检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2002年第6期18卷 671-675页

作者：李涛梁红雁闫峰卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为探讨心钠素基因经体细胞转移对阿霉素诱导的肾病动物泌尿功能的影响及其治疗肾病的潜力 ,采用肌肉或静脉内直接注射裸DNA的方法 ,将人心钠素基因的逆转录病毒载体分别导入阿霉素肾病动物体内 ,以期为其提供持续性的心钠素来源。结果发... 详细信息

为探讨心钠素基因经体细胞转移对阿霉素诱导的肾病动物泌尿功能的影响及其治疗肾病的潜力 ,采用肌肉或静脉内直接注射裸DNA的方法 ,将人心钠素基因的逆转录病毒载体分别导入阿霉素肾病动物体内 ,以期为其提供持续性的心钠素来源。结果发现 ,人心钠素基因经肌肉和静脉内直接注射这 2种途径导入后 ,均可使阿霉素肾病动物的尿量体重比明显增加 ,有效利尿作用时间大于 15d。试验期间 ,实验组肾病动物的体重明显增长 ,血浆中的心钠素浓度在基因转移 5d后明显升高 ,但动物尿中的K+和Na+浓度无明显变化。以上结果说明 ,心钠素基因经肌肉和静脉 2种途径导入均可明显改善肾病动物的泌尿功能。

关键词：阿霉素肾病大鼠肌肉注射静脉注射心钠素基因利尿作用比较研究基因治疗逆转录病毒载体

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TRAIL诱导的白血病细胞凋亡过程中的基因差异表达

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中国医学科学院学报 2002年第3期24卷 238-241页

作者：刘彦信胡欢开郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的分离鉴定重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(rsTRAIL)在诱导JurkatT淋巴细胞白血病细胞凋亡过程中差异表达的基因。方法采用抑制性差减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)及PCR技术筛选差异表达的基因。采用... 详细信息

目的分离鉴定重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(rsTRAIL)在诱导JurkatT淋巴细胞白血病细胞凋亡过程中差异表达的基因。方法采用抑制性差减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)及PCR技术筛选差异表达的基因。采用狭缝杂交和Northern印迹技术鉴定差异基因片段;以DNA自动序列分析仪测定所获cDNA核苷酸顺序。结果获得了6个差异表达的基因片段,4个在TRAIL诱导的白血病细胞凋亡过程中被抑制,2个被激活;其中,A14、X1、D1、A23和C5等5个基因片段为新基因,其GeneBank登记号分别为AW731601、AW731602、AW731603、AW731604和BE239235。Northern印迹显示,基因D1在Jurkat和MCF-7中的表达明显高于其它肿瘤细胞,提示该基因可能具有肿瘤特异性。结论TRAIL诱导的细胞凋亡过程,涉及多种基因表达的改变。

关键词：白血病细胞凋亡肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体白血病细胞差异表达基因

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绝经后骨质疏松症Ⅰ型胶原代谢的变化

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解剖学报 2002年第2期33卷 166-169页

作者：刘敬许增禄王计奎徐园园钱晓菁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100005

目的　研究Ⅰ型胶原及其代谢在绝经后骨质疏松症发病中的作用。　方法　双侧卵巢切除制造大鼠骨质疏松模型 (OVX大鼠 ) ;比色法测定骨中羟脯氨酸浓度 ,计算胶原含量 ;苦味酸天狼星红染色 ,从蛋白水平观察骨中Ⅰ型胶原的分布和变化 ;地... 详细信息

目的　研究Ⅰ型胶原及其代谢在绝经后骨质疏松症发病中的作用。　方法　双侧卵巢切除制造大鼠骨质疏松模型 (OVX大鼠 ) ;比色法测定骨中羟脯氨酸浓度 ,计算胶原含量 ;苦味酸天狼星红染色 ,从蛋白水平观察骨中Ⅰ型胶原的分布和变化 ;地高辛标记的Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶 1(MMP 1)基因探针进行原位杂交 ,从mRNA水平观察Ⅰ型胶原和MMP 1的分布和变化。　结果　OVX大鼠骨中无机盐和胶原含量均降低 ,Ⅰ型胶原蛋白纤维变细、断裂、结构紊乱。Ⅰ型胶原和MMP 1mRNA水平均升高。

关键词： I型胶原基质金属蛋白酶-1 绝经后骨质疏松症动物实验

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遗传性乳光牙本质家系致病基因的染色体定位

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中华口腔医学杂志 2002年第6期37卷 408-411页

