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泽兰大孔树脂洗脱部位中原儿茶醛、咖啡酸和迷迭香酸含量的反相高效液相色谱法测定

时珍国医国药 2011年第2期22卷 417-419页

作者：聂波李佳彦王硕仁刘勇闫彦芳张壮北京中医药大学东直门医院北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室北京100700 北京中医药大学中药学院北京100102

目的建立同时测定泽兰中原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸的高效液相色谱含量测定方法,并对泽兰大孔树脂洗脱部位中的这3种酚酸的含量进行了测定。方法采用Cadenza（5）CD-C18（250 mm×4.6 mm×5μm）分析柱;流动相为乙腈/水系统,... 详细信息

目的建立同时测定泽兰中原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸的高效液相色谱含量测定方法,并对泽兰大孔树脂洗脱部位中的这3种酚酸的含量进行了测定。方法采用Cadenza（5）CD-C18（250 mm×4.6 mm×5μm）分析柱;流动相为乙腈/水系统,两相均含有0.75%的甲酸,以有机相10%起始,保持5 min后,于17 min内线性变为13%,于27 min内线性变为18%,于47 min内线性变为23%,于65 min内线性变为55%;流速1.0 ml/min;柱温30℃;于325 nm,280 nm双波长下检测。结果原儿茶醛（280 nm）、咖啡酸（325 nm）和迷迭香酸（325 nm）分别在0.01~2μg、0.01~2μg和0.04~8μg内呈良好的线性关系。3个成分相应的富集部位含量分别达到原儿茶醛0.141%,咖啡酸1.092%,迷迭香酸11.101%。结论该方法灵敏快速,准确可靠,可用于对泽兰及其大孔树脂洗脱工艺过程进行质量控制。

关键词：泽兰原儿茶醛咖啡酸迷迭香酸高效液相色谱法

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LRRC19识别肿瘤坏死因子α等炎症因子参与肾脏的免疫应答

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南开大学学报（自然科学版） 2011年第1期44卷 60-65页

作者：柴立民张园车永哲杨荣存南开大学医学院分子免疫学实验室天津300071 北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700

研究一个已鉴定的富亮氨酸重复结构(LRR)蛋白家族成员LRRC19,确定其组织分布及在肾组织中的表达和定位,并对其功能进行初步研究.通过RT-PCR技术检测LRRC19 mRNA在小鼠各组织中的分布;利用特异性探针mRNA杂交技术对该基因在肾组织中的表... 详细信息

研究一个已鉴定的富亮氨酸重复结构(LRR)蛋白家族成员LRRC19,确定其组织分布及在肾组织中的表达和定位,并对其功能进行初步研究.通过RT-PCR技术检测LRRC19 mRNA在小鼠各组织中的分布;利用特异性探针mRNA杂交技术对该基因在肾组织中的表达进行精确定位;免疫荧光实验分析该蛋白的亚细胞定位;通过分泌型碱性磷酸酶(Secreted Alkaline Phosphatase SEAP)检测技术,观察转染LRRC19后细胞中转录因子核因子(NuclearFactor NF)-κB和激活蛋白(Activator Protein AP)-1的活性改变,并探讨肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor TNF)α识别LRRC19对NF-κB信号通路的影响.RT-PCR和mRNA原位杂交实验结果显示,LRRC19 mRNA主要在肾组织中表达,并集中于肾小管上皮细胞,在脾和小肠组织中亦有表达;免疫荧光结果显示,FITC标记的LRRC19-V5融合蛋白位于细胞膜上,确定其为跨膜蛋白;LRRC19在细胞内异位表达可以不同程度的增强NF-κB和AP-1的活性,TNFα和IL-1β刺激后,NF-κB活性明显升高,TNFa刺激后表现尤为显著.作为存在于肾小管上皮细胞中的跨膜受体LRRC19,可通过识别病原体分子和致炎细胞因子,介导信号传导,启动相关细胞因子转录,调节肾组织的免疫防御作用.

