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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 256-261页

作者：石新兰凌允礼侯健存中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理室北京100005

目的　以小鼠肺泡血管炎动物模型为研究对象，证明亚硒酸钠及其它抗氧化剂，可通过抑制补体—中性粒细胞（ＰＭＮ）—活性氧（ＲＯＳ）正反馈活化环的机制抑制炎症反应。方法　以牛血清白蛋白致敏昆明小鼠建立肺泡Ａｒｔｈｕｓ反应性血... 详细信息

目的　以小鼠肺泡血管炎动物模型为研究对象，证明亚硒酸钠及其它抗氧化剂，可通过抑制补体—中性粒细胞（ＰＭＮ）—活性氧（ＲＯＳ）正反馈活化环的机制抑制炎症反应。方法　以牛血清白蛋白致敏昆明小鼠建立肺泡Ａｒｔｈｕｓ反应性血管炎（即急性肺泡炎）的动物模型，观察口服补体活化抑制剂亚硒酸钠或抗氧化剂类黄酮（ｆｌａｖｏｎｏｉｄ）和维生素Ｅ阻断补体活化正反馈环的运转，以抑制小鼠急性肺泡炎的发生（观察补体活化及释放的活性氧在炎症区ＰＭＮ上的荧光组化表现）。结果　以上３种补体活化抑制剂及抗氧化剂能在不同程度上抑制小鼠肺泡Ａｒｔｈｕｓ血管炎的发生，尤以３种抗氧化剂联合应用效果更佳，其抑制率可达７５％（Ｐ＜０．０１）。结论　亚硒酸钠抑制补体的活化、类黄酮及维生素Ｅ的抗氧化作用可以通过抑制补体活化反馈机制控制炎症应答。

关键词：亚硒酸钠抗氧化剂活性氧肺泡血管炎实验研究

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人白细胞介素-15 cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的高效稳定表达

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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 293-297页

作者：薛莉崔莲仙何维巴德年中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学室北京100005

目的　在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中表达人白细胞介素１５（ＩＬ１５），为ＩＬ１５的功能研究提供有利条件。方法　采用ＰＣＲ技术扩增人ＩＬ１５编码区ｃＤＮＡ片段，构建重组真核表达载体，再以脂质体法转染至ＣＨＯ ... 详细信息

目的　在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中表达人白细胞介素１５（ＩＬ１５），为ＩＬ１５的功能研究提供有利条件。方法　采用ＰＣＲ技术扩增人ＩＬ１５编码区ｃＤＮＡ片段，构建重组真核表达载体，再以脂质体法转染至ＣＨＯ细胞进行表达，鉴定表达产物的生物学活性。结果　共获得８株高效表达ＩＬ１５的阳性克隆，其平均活性为（３１８５４±３２７２）Ｕ／（１０６ｃｅｌｌｓ·ｄ），稳定传代６个月后仍保持其表达活性。结论　人ＩＬ１５

关键词：白细胞介素15 卵巢细胞真核基因表达 CHO

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γδT细胞的抗原识别机制

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中国免疫学杂志 1999年第10期15卷 433-435页

作者：何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫室北京100005

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短重复序列PCR产物变性胶电泳影子带新解——正负链电泳行为的差异

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中华医学遗传学杂志 1999年第5期16卷 328-330页

作者：赵红珊黄尚志李辉梁承宇袁波中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室北京100005

目的　探讨短重复序列ＰＣＲ产物变性胶的电泳影子带形成机理，并设法消除影子带。方法采用ＰＣＲ和不对称ＰＣＲ，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳观察影子带产生的情况。结果　利用不对称ＰＣＲ，某些二核苷酸（ＣＡ）ｎ ... 详细信息

目的　探讨短重复序列ＰＣＲ产物变性胶的电泳影子带形成机理，并设法消除影子带。方法采用ＰＣＲ和不对称ＰＣＲ，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳观察影子带产生的情况。结果　利用不对称ＰＣＲ，某些二核苷酸（ＣＡ）ｎ重复序列的影子带减少一半，四核苷酸重复序列的影子带消除；正负链的电泳速度有差异。结论　正负链电泳行为的差异是影子带产生的原因之一，利用不对称ＰＣＲ可部分或完全消除影子带。

关键词：遗传病诊断聚合酶链反应影子带不对称

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甲状旁腺素对鼠成骨细胞胶原合成的影响

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中华医学杂志 1999年第10期79卷 785-786页

