检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2005年第1期25卷 79-81页

作者：杨鹏薛越强廖峥嵘屠亚军琦祖和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005 河北医科大学基础医学院细胞生物室石家庄050017

将人载脂蛋白 (ApoEε4 )转基因鼠和突变前体蛋白 (APP)转基因小鼠交配 ,以建立h ApoEε4 /突变APP双转基因小鼠。共产出仔鼠 2 3只 ,经PCR初步筛选 ,并用Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA作进一步鉴定 ,得到 3只双转基因小鼠。该双转... 详细信息

将人载脂蛋白 (ApoEε4 )转基因鼠和突变前体蛋白 (APP)转基因小鼠交配 ,以建立h ApoEε4 /突变APP双转基因小鼠。共产出仔鼠 2 3只 ,经PCR初步筛选 ,并用Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA作进一步鉴定 ,得到 3只双转基因小鼠。该双转基因鼠的建立为进一步阐明ApoEε4的致病作用以及对AD的研究提供了理想的研究模型。

关键词：突变转基因小鼠前体蛋白载脂蛋白Eε4 转基因鼠阳性仔鼠交配基因组DNA Southern杂交

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系统性红斑狼疮患者血清γ干扰素诱导的蛋白10表达水平与疾病活动的关系

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中华检验医学杂志 2005年第1期28卷 46-49页

作者：刘中娟林嘉友倪安平宋耀虹沈瑛张时民中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科 100730 中国医学科学院基础医学研究所免疫室

目的　探讨血清γ干扰素诱导的蛋白 10 (IP 10 )水平 ,与红斑狼疮 (SLE)疾病活动的关系及其在SLE肾损伤中的可能作用。方法　收集了 112例SLE患者及 4 0名正常健康人和 30例类风湿性关节炎 (RA)患者血清。应用ELISA测定血清IP 10水平。... 详细信息

目的　探讨血清γ干扰素诱导的蛋白 10 (IP 10 )水平 ,与红斑狼疮 (SLE)疾病活动的关系及其在SLE肾损伤中的可能作用。方法　收集了 112例SLE患者及 4 0名正常健康人和 30例类风湿性关节炎 (RA)患者血清。应用ELISA测定血清IP 10水平。结果　SLE活动组血清IP 10水平 (5 0 8 7± 2 5 2 4 ) μg/L较非活动组 (32 2 2± 95 9) μg/L和对照组 (12 4 9± 4 1 3) μg/L明显升高 (P<0 0 0 1)。活动性狼疮肾炎 (LN)组IP 10水平 (5 5 0 9± 2 0 6 1) μg/L与活动性无肾损伤组 (35 4 8±10 5 3) μg/L及对照组比较其差异均具有统计学意义 (P <0 0 0 1)。特别是Ⅲ型和Ⅳ型LN患者血清IP 10水平 (6 2 9 85± 16 4 ) μg/L升高最为显著 ,与Ⅱ型和Ⅴ型LN(30 2 9± 2 0 7 1) μg/L相比其差异具有统计学意义 (P <0 0 1)。另外 ,血清IP 10水平随着SLE疾病活动水平明显升高 ,与总的SLEDAI评分密切相关 (r=0 6 312 ,P <0 0 0 1) ,与SLEDAI肾评分亦密切相关 (r =0 6 880 ,P <0 0 0 1)。结论　以上结果表明IP 10可能在SLE肾损伤中起着十分重要的作用 ,血清IP 10水平与SLE疾病活动密切相关 ,可作为SLE疾病活动、尤其是监测狼疮肾损伤的重要指标。

关键词： IP-10 血清 SLE 肾损伤患者疾病 γ干扰素活动水平结论

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人载脂蛋白A-Ⅰ半胱氨酸突变体的二级结构和脂质结合能力的比较

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第5期21卷 603-609页

作者：祝学卫吴刚曾武威薛红陈保生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体... 详细信息

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体,分别为apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),和apoA-Ⅰ(L195C).观察比较各种野生型及突变apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量和二级结构稳定性及其脂质结合能力.结果显示,野生型apoA-Ⅰ,apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),apoA-ⅠMilano和apoA-Ⅰ(L195C)的α螺旋含量分别为54±4%,49±4%,50±2%,51±6%,56±4%,52±3%,和54±1%,各种蛋白的α螺旋含量无显著性差异(P>0.05).野生型apoA-Ⅰ的变性标准自由能(ΔG0D)为10.5kJ/mol;apoA-Ⅰ(S52C)和apoA-ⅠMilano的ΔG0D比野生型低2.1kJ/mol;而apoA-Ⅰ(K129C)的ΔG0D比野生型apoA-Ⅰ高1.6kJ/mol.与野生型apoA-Ⅰ相比,apoA-Ⅰ(K129C)和apoA-Ⅰ(L195C)两个突变体与脂质结合能力明显下降(P<0.05),而其它半胱氨酸突变体(包括apoA-ⅠMilano)在脂质结合动力学方面与野生型apoA-Ⅰ无明显差异.以上结果提示,不同位点发生的半胱氨酸突变对apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量无明显影响,但对蛋白的二级结构稳定性和脂质结合能力影响不尽相同.

