检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Genetica Sinica 2003年第4期30卷 383-388页

作者：董文吉祖振响刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干... 详细信息

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干细胞转导条件 ,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功 ;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体 ,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体。

关键词：造血干细胞反转录病毒载体慢病毒载体腺相关病毒载体基因治疗

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AP-1在血管内皮细胞PAI-1表达中的作用

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中国医学科学院学报 2003年第3期25卷 307-311页

作者：李晓冬祖淑玉王雯朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的研究核转录因子激活蛋白-1(activatorprotein-1,AP-1)在肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF-α)、弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimalmodifiedlowdensitylipoprotein,mmLDL)诱导血管内皮细胞PAI-1基因表达中的转录调控机制。方法进行人脐静脉内皮细胞(humanvascularendothelialcells,HUVECs)的培养和鉴定。采用基因重组技术,构建4个含人PAI-1基因不同长度5'上游序列的荧光素酶报告基因质粒,并结合瞬时转染分析实验,初步确定PAI-1基因上游具有调控作用的是位于-823到-553之间的AP-1元件。为进一步确证AP-1元件的调控作用,采用PCR法对该元件进行定点突变。结果TNF-α能明显诱导构建质粒pGL3-PAI-1-823/+90荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-PAI-1-823/+90的3个突变体诱导作用明显降低;mmLDL也能明显诱导质粒pGL3-PAI-1-823/+90荧光素酶表达,但对质粒pGL3-PAI-1-823/+90的3个突变体的诱导作用不明显。结论在TNF-α、mmLDL作用下,内皮细胞转录表达PAI-1基因过程中,3个AP-1元件起着重要的作用。

关键词：纤溶酶原激活物抑制剂内皮细胞激活蛋白-1元件

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CD3ε和5-氟尿嘧啶在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P53的表达

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中华医学杂志 2003年第22期83卷 1962-1967页

作者：程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM... 详细信息

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM的TJK及T3JK细胞株。用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 /或 5 FU(2 5 μg/ml)刺激不同的T淋巴细胞诱导细胞凋亡 ,用噻唑蓝比色法检测细胞存活率 ,并计算细胞死亡率 ;用瞬时转染野生型或突变型P5 3表达质粒的方法和Western印迹检测P5 3蛋白质的表达 ,分析其在T淋巴细胞凋亡中的作用。结果　在CD3ε和 5 FU分别诱导T淋巴细胞凋亡过程中 ,均伴随着P5 3蛋白质表达增加 ;两者联合使用使T淋巴细胞凋亡和P5 3蛋白质表达显著增加 ;P5 3过表达可明显增加T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。结论　抗CD3ε抗体和 5 FU联合作用可显著提高P5 3蛋白质表达 ,两者在T淋巴细胞凋亡中具有协同效应。

关键词： CD3ε 5-氟尿嘧啶 T淋巴细胞凋亡协同作用 P53 表达单克隆抗体

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奇静脉逆行灌注在主动脉手术中对脊髓保护的解剖学研究

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中国临床解剖学杂志 2003年第1期21卷 49-52页

作者：张平王乃利寇印华张晓东中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院解剖学教研室北京100005

目的 :为主动脉手术中脊髓保护提供形态基础和术式设计。方法 :解剖观察了 3 1例成人标本的奇静脉系、椎静脉丛 ,以及脊髓静脉回流途径。结果 :观测奇静脉系及相关静脉 ,其直径为 ( x±s) :奇静脉为 (9.2± 1.9)mm ,半奇静脉为 ... 详细信息

