检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2025年第2期45卷 183-188页

作者：罗钰蓓黄建军杨文秀张军红李静赵春华豆晓伟贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院乳腺外科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床医学研究中心贵州贵阳550004 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程研究中心干细胞新药研发及临床转化研究北京市重点实验室(BZ0381)北京100005

目的从患者的肿瘤组织建立可以传代的乳腺癌原代细胞系,为基础研究提供新的细胞模型。方法经穿刺取材的患者乳腺癌组织经过Ⅱ型胶原酶消化后培养在BCMI培养基中。当细胞快速增殖时,更换为DMEM培养基。检测STR基因分型确定4种乳腺癌原代... 详细信息

目的从患者的肿瘤组织建立可以传代的乳腺癌原代细胞系,为基础研究提供新的细胞模型。方法经穿刺取材的患者乳腺癌组织经过Ⅱ型胶原酶消化后培养在BCMI培养基中。当细胞快速增殖时,更换为DMEM培养基。检测STR基因分型确定4种乳腺癌原代细胞的特异遗传标记。集落形成实验和球形成实验分析乳腺癌原代细胞系致瘤性。Real-time PCR和Western blot实验分析乳腺癌原代细胞上皮间充质转换分子。转移实验和侵袭实验分析乳腺癌原代细胞的转移能力。结果培养了4种乳腺癌原代细胞系BC25#,BC51#,BC56#和BC57#。这些乳腺癌细胞系培养基是DMEM培养基,可以传代,具有清楚的临床背景。STR基因分型确定了4种乳腺癌原代细胞系特异的遗传标记。集落形成实验和成球实验发现4种乳腺癌原代细胞系比传统的乳腺癌细胞T-47D有更强的形成肿瘤能力。Real-time PCR和Western blot实验发现,与传统的乳腺癌细胞T-47D相比,4种乳腺癌原代细胞系E-cadherin表达降低,vimentin表达升高。迁移实验和侵袭实验发现原代细胞系BC25#比传统的乳腺癌细胞T-47D有更强的转移能力。结论培养了4种可以传代的乳腺癌原代细胞系BC25#、BC51#、BC56#和BC57#,为乳腺癌基础研究提供了新的肿瘤细胞模型。

关键词：乳腺癌原代细胞系基础研究新肿瘤细胞模型

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生物反应器内再造组织工程化心肌的实验研究

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中国医学科学院学报 2003年第1期25卷 7-12页

作者：刘霞王常勇郭希民欧阳五庆军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100850

目的在体外模拟微重力条件下构建心肌细胞-胶原复合体,探索组织工程化心肌组织体外再造的可行性。方法采用顺序消化及差速贴壁法从1～2d龄新生大鼠的心肌组织中分离心肌细胞,并将其与多孔胶原复合形成复合体。复合体在旋转生物反应器(ro... 详细信息

目的在体外模拟微重力条件下构建心肌细胞-胶原复合体,探索组织工程化心肌组织体外再造的可行性。方法采用顺序消化及差速贴壁法从1～2d龄新生大鼠的心肌组织中分离心肌细胞,并将其与多孔胶原复合形成复合体。复合体在旋转生物反应器(rotarycellculturesystem,RCCS)中进行培养,观测复合体内心肌细胞的生长状况、超微结构、细胞代谢率及细胞组分的变化,并将其与正常心肌和常规培养的复合体进行比较。结果在RCCS中培养的复合体内的细胞具有心肌细胞的特殊超微结构,免疫组化显示其中的α-横纹肌肌动蛋白染色呈强阳性,与静止培养的复合体细胞相比,细胞代谢更加旺盛。结论采用组织工程技术可以在RCCS中培育出组织工程化心肌组织。

关键词：心肌细胞胶原旋转生物反应器组织工程

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胰岛移植及胰岛干细胞研究进展

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中国医学科学院学报 2003年第1期25卷 83-87页

作者：郭希民王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100850

本文综述了近年来胰岛移植相关研究的进展,包括胰岛的分离、纯化、培养、冷冻保存和免疫隔离;同时还介绍了胰岛组织干细胞以及诱导胚胎干细胞分化为胰岛的最新进展,在对胰岛移植治疗糖尿病的现状及研究发展趋势进行全面分析的基础上,笔... 详细信息