关键词：人载脂蛋白A—Ⅰ 半胱氨酸突变体 α螺旋含量二级结构稳定性脂质结合能力

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中国艾滋病知多少——中国艾滋病流行趋势预测的影响因素

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 481-486页

作者：张孔来中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所流行病学教研室北京100005

自1985年中国大陆发现首例艾滋病病毒(HIV)感染者以来,艾滋病流行日益严重,及时采取有效的控制措施成为遏制艾滋病流行的当务之急。但是有效防控措施的制定是以客观分析和预测艾滋病流行趋势为基础的。本文从我国艾滋病的流行现状及其... 详细信息

自1985年中国大陆发现首例艾滋病病毒(HIV)感染者以来,艾滋病流行日益严重,及时采取有效的控制措施成为遏制艾滋病流行的当务之急。但是有效防控措施的制定是以客观分析和预测艾滋病流行趋势为基础的。本文从我国艾滋病的流行现状及其影响因素入手,阐述与艾滋病流行相关的数据来源并评价其质量,提出中国艾滋病流行趋势预测的障碍及建议。

关键词：流行趋势预测艾滋病病毒 1985年中国大陆控制措施客观分析防控措施流行现状数据来源感染者

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Flk1^+间充质干细胞减轻四氯化碳导致的肝纤维化的研究

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生物工程学报 2005年第3期21卷 396-401页

作者：史明霞房佰俊廖联明杨少光刘煜昊赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4... 详细信息

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4 制作雌性小鼠肝纤维化模型,在CCl4 损伤后立即或1周后经尾静脉注射Flk1+ MSC ,2或5周后检测受体小鼠肝脏的纤维化程度和供体细胞的植入。结果发现,CCl4 损伤后立即注射Flk1+ MSC ,可以使肝脏损伤程度明显减轻,减少胶原沉积,使肝脏羟脯氨酸含量及血清纤维化指标显著下降;而损伤1周后注射细胞则无明显变化。免疫荧光、PCR和荧光原位杂交方法证实,在受体肝脏中有供体细胞植入,呈上皮细胞形态,并表达白蛋白,但是数量很少。因此,Flk1+ MSC具有潜在的植入肝组织的能力,并可能启动肝组织的内源性修复,减轻CCl4 导致的肝纤维化。

关键词：间充质干细胞,肝纤维化,移植

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干扰素抗病毒机制及其抗病毒性肝炎中的作用

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中国公共卫生 2005年第7期21卷 890-891页

作者：李洪权刘英李辉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病教研室北京100005

干扰素(interferon,IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子.目前IFN已经被广泛地应用到慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、白血病、淋巴瘤等疾病的治疗中.本文着重阐述IFN-α的抗病毒作用.

关键词：抗病毒性肝炎干扰素抗病毒机制免疫调节作用慢性乙型肝炎慢性丙型肝炎抗病毒作用 IFN-α 细胞因子细胞增长抗肿瘤白血病淋巴瘤

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中国人群2002年与伤害有关行为的分析

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中华流行病学杂志 2005年第10期26卷 746-750页

作者：刘娜杨功焕马杰民陈爱平中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

目的描述2002年中国人群与伤害有关行为,特别是与交通事故及自杀有关行为的流行水平,以及在不同教育水平、职业和地区人群中的分布。方法使用13个问题,利用2002年普查人口进行加权计算不同类别人群交通违章行为和保护性措施的执行情况,... 详细信息

目的描述2002年中国人群与伤害有关行为,特别是与交通事故及自杀有关行为的流行水平,以及在不同教育水平、职业和地区人群中的分布。方法使用13个问题,利用2002年普查人口进行加权计算不同类别人群交通违章行为和保护性措施的执行情况,及家庭中农药、鼠药的保存情况。结果36.7%的人报告过去30天有在自行车道及机动车道上行走或乱穿马路的行为,其中3.67%为经常(>3次/周),11.3%为有时(1-2次/周),21.7%为偶尔(1-2次/月)。30.3%骑自行车者报告过去30天有闻红灯、占用机动车道、骑车带人等违章行为。调查人群中有4351人过去30 天有驾车经历,分别有13.2%、11.4%和16.9%的机动车驾驶员报告过去30天有酒后驾车、疲劳驾驶和无证驾驶的经历。驾驶员或乘车者经常佩带交通安全带的比例只有7.7%;目前驾驶和搭乘摩托车者中,经常戴头盔的比例为19.1%。男性交通违章的行为高于女性;农村人群交通违章的现象较城市严重。农村地区存放农药及鼠药的比例高于城市地区;有10%的家庭随意放置农药或鼠药。结论中国人群的交通违章现象严重,且交通安全保护性措施(佩带安全带、摩托车头盔)执行力度不够。对农药、鼠药疏于管理,人群的安全防范意识差。

