噬细胞 NF-κB TLR7

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毒热平注射液对病毒感染巨噬细胞IRAK4表达的影响

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时珍国医国药 2010年第6期21卷 1432-1433页

作者：张艳丽李秀萍王宁萍李澎涛宁夏医科大学宁夏银川750004 宁夏医科大学附属医院宁夏银川750004 北京中医药大学中医药抗病毒教育部重点实验室北京100029

目的研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1表达IRAK4(IL-1 receptor associated ki-nase 4,IRAK4)的影响。方法用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10μg/ml浓... 详细信息

目的研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1表达IRAK4(IL-1 receptor associated ki-nase 4,IRAK4)的影响。方法用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10μg/ml浓度含药维持液继续培养,于12 h弃细胞上清液并收集细胞,提取细胞RNA和核蛋白,进行实时定量PCR反应(RT-PCR)和Western-blot实验,分别测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞IRAK4 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平的影响。结果毒热平注射液可下调病毒感染巨噬细胞IRAK4 mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平。结论毒热平注射液的抗病毒作用可能与下调依赖MyD88的信号传导通路中IRAK4的表达有关。

关键词：毒热平流感病毒巨噬细胞 IRAK4

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犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞致炎物质的研究

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中华中医药杂志 2010年第12期25卷 1974-1978页

作者：吴莹金叶智孟建吴珺于雪飞郝钰北京中医药大学中医药防治病毒性疾病教育部重点实验室北京100029 北京市王府中西医结合医院北京102209

目的:研究犀角地黄汤合银翘散含药血清对甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后产生的致炎物质的影响。方法:运用中药血清药理学的方法制备等效剂量(13.8g/kg)的大鼠犀角地黄汤合银翘散含药血清。FM1感染NR8383细... 详细信息

目的:研究犀角地黄汤合银翘散含药血清对甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后产生的致炎物质的影响。方法:运用中药血清药理学的方法制备等效剂量(13.8g/kg)的大鼠犀角地黄汤合银翘散含药血清。FM1感染NR8383细胞1h后,加入15%的犀角地黄汤合银翘散含药血清,同时设正常细胞和病毒对照组。药物作用后6、12、24h,ELISA检测细胞上清中炎症细胞因子TNF-α、MCP-1的含量,放免法检测细胞上清中炎性介质PGE2、PLA2、LTB4的含量;药物作用后8、24、36、48h,生化法检测细胞内自由基NO、iNOS含量;药物作用后24h,RealtimePCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平。结果:犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制了FM1感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P<0.05),抑制了NO、iNOS的产生(P<0.05),降低了PGE2、PLA2、LTB4、MDA的含量(P<0.05)。结论:犀角地黄汤合银翘散含药血清明显抑制了流感病毒感染后肺泡巨噬细胞内炎性细胞因子、炎性介质及自由基的产生,具有抗炎作用。

关键词：犀角地黄汤合银翘散含药血清流感病毒肺泡巨噬细胞致炎物质

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