检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2003年第5期23卷 512-516页

作者：高金明林耀广邱长春刘怡雯马毅刘英朱元珏中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)在哮喘炎症过程中起重要作用 ,本文探讨了TNFα LTα基因多态性和哮喘遗传易感性及相关表型的关系。采用聚合酶链反应 (PCR) 限制性长度多态性 (RFLP)检测TNFα LTα基因多态性在 12 5名哮喘个... 详细信息

肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)在哮喘炎症过程中起重要作用 ,本文探讨了TNFα LTα基因多态性和哮喘遗传易感性及相关表型的关系。采用聚合酶链反应 (PCR) 限制性长度多态性 (RFLP)检测TNFα LTα基因多态性在 12 5名哮喘个体 ,12个哮喘家系成员和 96名无血缘关系的健康对照者间的分布 ;并测定了哮喘患者血清的TIgE ;肺通气功能 ,支气管舒张试验 ,乙酰甲胆碱 (Mch)气道激发试验。TNFα 2 2基因型的频率在哮喘组较健康对照组明显增高 (2 0 8%vs 11 4 % ,P <0 0 5 ) ,优势比 (OR)为 2 2 5 9(95 %CI1 30 1～ 4 94 9) ;等位基因频率TNF2在哮喘组较健康对照组明显增高 (0 4 2vs 0 33,P <0 0 1)。LTα基因的频率在两组间分布无差异。Logistic回归分析显示 :TNFα 2 2基因是哮喘的独立危险因素 (P <0 0 5 ) ,OR值为 0 2 2 6 (95 %CI 0 0 5 5 - 0 92 5 1)。携带TNFα 2 2基因型的患者在吸入 β2激动剂 2 0分钟后 ,FEV1的改善较携带其它基因型的患者差 (2 4 0 9± 19 5 ) %vs [2 9 4 6±2 2 6 0 ) %vs (38 81± 31 5 3) % ,P <0 0 5 ]。家系分析显示 :TNFα基因 LTα基因与哮喘连锁关系不肯定 ,LOD值 <1。TNFα 2 2基因型与哮喘的易感性相关。

关键词：肿瘤坏死因子α 淋巴毒素α 基因多态性支气管哮喘聚合酶链反应血清

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麦芽酚可抑制活性氧引起的SH-SY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2003年第4期23卷 375-378页

作者：王健杨洋许彩民潘华珍中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

近年来研究表明 ,氧化应激在阿尔茨海默病等神经退行性疾病发生发展中具有重要作用。本文研究了麦芽酚对过氧化氢 (H2 O2 )引起的人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)凋亡时细胞形态、磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻和DNA损伤的保护作用。结果发现麦芽酚... 详细信息

近年来研究表明 ,氧化应激在阿尔茨海默病等神经退行性疾病发生发展中具有重要作用。本文研究了麦芽酚对过氧化氢 (H2 O2 )引起的人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)凋亡时细胞形态、磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻和DNA损伤的保护作用。结果发现麦芽酚浓度为 2mmol L ,作用 2h后 ,可以保护细胞免受H2 O2 引起的氧化损伤。实验结果表明麦芽酚可作为一种抗氧化剂 ,有效保护H2 O2 引起的SH SY5Y的凋亡。

关键词：麦芽酚活性氧 SH-SY5Y 细胞凋亡氧化损伤阿尔茨海默病

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自体成纤维细胞注射移植的存活性初探

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基础医学与临床 2003年第3期23卷 314-317页

作者：赵玉明赵作均林惶左瑾方福德王佳琦中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院面颈整形美容中心北京100041 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E... 详细信息

为观察自体成纤维细胞移植后在体内成活和分泌胶原情况 ,体外培养兔自体成纤维细胞 ,部分细胞3H TdR掺入 ,标记和未标记的 8× 10 1 0 L- 1 细胞悬液 ,分别注射于兔耳背侧真皮浅、深层交界处 3次。 5月后取材 ,进行放射自显影 ,H E染色 ,天狼猩红染色观察 ,发现3H TdR掺入标记的细胞依然存活 ;注射部位出现大量的幼稚型成纤维细胞 ;真皮厚度增加 ,实验组为 14 0 2 6± 6 31(× 5 μm) ,对照组为 12 7 6 6± 4 78(× 5 μm) (P <0 0 1) ;Ⅲ型胶原含量增加 ,实验组为 2 6 3± 1 4 1(cm2 ) ,对照组为 1 0 5± 0 90 (cm2 ) (P <0 0 5 )。表明自体成纤维细胞注射移植后 ,能够在体内长期存活并分泌新生Ⅲ型胶原 ,为临床应用提供了初步、可靠的理论依据。