关键词： LRRC19 跨膜蛋白受体肾小管上皮细胞肿瘤坏死因子α 免疫应答

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黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤P、E选择素基因转录的影响

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北京中医药大学学报 2011年第3期34卷 177-180页

作者：徐冰朱海燕高永红刘蓓朱陵群陈立新北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700 北京师范大学中药资源与资源药物研究所北京中医药大学

目的观察黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)缺血再灌注损伤P、E选择素mRNA转录的影响,探讨其对缺血再灌注损伤心肌的保护机制。方法将由原代培养至第5代的HCEMC随机分为正常组,模型组,黄芪多糖低(25 mg/L)、高(100 mg/L)剂量组,吡... 详细信息

目的观察黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)缺血再灌注损伤P、E选择素mRNA转录的影响,探讨其对缺血再灌注损伤心肌的保护机制。方法将由原代培养至第5代的HCEMC随机分为正常组,模型组,黄芪多糖低(25 mg/L)、高(100 mg/L)剂量组,吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC,50μmol/L)组。以体外缺氧缺糖再复氧复糖建立缺血再灌注损伤模型,荧光实时定量PCR检测P、E选择素基因转录。结果模型组P、E选择素mRNA转录较正常组明显增加(P<0.01),黄芪多糖低、高剂量组较模型组则明显降低(P<0.05)。结论黄芪多糖可抑制缺血再灌注HCMEC中P、E选择素的基因转录,从而减少再灌注损伤时微血管内皮细胞的炎症黏附。

关键词：黄芪多糖 P选择素 E选择素再灌注损伤

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井穴放血治疗急性咽炎的临床观察

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辽宁中医杂志 2011年第9期38卷 1831-1832页

作者：李然伟徐冰刘颖北京中医药大学附属护国寺中医医院针灸科北京100035 北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700 北京中医药大学东直门医院针灸科北京100700

通过井穴点刺放血治疗急性咽炎的临床研究,探讨其治疗急性咽炎的临床疗效,并筛选具有较佳疗效的穴位。将60例患者随机分为少商、商阳、中冲、少冲、关冲、少泽6组,每组10例,根据每治疗组的不同穴位放血治疗,每日1次,共3天,进行症状积分... 详细信息

通过井穴点刺放血治疗急性咽炎的临床研究,探讨其治疗急性咽炎的临床疗效,并筛选具有较佳疗效的穴位。将60例患者随机分为少商、商阳、中冲、少冲、关冲、少泽6组,每组10例,根据每治疗组的不同穴位放血治疗,每日1次,共3天,进行症状积分和疗效判定。各组组内治疗前后症状积分有显著差异(P<0.0001),表明各组在缓解急性咽炎的症状方面均有疗效;组间比较中冲组、少商组优于其他组(P<0.001),表明中冲和少商穴在井穴选穴上具有优越性。疗效上总显效率在18.3%,总有效率88.3%,得知井穴放血对治疗急性咽炎有很好的疗效,其中少商、中冲组总有效率100%,优于其它组。结论:井穴放血疗法能较好的改善急性咽炎患者症状,提高疗效,其中中冲、少商效果较好。

关键词：急性咽炎五腧穴井穴

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益髓生血颗粒对珠蛋白生成障碍性贫血患者SCF及c-kit基因表达的影响

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辽宁中医杂志 2011年第7期38卷 1293-1295页

作者：柴立民吴志奎北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700 中国中医科学院广安门医院分子生物学实验室北京100053

目的:探讨益髓生血颗粒治疗珠蛋白生成障碍性贫血的作用机制。方法:观察20例患儿治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、网织红细胞计数(Ret)、胎儿血红蛋白(HbF)的改变;选取10例有效病例,通过实时荧光定量PCR技术探讨该药对珠蛋白生成障... 详细信息

目的:探讨益髓生血颗粒治疗珠蛋白生成障碍性贫血的作用机制。方法:观察20例患儿治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、网织红细胞计数(Ret)、胎儿血红蛋白(HbF)的改变;选取10例有效病例,通过实时荧光定量PCR技术探讨该药对珠蛋白生成障碍性贫血患者骨髓有核细胞SCF和c-kit基因表达的影响。结果:治疗后患者各项血液学参数均有改善;骨髓有核细胞c-kit基因表达明显升高,与治疗前比较差异有显著性(P<0.05);SCF基因表达无明显改变。结论:益髓生血颗粒可以明显改善患者的临床症状,通过SCF/c-kit信号传导途径,调节红系祖细胞及其它造血细胞的增殖和分化过程,来达到治疗目的。

关键词：珠蛋白生成障碍性贫血干细胞因子及其受体SCF/c-kit 益髓生血颗粒

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益髓生血方对珠蛋白生成障碍性贫血患者红系特异反式作用因子基因表达的影响

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北京中医药大学学报 2011年第3期34卷 197-200页

作者：柴立民陈惠民吴志奎北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700 中国中医科学院眼科医院中国中医科学院广安门医院

目的探讨益髓生血方治疗珠蛋白生成障碍性贫血的作用机制。方法观察30例患儿用益肾活血方(山萸肉、熟地黄、补骨脂、何首乌、阿胶、鳖甲、黄芪等)治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、网织红细胞计数(Ret)、胎儿血红蛋白(HbF)的改变;通... 详细信息