目的 :为主动脉手术中脊髓保护提供形态基础和术式设计。方法 :解剖观察了 3 1例成人标本的奇静脉系、椎静脉丛 ,以及脊髓静脉回流途径。结果 :观测奇静脉系及相关静脉 ,其直径为 ( x±s) :奇静脉为 (9.2± 1.9)mm ,半奇静脉为 (5 .5± 1.2 )mm ,副半奇静脉为 (3 .8± 0 .9)mm ,左最上肋间静脉为 (2 .0±0 .4)mm ,右最上肋间静脉为 (1.9± 0 .4)mm ,左腰升静脉为 (2 .3± 0 .5 )mm ,右腰升静脉为 (2 .2± 0 .6)mm。根据奇静脉属支的配布和肋间静脉汇入形式 ,将奇静脉系分为 4种类型。奇静脉及其属支中存在静脉瓣 ,有个体差异。脊髓静脉密集 ,与椎内静脉丛有丰富的网络连接 ,并通过神经根静脉与椎外静脉丛、奇静脉系相交通。结论 :在主动脉手术中应用奇静脉逆行灌注脊髓保护 ,是一种行之有效的新术式。

关键词：解剖学研究主动脉手术脊髓保护逆行灌注奇静脉

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对我国社区卫生服务进展和面临形势的思考

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中国公共卫生 2003年第6期19卷 745-746页

作者：梁万年中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所北京100005

自1997年1月提出改革城市卫生服务体系,积极发展社区卫生服务以来,社区卫生服务在全国各地有了长足的发展,社区卫生服务的重要性和意义逐渐为各级政府和群众所理解.本文就我国社区卫生服务的有关进展情况以及面临的有关形势等,提出一些... 详细信息

自1997年1月<中共中央、国务院关于卫生改革与发展的决定>提出改革城市卫生服务体系,积极发展社区卫生服务以来,社区卫生服务在全国各地有了长足的发展,社区卫生服务的重要性和意义逐渐为各级政府和群众所理解.本文就我国社区卫生服务的有关进展情况以及面临的有关形势等,提出一些看法和意见,供参考.

关键词：社区卫生服务中国卫生政策试点工作社会氛围

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顺式调控元件NF-κB在尼古丁诱导ICAM-1表达中的作用

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中国病理生理杂志 2003年第2期19卷 145-149页

作者：周卫辉陈祥银中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

目的 :研究 5’上游序列在尼古丁诱导细胞间粘附分子 - 1 (ICAM - 1 )基因转录调控中的作用。方法 :首先采用分子克隆技术构建实验所需的DNA片段 ,然后采用真核细胞转染技术将重组DNA片段与内参照质粒一起转染体外培养的内皮细胞并检测... 详细信息

目的 :研究 5’上游序列在尼古丁诱导细胞间粘附分子 - 1 (ICAM - 1 )基因转录调控中的作用。方法 :首先采用分子克隆技术构建实验所需的DNA片段 ,然后采用真核细胞转染技术将重组DNA片段与内参照质粒一起转染体外培养的内皮细胞并检测尼古丁刺激的转染细胞荧光素酶的相对活性。结果 :成功构建了 6种含有不同长度ICAM - 1基因启动子序列以及启动子中NF -κB和Sp - 1位点突变序列的荧光素酶报告基因质粒。与对照组相比尼古丁可促进含有启动子序列 - 579bp(pGL3E - 579/ +36) (P <0 .0 5) ,- 2 30bp (pGL3E - 2 30 / +36) (P<0 .0 5)以及启动子Sp- 1位点突变体 (pGL3E -Sp - 1 -MU) (P <0 .0 5)的荧光素酶基因表达 ,而下游NF -κB位点的删切重组体 (pGL3E - 1 34/ +36)和含有NF -κB位点突变体 (pGL3E -NF -κB -MU)的重组荧光素酶报告基因质粒在尼古丁诱导下与对照组相比荧光素酶表达量无明显差异。结论 :ICAM - 1基因启动子顺式作用元件下游NF -κB位点在尼古丁诱导ICAM -

关键词：烟碱 NF-κB 细胞粘着因子

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糖原累积症Ⅰa型-纯合G727T突变患儿的表型分析

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中华儿科杂志 2003年第4期41卷 252-255,T003页