作者：赵军吴丽更贾智张青松邢晓艳张晓海天津医科大学口腔医院牙体牙髓科 300070 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

目的　研究一个在天津塘沽地区发现的遗传性乳光牙本质回族家系致病基因是否与染色体 4q2 1连锁。方法　提取该家系 1 3名成员的外周血DNA ,选择染色体 4q2 1上的 8个短串联重复序列多态性标记 (shorttandemrepeatpolymorphisms ,STRPs... 详细信息

目的　研究一个在天津塘沽地区发现的遗传性乳光牙本质回族家系致病基因是否与染色体 4q2 1连锁。方法　提取该家系 1 3名成员的外周血DNA ,选择染色体 4q2 1上的 8个短串联重复序列多态性标记 (shorttandemrepeatpolymorphisms ,STRPs)做荧光标记PCR等位片段分析 ,用lod连锁分析法分析该家系致病基因位点与上述 8个STRPs的连锁关系。结果　得到 1 3名个体 8个位点的基因型和单体型 ,连锁分析结果显示 :8个STRPs的最大lod值均大于 0 ,其中 5个STRPs的lod值大于 1。结论　该家系致病基因定位在染色体 4q2 1上 ,表明中国回族人和报道的欧美人的DGI

关键词：遗传性乳光牙本质染色体定位牙本质生成不全遗传学串联重复序列多态性标记家系调查致病基因

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Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶-Ⅰ在烧伤修复过程中的表达

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解剖学报 2002年第2期33卷 175-179页

作者：王计奎许增禄刘敬钱晓菁徐园园中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100005

目的　研究深Ⅱ度烧伤的患者经MEBO治疗后 ,Collagenα1(Ⅰ )、MMP Ⅰ在烧伤部位的表达及意义。　方法　HE染色 ,天狼星红染色 ,免疫细胞化学 ,原位杂交 ;　结果　Collagenα1(Ⅰ )在烧伤修复过程中持续性表达 ,在新生表皮下的真皮中表... 详细信息

目的　研究深Ⅱ度烧伤的患者经MEBO治疗后 ,Collagenα1(Ⅰ )、MMP Ⅰ在烧伤部位的表达及意义。　方法　HE染色 ,天狼星红染色 ,免疫细胞化学 ,原位杂交 ;　结果　Collagenα1(Ⅰ )在烧伤修复过程中持续性表达 ,在新生表皮下的真皮中表达较强 ,新生汗腺、毛囊中也有表达 ;MMP Ⅰ表达的峰值是在烧伤后第 4d ,在新生表皮前沿下的真皮中较强 ,在新生汗腺中有表达。　结论　Collagen Ⅰ、MMP Ⅰ在烧伤修复 (包括毛囊、汗腺再生 )

关键词：烧伤修复再生烧伤湿性医疗技术 I型胶原基质金属蛋白酶-I

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人肾素转基因小鼠的建立

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生物化学与生物物理进展 2002年第3期29卷 483-486页

作者：陈兰英姜立群刘嘉莉苏雪峰方福德陈永福中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院北京100037 中国医学科学院基础医学研究所北京100005 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100094

为研究人肾素基因在体内的功能和建立其药物干预实验的动物模型 ,采用显微注射法 ,将纯化的人肾素基因导入小鼠受精卵 ,再培育成转基因小鼠 .通过DIGDNA印迹和PCR分析 ,进行转基因整合检测 .在出生的 13只子代鼠中 ,得到一只转基因阳性... 详细信息

为研究人肾素基因在体内的功能和建立其药物干预实验的动物模型 ,采用显微注射法 ,将纯化的人肾素基因导入小鼠受精卵 ,再培育成转基因小鼠 .通过DIGDNA印迹和PCR分析 ,进行转基因整合检测 .在出生的 13只子代鼠中 ,得到一只转基因阳性鼠 .整合率为 7 7% ,有效率 0 3% ,转基因已稳定传代 .RT PCR显示转基因阳性鼠的肾、心和肺组织中有肾素基因表达 ,而在肝脏与骨骼肌中则未检测到 .阳性鼠血浆肾素活性较对照鼠明显升高 ,而肾与心脏组织的肾素活性则无明显变化 .