目的探讨益髓生血方治疗珠蛋白生成障碍性贫血的作用机制。方法观察30例患儿用益肾活血方(山萸肉、熟地黄、补骨脂、何首乌、阿胶、鳖甲、黄芪等)治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、网织红细胞计数(Ret)、胎儿血红蛋白(HbF)的改变;通过实时荧光定量PCR检测该药对10例患者骨髓有核细胞中转录因子GATA模序结合蛋白(GATA-1和GATA-2)、红细胞Krüppel样因子(EKLF)、与EKLF结构相近的红系特异转录因子(FKLF)和红细胞核因子(NF-E2)基因表达的影响。结果治疗后患者各项血液学参数均有提高,与治疗前比较差异有显著性(P<0.01);骨髓有核细胞GATA-1、GATA-2和NF-E2基因表达明显升高,与治疗前比较差异有显著性(P<0.01、P<0.05);治疗前后EKLF、FKLF基因表达没有明显差异。结论益髓生血方可以改善患者的临床症状,通过调节红系特异反式作用因子基因的表达、调控珠蛋白基因簇的表达、促进有效红细胞生成而达到治疗该病的作用,这也是益髓生血方作用的分子机制之一。

关键词：珠蛋白生成障碍性贫血益髓生血方红系特异反式作用因子基因表达

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生脉注射液联合血塞通注射液对心肌梗死大鼠室颤阈值和心肌连接蛋白43表达的影响

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中西医结合学报 2011年第7期9卷 775-782页

作者：吴爱明张冬梅娄利霞翟建英吕晞滢柴立民王硕仁北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部和北京市重点实验室北京100700 北京中医药大学东直门医院国家中医药管理局心脉病证益气活血重点研究室北京100700 中药复方新药开发国家工程中心北京100079

目的:探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠室颤阈值、心脏大小、心肌梗死百分比及心肌缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达的影响。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型... 详细信息

目的:探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠室颤阈值、心脏大小、心肌梗死百分比及心肌缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达的影响。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血组和卡托普利组,采用结扎冠状动脉前降支的方法建立MI模型,假手术组只穿线,不结扎。于造模成功后第2天开始给予相应药物治疗,疗程为1个月。治疗结束后,采用在体心脏电刺激法检测心脏室颤阈值,称取全心质量后计算心脏质量指数(全心质量/体质量),图像分析测量左室内径和心肌梗死百分比,实时荧光定量聚合酶链式反应检测心肌Cx43mRNA的表达,免疫组织化学法检测心肌Cx43蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠室颤阈值显著降低,心脏质量指数和左室内径明显增大,心肌Cx43mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组和卡托普利组室颤阈值显著提高,心脏质量指数、左室内径和心肌梗死百分比均明显减小(P<0.05或P<0.01)。益气活血组Cx43mRNA和蛋白的表达水平均显著提高(P<0.05或P<0.01),而卡托普利组仅Cx43蛋白表达的光密度均值和综合光密度均值有明显的提高(P<0.05)。益气活血中药提高MI大鼠心肌Cx43mRNA和蛋白表达的作用优于卡托普利(P<0.05)。结论:生脉注射液联合血塞通注射液能提高MI大鼠心脏室颤阈值,其机制与改善MI后心脏结构重构和减轻心肌Cx43的表达有关。

关键词：生脉注射液血塞通注射液心肌梗死室颤阈值连接蛋白43 心室重构大鼠

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中医药干预急性心脑血管事件的研究思路探析

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北京中医药大学学报（中医临床版） 2011年第6期18卷 13-14页

作者：肖珉张为赵勇王亚红谢颖桢王硕仁郭维琴王显北京中医药大学东直门医院心血管科北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室中医内科学北京市普通高校重点实验室北京100700

在心脑血管疾病的治疗得到快速发展的今天,人类面临的新的挑战是预防急性心脑血管事件的发生。如何使高血压、高脂血症、糖尿病等高危人群多重危险因素控制达标,从而使急性心脑血管事件发生率下降已经成为新的研究热点。心脑血管疾病已... 详细信息

在心脑血管疾病的治疗得到快速发展的今天,人类面临的新的挑战是预防急性心脑血管事件的发生。如何使高血压、高脂血症、糖尿病等高危人群多重危险因素控制达标,从而使急性心脑血管事件发生率下降已经成为新的研究热点。心脑血管疾病已占我国人口死因的首位,北京地区也不例外,