本文综述了近年来胰岛移植相关研究的进展,包括胰岛的分离、纯化、培养、冷冻保存和免疫隔离;同时还介绍了胰岛组织干细胞以及诱导胚胎干细胞分化为胰岛的最新进展,在对胰岛移植治疗糖尿病的现状及研究发展趋势进行全面分析的基础上,笔者认为异体胰岛移植是当前I型糖尿病治疗的重要手段之一,而胰岛干细胞移植则是未来糖尿病治疗的趋势。

关键词：糖尿病胰岛移植胰岛干细胞

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溶液喷丝法制备组织工程无纺布支架

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高等学校化学学报 2005年第1期26卷 175-178页

作者：刘厚利陈金武王连才王常勇冯增国北京理工大学材料科学与工程学院北京100081 军事医学科学院基础医学研究所组织工程中心北京100850

在高压氮气作用下用溶液喷丝制备了组织工程支架 .聚乙二醇 /聚对苯二甲酸丁二醇酯 (PEGT/ PBT)共聚物的氯仿溶液经高压氮气流喷丝 ,继而沉积成无纺布 .为了提高支架的生物相容性 ,将透明质酸水溶液喷涂到 PEGT/ PBT丝表面 .结果表明 ,... 详细信息

在高压氮气作用下用溶液喷丝制备了组织工程支架 .聚乙二醇 /聚对苯二甲酸丁二醇酯 (PEGT/ PBT)共聚物的氯仿溶液经高压氮气流喷丝 ,继而沉积成无纺布 .为了提高支架的生物相容性 ,将透明质酸水溶液喷涂到 PEGT/ PBT丝表面 .结果表明 ,所制备的支架材料的生物相容性良好 ,细胞外基质透明酸能显著提高无纺布支架的生物相容性 .

关键词：溶液喷丝聚乙二醇/聚对苯二甲酸T---醇酯组织工程无纺布支架生物相容性

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组织工程心肌研究中心肌肌钙蛋白T及细胞间隙连接蛋白43免疫组化检测结果的观察与分析

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解放军医学杂志 2009年第5期34卷 587-590页

作者：段翠密李颖王海滨周瑾刘志强江红王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

目的建立组织工程心肌研究中系统观察免疫组化检测结果的程序与方法。方法取新生大鼠心脏制作石蜡组织切片;用0.25%胰酶消化法分离原代新生大鼠心肌细胞,一部分进行细胞爬片培养,一部分与液态胶原混合构建组织工程心肌并施加力学拉伸刺... 详细信息

目的建立组织工程心肌研究中系统观察免疫组化检测结果的程序与方法。方法取新生大鼠心脏制作石蜡组织切片;用0.25%胰酶消化法分离原代新生大鼠心肌细胞,一部分进行细胞爬片培养,一部分与液态胶原混合构建组织工程心肌并施加力学拉伸刺激,制作组织工程心肌石蜡组织切片。对三者分别进行心肌肌钙蛋白T(cTnT)及细胞间隙连接蛋白43(Cx43)抗体的免疫组化染色。比较观察天然心肌组织、体外培养心肌细胞及组织工程心肌组织免疫组化的检测结果,对其形态结构的变化进行综合分析。分别选取5个不同视野对细胞总数和cTnT阳性细胞进行计数,计算百分比。在细胞和再造心肌组织培养过程中观察自发收缩的细胞区域与cTnT着色区域的关系。结果天然心肌和组织工程心肌切片分别反映了天然在体心肌和体外构建心肌的细胞形态和组织结构特征;心肌细胞爬片显示了体外心肌细胞与非心肌细胞的形态,以及随体外培养时间的延长其形态和数量比例的改变。细胞在体外培养时间越长,成纤维细胞比例越高。尽早将分离的原代新生大鼠心肌细胞与液态胶原混合体外再造心肌组织进行三维拉伸培养有助于抑制其中的成纤维细胞的增殖速度。将分离细胞爬片培养4h后可相继观察到能自发收缩的细胞,其收缩区域与染色片中cTnT的着色区域基本相符;再造的组织工程心肌的收缩自拉伸后48h开始,逐渐从单个细胞到肌束再到整条再造心肌,频率逐渐加快,从1～2/min到5～10/min。结论建立了观察与分析组织工程心肌免疫组化结果的程序和方法,为优化实验设计与条件提供了客观参数,也为构建其他组织的形态学观察与分析方法提供了有利借鉴。