关键词：逆转录-聚合酶链反应地高辛 DNA印迹显微注射高血压动物模型人肾素转基因小鼠

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短暂激活c-jun N-terminal激酶抑制胆红素诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2002年第5期22卷 473-476页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京10005

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4±... 详细信息

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2 ) %降低到 (12 6± 2 6 ) %。为了进一步证实JNK的作用 ,在SH SY5Y细胞经H2 O2 预处理前 ,先经 2 0 μmol LJNK c jun AP1抑制剂curcumin作用 12h以抑制H2 O2 对JNK的激活 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞增高到 (42 8± 4 4 ) % ,curcumin完全抑制了短暂激活JNK所提供的保护作用。结果表明短暂激活JNK可能在胆红素诱导的SH SY5Y细胞凋亡中提供抗凋亡信号。

关键词：细胞凋亡胆红素 JNK 人神经母细胞瘤细胞

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用RACE结合cDNA文库筛选的方法获取新的锌指蛋白基因

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遗传 2002年第3期24卷 329-331页

作者：杜占文刘立仁张俊武中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

大多数有重要功能的蛋白质都含相应的由保守氨基酸顺序组成的功能结构域。本文首先根据蛋白质功能结构域保守氨基酸序列设计简并引物 ,用PCR方法扩增出基因EST序列 ,再利用改进的快速扩增cDNA末端(RACE)方法从cDNA文库中扩增出基因非同... 详细信息

大多数有重要功能的蛋白质都含相应的由保守氨基酸顺序组成的功能结构域。本文首先根据蛋白质功能结构域保守氨基酸序列设计简并引物 ,用PCR方法扩增出基因EST序列 ,再利用改进的快速扩增cDNA末端(RACE)方法从cDNA文库中扩增出基因非同源部位 ,然后以非同源序列为探针 ,筛选cDNA文库。利用此方法成功地从人骨髓cDNA文库中克隆到几个编码锌指蛋白并代表原有EST的新的全长cDNA。这一策略也应适用于筛选编码具有其他序列保守性功能结构域蛋白的基因。

关键词： RACE cDNA文库筛选锌指蛋白基因非同源DNA序列新基因

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apoE_4近交系转基因鼠的高脂血症表现和自发变换行为损害

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第6期18卷 772-775页

作者：薛越强屠亚军杨鹏蒋效松廖峥嵘琦祖和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005 河北医科大学基础医学院细胞生物学研究室石家庄050017

建立相关疾病的动物模型 ,研究apoE4在脂质代谢和早老性痴呆等疾病中的作用 .通过显微注射法建立人apoE4近交系转基因鼠 .经Southern和Northern印迹杂交 ,鉴定apoE4基因的整合与表达 .98只新生鼠中鉴定出 2只首建鼠 ,定名为TgN(apoE4) 1... 详细信息

建立相关疾病的动物模型 ,研究apoE4在脂质代谢和早老性痴呆等疾病中的作用 .通过显微注射法建立人apoE4近交系转基因鼠 .经Southern和Northern印迹杂交 ,鉴定apoE4基因的整合与表达 .98只新生鼠中鉴定出 2只首建鼠 ,定名为TgN(apoE4) 1QiL和TgN(apoE4) 2QiL .外源基因整合的拷贝数分别为 1和 2 .F1代杂合鼠的脑 ,肾脏 ,心脏和肝脏中均有人apoE4基因的表达 .血清脂质水平通过酶法检测 ,自发变换行为经Y迷宫试验检测 .转基因鼠的血清胆固醇和甘油三酯明显升高 ,自发变换行为受到损害 .结果表明 ,近交系转基因鼠过量表达人apoE4基因可导致血清脂质升高 ,并对其空间记忆能力造成损害 .

关键词： apoE4 近交系转基因鼠高脂血症自发变换行为损害

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P38激酶介导胆红素诱导的SHSY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2002年第1期22卷 45-46页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样... 详细信息

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ;用P38激酶抑制剂SB2 0 3580预处理细胞后 ,在倒置光显微镜下观察胆红素作用不同时间细胞形态的变化及存活情况 ;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。结果显示SHSY5Y细胞经胆红素作用后细胞核出现典型的凋亡样改变 ;细胞经SB2 0 3580预处理 1h ,胆红素作用 3h后凋亡率为 (1 2 1± 2 4) % ,对照组为(1 9 4± 2 7) % ;4h后凋亡率为 (39 3± 4 8) % ,对照组为 (66 2± 5 2 ) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。

关键词：胆红素 P38激酶凋亡人神经母细胞瘤细胞系

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