作者：邱正庆魏珉刘歌刘国仰中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科100730 中国医学科学院基础医学研究所遗传室

目的　对临床诊断为糖原累积症Ⅰa型的患儿及其父母进行葡萄糖 6 磷酸酶 (G6Pase)的基因突变筛查 ,并对基因突变完全相同的患儿进行临床特点的比较分析。方法　提取患儿及其父母外周血DNA ,分别进行G6Pase基因五个外显子的PCR扩增 ,纯... 详细信息

目的　对临床诊断为糖原累积症Ⅰa型的患儿及其父母进行葡萄糖 6 磷酸酶 (G6Pase)的基因突变筛查 ,并对基因突变完全相同的患儿进行临床特点的比较分析。方法　提取患儿及其父母外周血DNA ,分别进行G6Pase基因五个外显子的PCR扩增 ,纯化后进行DNA直接测序 ;对基因突变相同的 6家系 7例患儿进行临床表现、生化改变及对治疗反应的比较分析。结果　所有 7例患儿均为G6Pase基因外显子 5核苷酸位点第 72 7处纯合子型G→T的单个碱基突变 (G72 7T) ,而其父母均为此杂合突变的携带者。基因突变完全相同的 7例患儿临床表现的严重性、对治疗的反应不全相同 ,除经典的低血糖、生长发育落后、肝脏肿大、肾脏肿大、代谢性酸中毒和乳酸血症外 ,尚有脾大 (1例 ) ,轻度肝功能受损 (6例 ) ,多发肝腺瘤 (1例 )等。结论　G72 7T突变很可能是中国人种糖原累积症Ⅰa型的较常见突变 ;具有相同突变的患儿不仅临床表现轻重不同 ,而且 ,对生玉米淀粉治疗的反应也各有差异 ;通过典型的临床及生化表现辅以外周血基因分析。

关键词：糖原累积症Ia型 G727T 突变患儿表型分析纯合子

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血管紧张素Ⅱ受体介导细胞凋亡及其功能的研究进展

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解剖学报 2003年第3期34卷 333-335页

作者：刘艳张世馥金叔敏程凯中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系北京100005

肾素．血管紧张素系统(renin-angiotensin system， RAS)是机体调控内环境稳定的重要体液调节系统之一，它主要通过血管紧张素的作用而产生多种生物学效应。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，ANGⅡ)是肾素一血管紧张素系统的主要活性肽，愈... 详细信息

肾素．血管紧张素系统(renin-angiotensin system， RAS)是机体调控内环境稳定的重要体液调节系统之一，它主要通过血管紧张素的作用而产生多种生物学效应。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，ANGⅡ)是肾素一血管紧张素系统的主要活性肽，愈来愈多的证据表明，在一些以组织器官发生进行性纤维化为特征的慢性疾病，尤其是心血管，肾脏疾病的进展中起着重要作用~[1]。已知RAS的生物学效应均通过ANGⅡ与相应的受体作用而介导的。根据不同的药理和生化特性，ANGⅡ受体分为两个亚型ATl和AT2~([1,2])。血管内皮上的受体由循环ANGII激活，而心脏、血管壁、肾脏等血管中的受体则以自分泌或旁分泌形式生成的ANGⅡ激活。 ANGⅡ除了具有调节血管张力、血流及促进细胞生长、的作用之外。近几年研究表明，它还具有介导细胞凋亡用。

关键词：血管紧张素Ⅱ受体细胞凋亡细胞功能生物学特性肾脏细胞心血管细胞

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实验性氟中毒骨组织中Ⅱ型胶原基因表达及结构的改变

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中华预防医学杂志 2003年第4期37卷 243-245,T002页

作者：刘秉慈许增禄缪庆徐园园徐茗钱晓菁尤宝荣袁伯华康宁中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所北京100050 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