作者：韩志岩程锦轩刘景生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室北京100005

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舒喘灵对缺氧大鼠肺动脉高压和肺组织肾上腺素能β_2受体mRNA表达的影响

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中国病理生理杂志 1999年第3期15卷 193-196页

作者：丁耀贤王晓芳薛全福王立荣斯琴中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理研究室

目的：研究β２激动剂舒喘灵对缺氧大鼠肺动脉高压及肺β２受体ｍＲＮＡ的作用。方法：常压缺氧４周，同时用舒喘灵灌胃（５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），用肺动脉插管测压，用ＲＴ－ＰＣＲ术测肺β２受体ｍＲＮＡ。结果：缺氧同... 详细信息

目的：研究β２激动剂舒喘灵对缺氧大鼠肺动脉高压及肺β２受体ｍＲＮＡ的作用。方法：常压缺氧４周，同时用舒喘灵灌胃（５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），用肺动脉插管测压，用ＲＴ－ＰＣＲ术测肺β２受体ｍＲＮＡ。结果：缺氧同时给舒喘灵可减轻缺氧大鼠肺动脉高压、右心室压及右心室肥厚，同时使降低的β２受体ｍＲＮＡ回升到对照水平，动脉血氧分压不受影响，对体动脉压无明显作用。结论：舒喘灵能防止缺氧引起的肺动脉高压和肺肾上腺素能β２受体ｍＲＮＡ水平的降低。

关键词：肺动脉高压缺氧舒喘灵肾上腺素能 β2受体

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血管紧张素Ⅱ对血管内皮细胞整合素β3表达的影响

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中国病理生理杂志 1999年第3期15卷 200-202页

作者：王华沈传陆郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理教研室

目的和方法：本实验采用细胞ＥＬＩＳＡ和ＲＴ－ＰＣＲ的方法分别从蛋白质和ｍＲＮＡ水平对血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）作用下的内皮细胞表面整合素β３的表达进行检测。结果：１０－８ｍｏｌ／Ｌ～１０－５ｍｏｌ／Ｌ的Ａｎｇ－Ⅱ在蛋... 详细信息

目的和方法：本实验采用细胞ＥＬＩＳＡ和ＲＴ－ＰＣＲ的方法分别从蛋白质和ｍＲＮＡ水平对血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）作用下的内皮细胞表面整合素β３的表达进行检测。结果：１０－８ｍｏｌ／Ｌ～１０－５ｍｏｌ／Ｌ的Ａｎｇ－Ⅱ在蛋白质水平能够促进内皮细胞整合素β３表达（Ｐ＜０．０５），且呈剂量依赖性。１０－６ｍｏｌ／Ｌ的Ａｎｇ－Ⅱ作用培养的人脐静脉内皮细胞１８ｈ后，细胞整合素β３ｍＲＮＡ量为正常对照组的１５倍。结论：提示Ａｎｇ－Ⅱ促进内皮细胞表面整合素β３的表达可能是单核细胞和内皮细胞之间粘附功能增加的机制之一。

关键词：血管紧张素Ⅱ 血管内皮细胞整合素

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反转录病毒载体介导的人β-珠蛋白基因在小鼠体内整合和表达的实验研究

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中华医学杂志 1999年第2期79卷 121-124页

作者：翟锦彬刘德培王晶陈迪郑勇梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨反转录病毒载体介导的携带小片段５′ＨＳ２增强子的β珠蛋白基因在小鼠体内整合与表达状态，对能否应用于临床地中海贫血基因治疗作出初步的评价。方法用“乒乓”超感染方法筛选具有较高病毒滴度的单向性产病毒细胞系，采用... 详细信息

目的探讨反转录病毒载体介导的携带小片段５′ＨＳ２增强子的β珠蛋白基因在小鼠体内整合与表达状态，对能否应用于临床地中海贫血基因治疗作出初步的评价。方法用“乒乓”超感染方法筛选具有较高病毒滴度的单向性产病毒细胞系，采用回体（ｅｘｖｉｖｏ）基因转移策略，分析人β珠蛋白基因在小鼠体内的整合及表达。结果病毒重组体的病毒滴度在“乒乓”超感染后有明显提高，最高病毒滴度约为１×１０６ＣＦＵ／ｍｌ；在小鼠ＣＦＵＳ１２（第１２天脾结节）中检测到２个重组体中人β珠蛋白基因的整合，表达水平约为内源性鼠α珠蛋白基因的０５％～５％。在２只长期造血重建小鼠的骨髓、脾、胸腺及另一只小鼠的骨髓及脾中整合有人β珠蛋白基因，在一只重建小鼠的骨髓和脾中有人β珠蛋白基因表达，约为鼠α珠蛋白基因的７％。结论反转录病毒载体介导的人β珠蛋白基因可稳定整合在小鼠骨髓造血干细胞中。