关键词：成纤维细胞细胞移植放射自显影 ^3H-TdR

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衰老相关的T细胞生物学研究进展

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中华老年医学杂志 2003年第5期22卷 319-320页

作者：罗元明刘彦信郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

T细胞衰老是导致机体衰老、衰老相关疾病以及和寿命直接相关的重要因素.T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以,研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容... 详细信息

T细胞衰老是导致机体衰老、衰老相关疾病以及和寿命直接相关的重要因素.T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以,研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容.目前,人们在进行衰老生物学研究时,常用T细胞作为模型研究基因表达、细胞间通讯及体内平衡调节等,其他多细胞生物很少具有T细胞的优点.我们在此主要讨论引起T 细胞衰老的因素(机制)、由衰老而引起的T细胞功能的相关变化及检测衰老T细胞的常用方法.

关键词：衰老 T细胞生物学研究免疫系统

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基因人工进化的分子育种技术

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生命科学 2003年第3期15卷 183-188页

作者：蔡启良王恒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所北京 100005

分子育种技术(molecular breeding technology)利用人工手段模拟生物杂交优势的分子进化模式,在体外构建含有感兴趣基因的大量突变文库,并根据基因表达产物的特性,以合适的筛选方法选择具有最佳功能的改良基因。经过近几年的快速发展,... 详细信息

分子育种技术(molecular breeding technology)利用人工手段模拟生物杂交优势的分子进化模式,在体外构建含有感兴趣基因的大量突变文库,并根据基因表达产物的特性,以合适的筛选方法选择具有最佳功能的改良基因。经过近几年的快速发展,分子育种技术在创造高效随机基因突变库的方法上日臻完善,已在医学、工业和环境保护酶类研究等方面收到了很好的成效。预计未来该技术将广泛地应用于重要传染性疾病(如疟疾、艾滋病病毒等)的预防和治疗,尤其可通过DNA疫苗手段的应用而获得强大的生命力。作者全面地综述了分子育种技术的产生、发展和应用现状。

关键词：分子育种技术基因改组

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过量氟对大鼠骨骼I型胶原mRNA表达及纤维性状的影响

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环境与健康杂志 2003年第4期20卷 204-206页

作者：许增禄刘秉慈缪庆徐园园徐茗钱晓菁尤宝荣袁伯华康宁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所北京100050

目的观察过量氟对大鼠骨骼I型胶原mRNA表达的影响和对大鼠骨骼中胶原纤维性状的作用。方法将雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组10只,分别为给氟0.5、1、2个月组及相应的对照组。给氟组饮用含221mg/LNaF的含氟水,对照组饮用蒸馏水。制备α1... 详细信息

目的观察过量氟对大鼠骨骼I型胶原mRNA表达的影响和对大鼠骨骼中胶原纤维性状的作用。方法将雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组10只,分别为给氟0.5、1、2个月组及相应的对照组。给氟组饮用含221mg/LNaF的含氟水,对照组饮用蒸馏水。制备α1(Ⅰ)胶原cDNA探针,采用cDNA-mRNA原位杂交方法,检测大鼠骨组织中I型胶原mRNA的改变。采用苦味酸-天狼星红偏振光染色法对骨组织中胶原纤维进行观察。结果cDNA-mRNA原位杂交显示,大鼠给氟0.5个月后,I型胶原mRNA水平上升,但在给氟1个月及2个月时,阳性信号减弱。苦昧酸-天狼星红偏振光观察显示在肱骨、股骨、肋骨等骨组织中,胶原纤维发生断裂、变短、变细、排列紊乱,含量下降。结论过量氟对骨I型胶原mRNA表达有短期增强作用,继而抑制I型胶原mRNA合成。胶原mRNA水平下降可能是氟骨症胶原蛋白水平下降的原因之一。过量氟可导致大鼠I型胶原纤维正常结构破坏,交联下降。

关键词：氟化物中毒骨和骨组织胶原Ⅰ型原位杂交

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SARS冠状病毒PUMC_2株N蛋白cDNA的克隆、表达和纯化

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中国医学科学院学报 2003年第5期25卷 504-507页