目的　观察过量氟对大鼠骨组织中Ⅱ型胶原基因表达的影响和对大鼠骨骼中胶原类型及胶原结构的作用。方法　制备Ⅱ型胶原cDNA探针 ,采用cDNA mRNA原位杂交技术 ,检测饮用过量氟水 (氟化钠 2 2 1mg/L)的大鼠骨组织中Ⅱ型胶原的改变。采用... 详细信息

目的　观察过量氟对大鼠骨组织中Ⅱ型胶原基因表达的影响和对大鼠骨骼中胶原类型及胶原结构的作用。方法　制备Ⅱ型胶原cDNA探针 ,采用cDNA mRNA原位杂交技术 ,检测饮用过量氟水 (氟化钠 2 2 1mg/L)的大鼠骨组织中Ⅱ型胶原的改变。采用苦味酸天狼星红染色偏振光法对骨组织中胶原类型及胶原纤维结构进行观察。结果　染氟后 ,股骨等骨组织出现成软骨细胞。cDNA mRNA原位杂交显示 ,软骨化的骨组织软骨陷窝的软骨胞质中可见Ⅱ型胶原基因表达。染氟0 5个月组肋软骨软骨细胞胶原mRNA水平最高 ,其灰度值和标准误分别为 0 0 86和 0 0 13,染氟 1个月及 2个月后逐渐减弱 ,其灰度值和标准误分别为 0 0 4 7、0 0 0 8和 0 0 39、0 0 0 7。苦味酸天狼星红染色偏振光法观察骨组织中出现多色性Ⅱ型胶原纤维 ,胶原纤维断裂、排列紊乱、含量下降。结论　过量氟可致骨组织中胶原类型和胶原结构的改变 ,导致Ⅱ型胶原在软骨化骨组织中的表达及在肋软骨组织中的表达增强。

关键词：实验性氟中毒骨组织 Ⅱ型胶原基因表达胶原纤维结构 cDNA-mRNA 原位杂交技术

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脂多糖致衰老大鼠急性肺损伤及心肌组织ATP酶等的变化

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中国医学科学院学报 2003年第3期25卷 320-323页

作者：张健杜烨玮孙仁宇王士雯 CardiovascularInstitute FuwaiHospital 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005 InstituteofGeriatricCardiology GeneralHospitalofPLA

目的观察给衰老大鼠静脉或左心室内注入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,是否发生急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)以及心肌组织ATP酶等的改变情况。方法雄性Wistar大鼠40只复制成衰老模型。然后随机分成对照组(静脉注射生理盐水,n=8)... 详细信息

目的观察给衰老大鼠静脉或左心室内注入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,是否发生急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)以及心肌组织ATP酶等的改变情况。方法雄性Wistar大鼠40只复制成衰老模型。然后随机分成对照组(静脉注射生理盐水,n=8),ALI组(静脉注射5mg/kg体重LPS,n=16),及LPS组(左心室内注入相同剂量LPS,n=16)。注射后2h或6h收集血并取肺、心。制备肺、心组织匀浆。测肺湿/干重量比,用比色法测定蛋白、乳酸(LA)、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性。结果ALI组大鼠在静脉注射LPS后2h,肺泡灌洗液中蛋白含量及肺湿/干重量比显著升高(P<0.01);血中LA、NO2-/NO3-和MDA含量也显著升高(P<0.01);同时,肺组织中NO2-/NO3-含量显著升高(P<0.01),而GSH-PX及Na+-K+-ATPase活性均显著下降(P<0.01)。上述变化持续至注射后6h时。但在心肌组织中,直至注射LPS后6h才出现MDA含量的显著升高(P<0.01),和GSH-PX、Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性的显著下降(P<0.01)。而在LPS组,注射LPS后2h的血和2h、6h时的肺组织NO2-/NO3-含量均显著升高(P<0.05);注射后2h时肺组织中Na+-K+-ATPase活性显著下降(P<0.05)。其它指标无显著改变。结论给衰老大鼠静脉注?

关键词：急性肺损伤脂多糖心肌受损衰老

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