关键词：组织工程心肌肌钙蛋白T 连接蛋白43

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壳聚糖水凝胶局部注射对心梗的治疗作用研究

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解放军医学杂志 2007年第5期32卷 493-495页

作者：徐斌卢文宁郝彤吕双红王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

目的观察心梗部位局部注射壳聚糖水凝胶的促血管生成及心肌保护作用。方法将19只Wistar大鼠随机分为壳聚糖水凝胶注射组、单纯心肌梗死模型组、PBS注射组。结扎大鼠冠状动脉致心肌梗死30min后,心肌缺血处注射壳聚糖水凝胶。术后1、2、4... 详细信息

目的观察心梗部位局部注射壳聚糖水凝胶的促血管生成及心肌保护作用。方法将19只Wistar大鼠随机分为壳聚糖水凝胶注射组、单纯心肌梗死模型组、PBS注射组。结扎大鼠冠状动脉致心肌梗死30min后,心肌缺血处注射壳聚糖水凝胶。术后1、2、4周,分别处死动物进行组织学、免疫组织化学检查。结果壳聚糖水凝胶注射1、2周后有明显存留,4周后已降解吸收,无明显残留,但注射后明显提高了心梗部位的心室壁厚度,梗死部位的血管密度明显增加,存活的心肌数量增多,结缔组织增生程度减轻。结论心梗部位注射壳聚糖水凝胶可明显促进血管增生,有利于梗死部位心肌细胞的存活,适宜作为可注射性组织工程化心肌的支架材料。

关键词：壳聚糖水凝胶心肌梗塞局部注射治疗

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采用温敏性壳聚糖水凝胶体外构建组织工程化软骨的实验研究

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解放军医学杂志 2007年第5期32卷 500-502页

作者：郝彤刘暾吕双红王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

目的验证自行制备的温敏性壳聚糖水凝胶作为软骨细胞支架材料构建组织工程化软骨的可行性。方法以壳聚糖、β-甘油磷酸钠和羟乙基纤维素为原料,制备温敏性壳聚糖水凝胶,通过SD大鼠肌内注射植入,进行组织相容性检测。在此基础上,将其与... 详细信息

目的验证自行制备的温敏性壳聚糖水凝胶作为软骨细胞支架材料构建组织工程化软骨的可行性。方法以壳聚糖、β-甘油磷酸钠和羟乙基纤维素为原料,制备温敏性壳聚糖水凝胶,通过SD大鼠肌内注射植入,进行组织相容性检测。在此基础上,将其与软骨细胞复合构建组织工程化软骨,观察软骨细胞在壳聚糖水凝胶中的存活情况,并于体外培养3周后,作相关组织形态学检测。结果制备的壳聚糖水凝胶具有温度敏感性,即室温时为液态,37℃时10～15min可发生交联反应成为固态凝胶。SD大鼠肌内注射不同时间点组织相容性检测表明,该材料具有良好的组织相容性,植入体内2、4周时有少量炎性细胞浸润,6周时材料降解明显,8周时已经基本降解。采用该材料构建的组织工程化软骨体外培养3周后取材,通过组织学检查,HE染色可观察到软骨陷窝样结构,甲苯胺蓝染色、番红O染色及免疫组化染色结果显示软骨细胞具有分泌细胞外基质的功能。结论本研究自行制备的温敏性壳聚糖水凝胶材料具有良好的组织相容性,将其与软骨细胞复合后,可以在体外再造组织工程化软骨,是一种有广泛应用前景的软骨组织工程支架材料。

关键词：组织工程软骨温度敏感壳聚糖水凝胶支架材料

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雌激素与孕激素在兔子宫内膜上皮细胞体外增殖中的作用

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解放军医学杂志 2006年第6期31卷 582-584页

作者：段翠密王海滨江红王常勇宋宇轩王和平郭希民李晶项婷婷军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

目的探讨雌激素E2和孕激素P4不同水平对家兔子宫内膜上皮细胞体外增殖的影响。方法离心法获取家兔子宫内膜上皮细胞;用上皮角蛋白抗体的免疫荧光细胞染色对细胞进行鉴定,用流式细胞仪检测上皮细胞的纯度。设不同雌激素和孕激素水平组合... 详细信息