作者：谈昕煜樊峥王华瑾石磊阴彬倪安平秦川邹柯沈岩袁建刚强伯勤彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 Department of Clinical Laboratory PUMC HospitalCAMS and PUMCBeijing Institute of Experimental Animal CAMS and PUMCBeijing

目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化***21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及... 详细信息

目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化***21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及纯化。结论用基因重组方法表达的SARS冠状病毒N蛋白可为其进一步功能研究提供条件。

关键词： SARS冠状病毒 N蛋白

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体内筛选展示脑血管内皮选择性定位多肽的噬菌体

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解剖学杂志 2003年第4期26卷 307-311页

作者：王帅王欣陈红黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的:通过噬菌体展示技术寻找能够定位于脑部血管内皮的多肽。方法:通过鼠尾静脉注射展示文库,将脑组织中得到的噬菌体体外扩增,重新注人于Balb/c小鼠。如此3轮筛选,测定所获噬菌体的核苷酸顺序及导出展示多肽的氨基酸顺序,并进行免疫... 详细信息

目的:通过噬菌体展示技术寻找能够定位于脑部血管内皮的多肽。方法:通过鼠尾静脉注射展示文库,将脑组织中得到的噬菌体体外扩增,重新注人于Balb/c小鼠。如此3轮筛选,测定所获噬菌体的核苷酸顺序及导出展示多肽的氨基酸顺序,并进行免疫组化分析。结果:得到了展示6个多肽序列的噬菌体克隆。展示3个多肽顺序的噬菌体在脑组织中有明显分布,它们是CSKTAEHTC,QLADTTHHRPWP和SWASLPVGMNSW。免疫组化分析显示展示CSKTAEHTC和QLADTTHHRPWP序列的噬菌体在脑部有明显的阳性分布。结论:展示QLADT-THHRPWP的噬菌体可能对脑血管内皮有更好的结合能力。

关键词：体内筛选脑血管内皮选择性定位多肽噬菌体

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大鼠神经元凋亡相关碱性蛋白ARBP cDNA的克隆和功能

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第1期19卷 36-40页

作者：白氡明洪周新富陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 南澳洲Flinders大学医学院生理系

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广... 详细信息

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广泛的分布 .在R2L1细胞中转染ARBP反义cDNA表达载体后 ,既可以促进细胞增殖 ,又可以抑制去血清诱导的细胞凋亡 .因而 ,ARBP蛋白对神经元细胞的凋亡具有重要的调节作用 .

关键词：神经营养因子低亲和力受体 p75NTR cDNA末端快速扩增凋亡相关碱性蛋白大鼠神经元

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快速分析和鉴定肿瘤抗原研究

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医学研究通讯 2003年第8期32卷 9-10,15页

作者：何洪彬赵建晴刘庆丰张惠媛郝志勇徐雁英崔莲仙何维中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院北京100005

γδT细胞是近10多年来人们新认识的一种T细胞亚群,尽管其在抗原识别及其对多数肿瘤细胞的细胞毒作用中所独有的特性[1]而受到越来越多学者的关注,但目前尚未发现可用于肿瘤免疫治疗靶点的γδT细胞所识别的肿瘤抗原.如何发现和快速分... 详细信息

γδT细胞是近10多年来人们新认识的一种T细胞亚群,尽管其在抗原识别及其对多数肿瘤细胞的细胞毒作用中所独有的特性[1]而受到越来越多学者的关注,但目前尚未发现可用于肿瘤免疫治疗靶点的γδT细胞所识别的肿瘤抗原.如何发现和快速分析潜在的肿瘤抗原呢?研究表明γδT细胞是以MHC非限制性直接识别的方式识别抗原的,并且T细胞受体(TCR)与抗原之间特异性反应部位是抗原表位,而与抗原表位特异性结合的是TCR的互补决定区3(complementary determining regions 3,CDR3),同时,以surface plasmon resonance(SPR)biosensor为检测仪器的biomolecular interaction analysis(BIA)技术为生物分子之间相互作用,尤其是膜分子间的相互作用提供了一个不需标记的实时检测平台[2].为此,我们利用SPR biosensor,用卵巢上皮癌(ovarian epithelium carcinoma,OEC)肿瘤组织浸润的γδT细胞(tumor infiltrating γδT lymphocyte,γδTIL)TCRδ链的CDR3短肽快速分析和鉴定其所识别的肿瘤抗原肽.

关键词：肿瘤抗原快速分析鉴定抗原识别研究肿瘤免疫治疗 γδT细胞

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