关键词：急性心脑血管事件危险因素早期干预研究思路中医药

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缺血性心脑血管事件高危因素的中医干预研究

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中国医药指南 2011年第27期9卷 5-5,7页

作者：肖珉张为赵勇王亚红谢颖桢王硕仁郭维琴王显北京中医药大学东直门医院心血管科北京100700 北京市普通高校重点实验室(中医内科学) 北京100700 中医内科学教育部重点实验室(北京中医药大学) 北京100700

目的近30年,我国人群心脑血管病的发病率和病死率呈现逐年上升趋势,且发病年龄提前。现代医学已进入"强化降脂、降压、降糖"时代,并已经成为新的研究热点。随着大量缺血性心脑血管事件危险因素的发现,对其防治的重点"前... 详细信息

目的近30年,我国人群心脑血管病的发病率和病死率呈现逐年上升趋势,且发病年龄提前。现代医学已进入"强化降脂、降压、降糖"时代,并已经成为新的研究热点。随着大量缺血性心脑血管事件危险因素的发现,对其防治的重点"前移"成为心脑血管疾病防治的重要研究课题之一。本课题旨在探讨缺血性心脑血管事件高危因素的中医证候特点,为早期干预治疗提供依据。方法中老年人群是多重危险因素聚集发生率较高的特定群体,对该人群进行横断面调查问卷研究并进行前瞻性追踪分析,对比分析观察缺血性心脑血管病人群体与健康人群所合并危险因素的数目,症候学特点以及舌象,脉象特点。经多元回归统计分析,得出结论。结果本课题组目前阶段研究结果表明,急性缺血性心脑血管事件发生前"有征可循",中医证候出现相关规律和特点,其发生存在共同的发病病机"风""痰""瘀"。结论对"风""痰""瘀"三要素进行中医早期的综合干预,在辨证治疗基础上及早给予熄风、化痰、活血干预,可望起到"既病防变"的作用。

关键词：缺血性心脑血管事件危险因素早期干预中医

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活血益气方及其拆方药物血清对VEGF165转染脐静脉内皮细胞分泌MMP-9,MMP-2的影响

活血益气方及其拆方药物血清对VEGF165转染脐静脉内皮细胞分泌MMP...

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第二届全国中西医结合心血管病中青年论坛暨第二届黄河心血管病防治论坛

作者：张冬梅娄利霞吴爱明吕晞滢孙逸坤王硕仁北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室

目的:探讨活血益气方及其拆方含药动物血清对pcDNA3.1-VEGF质粒转染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分泌基质金属蛋白酶2（MMP-2）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）的影响。方法:构建pcDNA3.1-VEGF重组质粒,采用Fugene HD转染试剂按3:2比例将质粒... 详细信息

目的:探讨活血益气方及其拆方含药动物血清对pcDNA3.1-VEGF质粒转染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分泌基质金属蛋白酶2（MMP-2）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）的影响。方法:构建pcDNA3.1-VEGF重组质粒,采用Fugene HD转染试剂按3:2比例将质粒瞬时转染至HUVEC中。制备活血益气方及其拆方含药大鼠血清、生理盐水正常血清,以5%药物血清作用于转染后的HUVEC,Western Blot法检测血管内皮生长因子（VEGF）的表达,ELISA法测定MMP-2,MMP-9的表达。结果:（1）活血益气方组VEGF蛋白表达高于生理盐水组,与之比较,有统计学差异。活血方组、益气方组VEGF蛋白表达低于活血益气方组,与之比较,有统计学差异。（2）活血益气方组、活血方组MMP-2含量高于生理盐水组,与之比较,有统计学差异。益气方组MMP-2含量低于活血益气方组,与之比较有统计学差异。活血方组MMP-2含量虽高于活血益气方组,但与之比较,未见统计学差异。（3）活血益气方组、活血方组、益气方组MMP-9含量均高于生理盐水组,仅活血益气方组、活血方组与之比较有统计学差异。活血方组、益气方组MMP-9含量低于活血益气方组,与之比较,均具有统计学差异。结论:活血方可以促进转染后HUVEC细胞分泌MMP-2,MMP-9;益气方则未见促进转染后HUVEC细胞分泌MMP-2,MMP-9的作用。活血益气方不仅可以促进转染后HUVEC细胞表达VEGF蛋白,还可以促进其分泌MMP-2和MMP-9。推测活血益气方治疗性血管生成作用机制可能与其促进内皮细胞分泌MMP,从而促进内皮细胞迁移,提高血管通透性有关。活血方药在这方面起主要作用。

关键词：活血益气方 HUVEC VEGF165质粒转染基质金属蛋白酶

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