关键词：意外伤害交通事故自杀

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重组人色素上皮衍生因子显著抑制血管内皮细胞增殖

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中国医学科学院学报 2005年第3期27卷 295-299页

作者：阴彬邱飞蝉文中伟朱圣韬袁建刚强伯勤彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的通过原核表达,获得具有生物活性的人重组色素上皮衍生因子(PEDF)。方法将PEDF基因构建到GST原核表达系统中,经过表达纯化,获得重组蛋白,采用Westernblot和质谱分析确证该重组蛋白,采用MTT法检测所获得的重组蛋白对人脐静脉内皮细胞... 详细信息

目的通过原核表达,获得具有生物活性的人重组色素上皮衍生因子(PEDF)。方法将PEDF基因构建到GST原核表达系统中,经过表达纯化,获得重组蛋白,采用Westernblot和质谱分析确证该重组蛋白,采用MTT法检测所获得的重组蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制活性。结果获得了相对分子质量为46000的重组人PEDF重组蛋白,该蛋白可显著抑制血管内皮细胞增殖。结论成功地经过原核表达获得了具有血管生成抑制活性的重组人色素上皮衍生因子。

关键词：色素上皮衍生因子抗血管生成增殖

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小鼠衰老相关新基因Arzc的克隆

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中国医学科学院学报 2005年第2期27卷 194-198页

作者：陈等张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的鉴别和克隆与小鼠衰老相关的新基因。方法采用改进的差异显示反转录聚合酶链反应(D DR T-PCR)技术分析正常老化和年轻BA LB/C小鼠大脑皮层m R NA的差异表达,差异显示的新表达序列标签(EST)经N orthern杂交验证后,作为出发序列,利用... 详细信息

目的鉴别和克隆与小鼠衰老相关的新基因。方法采用改进的差异显示反转录聚合酶链反应(D DR T-PCR)技术分析正常老化和年轻BA LB/C小鼠大脑皮层m R NA的差异表达,差异显示的新表达序列标签(EST)经N orthern杂交验证后,作为出发序列,利用生物信息学方法设计引物,以小鼠大脑皮层总R NA的反转录产物为模板通过PCR克隆全长cD NA。结果差异显示分析共获得表达差异明显的EST42条,序列同源性分析显示其中29条为已知基因cD NA片段,13条可能为新EST。对新EST进行N orthern杂交验证后,对确证在正常老化鼠皮层表达明显下调的1个EST,通过生物信息学方法克隆全长cDN A,得到1个新的1382bp的cD NA序列,命名为Arzc,获得G enBank注册号A Y344585。该序列含有1个261bp的开放阅读框,推测的编码多肽包含86个氨基酸残基,与噬菌体编码的重组酶/整合酶的一段氨基酸序列有较高同源性。结论鉴别并克隆到一个可能与小鼠衰老相关的新基因A rzc。

关键词：差异显示反转录多聚酶链反应小鼠衰老表达序列标签基因

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抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究

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中国生物工程杂志 2005年第6期25卷 40-44页

作者：刘立颖许士奇赵雪梅杜洪震张伟梁平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学研究院病理室北京100005 承德医学院微生物与免疫学教研室承德067000

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受... 详细信息

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受严格调控的醇氧化酶启动子的控制下由甲醇诱导表达,并利用α因子前导肽引导融合抗体分泌。载体线性化后整合入甲醇营养型酵母Pichia pastoris(Pp)GS115基因组中,经鉴定表达单位具有良好的遗传稳定性。对筛选得到的高分泌表达融合抗体的细胞株进行表达和培养条件的优化,使诱导上清液中融合抗体的产量选到100mg/L。利用Protein A层析柱分离、纯化,获得纯度较高的融合抗体。经鉴定分析其具有正确的分子量和N末端,且融合抗体可与Aβ抗原结合并能吸引巨噬细胞吞噬和清除抗原抗体复合物,具有抗体生物学活性。这是首次利用甲醇营养型酵母表达系统成功实现了抗Aβ融合抗体的高效分泌表达及产物纯化鉴定,为进一步研究AD及其治疗提供了新的途径。

关键词：抗β-淀粉样多肽人源融合抗体甲醇营养型酵母表达系统阿尔茨海默病免疫治疗纯化性质

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