关键词：珠蛋白基因表达 β地中海贫血

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逆转录病毒载体介导诱导型NO合酶在神经细胞中表达

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1999年第3期31卷 15-20页

作者：臧梦维沈琦汪青刘景生彭学贤中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院、医学分子生物学国家重点实验室中国科学院微生物研究所

为了深入研究诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）基因表达产物在阿片耐受和依赖中作用，采用脂质体介导基因转染技术，将ｉＮＯＳｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体导入ＮＧ１０８... 详细信息

为了深入研究诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）基因表达产物在阿片耐受和依赖中作用，采用脂质体介导基因转染技术，将ｉＮＯＳｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体导入ＮＧ１０８１５神经细胞，获得Ｇ４１８抗性克隆，命名为ＮＧＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞。ＤＮＡ印迹杂交、ＰＣＲ扩增及ＲＴＰＣＲ和蛋白质免疫印迹杂交分析，证实ＮＧＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞有外源ｉＮＯＳ基因整合、转录和表达；ＮＡＤＰＨ黄递酶（ＮＡＤＰＨｄｉａｐｈｏｒａｓｅ，ＮＡＤＰＨｄ）组化和免疫组化染色表明，胞质中有ｉＮＯＳ基因功能表达；酶催化活性和ＮＯ－２含量均明显升高；重组酶具有天然酶生化和药理特性，即ＮＡＤＰＨ依赖性，Ｃａ２＋非依赖性和Ｃａ２＋螯合剂抗性以及ＮＯＳ抑制剂使酶活性降低，呈剂量相关性；ｉＮＯＳ基因表达使ＮＯｃＧＭＰ系统上调。成功地建立ｉＮＯＳ基因修饰神经细胞株，为寻找治疗阿片耐受和依赖的新药创造了条件。

关键词：一氧化氮合酶逆转录病毒环磷酸鸟苷神经母细胞瘤细胞株

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环孢素A联合雷公藤单体T_4对人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原合成及Ⅳ型胶原α1、转化生长因子β1mRNA表达的影响

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中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 338-344页

作者：苏颖李学旺高扬毕增祺林嘉友李莉中国医学科学院中国协和医科大学协和医院肾内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室北京100005

目的探讨环孢素Ａ（ＣsＡ）、雷公藤单体Ｔ４单独或联合使用对肾小球系膜基质合成的影响及可能机制。方法用ＥＬＩＳＡ法测定人系膜细胞培养上清Ⅳ型胶原含量，用ＲＴ－ＰＣＲ法测定人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原α１ｍＲαＮＡ（Ｃｏｌｌ... 详细信息

目的探讨环孢素Ａ（ＣsＡ）、雷公藤单体Ｔ４单独或联合使用对肾小球系膜基质合成的影响及可能机制。方法用ＥＬＩＳＡ法测定人系膜细胞培养上清Ⅳ型胶原含量，用ＲＴ－ＰＣＲ法测定人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原α１ｍＲαＮＡ（Ｃｏｌｌα１（Ⅳ）ｍＲＮＡ）、转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）ｍＲＮＡ的表达。结果ＣｓＡ可双向调节人系膜细胞Ⅳ型胶原的合成，ＣｓＡ１．０ｕｇ／ｍｌ为促进作用，ＣｓＡ０．０１～０．１ｕｇ／ｍｌ为抑制效应。Ｔ４剂量依赖性促进Ⅳ型胶原产生。两药联合应用具有协同效应，小剂量ＣｓＡ和Ｔ４联合在获得较强免疫抑制作用的同时促胶原生成作用较弱。ＣｓＡ１．０ｕｇ／ｍｌ和Ｔ４１０ｎｇ／ｍｌ均可上调人系膜细胞Ｃｏｌｌβ１（Ⅳ）、ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达，两者变化趋势基本一致。结论ＣｓＡ和Ｔ４均参与调节基质合成，两药小剂量联合促胶原生成作用减轻，这一作用可能由ＴＧＦβ１介导发生于转录水平。

关键词：环孢素A 雷公藤单体T4 系膜细胞 Ⅳ型胶原 TGF

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