目的探讨雌激素E2和孕激素P4不同水平对家兔子宫内膜上皮细胞体外增殖的影响。方法离心法获取家兔子宫内膜上皮细胞;用上皮角蛋白抗体的免疫荧光细胞染色对细胞进行鉴定,用流式细胞仪检测上皮细胞的纯度。设不同雌激素和孕激素水平组合添加于培养液,利用MTT法间接测定上皮细胞的体外增殖能力。结果利用离心法可获得高纯度的子宫内膜上皮细胞(96%);雌激素(100nmol/L)和少量孕激素(10nmol/L)对上皮细胞增殖有促进作用。免疫荧光细胞检测结果表明,经激素刺激的子宫内膜上皮细胞对上皮角蛋白抗体反应呈阳性。结论性腺激素对体外培养的子宫内膜上皮细胞有促进增殖的作用,而且不会使其分化为其他类型细胞。

关键词：子宫内膜雌激素孕激素细胞增殖

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以液态胶原为支架构建组织工程化心肌组织的实验研究

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中华医学杂志 2004年第9期84卷 766-770页

作者：赵云山王常勇郭希民张西正王秀丽乔悦段翠密董灵芝军事医学科学院基础医学研究所军事医学科学院组织工程研究中心北京100850 军事医学科学院卫生装备研究所

目的　探索以液态胶原作为支架材料于体外构建组织工程化心肌组织。方法　将分离并培养的新生大鼠心肌细胞与添加了基质因子的液态Ⅰ型胶原混合 ,在环形槽中铸成环状心肌细胞 /胶原条带。构建的条带在环形槽中培养 7d后取出 ,在对其施加... 详细信息

目的　探索以液态胶原作为支架材料于体外构建组织工程化心肌组织。方法　将分离并培养的新生大鼠心肌细胞与添加了基质因子的液态Ⅰ型胶原混合 ,在环形槽中铸成环状心肌细胞 /胶原条带。构建的条带在环形槽中培养 7d后取出 ,在对其施加 10 %的静态拉伸的情况下 ,再培养 7d。通过光学显微镜、常规HE染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察等对构建的组织工程化心肌组织进行评价。结果　构建的工程化心肌组织在施加静态拉伸的第 2天可观察到局部跳动的区域 ,随时间的延长跳动的区域逐渐增多 ,强度逐渐增大 ,并最终形成一致跳动。组织学和免疫组织化学染色研究结果显示 ,在构建的工程化心肌组织中 ,心肌细胞比较均匀地分布在整个条带中 ,且多数沿拉伸方向伸展 ,胞核呈长梭形 ,其形态类似于天然成熟心肌组织。透射电镜观察显示 ,条带中心肌细胞含有排列整齐的肌原纤维 ,并沿着细胞的长轴方向伸展 ,肌小节结构和Z带清晰可见。结论用液态Ⅰ型胶原可以构建类似天然心肌组织的工程化心肌组织。

关键词：液态胶原组织工程化心肌组织心脏疾病心肌细胞

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海藻酸钠胰岛素纳米粒对糖尿病大鼠的降血糖作用

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解放军医学杂志 2005年第7期30卷 590-592页

作者：董宝军王常勇郭希民马海霞段翠密李晶范明军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100850

目的研究海藻酸钠胰岛素纳米粒的制备方法及其对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法采用离子交联法制备海藻酸钠胰岛素纳米粒,分别用透射电镜和纳米粒度分析仪测定纳米粒形态和粒径。建立Wistar大鼠糖尿病模型,观察海藻酸钠胰岛素纳米粒灌胃... 详细信息

目的研究海藻酸钠胰岛素纳米粒的制备方法及其对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法采用离子交联法制备海藻酸钠胰岛素纳米粒,分别用透射电镜和纳米粒度分析仪测定纳米粒形态和粒径。建立Wistar大鼠糖尿病模型,观察海藻酸钠胰岛素纳米粒灌胃给药后的降血糖作用。结果制备得到的纳米粒形态为球形或近球形,粒径为236.4±19.3nm,胰岛素包封率为78.5%±6.1%,载药量为22.6%±4.4%。降血糖试验表明,海藻酸钠胰岛素纳米粒灌胃(26U/kg)后7h,血糖含量开始下降,这种降血糖作用可维持12h,其中血糖维持在正常水平的时间可达6h(血糖值≤7.0mmol/L)。结论海藻酸钠胰岛素纳米粒具有一定的缓释功能,灌胃给药后可降低糖尿病大鼠血糖水平。

关键词：胰岛素海藻酸钠纳米粒降血糖药

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